光合细菌、硝化细菌、小球藻、螺旋藻的培养基配方

海水小球藻培养基配方
海水小球藻（Dunaliellasalina）是一种广泛存在于海水中的单细胞绿藻，具有高度耐盐性和抗氧化性。

因其在海盐业和生物技术领域的重要应用而备受关注。

为了有效地利用这种微藻的特性，需要制备适合其生长的培养基。

下面是海水小球藻培养基的配方：主要成分：
1. 无菌海水：1000 mL
2. KNO3：0.8 g/L
3. MgSO4·7H2O：0.2 g/L
4. CaCl2·2H2O：0.04 g/L
5. NaCl：20 g/L
6. NaHCO3：0.02 g/L
7. FeSO4·7H2O：0.01 g/L
8. H3BO3：0.002 g/L
9. MnCl2·4H2O：0.001 g/L
10. ZnSO4·7H2O：0.0006 g/L
11. Na2MoO4·2H2O：0.0002 g/L
12. CuSO4·5H2O：0.0001 g/L
13. CoSO4·7H2O：0.0001 g/L
以上配方可根据需要进行调整，比如增加葡萄糖或其他营养物质以促进海水小球藻的生长。

同时，在培养过程中，需要控制温度、光照和搅拌等因素以确保培养条件的稳定性和良好性。

小球藻的培养一、小球藻小球藻是单细胞植物，种类较多，多数生活在淡水中，少数生活在海洋里。

按植物学分类，小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物，其体型小，直径一般为3～5μm，在显微镜下，需要放大400～600倍才能看到，我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水。

小球藻所含的营养成分很高，其蛋白质含量达到50%～60%（相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍），含脂肪10%～30%，还含有多种维生素。

小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高，这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能。

因此，小球藻的培养前景广阔。

作为培养原料的小球藻，可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水，在显微镜下鉴定，然后再用。

也可以向培养它的人索取。

1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等，大规模的培养可用水泥池。

首先，要对所使用的容器进行消毒，一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡，再用水冲刷数次。

(100mg/L的漂白粉水溶液的配制：①天平称量5g2%漂白粉澄清液；②定量转移至容量瓶中；③加水至1L；④混匀。

2％漂白粉上清液的配制法：取漂白粉2克，加少量水搅匀，再加水至100毫升，充分调匀后，待澄清后取上清液使用。

）2 培养液的准备（1）BG11液体培养基配方：Stock1 定容100mL 柠檬酸0.3g 柠檬酸铁胺0.3g EDTANa2 0.05gStock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 0.78g MgSO4·7H2O 1.5gStock3 定容100mL CaCl2·2H2O 1.9g Stock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 2.86g MnCl2·4H2O 1.81g ZnSO4·7H2O 0.222gNa2MnO4·2H2O 0.391g CuSO4·5H2O 0.079g Co(NO3)2·6H2O 0.049gStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容1000mL（2）购买2000元/套，九种原液各200ml（稀释1000倍），10瓶。

藻类的培养及认识海洋学院海洋本＊＊班：＊＊学号：＊＊指导老师：＊＊目录1.小球藻 (1)2.扁藻 (2)3.螺旋藻 (3)4.中肋骨条藻 (4)5.角毛藻 (5)6.海链藻 (5)7.金藻 (5)8.光合细菌 (6)1.小球藻培养基配方（1000ml）：Na2CO3 0.02 g、NaNO3 2.0 g、KH2 PO4 0.02 g、MgSO4 0.1 g、尿素量为0.8 g养殖条件：pH值6.0，光照强度4500lx，通气量1.5L/min营养成分（每100g）：水分6-7g、蛋白质50-65g、脂肪5-10g、碳水化合物10-20g、纤维素2-5g、叶绿素2-5g、矿物质5-7g、β-胡萝卜素100-200mg、小球藻生长因子2000-5000mg、维生素B1 1-3g、维生素B2 3-6mg、维生素B6 1-3mg、维生素B12 0.2-0.4mg、维生素C20-50mg、维生素E12-30mg、泛酸0.8-2mg、生物素3-20mg、叶酸3-10mg、烟酸10-30mg、胆碱60-160mg、肌醇6-20mg用途：1.只要提供单细胞小球藻种源，进入水体后可迅速繁殖，形成以单细胞小球藻为优势种群的绿色水体。

