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实验室常用培养基

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实验用培养基配制 >

1 ．牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养） 牛肉膏 3g ，蛋白胨 10g ， NaCl 5g ，水 1000mL ， pH7.4 ～ 7.6 2. 高氏 1 号培养基 ( 用于放线菌培养 ) 可溶性淀粉 20g ， KNO 3 1g ， NaCl 0.5g ， K 2 HPO 4- · 3H 2 O 0.5g ， MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g, ， FeSO4 · 7H 2 O 0.01g ，水 1000mL ， pH7.4 ～ 7.6 。 配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。 3 ．马丁氏（ Martin ）培养基（用于从土壤中分离真菌） K 2 HPO 4 1g ， MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g ，蛋白胨 5g ，葡萄糖 10g ， 1/3000 孟加拉红水溶液 100mL, 水 900mL ，自然 pH ， 121 ℃ 湿热灭菌 30min 。 待培养基融化后冷却 55 ～ 60 ℃ 时加入链霉素 ( 链霉素含量为 30 μ g/mL). 4. 马铃薯培养基 (PDA)( 用于霉菌或酵母菌培养 ) 马铃薯 ( 去皮 )200g, 蔗糖 ( 或葡萄糖 ) 20g, 水 1000mL 配制方法如下 : 将马铃署去皮 , 切成约 2cm 2 的小块 , 放入 1500mL 的烧杯中煮沸 30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底 , 然后用双层纱布过滤 , 取其滤液加糖 , 再补足至 1000mL, 自然 pH. 霉菌用蔗糖 , 酵母菌用葡萄糖 . 5. 察氏培养基 ( 蔗糖硝酸钠培养基 )( 用于霉菌培养 ) 蔗糖 30g, NaNO 3 2g, K 2 HPO 4 1g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4 · 7H 2 O 0.1g, 水 1000mL, pH7.0 ～ 7.2 6. Hayflik 培养基 ( 用于支原体培养 ) 牛心消化液 ( 或浸出液 )1000mL, 蛋白胨 10g, NaCl 5g, 琼脂 15g, pH7.8 ～ 8.0, 分装每瓶 70mL, 121 ℃ 湿热灭菌 15min, 待冷却至 80 ℃ 左右 , 每 70mL 中加入马血清 20mL,25% 鲜酵母浸出液 10mL, 15 醋酸铊水溶液 2.5mL, 青霉素 G 钾盐水溶液 (20 万单位以上 )0.5mL, 以上混合后倾注平板 . 注意 : 醋酸铊是极毒的药品 , 需特别注意安全操作 . 7 ．麦氏 (McCLary) 培养基 ( 醋酸钠培养基 ) 葡萄糖 0.1g, KCl 0.18g ，酵母膏 0.25g ，醋酸钠 0.82g, 琼脂 l.5g ，蒸馏水 l00mL 。溶解后分装试管， 1l5 ℃ 湿热灭菌 15min 。 8 ．葡萄糖蛋白胨水培养基 ( 用于 V.P ．反应和甲基红试验 ) 蛋白胨 0.5g ，葡萄糖 0.5g ， K 2 HPO 4 0.2g ，水 100mL, pH7.2, 1l5 ℃ 湿热灭菌 20min 。 9 ．蛋白胨水培养基 ( 用于吲哚试验 ) 蛋白胨 10g, NaCl 5g, 水 1000mL ， pH7.2 ～ 7.4, 121 ℃ 湿热灭菌 20min 。 10 ．糖发酵培养基 ( 用于细菌糖发酵试验 ) 蛋白胨 0.2g, NaCl 0.5g, K 2 HPO 4 0.02g ，水 100mL ，溴麝香草酚蓝 ( 质量分数 1% 水溶液 ) 0.3mL ，糖类 lg 。分别称取蛋白胨和 NaCl 溶于热水中，调 pH 至 7.4 ，再加入溴麝香草酚蓝 ( 先用少量质量分数 95% 乙醇溶解后，再加水配成质量分数 1% 水溶液 ) ，加入糖类，分装试管，装量 4 ～ 5cm 高，并倒放入一杜氏小管 ( 管口向下，管内充满培养液 ) 。 115 ℃ 湿热灭菌 20min 。灭菌时注意适当延长煮沸时间，尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。常用的糖类，如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等 ( 后两种糖的用量常加大为质量分数 1.5%) 。 11. RCM 培养基 ( 强化梭菌培养基 ) ( 用于厌氧菌培养 ) 酵母膏 3g ，牛肉膏 l0g ，蛋白胨 10g ，可溶性淀粉 lg ，葡萄糖 5g, 半胱氨酸盐酸盐 0.5g ， NaCl 3g ， NaAc 3g, 水 l000mL, pH8.5 ，刃天青 3mg/L, l2l ℃ 湿热灭菌 30min 。 12. TYA 培养基 ( 用于厌氧菌培养 ) 葡萄糖 40g ，牛肉膏 2g ，酵母膏 2g ，胰蛋白胨 (bacto-typetone)6g ，醋酸铵 3g, KH 2 PO 4 0.5g ， MgSO 4 · 7H 2 O 0.2g ， FeSO 4 · 7H 2 O 0.01g ，水 1000mL, pH6.5, 121 ℃湿热灭菌 30min 。 13 ．