微生物实验室常见20种培养基配方大全
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微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分:牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶1000 mL,121℃高压灭菌15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。
将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内,以无菌操作分装小试管。
蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。
从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d。
迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨 20g猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10 mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。
双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。
三、5%乳糖发酵管成分:蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。
将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121 ℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。
在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL ,121℃高压灭菌15min。
甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。
146种培养基配方在微生物学研究中,培养基是非常重要的工具,用于维持和培养各类微生物的生长。
不同的微生物对培养基成分有着不同的需求,因此,有很多种不同的培养基配方被设计出来以满足微生物的需求。
下面是一些常用的微生物培养基配方。
1. 素琼脂葡萄糖培养基(Tryptone glucose yeast extract agar):- 牛肉提取物(Tryptone) 10g- 酵母提取物(Yeast extract) 5g- 葡萄糖(Glucose) 10g- Agar 15g-pH7.22. 红色半固体培养基(Red semi-solid medium):- 蛋白胨(Peptone) 10g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- Agar 7.5g- 酚红(Phenol red) 0.02g-pH7.23. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potato glucose agar):- 马铃薯提取物(Potato extract) 4g- 葡萄糖(Glucose) 20g- Agar 20g-pH7.04. 大肠杆菌营养琼脂培养基(Escherichia coli nutrient agar): - 羊肉肉脏提取物(Peptone from meat infusion) 5g- 水解酵母(Yeast extract) 3g-NaCl5g- Agar 15g-pH7.05. 硫磺琼脂培养基(Sulfur agar):- 素蛋白(Casein peptone) 10g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 硫磺粉末(Sulfur powder) 0.1g- Agar 15g-pH7.56. 罗氏琼脂培养基(Rogosa agar):- 葡萄糖(Dextrose) 20g- 麦粉汁(Malt extract) 10g- 柠檬酸(Citric acid) 5g- Agar 15g-pH5.27. 环境样品微生物菌落计数菌落计数琼脂培养基(Microbial Colony Count Agar):- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 蛋白胨(Peptone) 5g-NaCl9g- Agar 15g-pH7.28. 活性炭琼脂培养基(Activated charcoal agar):- 木质纤维素(Cellulose) 5g- 活性炭(Activated charcoal) 1g- Agar 10g-pH7.29. 高盐基琼脂培养基(High salt base agar):- 兰氏海盐(Sea salt) 20g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 蛋白胨(Peptone) 5g- Agar 15g-pH7.510. 大豆酪蛋白琼脂培养基(Soy peptone agar):- 大豆酪蛋白(Soy peptone) 5g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- Agar 15g-pH7.0这只是一小部分微生物培养基的配方,实际上有很多种不同的培养基适用于不同类型的微生物。
常用培养基配方汇总培养基是微生物学研究和实验室工作中常用的一种培养微生物的基础环境,其主要组成包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
下面是一些常用的培养基配方汇总。
1.琼脂培养基琼脂培养基是最常用的固体培养基之一,其主要成分为琼脂、蔗糖、牛肉膏粉和无机盐。
其配方如下:-琼脂:15g-蔗糖:10g-牛肉膏粉:3g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化镁:0.5g-氯化钾:0.2g-高锰酸钾:0.0001g-蛋白胨:3g-酵母提取物:3g- 菜子油:0.5ml- 蒸馏水:1000ml2.肉汤培养基肉汤培养基是一种常用的液体培养基,其主要成分为牛肉膏粉和蛋白胨。
其配方如下:-牛肉膏粉:3g-蛋白胨:5g-葡萄糖:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:2g-氯化镁:0.5g- 蒸馏水:1000ml3.紫砂培养基紫砂培养基是一种用于真菌培养的培养基,其主要成分为紫砂和蔗糖。
其配方如下:-紫砂:15g-蔗糖:30g-蛋白胨:2g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g4.麦芽培养基麦芽培养基是一种用于酵母和酵母菌类培养的培养基,其主要成分为麦芽粉和蔗糖。
其配方如下:-麦芽粉:10g-蔗糖:30g-蛋白胨:5g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g- 蒸馏水:1000ml5.铁蛋白培养基铁蛋白培养基是一种用于菌类和细菌培养的培养基,其主要成分为铁蛋白和蔗糖。
其配方如下:-铁蛋白:10g-蔗糖:10g-蛋白胨:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:1g-氯化钙:0.1g这些常用的培养基配方可根据实验需要进行适当调整和改良,以提高微生物的生长和培养效果。