2.蛋白核小球藻具有较高的营养价值，可作为鱼苗，花白鲢，虾蟹，海参，大菱鲆，甲鱼等的开口饵料，减少饲料成本，提高水产动物的成活率。

3.可以更好的进行光合作用，增加水体溶氧，大大减少缺氧浮头。

4.消耗水体中的氨氮，亚硝酸盐等有害物质，改善水体环境。

2.扁藻培养基配方（1000ml）：硝酸钠100mg、磷酸二氢钾45mg、碳酸氢钠800mg、柠檬酸铁0.2mg、人尿2ml、改良f/2维生素溶液1ml、消毒海水1000ml养殖条件（亚心形扁藻）：1、盐度：亚心形扁藻对盐度的适应范围很广，在盐度为8-80的水中均能生长繁殖。

最适应的盐度范围在30-40之间。

2、温度：亚心形扁藻对温度的适应范围也较广，在7-30℃范围内均能生长繁殖，最适范围为20-28℃之间。

红螺菌培养基：1、富集培养基：经典的紫色非硫细菌（红螺菌）的富集培养基的配方为：NH4Cl：0.1g；NaHCO3：0.1g；K2HPO4：0.02g；CH3COONa：0.1~0.5g；MgSO4·7H2O：0.02g；NaCl：0.05～0.2g；生长因子1ml，蒸馏水97ml，微量元素溶液1ml，pH为7.0。

其中，①5％NaHCO3水溶液，过滤除菌取2m1加入无菌培养基中。

②生长因子：维生素B10.001mg、乙尼克丁酸0.1mg、对氨基苯甲酸0.1mg、生物素0.001mg，以上药品溶于蒸馏水中，定容至10ml，然后过滤除菌。

③微量元素溶液：FeCl3·6H2O ：5mg；CuS04·5H2O：0.05mg；H3BO4lmg；MnCl2·4H2O：0.05mg；ZnSO4·7H2O：1mg；Co(NO3)2·6H2O： 0.5mg。

以上药品分别溶于蒸馏水中，并定容至1000m1。

除①、②、③外，各成分溶解后100 Pa灭菌20min。

然后分别加入①、②、③，如加入0.1％～0.3％的蛋白胨则能促进该菌生长。

2、分离培养基：传统的红螺科分离培养基的配方为：NH4Cl：0.1g； MgCl2：0.02g；酵母膏：0.01g； K2HPO4：0.05g； NaCl： 0.2g；琼脂2g，蒸馏水90ml。

100Pa灭菌20min。

灭菌后，无菌操作加入经过滤除菌的0.5g/5mlNaHCO3，再无菌加入过滤除菌的0.1g或0.1mlNa2S·9H2O（降低培养基的氧化还原值），最后再加入5ml经过滤除菌的乙醇、戊醇或4％丙氨酸。

用过滤灭菌的0.1mol/H3PO3调pH至7.0。

摘自百度知道。

筛选富集培养基为: NH4Cl 1g/L, NaHCO3 1g/L, CH3COONa 3g/L, KH2PO4 0.3g/L, MgSO4 0.1g/L, 酵母膏0.5g/L, 微量元素母液1g, 自然pH值。

