黑木耳多糖提取工艺条件的研究

黑木耳多糖研究进展【摘要】本文综述了近年来人们对黑木耳多糖的提取方法、成分结构，保健功能及生物活性的研究成果进展。

【关键词】黑木耳多糖；提取方法成分结构生物活性功能食品引言黑木耳[1]又称木耳、耳子、光木耳，属真菌门担子菌纲木耳科木耳属菌类。

它是生长在朽木上的一种腐生菌，由菌丝体和子实体两部分组成。

菌丝体为无色透明，生长在朽木里面；子实体则生长在朽木的表面，为食用部分。

子实体丛生，常覆瓦状叠生。

耳状。

叶状或近林状，边缘波状，薄，宽2-6cm，最大者可达12cm，厚2mm左右，以侧生的短柄或狭细的基部固着于基质上。

初期为柔软的胶质，粘而富弹性，以后稍带软骨质，干后强烈收缩，变为黑色硬而脆的角质至近革质。

背面外面呈弧形，紫褐色至暗青灰色，疏生短绒毛。

绒毛基部褐色，向上渐尖，尖端几无色，里面凹入，平滑或稍有脉状皱纹，黑褐色至褐色。

菌肉由有锁状联合的菌丝组成，粗约2-3.5μm。

子实层生于里面，由担子、担孢子及侧丝组成。

担子长60-70μm，粗约6μm，横隔明显。

孢子肾形，无色。

我国是世界上主要的黑木耳生产国，年产量占世界总产量的90％以上，它在我国多数地区都有生产，这就为黑木耳的开发应用提供了有利条件。

黑木耳营养丰富、食味鲜美、不但是营养价值很高的食用菌，而且是药用价值较高的药用菌，是世界公认的保健品。

《本草纲目》中记载：“木耳生于朽木之上，性甘平，主治益气不饥，轻身强志，并有治疗痔疮，血痢，下血等作用。

”近代医学研究发现，黑木耳子实体多糖具有降血脂、延缓衰老、增强免疫和抗肿瘤等多种药理作用。

黑木耳是“药食同源”的典型代表，不但含有丰富的营养素，而且具有极高的药用价值。

有人对黑木耳的营养成分做了全面的分析，发现它富含大量的糖类和蛋白质，同时也是一种钙和铁含量较高的食品。

大量研究表明黑木耳作为“生物应答效应物”(Biological Response Modifier，简称BRM)具有多种生理功能，而这些重要的生理功能都是与其多糖组分密切相关的。

验,发现保持小苗周围空气湿润,通气良好且保湿良好的栽培基质和适宜的温度是丽格海棠试管苗移栽成功的关键[7]。

3　小结311　试验结果表明:最佳愈伤组织及分化培养基为:①MS +K T 1.00mg ΠL +NAA0.10mg ΠL ;②MS +6-BA 0.50mg ΠL +2,4-D0.10mg ΠL ;③MS +6-BA 1.00mg ΠL +NAA 0.10mg ΠL ;④MS +6-BA 0.50mg ΠL +NAA 0.10mg ΠL ;继代增殖以同样的培养基为好。

