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补骨脂酚的体外肝微粒体代谢及代谢减毒作用的种属比较焦士勇;艾常虹;李艾芳;李桦;王旗【摘要】目的研究补骨脂酚在人、比格犬和大鼠肝微粒体的体外代谢动力学及种属差异,评价不同种属肝微粒体对补骨脂酚人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)的减毒作用.方法应用MTT法检测HK-2细胞的存活率来评价补骨脂酚对HK-2细胞的毒性作用以及不同种属肝微粒体对其毒性的影响.应用HPLC法分析补骨脂酚在3个种属肝微粒体孵育液中的剩余浓度,研究其在肝微粒体中的代谢稳定性和代谢动力学.结果在3个种属肝微粒体分别作用下,补骨脂酚的HK-2细胞毒性明显降低.补骨脂酚在人肝微粒体中的代谢最慢,在大鼠肝微粒体中的代谢最快,人、犬和大鼠的代谢动力学参数Km、Vmax、T12)和CLint分别为:(81.66±3.41),(89.35±4.32)和(31.89±2.60)μmol·L-1;(0.47±0.01),(0.57±0.01)和(1.88±0.09) μmol·L-1·min-1;(44.14±1.13),(53.31±0.29)和(6.79±0.39)min;(39.38±1.04),(65.16±0.35)和(365.92±20.01)ml·min-1·kg-1.结论肝微粒体降低补骨脂酚的HK-2细胞毒性,这一减毒作用与补骨脂酚经肝微粒体酶的代谢相关.补骨脂酚的体外肝代谢动力学性质存在着一定的种属差异;犬肝微粒体对高浓度补骨脂酚所致的HK-2细胞毒性的降低作用要弱于人和大鼠肝微粒体.%Aim To investigate the inter-species differences of bakuchiol metabolism in human, beagle dog and rat liver microsomes by comparing enzyme kinetic parameters, and to evaluate metabolic detoxification of bakuchiol by liver microsomes from three species.Methods The cytotoxicity of bakuchiol was investigated using human kidney-2( HK-2 ),in presence or absence of liver mirosomes. The cell viabilities were examined by MTT assay. The residual concentrations of bakuchiol in microsomal incubates were determined by a HPLC method toinvestigate its metabolic stability and enzyme kinetics. Results The cytotoxicity of bakuchiol was significantly attenuated in the presence of the liver microspores of all three species. The metabolic elimination of bakuchiol by human liver microsomes was the slowest among the three species,while it was rapidest in rat liver. The Km, Vmax, T1/2 and CLint of bakuchiol obtained from human, dog and rat liver microsomes were( 81.66 ± 3.41 ),( 89.35 ± 4. 32 ) and ( 31.89 ±2.60 ) μmol · L-1 ,( 0.47 ±0. 014 ),( 0.57±0. 011 ) and ( 1.88 ±0. 087 ) μmol · L-1 · min-1,( 44. 14 ±1.13 ),( 53.31 ±0.29 ) and ( 6.79 ±0. 39 )min,( 39.38 ± 1.04 ), ( 65.16 ± 0.35 ) and ( 365.92 ± 20.01 ) ml · min- 1 . kg-1, respectively. Conclusions The cytotoxicity of bakuchiol on HK-2 cells was attenuated by the liver microsomes from each of the three species,respectively. The detoxification was associated with the biotransformation of bakuchiol by enzymes in liver microsomes. The inter-species differences were observed in hepatic metabolic characteristics of bakuchiol. A relative weaker effect of beagle dog liver microsomes on HK-2 cytotoxicity of bakuchiol at the high concentration level was also noted in comparison to that of human and rat.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2011(027)002【总页数】5页(P216-220)【关键词】补骨脂酚;HK-2细胞;细胞毒性;肝微粒体;代谢;种属差异;HPLC【作者】焦士勇;艾常虹;李艾芳;李桦;王旗【作者单位】北京大学公共卫生学院毒理学系,北京,100191;军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850;北京大学公共卫生学院毒理学系,北京,100191;军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850;北京大学公共卫生学院毒理学系,北京,100191【正文语种】中文【中图分类】R-332;R282.71;R322.47;R969.1中药补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，具有温肾助阳，纳气平喘，温脾止泻的功效［1］。