光合细菌培养基光合细菌培养基是一种用于培养和研究光合细菌的基础培养基。

光合细菌是一类具有光合作用能力的微生物，它们通过光合作用将光能转化为化学能，并利用该能量合成有机物质。

光合细菌在生态系统中扮演着重要的角色，同时也具有广泛的应用价值。

光合细菌培养基的配方和制备是研究光合细菌的重要基础工作。

光合细菌培养基主要包含碳源、氮源、无机盐、微量元素和缓冲剂等组分。

其中，碳源是细菌所需的能量来源，氮源则是细菌合成生命构建物质的必要元素。

在光合细菌的培养基中，常用的碳源包括葡萄糖、蔗糖和麦芽糖，而氮源则可以选择氨基酸、尿素和硝酸盐等。

除了碳源和氮源，无机盐也是光合细菌培养基中重要的组分。

无机盐提供了细菌所需的微量元素和矿物质。

光合细菌常需要的无机盐包括钠盐、钙盐、锰盐和镁盐等。

微量元素对细菌的生长和代谢起着重要的调节作用，能够促进光合细菌的生长和光合作用的进行。

缓冲剂的添加可以调节培养基的酸碱度，保持培养基的稳定性。

常用的缓冲剂包括磷酸盐和碳酸盐。

磷酸盐缓冲剂通常用于调节培养基的pH值，而碳酸盐缓冲剂则可以稳定培养基中的碳酸盐浓度，保持培养基的渗透压稳定。

光合细菌培养基的制备过程需要严格的操作和一定的实验经验。

首先，将所需的组分按一定比例称取并加入适量的纯水中。

然后，通过高压灭菌器对培养基进行灭菌处理，确保培养基中不含有任何其他的污染物和微生物。

最后，将灭菌后的培养基分装到培养皿或培养瓶中，即可用于光合细菌的培养和研究。

利用光合细菌培养基进行培养和研究可以帮助我们深入了解光合细菌的生长特性、代谢途径和光合机制。

通过研究光合细菌，我们可以揭示光合作用的分子机理，并应用于能源转化、环境修复和农业生产等领域。

此外，光合细菌还具有许多有益的应用，比如用于食品工业、制药业和生物能源开发等。

总之，光合细菌培养基是一种重要的用于培养和研究光合细菌的基础培养基。

通过合理配比和制备，可以获得适合光合细菌生长和研究的培养基。

光合细菌培养基的使用能够促进我们对光合细菌的了解，并为相关领域的研究和应用提供有力支持。

海水小球藻培养基配方
海水小球藻是一种单细胞绿藻，广泛分布于海洋与淡水中。

它们被广泛应用于生态学、生物地球化学和生物技术等领域的研究。

这里，我们提供一种海水小球藻培养基的配方，以供研究者使用。

配方：
1. 海水：1000mL
2. Tris-HCl缓冲液：10mM，pH 8.0，50mL
3. 乙酸钾：0.4g
4. 硝酸钾：0.075g
5. 磷酸二氢钾：0.01g
6. 氨水：2mL
7. 硫酸镁：0.1g
8. 硫酸钾：0.01g
9. 硫酸锌：0.00025g
10. 硼酸：0.0005g
11. 锰酸钾：0.0005g
12. 钴氯化物：0.0001g
13. 钒酸铵：0.000025g
14. 钼酸钠：0.000025g
15. 铜酸盐：0.000025g
方法：
1. 将1L海水加热至80℃，然后冷却到室温。

2. 在1L海水中加入Tris-HCl缓冲液、乙酸钾、硝酸钾、磷酸二氢钾、氨水、硫酸镁、硫酸钾、硫酸锌、硼酸、锰酸钾、钴氯化物、钒酸铵、钼酸钠和铜酸盐，并充分混合。

3. 调节pH值至8.0。

4. 将培养基通过0.22μm的过滤器过滤，保存在4℃的冰箱中。

注意：这个配方仅供参考。

在实际使用时，研究者可以根据实验需要进行微调。

此外，为了保证培养基的质量，建议使用高品质的试剂，并注意无菌和严格控制污染。

小球藻营养液尿素0.3G/L，硝酸钾0.3G/L，磷酸二氢钠0.2G/L最大细胞数量：葡萄糖2G/L，硝酸钾0.8G/L，磷酸二氢钠0.2G/L 最大蛋白质数量：葡萄糖6G/L，硝酸钾1.6G/L，磷酸二氢钠0.2G/L 人尿按2～3%的比例直接掺入水中。