玉米醪培养基 ( 用于厌氧菌培养 ) 玉米粉 65g ，自来水 1000mL ，混匀，煮 10min 成糊状，自然 pH, 121 ℃湿热灭菌 30min 。 14 ．中性红培养基 ( 用于厌氧菌培养 ) 葡萄糖 40g ，胰蛋白胨 6g ，酵母膏 2g ，牛肉膏 2g ，醋酸铵 3g ， KH 2 PO 4 5g ，中性红 0.2g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.2g ， FeSO 4 · 7H 2 O 0.01g, 水 1000ml, pH6.2, 121 ℃湿热灭菌 30min 。 15 ． CaCO3 明胶麦芽汁培养基 ( 用于厌氧菌培养 ) 麦芽汁 (6 波美 )1000mL ，水 1000mL ， CaCO 3 10g, 明胶 10g ， pH6.8, 121 ℃湿热灭菌 30min 。 16 ． BCG 牛乳培养基 ( 用于乳酸发酵 ) (B) 溶液：酵母膏 10g ，水 500mL ，琼脂 20g , pH6.8, 121 ℃ 湿热灭菌 20min 。 以无菌操作趁热将 (A) 、 (B) 溶液混合均匀后倒平板。 17 ．乳酸菌培养基 ( 用于乳酸发酵 ) 牛肉膏 5g ，酵母膏 5g ，蛋白胨 10g ，葡萄糖 10g ，乳糖 5g, NaCl 5g ，水 1000mL, pH6.8, 121 ℃湿热灭菌 20min 。 18 ．酒精发酵培养基 ( 用于酒精发酵 ) 蔗糖 10g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g, NH 4 NO 3 0.5g, 质量分数 20% 豆芽汁 2mL, KH 2 PO 4 0.5g ，水 100mL ，自然 pH 。 19. 柯索夫培养基 ( 用于钩端螺旋体培养 ) 优质蛋白胨 0.4g, NaCl 0.7g, KCl 0.02g, Na HCO 3 0.01g ， CaCl 0.02g, KH 2 PO 4 0.09g, NaH 2 PO 4 0.48g, 蒸馏水 500 mL ，无菌兔血清 40mL 。 制法：除兔血清外的其余各成分混合，加热溶解，调 pH 至 7.2, 121 ℃湿热灭菌 20min ，待冷却后，加入无菌兔血清，制成 8% 血清溶液，然后分装试管（ 5 ～ 10mL/ 管） , 56 ℃水浴灭活 lh 后备用。 20 ．豆芽汁培养基 黄豆芽 500g ，加水 1000mL ，煮沸 lh ，过滤后补足水分， 121 ℃湿热灭菌后存放备用，此即质量分数为 50% 的豆芽汁， 用于细菌培养：质量分数 10% 豆芽汁 200mL ，葡萄糖 ( 或蔗糖 )50g ，水 800mL, pH7.2 ～ 7.4 。 用于霉菌或酵母菌培养：质量分数 10% 豆芽汁 200mL ，糖 50g ，水 800mL ，自然 pH 。霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。 21 ． LB(Luria—Bertani) 培养基 ( 细菌培养，常在分子生物学中应用 ) 双蒸馏水 950mL ，胰蛋白胨 l0g, NaCl l0g ，酵母提取物 (bacto- yeast extract)5g ，用 lmol/L NaOH ( 约 l mL) 调节 pH 值至 7.0 ，加双蒸馏水至总体积为 1L ， 121 ℃湿热灭菌 30min 。 含氨苄青霉素 LB 培养基 : 待 LB 培养基灭菌后冷至 50 ℃左右加入抗生素，至终浓度为 80 ～ 100mg/L 。 22 ．复红亚硫酸钠培养基 ( 远藤氏培养基 ) ( 用于水体中大肠菌群测定 ) 蛋白胨 10g ，牛肉浸膏 5g ，酵母浸膏 5g ，琼脂 20g ，乳糖 10g, K 2 HPO 4 0.5g ，无水亚硫酸钠 5g, 5% 碱性复红乙醇溶液 20mL ，蒸馏水 1000mL 。 制作过程：先将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加入到 900mL 水中，加热溶解，再加入 K 2 PO 4 ，溶解后补充水至 l000mL ，调 pH 至 7.2 ～ 7.4 。随后加入乳糖，混匀溶解后，于 115 ℃ 湿热灭菌 20min 。再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中，用少许无菌水使其溶解，在水浴中煮沸 10min 后，立即滴加于 20mL 质量分数 5% 碱性复红乙醇溶液中，直至深红色转变为淡粉红色为止。将此混合液全部加入到上述已灭菌的并仍保持融化状态的培养基中，混匀后立即倒平板，待凝固后存放冰箱备用，若颜色由淡红变为深红，则不能再用。 23 ．乳糖蛋白胨半固体培养基 ( 用于水体中大肠菌群测定 ) 蛋白胨 10g ，牛肉浸膏 5g ，酵母膏 5g ，乳糖 10g ，琼脂 5g ，蒸馏水 1000mL ， pH7.2 ～ 7.4 ，分装试管 (l0mL/ 管 ), 115 ℃湿热灭菌 20min 。 24 ．乳糖蛋白胨培养液 ( 用于多管发酵法检测水体中大肠菌群 ) 蛋白胨 10g ，牛肉膏 3g ，乳糖 5g ， NaCl 5g ，蒸馏水 l000mL ，质量分数 1.6% 溴甲酚紫乙醇溶液 lmL 。调 pH 至 7.2 ，分装试管 (l0mL/ 管 ) ，并放入倒置杜氏小管， l15 ℃ 湿热灭菌 20min 。 25 ．三倍浓乳糖蛋白胨培养液 ( 用于水体中大肠菌群测定 ) 将乳糖蛋白胨培养液中各营养成分以扩大 3 倍加入到 l000mL 水中，制法同上，分装于放有倒置杜氏小管的试管中，每管 5mL ， 1l5 ℃ 湿热灭菌 20min 。 26 ．伊红美蓝培养基 (EMB 培养基 )( 用于水体中大肠菌群测定和细菌转