手性药物体外代谢的研究方法王彬;杨雷琼【摘要】手性药物体外代谢的研究是通过建立体外代谢模型对手性药物的代谢行为进行评价.随着大量手性药物的开发,出现了多种与体外代谢相关的研究方法和技术来评价对映体之间的分子以及代谢动力学方面的差异,从而选择出对映体.现对已有的一些研究方法及其优缺点进行综述,从而提供更系统化的手性药物的评选方法,更快速有效地为手性药物提供技术支持.%In vitro metabolism study of chiral drugs is to evaluate the metabolic behavior in vitro metabolic model. With the discovery of more chiral drugs, a lot of techniques and methods have been developed to evaluate chiral drug in vitro metabolism, so that molecular mechanisms and pharmacokinetic processes of two enantiomers can be displayed and the better can be selected. Here is to make a review on recent advances regarding different analytical techniques of chiral drugs and their metabolites, with the aim of offering a systemic reference for choosing suitable approach of chiral drug evaluation and selection.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2012(018)011【总页数】3页(P1614-1616)【关键词】手性药物;体外代谢;方法【作者】王彬;杨雷琼【作者单位】中国人民解放军总医院检验科,北京,100853;中国人民解放军总医院检验科,北京,100853;沈阳药科大学,沈阳,110016【正文语种】中文【中图分类】R969.1目前，在临床上应用的具有光学活性的药物已超过60%。
黄连上清丸、护肝片及牛黄解毒丸对药物代谢酶CYP3A4活性的影响目的：观察黄连上清丸、护肝片、牛黄解毒丸对CYP3A4活性的影响。
方法：利用体外肝微粒体培育体系，以咪达唑仑作为探针底物，研究黄连上清丸、护肝片、牛黄解毒丸对人肝微粒体细胞色素P450 3A4（CYP3A4）活性的影响。
结果：与空白组对比，黄连上清丸、牛黄解毒丸对CYP3A4活性表现为诱导作用，护肝片对CYP3A4活性表现为抑制作用。
结论：在与临床上经CYP3A4代谢的药物联合应用时，应警惕黄连上清丸、护肝片、牛黄解毒丸潜在药物之间的相互作用。
标签：黄连上清丸；护肝片；牛黄解毒丸；细胞色素P450 3A4细胞色素P450酶是人体内的肝药酶，广泛分布于肝脏等器官。
研究发现，有20多种同工酶与药物代谢相关性高，共同参与人体内300余种药物的代谢[1]。
多种药物同时使用时，若其中药物是CYP3A4的诱导剂或抑制剂，则会显著影响合用中其他药物的代谢，也会对其他药物的疗效产生影响。
研究表明，多种中药提取物对P450活性有一定影响，如银杏、五味子、白芷、羌活等甲醇提取物对CYP3A4有抑制作用[2-3]。
利用体外实验预测药物在体内是否发生药物代谢性相互作用，是药物代谢研究的热点内容。
研究黄连上清丸、护肝片、牛黄解毒丸对重组人肝微粒体细胞色素酶rCYP3A4的影响，结果如下。
1仪器与材料11仪器MINI-10K微型离心机（常州朗越仪器制造有限公司）；AL204型电子天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）；XH-C旋涡混合器（常州朗越仪器制造有限公司）；DW-86L386立式超低温保存箱（青岛海尔特种电器有限公司）；FE20实验室pH计（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）；LC3000高效液相色谱仪（北京创新通恒科技有限公司）。
12材料人重组肝细胞微粒体CYP3A4（批号：M41013，SPIBIO产）；咪达唑仑注射液（批号：20140607，江苏恩华药业股份有限公司；1羟基咪达唑仑（批号：FN08081402，Cerilliant）；卡马西平（批号：100142-201105，中国食品药品检定研究院）；酮康唑（批号：SM0325YF13，上海源叶生物科技有限公司）；NADPH（批号：WO1028EA14，上海源叶生物科技有限公司）。
注意区分代谢、排泄、消除三者之间的关系，消除包括代谢和排泄，其中代谢是指药物在体内经过药物代谢酶的作用结构发生改变，排泄是指药物以原型通过尿液、胆汁、粪便等途径排出体外，两者共同作用才导致药物的消除现象。
本文着重以口服药物的特征来描述药物代谢与排泄的过程，内容包括药物运动的物理过程、研究方法以及相应的应对策略。
∙肠代谢口服药物在小肠吸收部位跨过肠上皮细胞进入肝门静脉的过程中，会受到肠上皮细胞中药物代谢酶的作用，该过程成为肠首过，肠代谢酶的类型与肝药酶基本一致。
该过程一般采用肠微粒体代谢稳定性、在体肠灌流、肝门静脉插管等试验进行评价。
典型案例多表现为化合物溶解性、吸收性质均比较好，而门静脉血中药物浓度较低，整体体现为生物利用度较低。
在遇到类似案例时，早期可以结合代谢物鉴定结果修饰化学结构，后期可以改变给药方式来避免严重的肠首过效应。
∙肝代谢药物通过肝门静脉汇入肝脏，一部分游离药物经肝脏中CYP、UGT、non-CYP等酶代谢后形成代谢产物，部分药物以原型进入血液循环系统。
目前肝代谢的主要研究方法包括：体外肝细胞代谢稳定性、S9代谢稳定性、肝微粒体代谢稳定性、重组酶代谢稳定性等试验。
human主要研究的酶亚型包括：CYP1A2 2B6 2C8 2C9 2C19 2D6 3A4/5，要注意的是各个种属的代谢酶亚型的种类和分布并非完全一致。
当体外试验发现Ⅰ相代谢很稳定，而体内存在肝代谢的情况时，需要考察Ⅱ相或者non-CYP酶代谢的可能性。
主要经过肝代谢消除的化合物典型表现为体外代谢稳定性计算得到的CL大于或者接近于体内IV试验测得的CL，表现为胆汁和尿液中的原型药物较少。
