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第一章_________________________________________________________________________________ 1. 微生物：肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。 2. 按照细胞核结构和细胞器分化程度不同，全部生物可分为原核生物和真核生物 3. 凡是细胞核发育不完全，不具核模，核物质裸露，与细胞质没有明显的界限，没有分化的特异细胞器，只有膜体系的不规则泡沫结构，进行二分裂的细胞称为原核细胞. 4. 凡是具有发育完好的细胞核，有核膜（使细胞核与细胞质具有明显的界限），有高度分化的特异细胞器（如线粒体、叶绿体、高尔基体等），进行有丝分裂的细胞称为真核细胞 5. 微生物分类就是把各种微生物按照它们的亲缘关系分群归类，编排成系统。 6. 每一种微生物的学名都依据属和种而命名。属名+种名（+命名者等） 7. 微生物分类是在对大量微生物进行观察、分析和描述的基础上，以它们的形态、结构、 生理生化反应和遗传性等特征的异同为依据，将微生物分类。 8. 微生物的特点：个体微小，分布广泛；种类繁多，代谢旺盛；繁殖快速，易于培养； 容易变异，利于应用 9. 微生物学是研究微生物及其生命活动规律的一门基础学科。 10. 研究的内容涉及到微生物的形态结构、分类鉴定、生理生化、生长繁殖、遗传变异、 生态分布，微生物各类群之间、微生物与其他生物之间及微生物与环境之间的相互作用、相互影响的复杂关系等，目的是为了更好地认识、利用、控制和改造微生物，造福于人类。11. 污染控制微生物学是环境污染治理与微生物学相结合而产生发展起来的一门边缘性学 科。 12. 污染控制微生物学是研究污染控制过程中涉及到的微生物，并分析其生命活动规律的一 门应用学科。 13. 微生物学的真正发展大致经过三个阶段：形态学、生理学和分子生物学第二章 1. 原核微生物主要指细菌、放线菌和蓝细菌 2. 细菌多数在1 ym左右，在一定的环境条件下，有相对恒定的形态和结构。 3. 细菌基本形态有三种：球状、杆状和螺旋状。在自然界中杆菌最常见，球菌次之，螺 旋状最少。丝状杆菌可引起活性污泥膨胀。 4. 原生质体：细胞膜、细胞质、核质体、内含物 5. 细胞壁构成的主要成分是肽聚糖、脂类和蛋白质。根据细胞壁成分和结构的不同，将细 菌分为革兰氏阳性（简称G+）细菌和革兰氏阴性（简称G-）细菌。 6. 形态特征是鉴别菌种的主要依据之一。 7. 革兰氏染色法是细胞形态观察最常用的复染色方法。 8. 由于细菌的等电点较低，在2-5之间，原生质体带负电，易与阳离子染料相结合，因此细菌染色常用碱性染料。 9. 染色步骤：先用碱性染料结晶紫染色，再加碘液媒染，然后酒精脱色，最后用复染液（沙黄或番红）复染。能够固定结晶紫与碘的复合物而不被酒精脱色，仍呈现紫色，称为 革兰氏阳性菌，能被酒精脱色，经复染着色，菌体呈现红色，称为革兰氏阴性菌。 10. 细菌的染色反应和细胞壁结构和组成有关。 11. 革兰氏染色的机理：细胞壁的结构和组成与革兰氏染色反应有关。在染色过程中，细 胞内形成了深紫色的结晶紫-碘的复合物。由于G+细菌细胞壁较厚，特别是肽聚糖含量较高，网格结构紧密，脂类含量又低，当被酒精脱色时，引起了细胞壁肽聚糖层网状结构孔径缩 小以至关闭，从而阻止了不溶性结晶紫-碘的复合物的浸出，故菌体仍呈深紫色；相反，G-细菌的细胞壁肽聚糖层较薄，含量较少，而脂类含量又高，当酒精脱色时，脂类物质溶解，
