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Special Wild Economic Animal and Plant Research 特产研究124DOI ：10.16720/ki.tcyj.2022.075刺五加多糖的提取工艺及活性研究进展高世勇1，唐博琪1，石佳1，魏新瑞1，谭慧心2※（1.哈尔滨商业大学药物工程技术研究中心，黑龙江哈尔滨150076；2.哈尔滨医科大学附属第四医院药学部，黑龙江哈尔滨150001）摘要：刺五加作为药食同源的天然产物，在食品与药品方面都发挥着重要的作用。
多糖是刺五加的主要成分，也是刺五加发挥抗肿瘤、抗炎和免疫调节等生物活性的重要成分。
本文通过对刺五加多糖的提取工艺、分离纯化方法以及生物活性等研究状况进行系统地综述，旨在为深入研究刺五加多糖的构效关系及刺五加的开发利用等方面提供理论依据。
关键词：刺五加；多糖类成分；提取纯化；药理学作用中图分类号：R284；R285文献标识码：A 文章编号：1001-4721（2022）03-0124-05GAO Shi-yong 1,TANG Bo-qi 1,SHI Jia 1,WEI Xin-rui 1,TAN Hui-xin 2※（1.Pharmaceutical Engineering Technology Research Center,Harbin University of Commerce,Harbin 150076,China;2.De-partment of Pharmacy,The Fourth Affiliated Hospital of Harbin Medical University,Harbin 150001,China）Abstract:,as a natural product of homology medicine and food,plays an important role in both food and medicine.Polysaccharide isthemaincomponentof,and itis alsoanimportant componentoftoexert biological activities such as anti-tumor,anti-inflammatory and immune regulation.Thismanuscriptreviews theresearch statusofpolysaccharides extraction progress,separation and purification methods,and biological activity systematically,aiming to provide a theoretical basis for the further researchonthe structure-activityrelationshipof polysacchari-desandthe developmentand utilizationof.Key words:;polysaccharide;extraction andpurification;pharmacological activity刺五加[(Rupr.Maxim.)Harms ]属于五加科五加属植物，主要分布于黑龙江、吉林、河北和山西等地，在中国东北部地区较为常见，也分布于俄罗斯、日本以及朝鲜地区。
五味子药渣中多糖提取工艺研究
郭志欣;顾地周;宋宇辉;王亚娣;姚加梅
【期刊名称】《江苏农业科学》
【年(卷),期】2013(41)5
【摘要】以五味子醇提后的药渣为原料,以提取温度、提取时间以及料液比为主要影响因素,筛选影响五味子药渣水溶性多糖提取的因素水平.结果显示,提取温度对多糖得率影响显著,提取时间和溶剂用量对多糖得率影响均不显著.五味子药渣中多糖提取的最优方案:提取温度为100℃、提取时间为4h、料液比为1 g∶30 mL.本研究确定了五味子药渣中水溶性多糖的最佳提取工艺,为五味子的深度开发利用提供方法和理论依据.
【总页数】2页(P254-255)
【作者】郭志欣;顾地周;宋宇辉;王亚娣;姚加梅
【作者单位】通化师范学院生命科学学院,吉林通化134002;通化师范学院生命科学学院,吉林通化134002;通化师范学院生命科学学院,吉林通化134002;通化师范学院生命科学学院,吉林通化134002;通化师范学院生命科学学院,吉林通化134002
【正文语种】中文
【中图分类】TS261.7