根据我们的需求，当需要提高生物利用度或者暴露量时，早期可以结合代谢物鉴定结果修饰化学结构，阻断主要代谢位点，提高代谢稳定性；当需要化合物降低由代谢酶引起的DDI风险时，尽可能使化合物被多种亚型的代谢酶共同代谢，避免单一亚型酶受到诱导或者抑制时对化合物的PK有显著的影响。
药物代谢中的肝细胞⾊素P450D evelop m en t i n the I mm unomagnetic PreparationXu M in J iang L iliZ hej iang H osp ita l of T rad itiona l Ch inese M ed icine,H ang z hou 310006Abstract I mm unom agnetic p reparati on is one of the novel targeting p reparati ons,w h ich is developed since1990’s.T he article deals w ith i m m unom agnetic m icro spheres and i m m unom agnetic beads,including their p reparati on,effective p rinci p le and app licati ons.Key words T argeting p reparati on I mm unom agnetic m icro sphere I mm unom agnetic bead(收稿:1998207220,修回:1998210207)药物代谢中的肝细胞⾊素P450骆⽂⾹ 张银娣(南京医科⼤学临床药理研究所 南京 210029)摘 要 肝细胞⾊素P450参与许多外源性物质(包括药物)的⽣物转化。
本⽂从肝细胞⾊素P450在体内的分布及命名,被诱导和抑制的机制,对映体代谢的选择性与代谢差异遗传多态性以及国内外关于P450的研究⽅法等⽅⾯介绍了该领域研究的新进展。
关键词 细胞⾊素P450 药物代谢 ⽴体选择性 遗传多态性许多外源性脂溶性的⾮营养物质在体内需经过⽣物转化过程,肝脏是⼈体进⾏⽣物转化I相反应的主要场所。
参与⽣物转化的酶类是由⼀个庞⼤的基因家族编码调控的依赖细胞⾊素P450的混合功能氧化酶系统,其中主要成分是细胞⾊素P450。
氯丙嗪在不同种属肝微粒体中代谢差异研究董凡;谭叙;何欣;谢晴;谭峰【期刊名称】《质谱学报》【年(卷),期】2022(43)3【摘要】采用体外肝微粒体孵育实验研究氯丙嗪在鼠、猪、鸡肝微粒体的代谢速率及代谢产物。
利用液相色谱-串联质谱测定不同时间点氯丙嗪的峰面积,计算氯丙嗪的体外代谢率、代谢半衰期(T_(1/2))及固有清除率(CLint),通过氯丙嗪及其代谢产物的保留时间、碎片离子等信息,推断氯丙嗪的代谢产物和代谢途径。
结果表明,在猪、鼠、鸡肝微粒体孵育体系中,氯丙嗪的T_(1/2)分别为18.2、173.3、346.5 min,CLint分别为76.2、8.0、4.0μL/(min·mg)。
在3种肝微粒体孵育体系中共发现8种代谢产物,在鼠、猪和鸡肝微粒体孵育体系中分别发现5种、7种和4种氯丙嗪代谢产物,均检测出产物氯丙嗪亚砜、去甲基氯丙嗪、6-羟基氯丙嗪和7-羟基氯丙嗪。
氯丙嗪在肝微粒体孵育体系中的代谢途径以氧化、羟基化和去甲基反应为主,其在猪肝微粒体孵育体系中代谢和清除速度最快,其次是鼠、鸡,在不同种属肝微粒体孵育体系中代谢产物的种类和含量存在差异。
【总页数】8页(P357-364)【关键词】氯丙嗪;肝微粒体;代谢速率;体外代谢【作者】董凡;谭叙;何欣;谢晴;谭峰【作者单位】大连理工大学环境学院;大连海关综合技术服务中心【正文语种】中文【中图分类】O657.63【相关文献】1.黄芩素在人及不同种属肝微粒体中的UDP-glucuronosyltransferase代谢差异2.10,11-二氢-10-羟基卡马西平在不同种属肝微粒体中经UGT酶代谢的差异性研究3.UFLC-MS/MS研究胡椒碱在不同种属肝微粒体中的代谢稳定性和代谢表型4.采用UPLC-MS/MS法研究树豆酮酸A在不同种属肝微粒体中的代谢差异5.香柑内酯在不同种属肝微粒体中的代谢差异研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
《基于液质联用技术的胡黄连苷Ⅱ体内外代谢初步研究》一、引言胡黄连苷Ⅱ是一种具有重要药用价值的化合物，广泛存在于多种植物中。
随着现代医学技术的进步，对胡黄连苷Ⅱ的体内外代谢研究显得尤为重要。
本文旨在利用液质联用技术对胡黄连苷Ⅱ的体内外代谢进行初步研究，以期为胡黄连苷Ⅱ的药效学及药物代谢动力学提供理论依据。
二、材料与方法1. 材料（1）实验样品：胡黄连苷Ⅱ（2）实验动物：选用健康实验动物，如大鼠或小鼠。
（3）实验试剂与仪器：液质联用仪、色谱柱、溶剂等。
2. 方法（1）体外代谢实验：将胡黄连苷Ⅱ与动物肝脏微粒体混合，模拟体内环境进行代谢实验。
（2）体内代谢实验：将胡黄连苷Ⅱ给予实验动物，收集其代谢产物，进行液质联用分析。
（3）液质联用技术：利用液质联用仪对代谢产物进行分离、鉴定及定量分析。
三、实验结果1. 体外代谢实验结果通过体外代谢实验，我们发现胡黄连苷Ⅱ在动物肝脏微粒体中可发生多种代谢反应，生成多种代谢产物。
利用液质联用技术，我们成功鉴定了其中几种主要代谢产物的结构。
2. 体内代谢实验结果在体内代谢实验中，我们收集了实验动物服用胡黄连苷Ⅱ后的代谢产物。
通过液质联用技术，我们分析了代谢产物的种类及含量，并初步探讨了胡黄连苷Ⅱ在体内的代谢途径。
四、讨论根据实验结果，我们对胡黄连苷Ⅱ的体内外代谢进行了初步探讨。
首先，我们发现胡黄连苷Ⅱ在体外环境中可发生多种代谢反应，生成多种代谢产物。
其次，在体内环境中，胡黄连苷Ⅱ的代谢途径可能与体外环境相似，但具体代谢过程可能受到机体内部环境的影响。
此外，我们还发现不同个体之间可能存在代谢差异，这可能与个体的遗传、生理状态等因素有关。
五、结论本文利用液质联用技术对胡黄连苷Ⅱ的体内外代谢进行了初步研究。
通过实验，我们了解了胡黄连苷Ⅱ在体内外的代谢过程及主要代谢产物。
然而，由于实验条件及时间的限制，我们尚不能完全揭示胡黄连苷Ⅱ的详细代谢途径及机制。
未来可进一步开展相关研究，以期为胡黄连苷Ⅱ的药效学及药物代谢动力学提供更深入的理论依据。
药剂学中的药物代谢动力学研究综述药物代谢动力学是药剂学中的重要研究方向之一，通过对药物在体内的代谢过程进行深入研究，可以了解药物在体内的代谢途径、代谢产物以及代谢速率等信息，为合理用药和药物设计提供理论依据。
本文将综述药剂学中的药物代谢动力学研究的进展和应用。
一、药物代谢动力学的基本概念1.1 药物代谢动力学的定义药物代谢动力学是指药物在机体内转化成代谢产物的过程及其动力学规律的研究。