同时,在制备培养基的过程中要注意消毒和无菌操作,以避免试验的污染和杂质的干扰。
常用培养基配方汇总培养基是微生物学和生物技术中常用的一种实验工具,用于培养和繁殖微生物。
不同的微生物需要不同的培养基来满足其生长和繁殖的需求。
以下是一些常用的培养基配方汇总。
1. LB培养基(Luria-Bertani培养基)LB培养基是最常用的培养基之一,适用于大多数细菌的培养。
其成分包括植物蛋白胨、酵母提取物、氯化钠和琼脂。
它提供了细菌所需的氨基酸、碳源和能量源。
配方:-植物蛋白胨:10g-酵母提取物:5g-氯化钠:10g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至7.02. 紫砂培养基(Sabouraud培养基)紫砂培养基是一种适用于真菌培养的培养基。
其成分包括葡萄糖、酵母提取物和琼脂。
它提供了真菌所需的碳源和能量源。
配方:-葡萄糖:40g-酵母提取物:10g-加水至1L,调节pH至5.63. TSB培养基(Tryptic Soy Broth培养基)TSB培养基是一种适用于多种微生物的通用培养基。
其成分包括植物蛋白胨、胨肽、大豆胨和琼脂。
它提供了微生物所需的氨基酸、碳源和能量源。
配方:-植物蛋白胨:17g-胨肽:3g-大豆胨:5g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至7.34. MRS培养基(De Man, Rogosa and Sharpe培养基)MRS培养基是一种适用于乳酸菌培养的培养基。
其成分包括蔗糖、氯化镁、氯化钠、蛋白胨、酵母提取物和琼脂。
它提供了乳酸菌所需的碳源、氮源和能量源。
配方:-蔗糖:50g-氯化镁:0.2g-氯化钠:5g-酵母提取物:10g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至6.25.R2A培养基R2A培养基是一种适用于水样中微生物培养的培养基。
其成分包括胨肽、葡萄糖、酵母提取物、琼脂和微量元素。
它提供了水样中微生物所需的氮源、碳源和能量源。
配方:-胨肽:0.5g-葡萄糖:0.5g-酵母提取物:0.5g-琼脂:15g-微量元素:1mL-加水至1L,调节pH至7.2以上是一些常用的培养基配方汇总,适用于不同类型的微生物培养。
70种常用培养基配方培养基是一种在实验室中用于培养和生长微生物的基质。
根据微生物的不同需求,培养基可以分为许多不同类型。
下面列举了70种常用的培养基配方。
1. LB培养基(Luria-Bertani培养基)Tryptone 10 gYeast extract 5 gNaCl10gAgar 15 g加水至1L,调pH至7.0用途:培养大肠杆菌等广泛应用于分子生物学实验。
2. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potato Dextrose Agar)胰蛋白胨4g葡萄糖20g马铃薯提取物200gAgar 15 g加水至1L用途:用于真菌的培养和研究。
3.NIH3T3细胞培养基DMEM培养基 (Dulbecco's Modified Eagle Medium) 500 mL胎牛血清 (Fetal bovine serum) 10%青霉素/链霉素 (Penicillin/Streptomycin) 1%用途:常用于培养和传代小鼠成纤维细胞株。
4. 酵母饼干培养基(Yeast Extract Peptone Dextrose Agar)酵母提取物10g蛋白胨10g葡萄糖20gAgar 15 g加水至1L用途:适用于酵母菌的培养和繁殖。
5. BHIA培养基(Brain Heart Infusion Agar)大脑提取物17.5g胃蛋白胨10g葡萄糖2gAgar 12 gNaCl5g加水至1L用途:常用于培养细菌。
6. M9盐基液(M9 Minimal Medium)Na2HPO46gKH2PO43gNaCl0.5gNH4Cl1g1MMgSO41mL加水至1L用途:适用于大肠杆菌等菌种。
7. SJ培养基(Sabouraud Dextrose Agar)蔗糖40g蛋白胨10gAgar 15 g加水至1L用途:适用于真菌的培养。
8.R2A培养基Dipotassium phosphate 0.3 g Monopotassium phosphate 0.3 gSodium pyruvate 0.3 gSodium glutamate 0.3 gYeast extract 0.5 gPeptone 0.5 gTryptone 0.5 gGlucose 0.5 gAgar 15 g加水至1L用途:适用于环境中的微生物。
36种常用微生物培养基配制汇总之欧阳理创编微生物培养基是用于培养和繁殖微生物的营养液或固体基质。
不同的微生物对于营养成分的需求有所不同,因此有多种不同类型的培养基适用于不同的微生物。
以下是36种常用的微生物培养基的配制总结。
一、普通营养基1.爱德华氏琼脂培养基(Edward's Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨10g,蔗糖10g,酵母提取物5g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.2-7.42.LB培养基(LB Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨10g,酵母膏5g,NaCl10g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.0。
3.NB培养基(NB Medium)配方:纯培养基成分:牛肉精20g,酵母浸膏10g,蔗糖10g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.2二、选择性培养基1.MacConkey琼脂培养基(MacConkey Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨17g,胆盐16g,中性红紫晶1g,酸性红3.6g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.1-7.52.VR琼脂培养基(VR Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨10g,蔗糖10g,酵母浸膏10g,苏木素2.5g,酚红0.025g,碳酸钠10g,氧化钴0.0025g,碳酸锌0.025g,维生素B10.025g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH6.83.XLD琼脂培养基(XLD Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨3g,胆盐2g,蔗糖7.5g,腺苷鳖1g,素含色素蓝0.008g,溴酸钠0.0125g,菌落素1.5g,氧化铋1.5g,精盐75g,麦芽葡糖糖1g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.4三、富营养基1.TSA琼脂培养基(Tryptic Soy Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨15g,酵母提取物5g,氯化钠5g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.32.BHI琼脂培养基(Brain Heart Infusion Agar Medium)配方:纯培养基成分:牛心脏粉15g,牛脑粉8g,葡萄糖2g,酵母浸膏5g,琼脂15g,蒸馏水1L。