【相关文献】
1.五味子药渣多糖的提取及其免疫活性
2.五味子药渣多糖提取及其对白菜种子萌发活性影响的研究
3.钩藤药渣中多糖提取工艺的研究
4.五味子多糖提取工艺研究
5.管花肉苁蓉药渣中多糖提取工艺及体外抗氧化活性研究
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利用醇提药渣提取黄芪多糖的工艺研究赵海燕;马永平;刘雅静【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2008(000)036【摘要】[目的] 确定从醇提药渣中提取黄芪多糖的最佳试验条件.[方法]采用水为提取溶剂,用搅拌回流方法提取黄芪经乙醇提取后所得药渣中的黄芪多糖(APS).通过正交试验研究不同提取温度、固液比及提取时间对APS提取率的影响.[结果]结果表明,黄芪多糖提取的最佳条件为: 温度100 ℃,固液比1∶16,提取2 h;利用单因素试验确定最佳提取次数为3次,乙醇沉淀APS的最佳浓度为70%.与直接从黄芪生药中提取多糖相比,从醇提药渣中提取得到的黄芪多糖粗提物得率有所降低(从24.58%下降到12.93%),但纯度却大大提高(从74.87%提高到93.27%).[结论] 该方法能综合利用黄芪中的有效成分,减少中药资源的浪费.【总页数】3页(P15977-15978,15980)【作者】赵海燕;马永平;刘雅静【作者单位】北方民族大学生物科学与工程学院,宁夏银川,750021;北方民族大学生物科学与工程学院,宁夏银川,750021;北方民族大学生物科学与工程学院,宁夏银川,750021【正文语种】中文【中图分类】S567.23+9【相关文献】1.金钱草醇提残渣中多糖的提取工艺研究 [J], 张敏;赵婷;茆广华;邹烨;邹艳敏;宋晶;仰榴青2.五味子醇提残渣中多糖的提取工艺研究 [J], 赵婷;仰榴青;笪祖林;吴向阳;邹艳敏;张蓉仙3.养正消积胶囊醇提部分超声逆流提取工艺研究 [J], 武景路4.人参醇提后药渣中人参酸性多糖的分离纯化工艺研究 [J], 王贵金;杜红娜;乔莉;毕丹;贾继明5.醇提-表面活性剂协同法提取无患子总皂苷的工艺研究 [J], 郑林禄;马强;陈峰;张振兴;马宏儒因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一、实验目的本研究旨在通过实验方法提取和鉴定灵芝中的多糖成分，探究灵芝多糖的提取工艺，并对提取得到的灵芝多糖进行初步的生物活性分析。
二、实验材料与仪器1. 实验材料：- 灵芝子实体（赤芝或紫芝）- 乙醇、水、硫酸、蒽酮等化学试剂- 蒸馏水、无水乙醇、丙酮等溶剂- 蛋白酶、DNase等酶类- 小鼠、细胞等实验动物和细胞系2. 实验仪器：- 电子天平- 超声波清洗器- 烘箱- 离心机- 恒温水浴锅- 分光光度计- 高效液相色谱仪- 荧光显微镜等三、实验方法1. 灵芝多糖的提取：- 将灵芝子实体洗净、晾干，粉碎成粉末。
- 采用乙醇提取法，将灵芝粉末与95%乙醇按一定比例混合，在超声波清洗器中提取2小时。
- 将提取液过滤，滤液在烘箱中浓缩至一定浓度。
- 将浓缩液用无水乙醇沉淀，离心分离，收集沉淀物。
2. 灵芝多糖的鉴定：- 采用硫酸-蒽酮法对提取得到的沉淀物进行含量测定。
- 采用高效液相色谱法对提取得到的灵芝多糖进行结构分析。
3. 灵芝多糖的生物活性分析：- 采用小鼠腹腔巨细胞吞噬实验，检测灵芝多糖的免疫调节活性。
- 采用细胞实验，检测灵芝多糖对肿瘤细胞的抑制作用。
四、实验结果1. 灵芝多糖的提取：- 采用乙醇提取法，从灵芝子实体中提取得到多糖含量为10%左右。
2. 灵芝多糖的鉴定：- 硫酸-蒽酮法检测结果显示，提取得到的灵芝多糖含量较高。
- 高效液相色谱法分析结果显示，提取得到的灵芝多糖主要由葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖、半乳糖等单糖组成。
3. 灵芝多糖的生物活性分析：- 小鼠腹腔巨细胞吞噬实验结果显示，灵芝多糖能够显著提高小鼠腹腔巨细胞的吞噬功能。
- 细胞实验结果显示，灵芝多糖对肿瘤细胞具有抑制作用。
五、实验讨论1. 灵芝多糖的提取工艺：- 本实验采用乙醇提取法，结果表明该方法能够有效地提取灵芝中的多糖成分。
- 在实验过程中，提取溶剂的浓度、提取时间、料液比等因素对提取率有显著影响，需要进一步优化。