1.2 药物代谢动力学的重要性药物代谢动力学不仅可以帮助科学家了解药物在体内的代谢情况，还可以揭示药效和药物副作用的产生机制，为新药的研发和现有药物的个体化治疗提供依据。
二、药物代谢动力学的研究方法2.1 体外药物代谢动力学研究体外药物代谢动力学研究通常使用动物肝微粒体或肝酶体等模型，通过测定特定药物在体外代谢的速率来评估其代谢动力学参数。
2.2 体内药物代谢动力学研究体内药物代谢动力学研究常采用动物模型，通过给予动物特定药物并定时采集血样或尿样，进而确定药物的血药浓度及其代谢产物的排泄速率，从而获得药物代谢动力学参数。
三、药物代谢动力学的影响因素3.1 遗传因素个体的遗传差异可能导致药物代谢酶的活性差异，从而影响药物的代谢速率和血药浓度。
3.2 年龄因素药物代谢酶的活性在不同年龄段可能存在差异，儿童和老年人对药物的代谢速率可能较低。
3.3 疾病状态许多疾病，如肝脏疾病和肾脏疾病等，都可能对药物代谢动力学产生影响。
3.4 药物相互作用某些药物可以抑制或诱导药物代谢酶的活性，从而影响其他药物的代谢速率。
四、药物代谢动力学的应用4.1 药物合理用药通过研究药物的代谢动力学，可以了解药物在体内的代谢途径，从而选择合适的给药途径和剂型，优化药物的治疗效果。
4.2 药物设计与优化药物代谢动力学研究可以揭示药效和药物副作用的产生机制，为新药的设计和优化提供依据，提高药物的疗效和安全性。
4.3 药物相互作用研究药物代谢动力学研究可以揭示药物相互作用的机制，从而预测和避免潜在的临床药物相互作用。
西格列他钠的体外代谢闫亮平;窦桂芳;朱晓霞;甘慧;孙文种;孟志云【期刊名称】《中国药理学与毒理学杂志》【年(卷),期】2007(21)2【摘要】目的研究拟治疗2型糖尿病的创新化合物西格列他钠(chiglitazar)的体外代谢速率、代谢酶和代谢转化,为临床应用提供参考.方法采用高效液相-紫外检测(HPLC-UV)的方法测定肝微粒体孵育液中西格列他钠的浓度,用特异性抑制剂的方法分析化合物的代谢酶,用大鼠肝微粒体体外研究西格列他钠可能的代谢产物和代谢途径.结果建立了可靠的测定大鼠肝微粒体中西格列他钠的HPLC 分析方法;体外半衰期方法求得西格列他钠的t1/2为27.2 min,固有清除率(Clint)为50.9 mL·min-1·g-1蛋白;代谢酶研究表明,西格列他钠主要被P450酶中的CYP3A亚型代谢;西格列他钠在大鼠肝微粒体中的代谢主要为羟基化和O-脱烷基化,采用LC/MSn分析共发现了8个代谢物.结论西格列他钠是代谢活跃的化合物,有必要研究代谢产物的活性及临床注意药物相互作用.【总页数】7页(P124-130)【作者】闫亮平;窦桂芳;朱晓霞;甘慧;孙文种;孟志云【作者单位】军事医学科学院野战输血研究所药物代谢与药代动力学研究室,北京,100850;军事医学科学院野战输血研究所药物代谢与药代动力学研究室,北京,100850;军事医学科学院野战输血研究所药物代谢与药代动力学研究室,北京,100850;军事医学科学院野战输血研究所药物代谢与药代动力学研究室,北京,100850;军事医学科学院野战输血研究所药物代谢与药代动力学研究室,北京,100850;军事医学科学院野战输血研究所药物代谢与药代动力学研究室,北京,100850【正文语种】中文【中图分类】R969.1;R977.15【相关文献】1.西格列他钠对2型糖尿病患者糖脂代谢与促酰化蛋白及瘦素的影响 [J], 刘永健;张木勋;张建华;余毅恺;杨雁;吴玉文;温宇2.西格列汀联合罗格列酮对2型糖尿病患者糖、脂代谢及胰岛素抵抗的影响 [J], 孙默;姜志华;陈守涛3.西格列汀联合罗格列酮对2型糖尿病患者糖脂代谢及安全性的影响 [J], 方怀远4.磷酸西格列汀、二甲双胍及阿卡波糖联合应用治疗2型糖尿病伴骨质疏松疗效及对患者糖脂代谢、骨代谢水平的影响 [J], 孙家燕;张晓妍5.西格列汀对伴糖代谢异常的多囊卵巢综合征患者代谢和炎性指标及内脏脂肪的影响 [J], 杨洋;秦艳明;贾学芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
阿替美唑不同种属体外代谢产物鉴定比较及代谢通路研究李正;高尤;杨春苗;仇晓燕;张天宏;张文鹏;苏瑞斌;庄笑梅【期刊名称】《中国药理学与毒理学杂志》【年(卷),期】2018(0)12【摘要】目的应用Q-Exactive型四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC/LTQ-Orbitrap-MS)鉴定和比较阿替美唑在不同种属肝微粒体以及细胞色素P450(CYP)同工酶中的代谢产物,探讨阿替美唑代谢转化的种属差异及代谢通路,为新药研发和可能的药物相互作用研究提供科学数据.方法应用不同种属肝微粒体以及重组人源CYP同工酶体外温孵模型获得体外代谢产物.体外样品采用UPLC/LTQ-Orbitrap-MS分析,Phenomenex C18(100 mm×2.1 mm,5μm)柱分离,0.1％甲酸水溶液-乙腈流动相梯度洗脱,流速0.5 mL·min-1,正离子模式检测.结果根据精确相对分子质量和二级碎片离子信息,初步鉴定了阿替美唑在不同种属肝微粒体孵育样品中产生3个氧化产物,包括末端乙基羟基化(M1)、苯环氧化(M2)和咪唑环氧化(M3)产物,产物谱无种属差异.CYP同工酶温孵法发现,M1由CYP2A6,2D6和3A4介导产生,M2由CYP2A6,2D6和2C19介导产生,M3由CYP2A6,2B6和3A4介导产生.结论阿替美唑体外CYP酶介导的代谢转化无种属差异,代谢通路广泛,不易发生基于CYP代谢酶介导的药物相互作用.【总页数】7页(P946-952)【作者】李正;高尤;杨春苗;仇晓燕;张天宏;张文鹏;苏瑞斌;庄笑梅【作者单位】军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所,抗毒药物与毒理学国家重点实验室,北京 100850;军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所,抗毒药物与毒理学国家重点实验室,北京 100850;军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所,抗毒药物与毒理学国家重点实验室,北京 100850;海军青岛特勤疗养中心,山东青岛266071;军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所,抗毒药物与毒理学国家重点实验室,北京 100850;军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所,抗毒药物与毒理学国家重点实验室,北京 100850;军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所,抗毒药物与毒理学国家重点实验室,北京 100850;军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所,抗毒药物与毒理学国家重点实验室,北京 100850【正文语种】中文【中图分类】R969.1【相关文献】1.LC-MS/MS 法研究 Cocktail 探针药物咖啡因、右美沙芬、奥美拉唑、咪达唑仑及其代谢产物在大鼠血浆中的药代动力学 [J], 徐利云;候丛颂;杨志宏;孙晓波2.