生根培养以在1Π2MS +NAA0.50mg ΠL 和1Π2MS +I BA 0.10mg ΠL 培养基上的效果最好[10]。

312　从试验中注意到,在四个花色品种中易成苗的依次为粉色品种、橙色品种、黄色品种红色品种,对此需进一步研究[10]。

313　将不同外植体分别接种于不同的培养基上,培养1w 后,茎尖外植体首先明显膨大,长出愈伤组织块;3w 后,叶片外植体绝大多数都长出了愈伤组织块。

愈伤组织继续长大,呈黄绿色,颗粒状,较疏松.观察发现3种不同外植体都能被诱导出愈伤组织,只是茎尖最容易脱分化,叶柄次之。

这2种外植体脱分化诱导率均为100%;叶片的诱导率也达到88.3%。

这表明叶片组织分化强度和叶柄与茎尖组织的分化程度差别不大,这与远凌威等人的报道略有不同,需要进一步研究。

参考文献:[1]达克东,张松,姜璐琰,等.丽格海棠离体叶片培养不定芽发生和微繁研究[J ]1山东农业大学学报(自然科学版),2002,33(1):93-951[2]王利琳,庞基良,胡江琴.丽格海棠的离体快繁[J ]1生物技术,2001,11(5):46-481[3]林德钦,李梅,张文珠.富丽华贵的丽格海棠[J ]1厦门华侨亚热带植物引种园,2001,621[4]杜启兰,宋仪农.丽格海棠的微体快速繁殖[J ]1山东林业科技,2002,(5):16-171[5]田代科,管开云,郭瑞贤,等.变色秋海棠的繁殖栽培[J ]1广西植物,2001,21(4):375-3801[6]周鑫,韩建军.丽格海棠的组织培养[J ]1中国林副特产,2001,2(1):471[7]石贵玉,邓欢爱,周巧劲.高压静电场对蟆叶秋海棠愈伤组织生长的效应[J ]1广西科学,1999,6(4):296-2981[8]李景秀,管开云,孔繁才1长翅秋海棠的叶片培养和快速繁殖[J ]1植物生理学通讯,2000,36(5):439-4401[9]王发林,赵秀梅,刘芬.丽格海棠的叶片离体培养技术[J ]1甘肃农业科技,2001,(5):46-471[10]远凌威,袁正仿,张苏锋.丽格海棠的组织培养与快速繁殖研究[J ]1信阳师范学院学报(自然科学版),2002,15(2):219-2211黑木耳多糖的提取与纯化孔祥辉1,2,张介驰2,戴肖东2,李景鹏13(11东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150030;21黑龙江省科学院应用微生物研究所,黑龙江哈尔滨150010)摘要:黑木耳干子实体经复合酶解结合热水浸提法提取,超过滤,鞣酸法去蛋白,DE AE -52和Sephacryl S -400分子筛柱层析纯化得到精多糖(AAP1)。

正交设计法探讨黑木耳多糖的提取作者：张星和符翠丽来源：《科学与财富》2016年第34期（保山学院云南保山 678000）摘要：探讨了利用酶解法从黑木耳中提取多糖的不同因素的影响，通过正交试验确立了酶法提取多糖的最佳条件为：酶解时间60min，温度50 ℃，pH为5.0，料液比1：：80，反复提取三次，多糖提取率达到15.64%。

关键词：酶法；黑木耳；正交设计黑木耳是我国著名的药用和食用的胶质真菌，是木耳系真菌类担子菌纲。

经常食用木耳，可益气养神、滋阴润燥，增强抵抗力。

多糖是一类具有广泛活性的生物大分子，又叫多聚糖。

多糖不仅仅是人体生命必需的成分，也存在于一切细胞膜结构中，参与多种生命活动。

木耳多糖是黑木耳的活性成分之一，其生物活性越来越受到重视[1]。

多糖的提取方法有很多种。

水浸提法操作简单，可是耗能多，耗时长，提取效率较低[2]。

本文通过正交实验对黑木耳多糖酶法提取的条件进行了优化。

1.材料与方法1.1 材料与设备黑木耳购于保山金方超市；纤维素酶（BR，30U/mg，上海博奥生物科技有限公司）；其他试剂均为分析纯。

HH-S26s数显恒温水浴锅；GUO HUA 800低数离心机； JH-14-07 A-14-07-161型可见分光光度计；DFT-200型手提式高速万能粉碎机；DHG-9075A型电热恒温鼓风干燥箱等。

1.2 多糖含量的测定目前，多糖的测定方法主要有蒽酮硫酸法和苯酚-硫酸法[3-4]，本实验采用第二种方法，以干燥至恒重的葡萄糖为标准品。

1.3 木耳多糖的制备准确称取过60目筛的木耳粉末若干于圆底烧瓶中，加少量蒸馏水浸泡24h，加入一定量的酶溶液并调pH值，放入恒温水浴锅中酶解一段时间后取出，离心得上清液。

再将剩余沉淀重复酶解两次，合并上清液。

放入90℃的水浴锅中灭活10min，冷却。

用80%乙醇沉淀，离心得粗多糖，待显色后于490nm出测定吸光度A。

1.4 粗多糖提取率计算多糖得率（%）=（多糖含量/原料重量）×100%1.5 酶法提取的正交实验影响多糖提取率的因素很多，如酶的添加量，反应时间，反应温度及其pH值。