渝产续断多糖超声波辅助提取工艺的优化张丹;陶燕铎;谈利红;余保;颜学伟;曹纬国【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2015(54)2【摘要】为建立渝产续断(Dipsacus asperoids)多糖的最佳超声波辅助提取工艺,设计正交试验,以续断多糖的提取率为评价指标,对续断多糖的超声波辅助提取工艺参数进行考察.结果表明,最佳超声波辅助提取工艺为料液比1:20(g:mL),提取时间60 min,提取4次,测得续断多糖的平均提取率为7.472％,RSD为2.12％,表明续断多糖超声波辅助提取工艺稳定,质量可控.【总页数】3页(P431-433)【作者】张丹;陶燕铎;谈利红;余保;颜学伟;曹纬国【作者单位】重庆医科大学中医药学院,重庆400016;中国科学院西北高原生物研究所,西宁810000;重庆医科大学中医药学院,重庆400016;重庆医科大学中医药学院,重庆400016;重庆医科大学中医药学院,重庆400016;重庆医科大学中医药学院,重庆400016【正文语种】中文【中图分类】S567.23+9;R284.2【相关文献】1.猴头菌发酵米糠所产多糖的超声波辅助提取工艺研究 [J], 代峥峥;刘伟民2.兰州百合鳞茎多糖超声波辅助提取工艺优化及稳定性研究 [J], 李刚刚; 孙静; 伏衡一; 效碧亮3.响应面优化华腺萼木总黄酮和总多糖的超声波辅助提取工艺 [J], 秦惠珍;曹其义;宁莞权;唐健民;邹蓉;朱成豪;韦霄;熊忠臣4.均匀设计法优化灰树花多糖超声波辅助提取工艺及其抗氧化活性分析 [J], 曹丹;孙于寒;彭浩;兰阿峰5.超声波辅助酶法优化黄精多糖提取工艺的研究 [J], 刘日斌;张宇鹏;马崇坚;陈晓远;叶俊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
2020年第4卷第5期2020Vol.4No.5现代医学与健康研究Modem Medicine and Health Research□综述/Review中华中医药道地药材系列汇讲（5）道地药材川续断的研究近况杨建宇刘冠军IQ,刘白云1，2,3,张举昌1,2,3,刘桂香1,2,3,朱聒丽1，2,仪忠宝役祝之友5,唐祖宣°（1.中国中医药信息学会道地药材分会，北京100700; 2.北京医景堂疑难病研究院，北京100210; 3.河南省汉帝药业有限公司，河南平顶山467000; 4.北京中科康保医学研究院，北京100096; 5.国家中医药管理局全国名老中医药专家祝之友传承工作室，四川眉山620360; 6.国家中医药管理局国医大师唐祖宣工作室，河南邓州474150）摘要：川续断作为一种传统的道地药材，具有活血化瘀、接骨强腰的功效，可治疗骨折、腰膝酸痛、阳气不足、妇人胎不稳等疾病， 在中医临床诊疗中具有重要作用。
通过对川续断的历史沿革、采集、炮制方法、品鉴方式、产地变迁等方面进行综述，分析川续断的药理 作用和应用效果，旨在为道地药材川续断的更多药用研究提供借鉴。
关键词：川续断；道地药材；研究近况；药理作用；应用价值中图分类号：R282 文献标识码：A 文章编号：2096-3718.2020.05.0100.03川续断，又名川续断然、刺芹儿等，属被子植物门， 双子叶植物纲，合瓣花亚纲茜草目，川续断科，川续断属。
川续断主要分布于中国湖北、湖南、江西、广西、云南、 贵州、四川、西藏等地，生于沟边、草丛、林缘及田野路 旁叭川续断的药用历史悠久，其味苦、辛，性微温。
归肝，肾经，可行血消肿、生肌止痛、续筋接骨、补肝肾、 强腰膝、安胎，具有通达、止痛等功效［叫通过川续断的 相关知识进行检索，综述川续断的历史沿革、采集、炮制方法、品鉴方式、产地变迁、药理作用及应用效果，以期 在指导临床治疗的同时，为川续断的新应用提供参考依据，现综述如下。
五鹤续断对氟哌啶醇致痴呆大鼠抗氧化酶表达的影响
黄丽亚
【期刊名称】《湖北民族学院学报（医学版）》
【年(卷),期】2005(022)003
【摘要】目的探讨五鹤续断对氟哌啶醇致痴呆大鼠抗氧化酶表达影响的作用机制.方法30只雄性Wistar大鼠分为模型组、正常对照组和实验组.除正常对照组外,其余大鼠均用氟哌啶醇建立痴呆病(Alzheimer Disease,AD)动物模型,实验组同时腹腔注射五鹤续断注射液.测定各组大鼠的血清、肝、肾、海马、皮质中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量.结果与对照组和模型组比较,五鹤续断注射液能使大鼠多种组织SOD、GSH-PX显著升高,差别具有非常显著性意义(P＜0.001).结论五鹤续断增强抗氧化酶的表达作用,提示可能与促进抗氧化、抵抗氧自由基损伤和延缓衰老的机制有关.