反相高效液相色谱法测定奥美拉唑及其代谢产物5′-羟基奥美拉唑和奥美拉唑砜的血药浓度 [J], 付良青;黄丰;吴德政;郭军华3.Liguzinediol在不同种属肝微粒体中代谢产物的比较研究 [J], 戴贞丽;文红梅;单晨啸;尤晓亲;董棒;孙学;李伟4.沉香样品中曲霉属真菌菌株HNWSW-20的分离鉴定及其次生代谢产物的研究[J], 邓加艾;戴好富;王宇光;陈惠琴;谭志琼;梅文莉5.不吸水链霉菌代谢产物抗真菌作用的研究（Ⅱ．）不吸水链霉菌代谢产物体内、体外抗真菌作用的观察 [J], 侯芳玉;刘长林;杨丽春因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
探针药物法评价苦碟子注射液对大鼠肝微粒体CYP3A4的体外抑制作用郑造乾;骆瑾瑜;陈燕华;王小军【摘要】Objective To investigate the in vitro inhibition of kudiezi injection (KDZi) on liver microsomal CYP3A4 in rats and the potential herb-drug interaction with drugs metabolized by CYP3A4 enzyme in clinical ap-plication. Methods The test groups included a negative control group, an inhibitor positive control group and a KDZi group. After incubating the rat liver microsomes with testosterone, a probe substrate, the reduction of testos-terone were quantitated with HPLC, and IC50 values were calculated to assess the inhibitory effect of KDZi on rat CYP3A4 enzyme. Ketoconazole was used as a positive control. Results In mixture metabolic system of liver mi-crosome enzymes, the most suitable incubationconc entration of testosterone was 100μmol/L, incubation time was 40 min and concentration of microsome protein was 0.5mg/mL, when the concentration of Tris-HCl buffer was 0.1mol/L (pH7.4) at 37℃. The results showed that the IC50 value of positive inhibitors of CYP3A4 was0.0707μmol/L, which indicated that the incubation system satisfied the demands of CYP3A4 enzyme inhibition activity evaluation. The relative inhibitory rate of CYP3A4 in 9 serial volume concentration of KDZi (0,0.01%, 0.10%, 0.20%, 0.50%, 1.00%, 2.00%, 5.00%, 10.00%) were 0, 2.94%, 16.44%, 22.70%, 31.44%, 37.47%, 46.37%, 51.74%, and 60.40%, respectively. The IC50 value of KDZi on CYP3A4 inhibition was 3.46%, which wasexceeded their daily-dose concentration. Conclusion In ordinary condition, no significant interaction between KDZi and CYP3A4 is de-tected in vitro, which indicates that KDZi might be used with CYP3A4 enzyme substrates.%目的：观察苦碟子注射液对大鼠肝微粒体CYP3A4的体外抑制作用与CYP3A4酶底物合用药时可能产生的相互作用。
新型降糖化合物LSM-13在大鼠肝微粒体中的稳定性研究及代谢产物分析作者：杜瑶陈瑞朱高峰张吉泉汤磊来源：《中国药房》2021年第17期中图分类号 R917;R969.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）17-2059-07DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.17.03摘要目的：考察新型降糖化合物LSM-13在大鼠肝微粒体中的代谢稳定性，并分析其可能的代谢产物。
方法：将LSM-13溶解于由还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸启动的大鼠肝微粒体孵育体系中，置于37 ℃水浴中进行孵育，分别于孵育0、5、10、15、20、30、45、60 min时用乙腈终止反应。
以吲哚美辛为内标，采用高效液相色谱法测定孵育体系中LSM-13的质量浓度。
以孵育0 min时LSM-13的质量浓度为参照，计算其在不同孵育时间下的剩余百分比和酶动力学参数。
采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法检测并定性分析LSM-13在大鼠肝微粒体中的代谢产物。