微波辅助提取黑木耳多糖的研究
樊黎生;张声华;吴小刚
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2005(031)010
【摘要】研究利用微波辅助萃取技术提取黑木耳子实体中的黑木耳多糖的方法.以无菌过滤水为溶剂,以微波辐射处理为辅助条件,提取黑木耳子实体中的多糖,并与常规水提法(WE)、超临界萃取法(SFE)和超声波萃取法(USE)作了对比实验;考察了微波辐射功率,微波辐射时间,固液比,浸提时间和浸提级数这些因子对多糖得率的影响.确定的提取工艺条件为:微波功率为800 W,微波辐射时间为40 min,固液比(g:mL)为1:32,水浴浸提时间为3 h,提取级数为二级.
【总页数】4页(P142-144,148)
【作者】樊黎生;张声华;吴小刚
【作者单位】华中农业大学食品科技学院,武昌,430070;湖北工业大学生物工程学院,武昌,430064;湖北工业大学生物工程学院,武昌,430064;华中农业大学食品科技学院,武昌,430070
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.微波辅助提取黑木耳多糖的研究 [J], 王晓军;李颖
2.响应面法优化微波辅助提取黑木耳多糖工艺的研究 [J], 曾维才;张曾;贾利蓉
3.微波辅助提取黑木耳多糖的工艺 [J], 赵希艳;贾凌杉;马华
4.黑木耳多糖的生物活性研究进展 [J], 王国红;马怀良;律凤霞;姜明
5.富硒黑木耳多糖的理化性质及抗氧化活性研究 [J], 吕明帅;赵博;孙文玉;万水晶;刘春延;张国财
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收稿日期:2002210210;　修订日期:2003203221基金项目:武汉理工大学科研基金资助项目(XJJ 2002075)作者简介:陈和生(19652),男(汉族),湖北浠水人,现任武汉理工大学测试中心副教授,硕士学位,主要从事药学、生物技术与纳米材料的研究.(文献综述(黑木耳多糖的研究进展陈和生,孙振亚(武汉理工大学测试中心,湖北武汉　430070)摘要:目的:综述黑木耳多糖的研究内容。

方法:根据文献和我们的研究工作,从黑木耳多糖的分离纯化、结构分析、药理作用和构效关系等几方面进行综述。

结果:黑木耳多糖具有多种生物功能。

结论:黑木耳多糖是较理想的免疫促进药物,具有广阔的发展前景。

关键词:黑木耳多糖;　分离纯化;　结构分析;　药理作用;　构效关系中图分类号:O 636.1 文献标识码:B 文章编号:100820805(2003)0520300202Stud ies on Polysacchar ides of A u r icu la r ia au r icu laj udaeCH EN H e 2sheng ,SUN Z hen 2ya(T esting Cen ter ,W uhan U n iversity of T echnology ,W uhan 430070,Ch ina )Abstract :Objective :R eview on the studied contents of po lysaccharide of A u ricu laria au ricu lajud ae .M ethods :A cco rdingto the references and our w o rk ,the iso lati on and purificati on ,phar m aceutical acti on ,structure analysis and relati onsh i p on structure -activity of po lysaccharide of A u ricu laria au ricu lajud ae w ere review ed .Results :Po lysaccharide ofA u ricu laria au ricu lajud ae have m any bi oactivities .Conclusion :Po lysaccharide of A u ricu laria au ricu lajud ae is a k ind ofbetter i m m unity p romo ted m edicine ,the developm ental trend of po lysaccharide is very w ide .Key words :Po lysaccharide of A u ricu laria au ricu lajud ae ;　Iso lati on and purificati on ;　Structure analysis ;　Phar m aceutical acti on ;　R elati onsh i p of structure -activity 黑木耳(A u ricu laria au ricu lajud ae )营养丰富,食味鲜美,不但是营养价值很高的食用菌,而且是药用价值较高的药用菌,是世界公认的保健品。