【总页数】3页(P12-14)
【作者】黄丽亚
【作者单位】湖北民族学院医学院,湖北,恩施,445000
【正文语种】中文
【中图分类】R749.1+6;R285.5
【相关文献】
1.延龄草、何首乌对氟哌啶醇致痴呆大鼠抗氧化酶表达作用的研究 [J], 黄丽亚
2.天麻与续断对氟哌啶醇致痴呆大鼠模型抗氧化酶活性作用的比较 [J], 刘杰书
3.白术、麦冬增强氟哌啶醇致痴呆大鼠抗氧化酶表达作用比较研究 [J], 黄丽亚
4.延龄草盐酸丁咯地尔上调氟哌啶醇致痴呆大鼠抗氧化酶表达作用的比较研究 [J], 黄丽亚;肖本见
5.麦冬与何首乌上调氟哌啶醇致痴呆大鼠抗氧化酶表达作用的比较研究 [J], 刘杰书;黄丽亚
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五味子醇提残渣中多糖的提取工艺研究赵婷;仰榴青;笪祖林;吴向阳;邹艳敏;张蓉仙【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2008(029)008【摘要】研究工业五味子醇提残渣中多糖的提取工艺.以多糖得率为考察指标,在单因素实验结果的基础上,进行正交实验设计,考察料液比、温度、时间对多糖得率的影响.结果:温度是影响粗多糖得率的重要因素,水提法最佳工艺为料液比1:14,温度100℃,时间6h,提取2次,此条件下五味子多糖的得率为11.52%,粗多糖样品中多糖含量为44.46%.结论:该提取工艺的多糖得率较高,可用于五味子醇提残渣中粗多糖的提取.【总页数】4页(P70-73)【作者】赵婷;仰榴青;笪祖林;吴向阳;邹艳敏;张蓉仙【作者单位】江苏大学,药学院,江苏,镇江,212013;江苏大学,药学院,江苏,镇江,212013;江苏大学,化学化工学院,江苏,镇江,212013;江苏大学,化学化工学院,江苏,镇江,212013;江苏大学,药学院,江苏,镇江,212013;江苏大学,化学化工学院,江苏,镇江,212013【正文语种】中文【中图分类】TS2【相关文献】1.金钱草醇提残渣中多糖的提取工艺研究 [J], 张敏;赵婷;茆广华;邹烨;邹艳敏;宋晶;仰榴青2.利用醇提药渣提取黄芪多糖的工艺研究 [J], 赵海燕;马永平;刘雅静3.五味子醇提残渣中粗多糖的免疫活性研究 [J], 仰榴青;陈荣华;吴向阳;范群艳;赵江丽4.高压脉冲电场法快速提取北五味子中五味子醇甲的工艺研究 [J], 赵景辉;王再幸;赵伟刚;王英平;李荣峰;冯卓;赵明忠;潘扬5.五味子醇提残渣中粗多糖的体外抗氧化活性研究 [J], 陈荣华;吴向阳;仰榴青;邹艳敏;张蓉仙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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五味子多糖的提取工艺研究进展作者：柳玥雯来源：《农业科技与装备》2019年第06期摘要：在查阅、收集国内五味子多糖提取文献方法基础上，综述超声提取法、酶解提取法、超声波辅助酶法提取法、超声波-微波协同提取法、双水相体系提取法、闪式提取法等五味子多糖提取工艺研究进展，为进一步开展相关研究提供参考。
关键词：五味子多糖;提取工艺;酶解;超声波中图分类号：R284.2文献标识码：A文章编号：1674-1161（2019）06-0051-02五味子（SchisandrachinensisBaill.）为木兰科植物五味子的干燥成熟果实，具有敛肺滋肾、生津敛汗、涩精止泻、宁心安神等功效，具有较高的营养价值和药用价值，为我国传统的药食兼用植物。
现代药理研究发现，五味子多糖是其主要活性成分之一，具有抗衰老、保肝、抗氧化、降血脂、抗肿瘤、增强免疫等生物活性。
近年来，国内对五味子多糖的提取工艺进行了大量研究，综述相关研究进展，对五味子的开发利用具有借鉴意义。
1 五味子多糖的提取方法五味子多糖的传统提取方法是水提醇沉法和热水浸提法，提取效率低，耗费时间长。