结果：孵育60 min时，LSM-13在大鼠肝微粒体中的剩余百分比为（56.07±0.95）%，半衰期为42.78 min，固有清除率为0.032 4 mL/（min·mg）。
与大鼠肝微粒体空白样品的总离子流图比较，孵育60 min样品中新增了3个色谱峰，对应的准分子离子峰分别为m/z 505.133 8、417.102 4、293.111 7[M+H]+，可能是LSM-13脱氢、O-脱苄基、水解的产物。
结论：化合物LSM-13在大鼠肝微粒体中的稳定性为中等，并可能发生了脱氢、O-脱苄基和水解反应。
关键词降糖化合物;LSM-13;大鼠肝微粒体;稳定性;代谢产物Stability Study of Novel Hypoglycemic Compound LSM-13 in Rat Liver Microsomes and Its Metabolites AnalysisDU Yao1，CHEN Rui2，ZHU Gaofeng2，ZHANG Jiquan1，2，TANG Lei2（ 1. College of Pharmacy，Guizhou Medical University， Guiyang 550004， China; 2. Guizhou Provincial Engineering Technology Research Center for Chemical Drug R&D， Guiyang 550004， China）ABSTRACT OBJECTIVE： To investigate the metabolism stabilities of novel hypoglycemic compound LSM-13 in rat liver microsomes， and to analyze the possible metabolites. METHODS：LSM-13 was dissolved in rat liver microsome incubation system initiated by reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate， and was incubated in water at 37 ℃. The reaction was terminated with acetonitrile at 0，5，10，15，30，45 and 60 min， respectively. Using indomethacin as internal standard， the concentration of LSM-13 in incubation system was determined by HPLC. The residual percentage and enzyme kinetic parameters of LSM-13 were calculated at different incubation time points with the concentration of LSM-13 incubated for 0 min as reference. UPLC-Q-TOF/MS was used to analyze and speculate the metabolites of LSM-13 in rat liver microsomes. RESULTS：After 60 min incubation， the remaining percentage of LSM-13 was （56.07±0.95）%， the half-life was 42.78 min， and the intrinsic clearance was 0.032 4 mL/（min·mg）. Compared with total ion flow diagram of rat liver microsome blank samples， three chromatographic peaks were added in the samples incubated for 60 min; the corresponding molecular ion peaks were m/z 505.133 8， 417.102 4， 293.111 7[M+H]+; the possible metabolites may be dehydrogenation， O-debentylation and hydrolysis products of LSM-13. CONCLUSIONS： The compound LSM-13 has moderate stability in rat liver microsomes， and may undergo dehydrogenation， O-debentylation and hydrolysis.KEYWORDS Hypoglycemic compound; LSM-13; Rat liver microsomes; Stability; Metabolites近年来，新型降糖药物的研究与开发已成为创新药物研究的热点。
巴马香猪、人和大鼠洛伐他汀体外代谢的比较刘宇;曾本华;魏泓【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2007(17)6【摘要】目的体外研究巴马香猪、人和大鼠肝微粒体中洛伐他汀代谢的酶动力学差异,并用人体肝微粒体细胞色素P450 3A(CYP3A)酶特异性抑制剂酮康唑(KCZ)进行抑制,观察抑制活性反应的差异,评估巴马香猪作为人体CYP3A酶代谢药物研究实验动物模型的可行性.方法制备巴马香猪、人和大鼠的肝微粒体,构建肝微粒体与洛伐他汀的反应体系以及抑制剂抑制反应体系,利用RP-HPLC测定洛伐他汀代谢的变化,并对其相应活性值进行比较.结果巴马香猪肝微粒体代谢洛伐他汀的酶动力学变化比大鼠更为与人体相似.人体CYP3A特异性抑制剂均可以显著抑制三者的代谢,但是巴马香猪代谢速率下降程度与人体接近. 结论巴马香猪与大鼠相比,更适用于作为人CYP3A酶代谢的相关药物研究的良好动物模型.【总页数】5页(P329-332,337)【作者】刘宇;曾本华;魏泓【作者单位】第三军医大学基础部实验动物学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础部实验动物学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础部实验动物学教研室,重庆,400038【正文语种】中文【中图分类】R-33【相关文献】1.洛伐他汀对醛固酮诱导体外新生大鼠心肌成纤维细胞NO的调控 [J], 冯惠平;贾新未;王艳飞;张芳;张兰芳;解俊敏2.