海水小球藻适宜盐度为4～36%。

，适宜温度10～36℃，最适温度25～30℃，适宜光照度8000~15000勒，适宜pH7.5～8.5。

藻种培养：1．藻种培养设施：藻种的培养要在保种室中进行，保种室要求通风条件好，光线条件好，温度可控性好，保种室要配有空调、冰箱、具有人工光源的培养架等。

培养中常用培养仪器有显微镜、解剖镜等，容器有三角烧瓶、广口玻璃瓶等。

保种室要严格消毒，防止病菌的侵入。

2．容器、工具的消毒：进行单细胞藻类的纯培养，容器、工具、培养基都要进行严格灭菌，但一般生产性的单种培养，则只须达到消毒目的就可以了。

常用的消毒方法有高温消毒法和化学药品消毒法。

高温消毒法是利用高温杀死微生物的方法。

不耐高温的容器如塑料和橡胶制品等不能利用高温法消毒。

a、直接灼烧消毒接种环、镊子等金属小工具，试管口、瓶口等可以直接在酒精灯火焰上短暂灼烧消毒。

载玻片、小刀等则最好先蘸酒精，然后在酒精灯火焰上点燃，等器具上的酒精烧完，也就完成了灭菌操作。

b、煮沸消毒把容器、工具放入锅中，加水煮沸消毒，一般煮沸10-20分钟。

大型锥形瓶消毒，可在瓶口上放一普通的玻璃漏斗，再在漏斗上放一称量瓶盖，在锥形瓶内加少量淡水，置电炉上加热煮沸5-10分钟，可使整个瓶壁消毒。

消毒完毕即用消毒的纸或消毒的纱布包扎瓶口。

此法适合消毒小型的容器工具。

c、烘箱干燥消毒将玻璃容器、金属工具用清水洗干净后，放入烘箱。

关闭烘箱门，打开通气孔，接通电源加热。

当温度上升到120℃时，关闭通气孔，停止加热。

如果进行纯培养，容器必须灭菌，当温度上升到105℃时，关闭通气孔，继续加热至160℃，保持温度，恒温2小时，然后停止加热。

小球藻培养的三个流程及比例下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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1. 配方：小球藻培养基的配方可以根据不同的需求进行调整，以下是一种常用的配方：硝酸钠（NaNO3），1.5g/L.磷酸二氢钾（KH2PO4），0.04g/L.硫酸镁（MgSO4·7H2O），0.075g/L.氯化钙（CaCl2·2H2O），0.025g/L.碳酸钠（Na2CO3），0.02g/L.柠檬酸铁铵（FeC6H5O7·NH4OH），0.005g/L.微量元素溶液，1ml/L.2. 微量元素溶液配方：硼酸（H3BO3），2.86g/L.氯化锰（MnCl2·4H2O），1.81g/L.硫酸锌（ZnSO4·7H2O），0.22g/L.硫酸铜（CuSO4·5H2O），0.08g/L.钼酸钠（Na2MoO4·2H2O），0.02g/L.3. 制备方法：将硝酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、碳酸钠、柠檬酸铁铵等试剂分别溶解在适量的蒸馏水中，搅拌均匀。

光合细菌培养操作教程（附最新升级配方）他山之石，可以攻玉，汇集各地自配菌自制肥鱼友，总结交流经验，提高技术，以理论为依据，注重实践、接地气的数据和案例，欢迎加入实战调水肥水养殖群3再三强调、第一次扩种培养，请尽量遵守操作流程，室内灯泡光照，40瓦钨丝灯（老灯泡）、现在的温度，万万不可太阳直接暴晒，特别是2到20公斤的透明瓶培养，一定要搭遮阳网，而且网子和培养物之间至少1米的空隙、室内灯泡扩种成功以后，转入阳光培养，目前看来我试过的最理想的方案就是，搭建40公分深简易池子，如果是水泥池更好，如果是直接的砖头码的池子，铺油布，然后用透明的尼龙筒膜。

然后注水把尼龙筒膜浸泡完全，可以降温，上面再加遮阳网就很完美过夏天高温季节了、第一次培养的水源最好用池塘水和自来水经过煮沸冷却以后使用，等第一次的菌种培养成熟以后，第二次菌种数量比较多了，再做几个不同水源的直接培养，哪种水源最适合最终就确定用哪种水源关于菌种1.菌种的添加比例，第一次是百分之二十比例，也就是1：4的比例，因为第一次菌种经过长途黑暗运输，以及开始适应当地水源，所以需要按较大比例添加，当在当地培养几个世代以后，菌种比例可以适当减少，菌种和水的比例可以是1比10甚至是1比202.菌种的适应性，第一次扩大培养，由于菌种对当地水源有一个适应过程，所以第一次培养的成熟时间可能会有所延长，有可能需要天左右，当适应以后，条件适应情况下则只需要到天，当然这个因菌种种源不同有所差异的，我指的是我的菌种，其他菌种大家可以自己测试和总结。

3.菌种收到以后，由于菌种不可能大量发货，而且也没有必要大量发货，所以量一般都不是很多，所以为了百分百成功，必须精细化操作，首先给菌种采用40瓦白炽灯光照1小时左右然后再接种扩培，扩培也采用室内光照的方式培养，用40到60瓦的白炽灯最好，用2升左右的饮料瓶最理想，等自己的种群数量扩大以后，保种量在20公斤以上的时候，就可以规模化的用尼龙袋，和大透明塑料瓶室外用太阳晒。

光合细菌的培养方法光合细菌是一类具有光合作用能力的微生物。

过去，人们几乎不知道它的存在，直到本世纪30年代才发现它。

如今人们已揭示了它的许多奥秘，异军突起般地进入各个生产领域，为人类造福。

厌氧生物的“遗孤” 光合细菌在一切地球生物中，是够得上被称为“老资格”的。

距今25亿年前，那时地球大气层里还没有氧气的踪迹，只有水蒸气、二氧化碳、一氧化碳、甲烷、硫化氢和惰性气体等。

但是，在生命的摇篮——海洋里，已孕育着许多原性生命体，它们各有自己的生活方式：有的吃氨，有的吃硫化氢，有的吃甲烷……后来，地球上的氧气慢慢多起来了，许多不习惯于新环境的微生物，逐渐被淘汰，也有些厌氧细菌钻到地底下，将自己隐蔽起来。