近年来，多采用现代提取方法进行五味子多糖提取，如超声提取法、酶解提取法、超声波辅助酶法提取法、超声波-微波协同提取法、双水相体系提取法、闪式提取法等。
1.1 超声波提取法超声辅助提取利用超声空化现象，增强细胞渗透效应和毛细管效应，使有效成分得以释放，直接进入溶剂并充分混合。
此法可缩短提取时间和提高提取率，避免高温对有效成分的影响。
张莹等以五味子干粉为原料，比较超声波辅助法和热水浸提法提取五味子多糖的效果，通过正交试验优化提取条件。
超声波辅助提取的最佳工艺参数为：提取温度50℃、液料比10∶1、提取时间1h、醇沉浓度80%，平均得率18.61%。
热水浸提的最佳工艺参数为：提取温度100℃、液料比10∶1、提取时间3h、醇沉浓度80%，平均得率9.35%。
采用苯酚-硫酸法测定多糖含量，多糖含量分别为54.13%和52.38%。
五鹤续断多糖的提取及动态分布规律的研究（作者：__________ 单位： ___________ 邮编： ___________ ）【摘要】目的以恩施州道地药材一一五鹤续断为原料，初步研究其多糖提取分离及其动态分布规律。
方法采用石油醚脱脂、热水浸提、乙醇沉淀分离、sevage脱蛋白、冷冻干燥等方法提取分离续断多糖，并采用蒽酮比色法测定续断多糖的含量，了解其多糖的动态分布规律。
结果在提取2次、加料液比为1 ：0、提取时间2 h、提取温度为95 C时，续断多糖得率最高，三年生续断根多糖分布最高。
结论五鹤续断多糖分布规律为：三年生根〉两年生根〉一年生根＞叶，人工种植的续断根＞野生根。
【关键词】五鹤续断多糖提取分离分布规律Abstract : ObjectiveTo extract and separate polysaccharide in Dipsacus asper and extract polysaccharide and study itsregularities.MethodsDuring the extraction of polysaccharide, the effects of extraction times, temperature, proportion and time on yield of polysaccharide inv estigated by orthog onal experime nt. Theseparation procedure of precipitation with alcohol and purification from the removing prote ins and fats were an alyzed. The contents of polysaccharides were determ ined by anthrone colorimetry. ResultsThe results showed that the optimum parameters were as follows: 2 times extracti on ratio of material solve nt 1:20, the time 2h, the temperature was 95 °C . Con clusi on The regularities of polysaccharide distribution in Dipsacus asper is as follows: the polysaccharide in the roots grew for three years > the one for two years > for one year >the one in the leaves, the cultivation Wu-He Dipsacus roots > the wild form.Key words : Wu-He Dipsacus asper ; Polysaccharide ; Extraction ; Separation procedure ; The regularities of distribution五鹤续断属于川续断科植物(Dipsacus asper ),药用部位为其干燥根，其产地以湖北鹤峰县、五峰县为主，并且是川续断中的优质品［1 ］,具有补肝益肾、续接筋骨、抗骨质疏松、止血安胎等功效，临床上主要用于治疗腰膝酸软，跌打损伤，骨折，腰椎骨质增生，先兆性流产和习惯性流产等症状］2］。