雷公藤甲素在人和大鼠肝微粒体代谢消除和酶动力学的比较研究 [J], 吴桐;阳海鹰;原梅;车津晶;李桦3.罗通定在人、比格犬和大鼠肝微粒体代谢转化的体外比较研究 [J], 庄笑梅;林庆辉;李春正;邓婧婷;李桦4.左旋和右旋吡喹酮在人和大鼠肝微粒体内的代谢1 [J], 何坎;全钰珠5.松脂醇二葡萄糖苷在人和大鼠肝微粒体中的代谢比较 [J], 凌海燕;李春沁;杨安东;朱宁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC-QTOF MS和MS／MS分析鉴定PF573228肝微粒体体外代谢产物王献;王玲【摘要】To study the in vitro metabolic characteristics of PF573228 with rat liver microsomes, HPLC-ESI-MS/MS was applied and elucidated three metabolites of PF 573228 based on the chromatographic retention times , accurate ion mass and fragmentation pattern .Three biotransformation pathways , i.e., dehydrogenation , N-dealkylation and oxidation metabolism were suggested for the 3 metabolites.%为研究PF573228的大鼠肝微粒体体外代谢特点，采用高效液相色谱-电喷雾-串联质谱（ HPLC-ESI-MS/MS）的方法，结合检测的保留时间、精确质量数和特征碎片离子，鉴定了PF573228体外的3种代谢产物分子的结构，推断体外代谢产物的生物转化有3个主要途径：脱氢，N-脱烷基和氧化。
【期刊名称】《中南民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】4页(P9-12)【关键词】PF573228抑制剂;液质联用( LC-MS/MS);大鼠肝微粒体;体外代谢【作者】王献;王玲【作者单位】中南民族大学化学与材料科学学院，武汉430074;中南民族大学化学与材料科学学院，武汉430074【正文语种】中文【中图分类】TQ028;O657.63黏着斑激酶(FAK)是一种细胞质酪氨酸蛋白激酶，在正常细胞和癌细胞中均发挥着关键的调控作用，与细胞的黏附、伸展、迁移、增殖和凋亡等行为密切相关[1].FAK的抑制剂分子能够有效抑制FAK活性，对肿瘤细胞增殖和迁移有明显的抑制效果[2].PF573228是一种有效的、高选择性的FAK蛋白抑制剂，它是ATP与FAK蛋白特异性结合的竞争性抑制剂[3].本文采用高效液相色谱和四极杆飞行时间串联质谱(HPLC-QTOF-MS/MS)技术[4]，建立了一种简单、快捷、高效的方法，分离检测了PF573228与肝微粒体体外代谢物，通过二级质谱MS/MS鉴定了PF573228的代谢产物的结构并推测了其代谢裂解途径.1 实验部分1.1 仪器及试剂高效液相色谱仪(Agilent 1200，美国)，四极杆飞行时间质谱仪(Agilent 6520 Q-TOF MS，美国)，超纯水机(Molelement 1815a 摩尔元素型,上海摩勒科学仪器有限公司)，高速冷冻离心机(GL-20M, 上海卢湘仪离心机仪器有限公司)，色谱柱(ZORBAX Eclipse XDB-C18, 美国Agilent)，高精度数控摇床(SH2-03, 上海堪鑫仪器设备有限公司),水浴氮吹仪(CM-12, 北京成萌伟业科技有限公司),色谱柱(ZORBAX Eclipse XDB-C18, 美国Agilent).SD雌大鼠肝微粒体(20 mg/mL, 广州诺嘉生物科技有限公司)，超纯水(18.25MΩ)，PF573228(纯度>98%)，6-磷酸葡萄糖(纯度≥98%)，6-磷酸葡萄糖脱氢酶(200～400 U/mg)，NADP(纯度≥98%)，磷酸钾缓冲盐(纯度≥98%, Sigma-Aldrich公司)，甲醇、乙腈(色谱纯, 美国Waltman)，氯化镁(分析纯)，乙酸乙酯(色谱纯, 天津科密欧化学试剂有限公司).1.2 PF573228在大鼠肝微粒体系中的代谢反应PF573228在大鼠肝微粒体系中的代谢反应孵育方法参照文献[5～8]进行了优化，PF573228用DMSO溶解后用超纯水稀释，用200 mL超纯水溶解磷酸钾缓冲盐药片，完全溶解后，磷酸盐缓冲液浓度为0.1 mol/L(pH 7.4)，用超纯水配制浓度为5.0×10-3 mol/L氯化镁溶液，6-磷酸葡萄糖浓度为0.1 mol/L，6-磷酸葡萄糖脱氢酶浓度为10 U/mL，NADP浓度为2.0×10-2 mol/L.向1.5 mL的EP管中加入磷酸盐缓冲液200 μL，PF573228溶液20 μL，肝微粒体40 μL，氯化镁40 μL，6-磷酸葡萄糖40 μL，6-磷酸葡萄糖脱氢酶20 μL，混匀后置于37 ℃恒温水浴摇床中预孵育5 min后加入40 μL NADP启动代谢反应，37 ℃孵育30 min后，加入乙酸乙酯共计600 μL终止反应并萃取，静止萃取10 min后经10000 r/min离心10 min，取上清液经40 ℃氮气流吹干，所得残余物质用1 mL乙腈溶解，完成后进样检测.1.3 色谱-质谱条件在ESI-Q-TOF MS的正离子模式下进行PF573228原药和代谢产物检测.待测样品由自动进样器以标准进样方式进样.液相色谱的流动相A为超纯水，B为乙腈，流速为0.2 mL/min，梯度洗脱条件：0～8 min 20%～45% B，8～20 min 55% B，20～24 min 80% B，24～30 min 20% B.电喷雾质谱的条件：干燥气温度为300℃；干燥气流速为11 L/min；喷雾器压力为35 Psig；毛细管电压为3500 V；碎裂电压为125 V，质谱采集范围为50-1000 m/z，碰撞电压为40 eV、35 eV.2 结果与讨论2.1 PF573228经大鼠肝微粒体体外代谢产物鉴定在肝微粒体CYP450酶的作用下，PF573228经一相代谢反应采用HPLC/Q-TOF MS和MS/MS二级质谱分析得到分子离子及其特征碎片离子峰，结果见图1.