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LB配料

LB配料

实验室常用培养基的配制方法Ampicillin (100 mg/ml)IPTG(24 mg/ml)X-Gal (20 mg/ml)LB 培养基■ 组份浓度100 mg/ml Ampicillin■ 配制量50 ml■ 配制方法 1. 称量5 g Ampicillin 置于50 ml 离心管中。

2. 加入40 ml 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。

3. 用0.22 μm 滤器过滤除菌。

4. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃保存。

■ 组份浓度24 mg/ml IPTG■ 配制量50 ml■ 配制方法 1. 称量1.2 g IPTG 置于50 ml 离心管中。

2. 加入40 ml 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。

3. 用0.22 μm 滤器过滤除菌。

4. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃保存。

■ 组份浓度20 mg/ml X-Gal■ 配制量50 ml■ 配制方法 1. 称量1 g X-Gal 置于50 ml 离心管中。

2. 加入40 ml DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解后，定容至50 ml。

3. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃避光保存。

■ 组份浓度1%（W/V）Tryptone，0.5%（W/V）Yeast Extract，1%（W/V）NaCl■ 配制量 1 L■ 配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L 烧杯中。

Tryptone 10 gYeast Extract 5 gNaCl 10 g2. 加入约800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 滴加5 N NaOH（约0.2 ml），调节pH 值至7.0。

4. 加去离子水将培养基定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，4℃保存。

TB 培养基0.5%（W/V）Yeast Extract1%（W/V）NaCl0.1 mg/ml Ampicillin■ 配制量 1 L■ 配制方法 1. 称取下列试剂，置于1 L 烧杯中。

实验室平板培养基配方

实验室平板培养基配方

实验室用平板培养基配方
1.MRS培养基：
液体：蛋白胨 10g 牛肉膏 10g 柠檬酸铵2g 乙酸钠 5g(无水乙酸钠3g) 酵母粉 5g 葡萄糖 20g
磷酸氢二钾 2g 吐温 1.0ml
盐液甲 5.0ml 蒸馏水： 1000ml
溴甲酚紫 0.8g
[备注]盐液甲的配制：MgSO
4.7H
2
O 11.5g ，MnSO
4
.4H
2
O 2.8g
蒸馏水 100ml
固体：在MRS液体培养基中加入1.6%~2%的琼脂
PH=6.5~7.0 121℃灭菌30min
2.YB培养基：
液体:蛋白胨 5g 葡萄糖 5g 酵母粉 5g 磷酸氢二钾4g
3.08%硫酸锰 1.0ml 蒸馏水 1000ml
固体：在YB液体培养基中加入1.4%~1.7%的琼脂
PH=6.0~7.0 121℃灭菌30min
3.PYD培养基：
液体：酵母粉 10g 蛋白胨 20g
葡糖糖20g 蒸馏水1000ml
固体：在PYD液体培养基中加入2%的琼脂
[备注]灭菌时要将葡萄糖和蛋白胨、酵母粉分开，溶解后单独灭菌，防止三者在高温下发生化学反应。