光合细菌就是20亿年前厌氧微生物的“遗孤”。

光合细菌的特点一是它至今仍保持20亿年前的讨厌氧气的“性格”，平时它们深居地底、湖底、江河底和海底的污泥中，据分析每克污泥里含有105个光合细菌；二是光合细菌也能像植物那样，利用太阳光来制造养料，但是它们在光合作用过程中，不像绿色植物那样会放出氧气。

目前已发现的光合细菌不下数十种之多，但无论哪一种，迄今都还保留着20亿年前的习性，证明它们都是厌氧微生物的“遗孤”。

光合细菌的特殊本领任何一种光合细菌，都有一个光合器官。

它能分泌出跟叶绿素相同功能的物质，这些物质光合作用的效力，比叶绿素更高，能很快地把光能变成化学能。

例如有一种红色无硫细菌，它的光合器官能分泌出红色胡萝卜素，而且能利用紫外光、红外光等绿色植物所不能利用的光波。

所以，我们说光合细菌有高超的光合作用的本领。

光合细菌另一个本领，是在不同情况下，可以把一些废物如硫化氢、甲烷、脂肪酸、二氧化碳等，当作自己的食物，再通过体内分解、合成作用，制成对人类有用的东西。

有一种红色无硝菌，它在污泥中专吃废物，经过体内分解作用，能使体内含粗蛋白65.45％、脂肪7.18％、可溶性糖20.31％、纤维2.78％，还含有大量的维生素等对人类有价值的物质。

光合细菌菌剂光合细菌的培养方法光合细菌(简称PSB)是地球上最早出现具有原始光能合成体系的原核生物，是一大类在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称，其广泛存在于地球生物圈的各处。

光合细菌在水产养殖上的应用主要有以下五个方面：作为养殖水质净化剂；作为饲料添加剂；用于鱼、虾、贝幼体的培育；作为动物性生物饵料的饵料；防治鱼病。

光合细菌的培养，按次序分容器工具的消毒、培养基的配制、接种、培养管理四步。

一、容器、工具的消毒消毒方法参考本报第1199期B3版《单细胞藻类的培养方法》一文中的容器、工具的消毒方法。

二、培养基的配制1.培养基配方培养光合细菌首先应选择一个能基本满足培养种的生理生态特性和营养要求、经过培养实践证明且效果比较理想的培养基配方。

2.配制培养基的用水如果培养的光合细菌是淡水种，菌种培养可用蒸馏水；生产性培养可用自来水（或井水）配制。

如果培养的光合细菌是海水种，则用天然海水（或人工海水）配制。

用天然海水配制培养基，可免加镁盐和钙盐，因为海水中镁、钙元素的含量已能满足需要。

此外，在海水中加入磷元素时不能用磷酸氢二钾，应用磷酸二氢钾，否则会产生大量沉淀。

3.配制按培养基配方把所列物质称量，逐一溶解后，混合，配成培养基。

也可把部分组份配成母液，使用较方便。

4.灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。

小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅煮沸消毒。

大型生产性培养则先把水用次氯酸钠处理、消毒，然后加入配方所列组份，溶解、混合。

三、接种培养基配制好后，应立即进行接种。

光合细菌生产性培养的接种量比较高，一般为20％～50％，即菌种母液量和新配培养量之比为1：4（20％）～1：1（50％），且不应低于20％，尤其微气培养接种总量应高些，否则，光合细菌在培养液中很难占绝对优势。

四、培养管理光合细菌的培养过程中，管理工作包括日常管理操作和测试、生长情况的观察检查和出现问题的分析处理等三个方面。

海水小球藻培养基配方
海水小球藻是一种常见的海洋原生生物，其在生态系统中具有重要的作用。

为了进行海水小球藻的研究和培养，需要一种有效的培养基配方。

以下是一个适用于海水小球藻的培养基配方：
1. 人工海水：1升
2. EDTA（二乙酸四乙烯三胺）：10毫升
3. 磷酸盐缓冲液：10毫升
4. 硝酸钾：200毫克
5. 硫酸镁：100毫克
6. 硫酸钾：20毫克
7. 硝酸铵：50毫克
8. 钙氯化物：20毫克
9. 碳酸钠：100毫克
10. 亚硫酸氢钠：2毫克
11. 微量元素：1毫升
以上配方需要按比例混合，并在一定温度下进行培养。

