基础微生物肠杆菌科细菌
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你需要的微生物检验基础知识汇总!一、分类细菌属于原核细胞型微生物。
最精确的方法为遗传学分类方法。
最常用的是经典传统分类法:根据细菌的亲缘关系,界门纲目科属种型株分类。
科:由共同关系的属组成,如肠杆菌科;属:是种的高一级分类单位,通常包含有共同特征或关系亲密的种,用以描述微生物的主要特征,如埃希氏菌属;种:是分类等级的基本单位,同一种微生物形态、生理学特征和组成成分基本相同,用以描述微生物的次要特征,如大肠埃希氏菌;菌株或品系:同一种微生物中不同来源的纯培育物,如大肠埃希氏菌CGMCC 1.3373。
二、细菌形态学及形态学检查法细菌形态结构主要指细菌的大小、外形、排列及超微结构。
细菌结构与其生理功能、致病性、免疫性有关。
2.1形态结构2.1.1基本形态3类:球菌、杆菌、螺旋菌,杆菌是最常见的形态。
2.1.2大小测量细菌大小的单位为微米m。
球菌以直径表示大小,杆菌以长与宽表示大小,同一种细菌在不怜悯况下大小形态也有差别:涂片干燥、固定、染色时细菌收缩;快速生长的球菌往往呈短杆状。
菌龄与细菌大小的关系受很多因素影响,主要与代谢废物的积累及培育基中渗透压上升等因素有关。
2.1.3结构基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、核质;特别结构:鞭毛、菌毛、荚膜、芽孢等。
菌毛是什么?菌毛(Pilus)很多革兰氏阴性菌菌体表面遍布的比鞭毛更为细、短、直、硬、多的丝状蛋白附属器,也叫做纤毛(Fimbriae)。
其化学组成是菌毛蛋白(Pilin),菌毛与运动无关。
菌毛可分为一般菌毛(Commonpilus)和性菌毛(Sexpilus)两种。
一般菌毛长0.3~1.0um,直径7nm。
具有粘着细胞(红细胞、上皮细胞)和定居各种细胞表面的力量,它与某些细菌的致病性有关。
无菌毛的细菌则易被粘膜细胞的纤毛运动、肠蠕动或尿液冲洗而被排解,失去菌毛,致病力亦随之丢失。
性菌毛有的细菌还有1~4根较长的性菌毛,比一般菌毛而粗,中空呈管状。
性菌毛由质粒携带的一种致育因子(Ferility factor)的基因编码,故性菌毛又称F菌毛。
一、实验目的1. 掌握肠道杆菌的生理生化特性。
2. 熟悉并掌握肠杆菌科细菌的鉴定方法,如IMViC试验等。
3. 通过实验,提高对微生物学实验技能的运用和操作能力。
二、实验原理肠杆菌科细菌是一类革兰氏阴性、无芽孢、无荚膜的杆菌,广泛分布于自然界、人和动物的肠道中。
本实验通过对肠杆菌进行一系列生理生化试验,包括吲哚试验(I)、甲基红试验(M)、V.P试验(V)、柠檬酸盐利用试验(C)等,以鉴定和区分不同肠杆菌科细菌。
三、实验材料1. 菌株:大肠杆菌、产气肠杆菌、变形杆菌等。
2. 培养基:蛋白胨水培养基、葡萄糖蛋白胨培养基、柠檬酸盐培养基、双糖铁培养基等。
3. 试剂:吲哚试剂、甲基红试剂、V.P试剂、40%KOH、-茶酚、溴麝香草酚蓝、苯酚红等。
4. 仪器:酒精灯、试管、试管架、烧杯、量筒、接种环、接种针、无菌玻片、显微镜等。
四、实验方法1. 吲哚试验(I)(1)将试验菌接种于蛋白胨水培养基,37℃培养24小时。
(2)取1 mL培养液,加入1 mL乙醚,充分振荡,使乙醚层浮于培养液表面。
(3)沿管壁加入吲哚试剂10滴,静置片刻。
(4)观察培养液颜色变化,呈玫瑰红色为阳性,不变色为阴性。
2. 甲基红试验(M)(1)将试验菌接种于葡萄糖蛋白胨培养基,37℃培养24小时。
(2)沿管壁加入甲基红试剂3-4滴。
(3)观察培养液颜色变化,呈红色为阳性,黄色为阴性。
3. V.P试验(V)(1)将试验菌接种于葡萄糖蛋白胨培养基,37℃培养24小时。
(2)加入40%KOH 10-20滴,再加入等量-茶酚,用力振荡。
(3)37℃培养4小时后观察,仍无色产生为阴性。
4. 柠檬酸盐利用试验(C)(1)将试验菌接种于柠檬酸盐培养基斜面上,37℃培养24-28小时。
(2)观察培养基颜色变化,若含有溴麝香草酚蓝的斜面呈现蓝色为阳性,呈绿色为阴性;含苯酚红的斜面呈现红色为阳性,呈黄色为阴性。
五、实验结果1. 吲哚试验:大肠杆菌为阳性,产气肠杆菌为阴性。
肠杆菌科Enterobacteriaceae1.肠杆菌科:①是一大群寄居于人和动物肠道中的革兰阴性无芽胞杆菌(40种), 常随人与动物粪便排出,广泛分布于水、土壤或腐物中。
②大多为正常菌群或条件致病菌,部分强致病菌。