由图1可见，在ESI离子源作用下，m/z 492经初步碰撞诱导解离，产生的m/z 169的碎片离子峰和m/z 323(-C8H9SO2)的碎片离子峰是C-N键断裂产生，裂解产生的m/z 251(-C3H5ON)碎片离子峰是m/z 323的碎片离子苯环旁边五元环断裂得到，而碎片离子m/z 90(-C5H2N3F3)则是m/z 251的碎片离子中间环上C-N 键断裂产生的.a)原药PF573228 LC-MS提取离子(EIC)流图;b)PF573228的ESI-MS质谱图; c)PF573228在40 eV下的碰撞诱导解离二级质谱图(ESI-MS/MS)图1 PF573228提取离子流图(TIC)和质谱图Fig.1 Extracted ion chromatogram(EIC) and mass spectra of PF573228根据PF573228的结构特点和肝微粒体的代谢规律，推断PF573228经肝微粒体体外代谢产物的可能结构和保留时间(见表1).根据精确质量数、同位素分布、二级质谱图特征碎片离子等信息对可能的代谢物进行了定性分析，鉴定了PF573228在体外经肝微粒体的I相代谢途径和代谢产物结构[9-12].表1 PF573228经肝微粒体体外代谢产物相关信息Tab.1 Information of metabolites of PF573228 in liver microsome in vitro原药和代谢产物代谢途径m/z分子式质量偏差/10-6保留时间/minM0PF573228492.1312C22H20F3N5O3S8.1314.94M1加单氧508.1261C22H20F3N5O4S8.8612.88M2脱氢490.1155C22H18F3N5O3S-4.9314.12M3N-脱烷基324.1067C14H12F3N5O-9.6812.21代谢产物M1保留时间和碎片离子质谱分析结果如图2a，2b，2e和图3所示.由图可见，M1分子离子峰m/z 508裂解去一分子水，产生m/z 490(-H2O)碎片离子峰，与代谢产物M2结构一样，进一步裂解去酰胺基产生m/z 450(-NCO)碎片离子峰，旁边苯环C-N断裂产生m/z 169(-C8H9SO2)碎片离子峰与原药M0的特征峰是一样的.a) PF573228三种代谢产物LC-MS提取离子流图(EIC); b～d) 代谢产物M1、M2、M3的ESI-MS质谱图; e) M1在35 eV下的碰撞诱导解离二级质谱图(ESI-MS/MS)图2 PF573228代谢产物的提取离子流图(EIC)和质谱图Fig.2 The extracted ion chromatogram(EIC) and mass spectra of the metabolites of PF573228代谢产物M2的EIC图和分子离子峰的质谱分析结果如图2a, 2c所示，对代谢产物M1结构分析可知M1脱去一分子的水后结构和代谢产物M2是一样的，其特征离子峰m/z 450、m/z 320、m/z 169与M2的特征离子峰是一样，裂解去酰胺基产生m/z 450(-NCO)碎片离子峰，旁边苯环C-N进一步断裂产生m/z 169的碎片离子峰和m/z 282的碎片离子峰.图3中也说明了代谢产物M2的裂解途径. 代谢产物M3的EIC图和分子离子峰的质谱分析结果如图2a, 2d所示，代谢产物M3是N-脱烷基化得到的代谢产物，其分子离子峰m/z 324二级质谱图的特征碎片离子m/z 162是中间N与嘧啶环上的C裂解产生的.在药物PF573228的二级质谱图1c中可见此类C-N的断裂.图3 代谢产物M1的ESI-MS/MS的裂解途径Fig.3 The ESI-MS/MS fragmentation of the metabolite M12.2 PF573228在肝微粒体体外代谢的代谢途径根据HPLC-ESI-TOF MS和MS/MS分析结果推测，PF573228在大鼠肝微粒体P450酶系的作用下的转化如图4所示.肝微粒体中细胞色素P450酶系在转化阶段起着非常重要的作用，药物在实验对象体中发生生物转化，根据药物Ⅰ相代谢反应有氧化、还原或水解等类型.说明PF573228经肝微粒体体外代谢产物的生物转化有3个主要途径：脱氢，N-脱烷基和加氧.a) 羟基化; b) 脱氢; c) N-脱烷基作用图4 PF573228肝微粒体体外代谢的代谢途径示意图Fig.4 The schematic diagram for the metabolic pathway ofPF573228 with liver microsome in vitro参考文献【相关文献】[1] Li S F, Hua Z C , FAK expression: regulation and therapeutic potential[J]. Adv Cancer Res, 2008, 101: 45-61.[2] Hao H, Naomoto Y, Bao X, et al. Focal adhesion kinase as potential target for cancer therapy (Review)[J]. Oncol Rep, 2009, 22(5): 973-979.[3] Slack-Davis J K, Martin K H, Tilghman R W, et al. Cellular characterization of a novel focal adhesion kinase inhibitor[J]. J Biol Chem, 2007, 282(20):14845-14852.[4] Raju B,Ramesh M,Borkar R M,et al.In vivo metabolic investigation of moxifloxacin using liquid Chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry in combination with online hydrogen/deuterium exchange experiments[J]. Rapid Commun Mass Spectrom, 2012, 26(16): 1817-1831.[5] Lu X, Zhao X J, Bai C ,et al. LC-MS-based metabonomics analysis[J]. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci, 2008, 866(1/2):64-76.[6] Liu H, Wang K, Tang Y, et al. Structure elucidation of in vivo and in vitro metabolites of mangiferin[J]. J Pharmaceut Biomed, 2011, 55(5): 1075-1082.[7] Qi P, Fan M, Li Z, et al. 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