PH自然121℃灭菌30min
中国农业大学动物科技学院
饲料生物技术实验室
张得龙
2013.10.31。

tsa培养基原理

tsa培养基原理

TSA培养基原理TSA（Tryptic Soy Agar）培养基是一种常用的通用培养基，适用于许多微生物的生长和繁殖。

它由多种成分组成，能够提供微生物所需的营养物质，并为其提供适宜的生长环境。

TSA培养基的基本原理是通过提供碳源、氮源、矿物质和其他生长因子来满足微生物的营养需求，同时通过添加适当的抑制剂来抑制非目标微生物的生长，从而促进目标微生物的生长和繁殖。

TSA培养基的成分TSA培养基的主要成分包括：1.蛋白胨（Peptone）：提供微生物所需的氮源和碳源，是培养基的主要营养成分之一。

2.大豆胨（Soybean Peptone）：提供微生物所需的氮源和碳源，同时含有丰富的维生素和生长因子。

3.大豆酪蛋白胨（Soybean Casein Digest）：提供微生物所需的氮源和碳源，同时含有丰富的维生素和生长因子。

4.葡萄糖（Glucose）：提供微生物所需的碳源，是培养基的主要能量来源之一。

5.红藻酸钠（Agar）：用于固化培养基，形成固体的TSA培养基。

6.高锰酸钾（Potassium Permanganate）：用于抑制非目标微生物的生长。

7.氯化钠（Sodium Chloride）：提供微生物所需的矿物质和离子平衡。

8.磷酸二氢钠（Monobasic Sodium Phosphate）和磷酸二氢钾（MonobasicPotassium Phosphate）：提供微生物所需的磷源。

9.水：作为溶剂，调节培养基的浓度和pH值。

TSA培养基的原理TSA培养基的原理主要涉及到以下几个方面：1.提供营养物质：TSA培养基中的蛋白胨、大豆胨和大豆酪蛋白胨等成分提供了微生物所需的氮源和碳源，葡萄糖提供了微生物所需的碳源。

这些营养物质为微生物的生长和繁殖提供了必要的营养条件。

2.提供矿物质和离子平衡：TSA培养基中的氯化钠等成分提供了微生物所需的矿物质和离子平衡，维持微生物细胞内外环境的稳定。

3.提供维生素和生长因子：大豆胨、大豆酪蛋白胨等成分中含有丰富的维生素和生长因子，这些物质对微生物的生长和繁殖起到促进作用。

培养基sda的成分

培养基sda的成分

培养基sda的成分
培养基SDA是一种常用的实验室培养基，其成分主要包括碳源、氮源、矿质盐和生长因子等。

这些成分在培养基中的配比和浓度对于细胞的生长和繁殖起着至关重要的作用。

碳源是细胞能量代谢的重要来源。

在SDA培养基中，常用的碳源包括葡萄糖、麦芽糖等。

这些碳源能够被细胞迅速吸收和利用，提供能量和碳源供细胞生长。

氮源是细胞合成蛋白质和核酸的重要成分。

在SDA培养基中，常用的氮源包括氨基酸、胨、尿素等。

这些氮源可以被细胞利用，用于合成细胞所需的蛋白质和核酸。

矿质盐是细胞正常生长所必需的微量元素。

在SDA培养基中，常用的矿质盐包括氯化钠、磷酸二氢钾等。

这些矿质盐能够提供细胞所需的微量元素，维持细胞的正常代谢和生长。

生长因子是细胞生长和繁殖所必需的物质。

在SDA培养基中，常用的生长因子包括维生素、激素等。

这些生长因子能够促进细胞的分裂和增殖，加速细胞的生长和繁殖。

培养基SDA的成分包括碳源、氮源、矿质盐和生长因子等。

这些成分在培养基中的合理配比和浓度能够提供细胞所需的能量、碳源、氮源和微量元素，促进细胞的正常生长和繁殖。

通过合理调控培养基的成分，可以为细胞实验提供一个适宜的生长环境，有助于研究
人员开展各种细胞实验和研究工作。