培养基配方1、PDA培养基(用于分离、培养植物内生真菌):马铃薯(去皮)200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。
用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 μ g/ml,用于抑制细菌的生长。
2、NA培养基(用于分离、培养植物内生细菌):牛肉膏3g,蛋白胨5g,葡萄糖2.5g,琼脂粉15g,蒸馏水1000ml,pH 7.0。
用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50μg/ml,用于抑制真菌生长。
115℃,20min 灭菌。
3、LB培养基:胰蛋白胨10 g,酵母提取物5 g,NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;4、DSM1培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,胰蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;5、DSM2培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl5 g,细菌学蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;6、Msgg培养基:磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0),MOPs 100 mmoL/L(pH7.0),MgCl2 2 mmoL/L,CaCl2 700 mmoL/L,MnCl2 50 μM,FeCl3 50 μM,ZnCl2 1 μM,VB1 2 μM,甘油0.5 %,谷氨酸0.5 %,色氨酸50 μg/mL,苯丙氨酸50 μg/mL,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。
7、N%NA培养基:牛肉膏3.0 g,细菌学蛋白胨10 g,NaCl 5 g,琼脂粉N*10 g,8、BGM1培养基:牛肉膏3 g,胰蛋白胨10 g,NaCl 5 g,磷酸三钾26.631 g(pH7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,葡萄糖1 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。
微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分:牛肉膏或牛肉汤500克,葡萄糖10克,胰蛋白胨10克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于各种需有机氮源的细菌的培养。
2.十倍腌盐水成分:NaCl300克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。
3.果胶培养基成分:果胶5克,葡萄糖5克,NaNO32克,K2HPO40.2克,MgSO4·7H2O0.1克,CaCO30.02克,FeSO4·7H2O0.01克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于果胶酶产生菌的培养。
4.大肠杆菌选择性培养基成分:土豆提取物4克,蛋白胨2克,乳糖10克,NaCl10克,胆盐0.75克,碱性蓝2克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于分离大肠杆菌的选择性培养。
5.卡波培养基成分:石蜡300克,肉浸膏100克,大豆酪蛋白胨20克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于致病真菌的培养。
6. Nutrient Broth培养基成分:肉膏1克,酵母提取物2克,葡萄糖2克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌和真菌的常规培养。
7. Luria-Bertani(LB)培养基成分:酵母提取物5克,酪蛋白胨10克,NaCl10克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于E. coli等细菌的培养。
8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖40克,醇20克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于真菌的培养。
9. MacConkey琼脂培养基成分:鱼精膏20克,胆盐胆红素15克,玛琪琼脂25克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于肠道杆菌的培养、分离。
10.马加提琼脂培养基成分:马加提琼脂50克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。
11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖20克,醇30克,琼脂20克,蒸馏水1000毫升。
实验室常用培养基配方1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是最为常用的一种培养基,用于微生物的一般培养、分离和鉴定,其配方如下:-水:1000mL-肉浸膏或胨:三到五克-水解酪蛋白:五克-氯化钠:五克-琼脂:十五克2. 培养基ONE(BHI Agar)培养基ONE用于灭菌后的微生物收集、保存和复苏,配方如下:-砂糖:十五克-胨:二十克-水:1000mL-酵母膏:二十克-酵母蛋白胨:十克-溶血素:十克-十%NaCl:五百毫升-甘油:百毫升3. 霍乱弧菌选择性琼脂培养基(TCBS Agar)TCBS Agar用于霍乱弧菌的分离和检测,配方如下:-水:1000mL-TCBS粉:一百克4. MacConkey琼脂培养基(MacConkey Agar)MacConkey琼脂培养基是一种选择性琼脂培养基,用于大肠杆菌的分离和检测,配方如下:-水:1000mL-肉浸膏:十七克-水解酪蛋白:十五克-氯化钠:五克-紫蘑菇素:六十毫克-琼脂:十五克5. Sabouraud琼脂培养基(Sabouraud Agar)Sabouraud琼脂培养基用于真菌的分离和培养-水:1000mL-葡萄糖:四十克-琼脂:十五克-氯化钠:五克-氯已二维硫酸钾:二十克这些仅仅是一些常见的培养基配方,实验室常根据不同微生物的要求而有所调整。
此外,还有许多特殊的培养基用于特殊微生物的培养和分离,如MRS培养基用于乳酸菌、EC培养基用于大肠杆菌O157:H7等。
在使用培养基时,需要注意权威的文献和生产厂家的指导。
微生物常用的培养基配方1、用于细菌培养——LB(Luria-Bertani)培养基LB培养基分为液体及固体两种形态的培养基,主要在分子生物学中应用。
(1) LB液体培养基,在90mL双蒸馏水中加入:胰蛋白胨1g氯化钠1g酵母提取物0.5g摇动容器直至溶质溶解后,用1当量NaOH调节pH至7.0,再用双蒸馏水定容至100mL。
而后进行高压蒸汽灭菌。
(2) LB固体培养基在100mL液体培养基的基础上,加入1.5g琼脂粉。
2、用于细菌培养——牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏 1.5g蛋白胨5g氯化钠 2.5g水500mL,pH调至7.4~7.6。