此培养基可用于海水小球藻的研究和培养，可以帮助科学家更好地理解这种海洋微生物的特性和用途。

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一、小球藻小球藻是单细胞植物,种类较多,多数生活在淡水中,少数生活在海洋里;按植物学分类,小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物,其体型小,直径一般为3～5μm,在显微镜下,需要放大400～600倍才能看到,我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水;小球藻所含的营养成分很高,其蛋白质含量达到50%～60%相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍,含脂肪10%～30%,还含有多种维生素;小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高,这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能;因此,小球藻的培养前景广阔;作为培养原料的小球藻,可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水,在显微镜下鉴定,然后再用;也可以向培养它的人索取;1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等,大规模的培养可用水泥池;首先,要对所使用的容器进行消毒,一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡,再用水冲刷数次;100mg/L的漂白粉水溶液的配制：①天平称量5g2%漂白粉澄清液；②定量转移至容量瓶中；③加水至1L；④混匀;2％漂白粉上清液的配制法：取漂白粉2克,加少量水搅匀,再加水至100毫升,充分调匀后,待澄清后取上清液使用;2 培养液的准备1BG11液体培养基配方：Stock1 定容100mL 柠檬酸柠檬酸铁胺 EDTANa2Stock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 MgSO4·7H2OStock3 定容100mL CaCl2·2H2OStock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 MnCl2·4H2O ZnSO4·7H2O Na2MnO4·2H2O CuSO4·5H2O CoNO32·6H2OStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容 1000mL2购买2000元/套,九种原液各200ml稀释1000倍,10瓶;培养基各取1ml;3 藻种购买：淘宝轮虫小球藻套装;40元/一套4 接种选取生活力强、生长旺盛的藻种,在天气晴朗的上午接种;一般情况下,作为第1级培养,可按藻液与培养液1∶2的比例进行接种;接种的量大,可使藻种迅速成为培养液中的优势种,利用生物间的拮抗作用,减少了污染机会,缩短了小球藻的培养时间;待扩大培养时,可按藻液与培养液1∶4的比例进行接种;5 管理搅拌由于小球藻不能游动,只能浮在水中生活,所以必须对培养液进行搅拌,让藻体不断变换位置,使光照、养料和水温均衡,这样有利于藻体的迅速生长和繁殖;常用的搅拌工具有玻璃棒、竹棒,每天搅拌3次,每次1分钟;光照小球藻的培养要有充分的光照,阴雨天光线不足时,可在培养室内用人工光源进行补充,通常用冷白荧光灯,光照强度为2000～3000Lx；但在光线强烈的夏天,要用遮阳网等进行适当避光;温度及pH 温度保持在25～30℃,最适宜生长温度为26℃;pH保持在6～8;污染的防治在小球藻的培养过程中,要经常观察藻液的颜色是否正常、是否有沉淀和附壁现象、液面是否有菌膜等异常情况;造成藻种污染的多数情况是原生动物及杂藻的生长;如果显微镜下检查有原生动物生活,可用1mg/L的漂白粉灭杀;对付其他杂藻最好的办法是严格控温和经常检查培养液的pH;6 采收当小球藻的培养液变成绿色、用显微镜观察1mL;培养液中大约有100个小球藻时,就可以采收或扩大再培养了;采收时,用%～%的明矾粉溶解在培养液里,约1小时后,小球藻沉在了水底,除去上层的水,就能获得小球藻的浓缩液;二、硅藻1. 储存液：1 金属液每升含EDTA二钠 - g氯化铁晶体 - g五水硫酸铜 - g七水硫酸锌 - g六水氯化钴 - g四水氯化锰 - g二水钼酸钠 - g2 维生素液每升含VB12 - g维生素B5盐酸盐 - g生物素 - g2. 1L培养基配方：硝酸钠 - g二水合磷酸二氢钠 - g金属液 ml维生素液 ml硅酸钠50mg加水至1L;硅藻培养温度在22℃,光照照度在3000lux不要太阳直射以上;大量培养中曾出现过杂藻污染问题,主要是浮游的蓝纤维藻及部分栅藻和小球藻;我们利用藻类比重、悬浮习性不同来排除杂藻;发现杂藻时,停止搅拌数小时,使硅藻下沉,蓝纤维藻等悬浮在水中;然后将上清液倾弃,再将沉淀硅藻用蒸馏水反复清洗几次后,加入新鲜培养基,即可获得纯化;补充：1．藻种培养设施：藻种的培养要在保种室中进行,保种室要求通风条件好,光线条件好,温度可控性好,保种室要配有空调、冰箱、具有人工光源的培养架等;培养中常用培养仪器有显微镜、解剖镜等,容器有三角烧瓶、广口玻璃瓶等;保种室要严格消毒,防止病菌的侵入;2．