第十一章 病毒感染的实验室诊断与防治原则
- 格式:pdf
- 大小:700.09 KB
- 文档页数:46


病毒感染实验诊疗1.( 1 )一般原则是特异敏感、迅速和简易。
第一依据流行病学和临床特色,初步判断可能感染的病毒。
(2)而后依据可疑病毒的生物学特色、机体免疫应答和临床过程,以及病人目前所处的机遇,确立实验诊疗方法。
2.(1)对潜藏期短,发病时还没有抗体产生,可选择测定病毒颗粒、病毒抗原或核酸。
(2)对潜藏期超出十天的感染,可检测特异性的 IgM 抗体来进行早期迅速诊疗,及差别首次和再次感染。
(3 )对可在体内形成连续感染或潜藏感染的病毒,可检测急性期和恢复期双份血清的IgG 抗体有无 4 倍以上涨高,或直接检测病毒核酸。
(4)对原由不明或有新病毒感染时,应收集标本进行病毒分别,同时应采纳双份血清以确认分其余病毒为病原体。
(5)对同一症状可有多种病毒惹起的状况,应同时检测几种有关病毒的病毒颗粒、抗原或抗体。
(6)对由多个型别构成的病毒可测定它们的共同抗原。
第一节标本收集与运送一、标本的收集1.采样时间:尽可能在发病的早期,急性期或患者人院的当日进行。
2.标本种类的选择:依据临床感染的症状及流行病学资料,判断可能感得病毒种类,选择相应部位采纳标本。
常有分别病毒标本的选择:3.常有标本的收集方法(1) 血液:以无菌取抗凝血10ml 。
抗凝采纳100n / ml 肝素钠。
用于分别CMV 、HSV ,、黄病毒、 EBV、 HIV-1及重生儿肠道病毒。
(2) 脑脊液:以无菌取脑脊液 1 ~ 2ml ,冰浴立刻送检。
在 4 ℃可寄存72h 。
用于分别柯萨奇病毒、 ECHO 病毒、肠道病毒、腮腺炎病毒。
(3) 宫颈或阴道拭子:采纳病灶部位分泌物,或将拭子伸人宫颈约lcm 逗留 5 秒拿出,冰浴立刻送检。
用于分别HSV 、 CMV 。
(4)粪便标本:取 2 ~4 g粪便加 10ml 运送液立刻送检,用于分别腺病毒、肠道病毒和轮状病毒。
(5) 含漱液:用无菌生理盐水让患者含漱。
用于分别流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、RSV 等。
病毒感染的检查方法以及防治原则宣汉县第三人民医院王祥病毒感染在临床感染性疾病中非常常见,较一般细菌感染、真菌感染类疾病的治疗难度更大,对患者健康的危害后果更严重,甚至有的病毒感染,如艾滋病毒感染、狂犬病毒感染属于难治性疾病,致死率极高。
目前,控制病毒感染的总体方针是预防为主,防治结合。
防治效果的监督、管理,除了依赖流行病学的调查研究外,离不开实验室的检测分析手段,因而了解相关检测方法及防治原则,在病毒感染的预防、控制中具有重要意义和实用价值。
随着科学技术的不断进步和发展,病毒感染的医学实验室诊断技术也越来越趋向于简便、快速、敏感和高特异性的方向发展,为病毒感染性疾病的早期发现和治疗提供了很大便利。
目前常用的病毒学检查方法主要包括直接检测病毒体及所致宿主细胞病理改变的形态学直接检测技术,检测病毒抗原刺激机体产生特异性免疫球蛋白的免疫血清学检测技术及检测病毒蛋白抗原成分和核酸的分子生物学检测技术(如PCR技术)。
形态学直接检查技术是病毒学实验检查方法的常用技术,主要通过检查病毒感染细胞或体液标本中是否存在病毒感染的直接证据,主要包括病毒的颗粒、抗原、核酸及包涵体等。
包涵体检查属于细胞病理学的范畴,是通过光学显微镜直接检查经姬姆萨(Giemsa)或苏木精-伊红(H-E)染色后的病变组织或脱落细胞中的特征性包涵体,有助于病毒感染的鉴别诊断,如巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒和腺病毒等感染时,宿主细胞可产生细胞核内包涵体,呼吸道合胞病毒、狂犬病毒及痘类病毒感染后可产生细胞浆内包涵体,麻疹病毒感染时,在宿主细胞质和细胞核内均可形成包涵体;病毒颗粒检查依赖于电镜技术,电镜技术检查可以从病毒形态上作出明确的鉴别诊断,除了可以实现早期快速诊断外,还可以在发现、鉴定新的病毒以及研究病毒引起组织、细胞的病理变化等方面发挥重要作用,电镜技术包括负染色技术、免疫电镜技术和超薄切片电镜技术;病毒抗原的检测是通过免疫标记技术直接或间接的、高度特异性的检查标本中的病毒抗原,根据标记物及免疫介质的不同又分为免疫荧光技术、免疫酶染技术和免疫印迹实验;病毒核酸检测则主要通过核酸杂交技术、PCR技术及高通量病毒核酸检测技术高特异度的检测病毒核酸的分子生物学方法,具有敏感性高、特异性强、快速简便等优点,已广泛应用于病毒感染性疾病的快速诊断及研究领域;病毒血清学检测虽然是传统的诊断技术,但应用比较成熟,是当前仍然具有较高应用价值的病毒实验室检查方法,特别对某些病毒,如乙肝、丙肝、EB及艾滋等病毒,由于当前技术局限,培养时间较长或培养困难而更有使用价值和现实意义,即使是易于培养的病毒,也同样具有较高的辅助诊断价值,其核心原理为利用抗原抗体特异性结合的特性,可用已知的病毒抗原(或抗体)检查对应的特异性抗体(或抗原),经典的血清学实验包括中和实验、血凝抑制试验、补体结合实验、酶联免疫实验及免疫荧光技术等,但其局限性在于抗体检测时,不能孤立的凭借单次检测结果作为诊断依据,必须结合急性期和恢复期双份血清检测结果,动态观察抗体效价变化更具临床诊断价值。