3、用于霉菌或酵母菌培养——马铃薯培养基(PDA)马铃薯(去皮)200g蔗糖(葡萄糖)20g水1000mL将马铃薯去皮切成小块放入锅中,加水至1000mL,煮至沸腾后维持20-30min,注意不时用玻璃棒搅拌防止糊底。
用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,弃去滤渣。
取滤液加糖(培养霉菌用加蔗糖,培养酵母菌用加葡萄糖),补充水至1000mL,自然pH。
4、用于V.P.反应和甲基红试验——葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨0.5g葡萄糖0.5g磷酸氢二甲0.2g水100mL,调节pH至7.2~7.4,115℃湿热灭菌20min。
5、用于吲哚实验——蛋白胨水培养基蛋白胨10g氯化钠5g水1000mL,调节pH至7.2~7.4,121℃湿热灭菌20min。
6、用于厌氧菌培养——RCM培养基(强化梭菌培养基)酵母粉3g牛肉膏10g蛋白胨10g可溶性淀粉1g葡萄糖5gL-半胱氨酸盐酸盐0.5g氯化钠5g醋酸钠3g琼脂0.5水1000mL,调节pH至6.8±0.1,121℃高压灭菌15min。
微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分:牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶1000 mL,121℃高压灭菌15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。
将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内,以无菌操作分装小试管。
蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。
从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d。
迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨 20g猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10 mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。
双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。
三、5%乳糖发酵管成分:蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。
将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121 ℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。
在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL ,121℃高压灭菌15min。
甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。
鲜红色为阳性,黄色为阴性,甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20 mL蒸馏水。
V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~4d。
哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。
加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL充分振摇试管,观察结果阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察。
五、营养明胶成分:蛋白胨 5g牛肉膏 3g明胶 120g蒸馏水 1000mLpH 6.8~7.0制法:加热溶解,校正至pH7.4~7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固,复查最终pH应为6.8~7.0。
用琼脂培养物穿刺接种,放在22~25℃培养,每天观察结果,记录液化时间。
或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果。
六、苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏 3gDI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g)2g磷酸氢二钠 1g氯化钠 5g琼脂 12g蒸馏水 1000mL制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面。
自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在36士1℃培养4h或18~24h,滴加10%三氯化铁溶液2~3滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。
七、蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨)20g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH7.4制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min。
靛基质试剂柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入浓盐酸25ml。
欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内,然后缓慢加入浓盐酸20 ml。
试验方法:挑取小量培养物接种,在36士1℃培养1~2d,必要时可培养4~5d。
加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5 mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。
蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。
每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用。
八、硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)成分:牛肉膏 3g酵母浸膏 3g蛋白胨 10g硫酸亚铁 0.2g硫代硫酸钠 0.3g氯化钠 5g琼脂 12g蒸馏水 1000 mL制法:加热溶解,校正pH,分装试管,115℃高压灭菌15min,取出直立候其凝固。
挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于36士1℃培养1~2d,观察结果。
产硫化氢者使培养基变为黑色。
肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基。
九、尿素琼脂成分:蛋白胨 1g氯化钠5g葡萄糖1g磷酸二氢钾 2g4%酚红溶液 3 mL琼脂 20g蒸馏水 1000 mL20%尿素溶液 100mL制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶。