容器、工具的消毒：进行单细胞藻类的纯培养,容器、工具、培养基都要进行严格灭菌,但一般生产性的单种培养,则只须达到消毒目的就可以了;常用的消毒方法有高温消毒法和化学药品消毒法;高温消毒法是利用高温杀死微生物的方法;不耐高温的容器如塑料和橡胶制品等不能利用高温法消毒;a、直接灼烧消毒接种环、镊子等金属小工具,试管口、瓶口等可以直接在酒精灯火焰上短暂灼烧消毒;载玻片、小刀等则最好先蘸酒精,然后在酒精灯火焰上点燃,等器具上的酒精烧完,也就完成了灭菌操作;b、煮沸消毒把容器、工具放入锅中,加水煮沸消毒,一般煮沸10-20分钟;大型锥形瓶消毒,可在瓶口上放一普通的玻璃漏斗,再在漏斗上放一称量瓶盖,在锥形瓶内加少量淡水,置电炉上加热煮沸5-10分钟,可使整个瓶壁消毒;消毒完毕即用消毒的纸或消毒的纱布包扎瓶口;此法适合消毒小型的容器工具;c、烘箱干燥消毒将玻璃容器、金属工具用清水洗干净后,放入烘箱;关闭烘箱门,打开通气孔,接通电源加热;当温度上升到120℃时,关闭通气孔,停止加热;如果进行纯培养,容器必须灭菌,当温度上升到105℃时,关闭通气孔,继续加热至160℃,保持温度,恒温2小时,然后停止加热;必须要等到温度下降到60℃以下,才能打开烘箱门;有棉塞和纸包扎的容器、工具灭菌,不能超过180℃,以免烘焦;化学药品消毒主要用于生产性大量培养中,大型容器、工具、水泥池等常用化学药剂消毒;a、漂白粉消毒工业用漂白粉一般含有效氯25%~35%,消毒时按万分之1-3的含量配成水溶液,把容器、工具在溶液中浸泡半小时,再用消毒水冲洗3~4次即可;b、酒精消毒酒精消毒常用于中小形容器和工具,方法是用纱布蘸70%酒精在容器、工具的表面涂抹即可;c、高锰酸钾消毒以百分之五的比例配成溶液把要消毒的容器、工具浸泡5分钟,然后取出用消毒水冲洗2~3次,便可达到消毒目的;如果是对玻璃钢水槽、水泥池等消毒,可以用高锰酸钾溶液拨在池壁上,拨洒几遍后刷洗池底,10分钟后再用消毒水冲洗干净;d 石炭酸石炭酸消毒按3%~5%的比例配成消毒液,把要消毒的容器和工具放在其中浸泡半小时,再用消毒水冲洗2~3次;微藻的培养液是在消毒的海水或淡水中加入各种营养盐配制而成;培养液的配制,首先按配方先后称量各种营养物质,可逐一溶解,也可以同时溶解;遇到难溶的含金属的物质可以加热或与NaEDTA一起溶解,配方中的维生素一般等水温降至60℃后再加;生产上为了方便可以将营养盐配方浓缩1000-2000倍配成母液,使用时可以根据培养水体多少量取母液的体积即可;3．培养液的制备和消毒：保种培养液的消毒一般采用加热消毒法,经沉淀、过滤的海水,一般加温至90℃左右维持5分钟或达到沸腾即可;由于海水中的一些对藻类生长有促进作用的有机物在高温时易遭破坏,所以加温时间不宜太长;4．接种：接种就是把作为藻种的藻液接入新配好的培养液中,进行丰富培养;选择无污染、生长旺盛、颜色正常、藻液中无沉淀、细胞无附壁的藻种进行接种;一般来说藻种液和新培养液的比例为1:2;接种的时间最好在上午的8~10时,这个时间是藻类细胞代谢最旺盛的时候;培养条件:保种的条件最好保证在藻种的最适生长条件,要保证藻种不受污染;5．藻种培养：温度保持在25～30℃;pH保持在6～8;6．日常培养管理:1注意保种室的卫生,定时打扫,谢绝无关人员的进入等；2外观检查;检查藻液颜色是否不再浅变浓,或是出现浑浊或沉降等反映藻体生长不正常,处于老化时期受到病虫侵染的现象;3镜检检查是否发生污染,是否老化,以确保试验的顺利进行;4控制温度;通过暖气控温装置控制温度,使试验藻细胞在适宜的温度环境中;5摇瓶;在培养过程中每天摇瓶1-3次,使藻均匀分布;6 调节光强; 保持合适的光强,白天避免阳光直射;7．藻种保藏方法：存藻种时可以根据保种目的和保种条件的不同分别采取不同的保种方法;1固体培养基保存法;保种用的固体培养基的营养浓度应比正常的液体培养液的高,一般增加一倍;琼脂量为%;固体培养基分装灭菌后,冷却待用;将无污染的藻种用喷雾法或划线法接种到固体培养基上;常用固体培养基保种方法有两种,一种通常把藻种接种在固体培养基上,在弱光低温条件下慢慢培养保存,接种一次可以保存半年到一年;另一种方法,接种后首先放在光线充足的地方防止直射光照射,使藻类细胞较快速地繁殖起来,直到培养基上出现颜色,即可放入冰箱或冷库中,一般在5℃左右的低温下保存;每天给藻种几个小时的弱光照;此法保存的时间可长达2至3年;2液体培养基保存法;低温、弱光下培养;一般两个月更换一次培养液;淡水小球藻在国内的培养有几十年的历史,因为培养方式简单,生长速度快,被誉为罐装的太阳,一度被大力推广;小球藻是培育淡水轮虫的有效饵料之一;淡水小球藻的培养,无非几个要素,光照、适宜的温度、营养液;首先说一下光照,一般是大于4500lx,温度以25℃为最佳,在25-30度间都能够很好的生长,每20个小时就能分裂成4个细胞;那么第三个要素是营养液,而营养液无非就是氮源、磷源、碳源及一些微量元素,目前使用较多的营养液配方有BG-11、F/2、SE 培养基等,同时强调一点,实验表明,适当补充尿素是促进小球藻生长的一个很好的方式,同时小球藻可以异养,适当添加葡萄糖可以缩短培养时间;藻种的获得很容易,但是建议用纯种的规范操作的藻种,好的种源是开口的第一步,现在藻种获得可以通过某宝直接搜索小球藻藻种购买,也可以通过向水生所采购,但是那里藻种普遍较贵,差不多1000大洋10ml左右,如果不是科研要求,不建议如此购买,还有就是通过科研院校索要;首先我们要获得小球藻藻种,这个某宝上有出售,也可以向科研院所购买,这个在此就不详述,一般藻种浓度在百万-千万个/ML,接种藻种时,将200-300ml 的藻种倒入到1L 培养液中推荐比例在1：3-5 之间为宜,在瓶口加多层纱布培养,光照大于2000-4500 勒克斯,光强可以加大,温度在25℃-30°为宜;一般我们15 天左右需要继续扩培如果是育苗急用的话,可以每L 水中添加尿素,10g/L 的葡萄糖,光照在4500LX ;其中的营养液可以是BG11、F/2、SE培养基等。