复合酶法提取黑木耳多糖方法优化郑钧予;丑建栋;彭晓龙;何媛媛;席丽琴;张柏林【摘要】[目的]优化黑木耳多糖酶法提取的工艺条件.[方法]采用复合酶法提取木耳多糖,以多糖的提取率为指标,考察了酶解温度、酶解溶液pH、浸提料液比以及酶解时间对黑木耳多糖提取效率的影响,并采用TLC薄层色谱层析法分析提取出的黑木耳多糖的成分.[结果]试验确定了复合酶酶解提取黑木耳多糖的最佳工艺条件:浸提料液比1:40 g/ml,酶解溶液pH7.0,酶解温度40℃,酶解时间3.0h.在此条件下,黑木耳多糖的提取率为4.353％,所含有的单糖为D-葡萄糖.[结论]研究可为黑木耳多糖的提取提供参考依据.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】4页(P183-185,199)【关键词】黑木耳;多糖;复合酶解;薄层层析【作者】郑钧予;丑建栋;彭晓龙;何媛媛;席丽琴;张柏林【作者单位】北京林业大学生命科学与技术学院,北京100083;北京林业大学生命科学与技术学院,北京100083;北京林业大学生命科学与技术学院,北京100083;北京林业大学生命科学与技术学院,北京100083;北京林业大学生命科学与技术学院,北京100083;北京林业大学生命科学与技术学院,北京100083【正文语种】中文【中图分类】S646.6黑木耳又称云耳、黑菜，是一种质优的胶质食用菌和药用菌。

我国黑木耳资源丰富，年产量5 000 t左右，占世界总产量的90%以上，为开发应用黑木耳提供了有利条件。

黑木耳多糖具有调节免疫、抗衰老、抗癌防癌等作用［1－3］。

黑木耳中含有丰富的甘露聚糖、甘露糖、葡萄糖、木糖、葡萄糖醛酸等碳水化合物［4］，对人体有极大的益处。

提取多糖常用的方法有［5－8］:热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法、酶法、超声波法、微波法等。

林敏等探索出热水浸提法提取黑木耳多糖的最佳工艺条件:黑木耳子实体干粉与水之比为1∶50，在90℃水浴中抽提3.5 h，提取液用70%乙醇醇析，在此工艺条件下多糖得率最高［9］。

酶解法提高黑木耳多糖提取效率酶解法提高黑木耳多糖提取效率一、黑木耳多糖概述黑木耳是一种常见且营养丰富的食用菌，在众多营养成分中，黑木耳多糖具有极高的研究价值。

黑木耳多糖属于大分子化合物，其结构复杂多样，包含多种单糖组成成分，如葡萄糖、甘露糖、木糖等，并且这些单糖通过不同的糖苷键连接形成复杂的多糖链。

这种独特的结构赋予了黑木耳多糖诸多优异的生理活性。

1.1 黑木耳多糖的生理活性黑木耳多糖具有多种显著的生理活性。

在免疫调节方面，它能够刺激机体的免疫系统，增强免疫细胞的活性，提高机体的抵抗力，有助于预防和对抗各类疾病。

抗氧化活性也是其重要特性之一，它可以有效清除体内过多的自由基，减轻自由基对细胞和组织的氧化损伤，从而延缓衰老过程，预防多种慢性疾病的发生。

此外，黑木耳多糖还具有降血脂、降血糖的作用，对于调节人体的血脂和血糖水平，预防心血管疾病和糖尿病等代谢性疾病具有重要意义。

它还在抗肿瘤、抗凝血、抗血栓以及保护肝脏等方面展现出潜在的药用价值，为开发新型药物和功能性食品提供了广阔的前景。

1.2 传统提取方法及其局限性传统的黑木耳多糖提取方法主要有水提法、碱提法等。

水提法是较为常用的方法之一，其原理是利用水作为溶剂，在一定温度和时间条件下，将黑木耳中的多糖溶解出来。

然而，水提法存在提取率相对较低的问题，往往需要较长的提取时间和较高的提取温度，这不仅消耗大量的能源，还可能导致多糖的部分降解，影响其活性。

碱提法虽然在一定程度上能够提高提取率，但碱性条件容易对多糖的结构造成破坏，改变其化学性质，进而影响其生理活性。

而且，碱提法后还需要进行复杂的中和处理步骤，增加了工艺的复杂性和成本。

这些传统提取方法的局限性促使人们寻求更高效、温和且能保持多糖活性的提取方法，酶解法应运而生。

二、酶解法的原理与优势酶解法是一种基于生物酶催化作用的提取技术，在黑木耳多糖提取中具有独特的原理和显著的优势。

2.1 酶的种类及作用机制用于黑木耳多糖提取的酶主要有纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶等。