已有研究表明，续断根的热水提取物中存在着抗补体多糖和具免疫调节活性的高分子活性成分［3］。
多糖尤其是中药多糖因具有增强机体免疫功能及抗肿瘤等药理作用，而且几乎没有毒性，愈来愈成为当前的研究热点。
本研究以五鹤续断为原料，探究续断多糖的提取和动态分布规律，以拓宽五鹤续断的应用范围和产品类型，为进一步开展其药用及保健方面的应用开发奠定基础。
1材料与仪器1.1采样及样品预处理本研究所用材料均来自恩施州鹤峰县走马镇万寺坪道地药材五鹤续断GAP研究及种植基地，野生续断采自GAP基地周围的环境。
采用随机取样的方法，分别取人工种植一年生、二年生、三年生和野生的新鲜植株各10株（其根生长三年以后木质化，不能药用），用无离子水将其根、茎、叶分别洗净，切碎后放在105 C的烘箱里杀青30 ~ 60 min后，于80 C下烘至恒重，将各样品用粉碎机打成粉末，过60目筛，装于试剂瓶中，贴上标签，置于干燥器内贮存备用。
1.2仪器与试剂植物样品粉碎机，756MC-紫外分光光度计，RE-52型旋转蒸发器，HWS12电热恒温水浴锅，DGX型电热鼓风干燥箱，磁力搅拌器，pH计（PHS-3C ），电子天平，冷冻干燥机，低速大容量多管离心机，双重蒸馏水器。
95%乙醇、无水乙醇、氯仿、正丁醇、葡萄糖、石油醚、蒽酮、浓硫酸、HCIO4、葡萄糖等，所有试剂均为分析纯（由恩施州人合科贸有限责任公司提供），所用水为双蒸水。
2方法2.1续断多糖的提取工艺流程石油醚脱脂T热水浸提T水提液过滤T冷冻浓缩T乙醇沉淀多糖T Sevage试剂去蛋白T冷冻干燥T测定含量2.2多糖含量测定多糖含量测定采用邹琦主编的植物生理生化实验指导中蒽酮比色法]4],采用葡萄糖作标准溶液，得线性回归方程曲线为：Y=266.03X-3.004 7，相关系数r2=0.997 6。
样品中多糖的测定：吸取样品溶液和蒸馏水(作空白)各1 ml，分别置于试管中，沿壁缓慢加入5 ml 冷的蒽酮溶液，混合均匀后，在试管口盖上玻璃塞，在沸水浴上加热10 min后，在流水中冷却20 min，在620 nm波长处以试剂空白作参比，测定吸光度，根据回归曲线查出样品中多糖的浓度。
3结果3.1五鹤续断中续断多糖的提取3.1.1石油醚脱脂将实验所要用的五鹤续断样品粉末准确称量后，用滤纸包好置于索氏提取器中，80 C恒温水浴回流6 h后，挥干石油醚即可脱去样品中的脂。
在石油醚脱脂的过程中，回收的溶液颜色由深变浅，说明此过程还具有脱色的作用，同时也说明其中的部分色素是脂溶性的物质。
3.1.2确定五鹤续断中续断多糖的最佳提取工艺用人工种植的三年生五鹤续断根作为实验材料，以确定其最佳提取工艺。
影响续断多糖提取率的因素很多，如料液比、温度、时间以及提取次数等，为综合分析各因素的影响程度，本实验采用4因素3水平正交实验[5] L9 ( 34 )，以确定续断多糖的最佳提取工艺。
实验方案设计见表1。
表1影响续断多糖提取因素实验水平表(略)根据因素水平表1，按正交实验L9 (34)浸提。
将浸提液过滤、浓缩后，浓缩液加无水乙醇沉淀，4 C静置过夜后离心（5 000r/min ,15 min），Sevage试剂去蛋白，冷冻干燥，得续断粗多糖，重复实验3次，正交实验设计与实验结果见表2。
经直观分析，初步筛选出续断多糖提取工艺的最佳水平组合为A2B3C2D2。