一．编号
铜绿微囊藻（FACHB-912）、水华微囊藻（FACHB-1028）、螺旋藻（FACHB-901）
小球藻（FACHB-1028）
二．培养基及培养条件
（1）螺旋藻采用Zarrouk培养基，
藻种纯化：在Zarrouk 培养基中加入 1.5%琼脂粉，制成固体培养基平板，再将待分离纯化的藻液通过划线方法接种在平板上，置于培养箱中，29℃、光照强度2000 Lux下培养7 d。

从平板上挑取单藻落接入250 mL三角瓶中(含100 mL Z氏培养基)，于光照培养箱中静置培养，每天摇3 次，7 d 后作为实验备用藻种.
培养条件：温度30℃，光照4000 Lux，光暗比12:12。

（2）铜绿微囊藻、水华微囊藻、小球藻(绿藻)培养采用BG11培养基
培养条件：温度25℃，光照2000 Lux，光暗比12:12。

海水小球藻培养基配方
海水小球藻（Dunaliella salina）是一种绿藻，常见于高盐度环境中，具有很大的潜力用于生物燃料、食品添加剂和抗氧化剂等领域。

为了
成功培养海水小球藻，必须提供适合其生长和繁殖的培养基。

以下是一种
常用的海水小球藻培养基配方：
1.水溶液
培养海水小球藻时，需要使用含有适当盐度的水溶液。

一般来说，盐
度应保持在25-35ppt（盐份浓度为2.5-3.5％）之间。

可以通过配制高盐
浓度溶液然后稀释来达到所需的盐度。

2.硝酸盐源
在海水小球藻培养基中，硝酸盐是提供氮源的关键成分。

通常，硝酸
盐以硝酸钠的形式添加。

硝酸钠的用量通常为1-3g/L。

3.物质C源
4.磷酸盐源
磷酸盐是海水小球藻培养基的重要组成部分，提供磷为藻类细胞生长
和分裂提供必要的能量。

磷酸盐可以使用磷酸钠或磷酸二氢钠的形式添加。

通常，磷酸盐的浓度为100-200mg/L。

5.钾盐源
6.硫酸盐源
7.镁盐源
以上是一种常用的海水小球藻培养基配方，提供了必要的营养成分以满足其生长和繁殖的需求。

当然，具体的培养基配方还可根据实际需求进行调整和优化，以进一步提高海水小球藻的生长效率和产量。