黑木耳液体发酵产胞外多糖条件的研究李慧;兰时乐【摘要】[目的]研究黑木耳液体发酵产胞外多糖的条件.[方法]利用单因素试验,研究碳源、氮源、无机盐、培养温度、初始pH、接种量、发酵时间等对黑木耳液体发酵产胞外多糖产量的影响.[结果]适宜的发酵培养基为:葡萄糖4％、豆饼粉0.7％、KH2 PO4 0.4％、MgSO4·7H2O 0.5％、CaCO30.3％、棉籽壳粉1％；适宜的发酵条件为:培养基初始pH 6.0、温度28℃、接种量10％ (V/V)、装液量90ml(250 ml三角瓶)、发酵时间6d,在此条件下胞外多糖产量可达4.835 g/L.[结论]该研究为黑木耳胞外多糖的工业化生产提供了必要的理论基础.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2013(041)019【总页数】3页(P8100-8102)【关键词】黑木耳;液体发酵;胞外多糖【作者】李慧;兰时乐【作者单位】湖南省微生物研究所,湖南长沙410009;湖南农业大学生物科学技术学院,湖南长沙410128【正文语种】中文【中图分类】S646.6我国是世界上主要的黑木耳生产国，年产量占世界总产量的90%以上［1］。

黑木耳肉质细腻，脆嫩鲜美，不但含丰富的营养素，而且具有极高的药用价值。

已有研究表明，黑木耳多糖具有延长血栓形成时间［2］、降低血糖浓度［3］、延缓衰老［4－5］、抗肿瘤［6］、提高免疫功能［7］等作用。

关于利用黑木耳液体深层发酵生产胞外多糖的研究，唐青涛等［8］对黑木耳在液体条件下产多糖进行了初步的研究;肖彩霞等［9－10］研究了黑木耳发酵生产胞外多糖的营养条件并优化了液体发酵产胞外多糖培养基;吴静等［11］研究了不同pH对A.auricula菌体生长、葡萄糖消耗和胞外多糖合成影响，在对pH影响黑木耳多糖发酵过程的动力学分析基础上，提出了黑木耳胞外多糖发酵的两阶段pH控制策略，并通过试验验证了pH控制策略的有效性。

文中通过液体深层发酵，研究了黑木耳液体发酵产胞外多糖的培养基和发酵条件，以期为黑木耳胞外多糖的工业化生产提供必要的理论基础。

脉冲放电等离子体技术提取黑木耳多糖实验目的：为寻求一种新型的活性成分提取方法，使用脉冲放电等离子体提取黑木耳多糖，以脉冲放电电压、液料比及处理时间作为影响因素，使用响应面法进行条件优化。

实验原理脉冲放电等离子体技术是近年来发展起来的一种低温等离子体产生技术[1]，该技术综合了脉冲电场、脉冲紫外、臭氧处理、脉冲电晕处理各个技术的处理效应[2]，具有处理温度低、速度快、能耗低等优点[3]，由于其良好的应用特征而被国内外学者广泛研究。

脉冲放电等离子体技术处理液体物料的作用方式是将气体鼓泡充入被处理液体中，电脉冲作用到液体中的气体上，使注入气泡被电离，导致气泡的局部放电，形成等离子体[2]。

该过程是一个极其复杂的过程，它不仅能在放电时形成强电场、非平衡等离子体通道，还能伴随强紫外光辐射；而等离子体通道中富集了离子、电子、激发态原子、分子（O3，H2O2）和大量的活性物质（OH-，H+，O-2等），这些复杂的放电现象能引发一系列的物理、化学和生物反应，破坏物质的化学结构或生理结构，从而达到杀菌的目的[1]。

目前，脉冲放电等离子体技术在医疗器械和食品的杀菌领域已经显示了出了独特的优越性，对大肠杆菌等菌种具有十分显著的钝化作用，并且具有十分显著的破坏细胞的作用[4-11]。

作为一种横跨电子学、化学、微生物学、物理学、工程技术等多门学科的交叉学科。

特别是脉冲电场提取技术已被公认为国际上研究最热门的提取技术的前提下。

脉冲放电等离子体技术完全可以对细胞内物质的提取等亟待解决的问题提供一种新的研究手段，然而在这些方面的研究却微乎其微，因此有必要深入发展和拓宽脉冲放电等离子体技术的应用范围，满足市场对低能耗、低操作费用、高效的高新技术的要求。

黑木耳是中国珍贵的药用和食用胶质真菌,其中具有重要生物活性的是其所含的多糖。

有多项研究证实:黑木耳多糖有抗凝血、抗血栓、增强机体免疫功能及降血脂等多种功效[12]。

因此，对黑木耳多糖的提取与利用就成了首要问题。