表2续断多糖提取正交实验L9（34）结果（略）表3续断多糖提取方差分析表（略）由表2极差分析和表3方差分析可以看出，各因素对续断多糖提取的得率影响大小为BA C D，其中料液比在a =0.05达到显著水平，故续断多糖提取的最佳组合为A2B3C2D2，即提取2次、料液比为1 20、提取时间2 h、提取温度95 C为最佳提取工艺。
3.2续断多糖的分离纯化3.2.1确定乙醇分级沉淀多糖的最佳体积本实验采用乙醇作为多糖沉淀剂，将提取所得续断多糖溶液浓缩后，在最优水平下以11， 1 2，1 3，1 4，1 5 （浸提液:无水乙醇，V/V）进行分级沉淀，4 C静置过夜后离心（5 000 r/min，15 min），冷冻干燥，得到不同体积比的5种续断粗多糖。
结果见表4。
表4不同浓度乙醇沉淀多糖结果比较（略）比得率以多糖得率最高者为100%。
从表4续断粗多糖得率可知，乙醇体积越大，粗多糖得率越高，当滤液与乙醇体积比由1 4增加到1 5时，沉淀多糖量几乎保持稳定状态，因此，采用乙醇沉淀多糖时，选用滤液与乙醇体积比为14。
3.2.2 Sevage法去蛋白本实验采用Sevage （氯仿-正丁醇，体积比41）试剂去除粗多糖中的蛋白质。
将上述所得的粗多糖充分溶解后，转入到分液漏斗中，加入等体积的Sevage试剂，剧烈振荡5 min，静置2 h，取其水相，测定280 nm处吸收值，测毕将溶液倒回原水溶液中。
将水相再加入等体积的氯仿-正丁醇溶液，重复上述过程，直至光吸收值基本不变。
从脱蛋白结果来看，反复脱11次效果最佳。
最后将纯化的多糖进行冷冻干燥后，测定其含量。
3.3续断多糖的动态分布规律采用上述确定的五鹤续断多糖的最佳提取、分离和纯化工艺，分别对不同生长期的五鹤续断根和基生叶中的续断多糖进行提取、分离和纯化，并采用蒽酮比色法测定多糖的平均含量。
结果见图1。
分析表明，续断多糖的分布为：三年生根〉两年生根〉一年生根〉叶，野生根是三年生的，其多糖的分布量比三年生人工种植的略低。
这表明，在一定生长年限内，人工种植的五鹤续断根中续断多糖的动态分布具有一定的分布规律，即随着生长年限的增加，其根中多糖的平均含量逐年递增，而五鹤续断基生叶中多糖的平均含量与其根相比要低得多，因此，从续断多糖含量的角度分析，五鹤续断药用部位为其根是具有科学性的。
4结论采用石油醚脱脂、水浸提、乙醇沉淀多糖、sevage试剂脱蛋白等方法研究五鹤续断多糖的提取、分离和纯化的工艺优化，得出如下结论：通过续断多糖提取的正交实验分析，确定了续断多糖提取的最佳工艺条件为：提取2次，料液比1 ：0,提取时间2 h，提取温度95 °C在提取续断多糖时，除去蛋白质等杂质用氯仿-正丁醇（体积比4 ：）有较好的效果，迅速、去杂干净，续断多糖损失量较少。
用乙醇分级沉淀多糖时，采用浓缩液与无水乙醇的体积比为1:4时，沉淀多糖效果最好，其次为1 3和1 5，最差的为11。
在工业生产中，可根据原材料成本和续断多糖商品价格选择合适的工艺。
蒽酮比色法测定续断多糖的原理是糖与硫酸反应，脱水生成羟甲基咲喃甲醛，再与蒽酮缩合成蓝色络合物，再用分光光度计测定续断多糖的含量。
本法操作简单，显色稳定，灵敏度高，重复性好, 可作为续断多糖及其它多糖含量的测定方法。
药用植物五鹤续断根中多糖含量较高。
续断多糖具有较强的免疫调节活性，随着对多糖理化性质、结构和药理作用的深入研究，开发利用五鹤续断多糖保健品或药物制剂，具有一定的现实意义和开发价值。
【参考文献】:1 ]张万福•湖北“五鹤续断”的地道历史考证及开发前景 :J].湖北民族学院学报（医学版）,2002,19（3）:24.[2]全国中草药汇编写组.全国中草药汇编，下册[M].北京:人民卫生出版社,2000 : 135.:3］严忠红•川续断根部免疫调节多糖的分离和化学性质［J］.植物学分册,1998,13(3):122.:4］邹琦.植物生理生化实验指导］M］.北京：中国农业出版社，1997:5,53.:5］孙国红，王学会.概率论与数理统计学习指南］M］天津:南开大学出版社,2005。