2 分类:(1)埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属、耶尔森菌属:胃肠道感染、增殖、引起症状(2)枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登菌属、摩根菌属、欧文菌属、哈夫尼菌属、爱德华菌属(3)其它:肥杆菌属、致病杆菌属、克吕沃尔菌属、拉恩菌属、西地西菌属、塔特姆菌属3. 肠道杆菌的共同特性(1)形态与结构:G-杆菌,多数有鞭毛,大多有菌毛,少数有荚膜或包膜,无芽胞。
(2)培养特性:需氧或兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好,常用肠道选择培养基分离培养。
(3)生化反应:生化反应活泼,乳糖发酵试验在初步鉴别肠道致病和非致病菌时有重要意义,生化反应与致病性成反比。
(4)Ag构造:菌体(O)Ag、鞭毛(H)Ag、表面(K、Vi)Ag、粘附因子(F)Ag (5)变异现象:S-R、H-O、Ag、耐药性、毒素产生、生化反应等(6)传播方式:污染的饮水及食物、经消化道传播。
(7)致病性:菌毛、表面Ag、内毒素、肠毒素等,以肠道症状为主。
(8)抵抗力:不强,加热60℃经30分钟即死亡。
4. 肠道杆菌分离鉴定程序5.肠道选择鉴别培养基(2)其他选择鉴别培养基A. EMB(伊红美兰): 含乳糖,伊红和美蓝是抑菌剂和pH指示剂,可抑制革兰氏阳性菌,在酸性条件下产生沉淀,形成紫黑色菌落或具黑色中心的外围无色透明的菌落。
B. HE培养基:含乳糖、蔗糖和水杨素,胆盐、去氧胆酸钠、溴麝香草酚兰和酸性复红可抑制革兰氏阳性菌;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;溴麝香草酚兰和酸性复红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为蓝色。
选择鉴别培养基C. 麦康凯琼脂MacConkey:含乳糖,牛胆盐可抑制G+菌,中性红是pH指示剂,细菌发酵乳糖产酸时菌落呈粉红色,并在菌落周围出现胆盐沉淀的浑浊圈。
医学微生物学 medical microbiology:主要研究与人类疾病有关的病原微生物的基本生物学特性、致病机制、检测方法,机体抗感染免疫,以及相关感染性疾病的防治措施。
细菌学 总论部分第一章 细菌的生物学性状细菌是原核细胞型微生物,广义范畴的细菌是各类原核细胞型微生物,包括细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体,狭义范围则专指数量最大、种类最多、具有典型结构的细菌。
第一节 细菌的形态与结构 一、细菌的大小与形态 细菌的测量单位:微米μm细菌按照其外形可分为球菌、杆菌、螺形菌三大类。
球菌:呈球形或近似球形,直径约1μm 。
根据菌体分裂时的平面和菌体间排列方式的不同,分为: 双球菌 eg 脑膜炎奈瑟菌 链球菌 eg 乙型溶血性链球菌 四联球菌 eg 四联加夫基菌 八叠球菌 eg 藤黄八叠球菌杆菌 双歧杆菌、球杆菌、链杆菌、分支杆菌 螺形菌 弧菌、螺菌、螺杆菌上述均为细菌在适宜条件下表现出的典型形态,当细菌衰老或环境中存在不利于细菌生长的因素(如抗菌药物过高的盐分等)时,细菌可出现对中不规则的多形性,称为衰退型。
二、细菌细胞的结构基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 、特殊结构:荚膜、菌毛、鞭毛、芽孢 (一)细菌的基本结构1.细胞壁 cell wall 位于细菌细胞最外层,紧贴在细胞膜外,是无色透明,坚韧而有弹性的膜状结构。
用革兰染色法可将细菌分为革兰阳性菌G +和革兰阴性菌G- 细胞壁的化学组成 细菌结构细胞壁的功能①维持细菌固有外形②保护细菌抵抗低渗环境③参与菌体内外物质交换④菌体表面带有多种抗原分子,可诱发机体的免疫应答⑤某些成分与细菌致病性相关细菌细胞壁缺陷型即细菌L型细菌细胞壁肽聚糖的结构受到理化或者生物因素的直接破坏或合成被抑制后,在普通环境中不能生存,但在高渗环境下仍能存活的细胞壁缺陷型细菌。
革兰染色阴性。
G+菌肽聚糖结构受损,细胞壁几乎完全缺失,原生质仅被一层细胞膜包绕,称为原生质体G-菌肽聚糖结构受损,其细胞膜外还有外膜保护,称为原生质球2.细胞膜cell membrane 位于细胞壁内侧,为紧密包绕着细胞质的半渗透性薄膜,占细胞干重10%-30%,结构与真核细胞基本相同,由磷脂和蛋白质组成,不含胆固醇。