121℃高压灭菌15min。
冷至50~55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液,尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用。
挑取琼脂培养物接种,在36士1℃培养24h,观察结果。
尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。
十、氰化钾(KCN)培养基成分:蛋白胨10g氯化钠 5g磷酸二氢钾 0.225g磷酸氢二钠 5.64g蒸馏水 1000 mL0.5%氰化钾溶液 20 mLpH 7.6制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
放在冰箱内使其充分冷却。
每100 mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1:10000),分装于12mm*100mm灭菌试管,每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在4℃冰箱内,至少可保存两个月。
同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用。
十一、营养琼脂成分:蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15~20g蒸馏水1000mL制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4。
加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。
如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。
十二、营养肉汤成分:蛋白胨 10g牛肉膏 3g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH7.4制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225 mL ,121℃高压灭菌15min。
十三、缓冲蛋白胨水(BP)成分:蛋白胨 10g氯化钠 5g磷酸氢二钠 9g磷酸二氢钾 1.5g蒸馏水1000mLpH 7.2制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min。
临用时无菌分装每瓶225mL。
注:本培养基供沙门氏菌前增菌用。
本培养基供沙门氏菌前增菌用。
十四、EC肉汤成分:胰蛋白胨 20g3号胆盐(或混合胆盐)1.5g乳糖 5g磷酸氢二钾 4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠 5g蒸馏水 1000mL制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min。
最终pH为6.9±0.2。
十五、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基多胨或眎胨 5g胆盐 1g碳酸钙 10g硫代硫酸钠 3g蒸馏水 1000mL碘溶液碘 6g碘化钾 5g蒸馏水 20 mL制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL。
分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀,121℃高压灭菌15min备用。
临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL,,0.1%煌绿溶液1mL。
十六、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白胨 5g乳糖 4g亚硒酸氢钠 4g磷酸氢二钠 5.5g磷酸二氢钾 4.5gL-胱氨酸 0.01g蒸馏水 1000mL1% L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取L-胱氨酸0.1g或(DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氢氧化钠1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL即成。
制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷备用。
另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合。
再加入1% L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL。
分装于灭菌瓶中.每瓶100mL,pH应为7.0±0.1。
十七、亚硫酸铋琼脂(BS)成分:蛋白胨 10g牛肉膏 5g葡萄糖 5g硫酸亚铁 0.3g磷酸氢二钠 4g煌绿 0.025g柠檬酸铋铵 2g亚硫酸钠 6g琼脂 18~20g蒸馏水 1000mLpH 7.5制法:1.将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中。
2将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解。
3将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃。
4将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀,冷至50~55℃,倾注平皿。
此培养基不需高压灭菌。
制备过程不宜过分加热,以免降低其选择性。
应在临用前一天制备,贮存于室温暗处,超过48h 不宜使用。
十八、三糖铁琼脂(TSI)成分:蛋白胨 20g牛肉膏 5g乳糖 10g蔗糖 10g葡萄糖 1g氯化钠 5g硫酸亚铁铵 0.2g硫代硫酸钠 0.2g琼脂 12g酚红 0.025g蒸馏水 1000 mLpH 7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。
加入0.2%酚红水溶液12.5 mL,摇匀,分装试管。
装量宜多些,以便得到较高的底层。
121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用。
十九、三糖铁琼脂换用方法成分:蛋白胨15g眎胨5g牛肉膏 3g酵母膏 3g乳糖 10g蔗糖 10g葡萄糖 1g氯化钠 5g硫酸亚铁 0.2g硫代硫酸钠 0.3g琼脂 12g酚红 0.025g蒸馏水 1000 mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。
加入0.2%酚红水溶液12.5 mL,摇匀,分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。
121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用。
二十、嗜盐性试验培养基成分:蛋白胨2g氯化钠按不同量加蒸馏水100 mLpH7.7制法:配制2%蛋白胨水,校正pH,共配制5瓶,每瓶100mL。
每瓶分别加入不同量的氯化钠:(1)不加;(2)3g;(3)7g;(4)9g;(5)11g。
待溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min。