第一章绪论 1 什么是微生物？微生物有哪些主要类群？ 微生物是指肉眼难以看清，需要借助光学显微镜或电子显微镜才能观察到的一切微小生物的总称。 微生物包括：原核类：三菌(蓝细菌、细菌、放线菌)、三体(支原体、衣原体、立克 次氏体)(蓝细菌即蓝藻，所以有时也称一藻、二菌、三体) 真核类：真菌、原生动物、显微藻类 .非细胞生物：病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒) 3.微生物的主要特点是什么？ 形体小，比面积大。 吸收快，转化快。 生长旺，繁殖快。 适应性强，易变异。 分布广，种类多。 第二章原核微生物 1比较G+和G-的细胞壁的结构和化学组成上的异同点，并简述革兰氏染色的原理及操作步骤。 革兰氏阳性菌细胞壁由肽聚糖和磷壁酸组成 革兰氏阴性菌细胞壁由肽聚糖和脂多糖组成 革兰氏染色法：草酸铵结晶紫初染-----碘液媒染-----95%乙醇脱色---番红复染原理：革兰氏阳性菌肽聚糖含量与胶联程度都比较高，肽聚糖层多，所以细胞壁较厚，壁上的间隙较小，媒染后形成的结晶紫-碘复合物就不易被洗脱出细胞壁，加上它基本上不含脂质，乙醇洗脱时细胞非但没有出现缝隙，反而使肽聚糖层网孔因脱水而变得通透性更小，结果蓝紫色的结晶紫-碘复合物就留在细胞内而使细胞呈蓝紫色。而革兰氏阴性菌的肽聚糖含量与胶联程度较低。层次也少，故其细胞壁较薄，壁上的空隙较大，再加上细胞壁的脂质含量高，乙醇洗脱后，细胞壁因脂质被溶解而孔隙更大，所以结晶紫-碘复合物极亦脱出细胞壁，乙醇脱色后的细胞成无色，经过番红复染，结果就呈现红色。 2细菌的菌落特征如何描述？（提示：细菌菌落总的特征以及具有特殊结构时的菌落特征）细菌菌落湿润、粘稠、易挑起，质地均匀及菌落各部位颜色一致。 4 放线菌的菌丝类型有哪些？各有何功能？ 基内菌丝：吸收营养物质和排泄废物 气生菌丝：多核菌丝生成横隔进而分化形成孢子丝 孢子丝： 第三章真核微生物 2 酵母菌和霉菌的繁殖可形成哪几种无性孢子和有性孢子？ 酵母菌：无性孢子包括掷孢子、厚垣孢子、节孢子、分生孢子。 有性孢子有子囊孢子 霉菌：无性孢子有厚垣孢子、节孢子、分生孢子、孢囊孢子、游动孢子。 有性孢子有卵孢子、接合孢子、子囊孢子。
2004年秋季污染控制微生物试题A答案 一、填空（0.5分×40） 1.微生物一词并非（生物分类学上）的专用名词，而是指所有（形体微小）、（结构较为简单），一般须借助光学显微镜甚至电子显微镜才能观察到的低等生物的（统称），包括病毒、（原核生物）、（真菌）、（单细胞藻类）以及（原生动物）和（后生动物）等。这些微小生物通常不能被（肉眼）直接分辨，而必须借助（光学显微镜）甚至（电子显微镜）才能观察到。 2. 微生物具有多种特点，主要体现在（体积微小，结构简单）、（分布广泛，种类繁多）、（繁殖速度快，代谢强度高）、（适应能力强，易于培养）、（易变异）等方面。 3.无论是动、植物病毒或噬菌体，其增殖过程基本相同，大致分为（吸附）、（侵入和脱壳）、（生物合成）、（装配与释放）等一系列的连续步骤。 4. 细菌细胞的基本结构主要包括（细胞壁）、（细胞质膜）、（细胞质）、（核质）及（内含物）等。有些细菌还可能有（荚膜）、（芽孢）和（鞭毛）等特殊结构。 5. 革兰氏染色法为（复）染色法，其主要步骤是：先用碱性染料（结晶紫）染色，再加（碘液）媒染，然后用（酒精）脱色，最后以（复染液——沙黄或蕃红）复染。凡呈紫色者，称为（革兰氏阳性）细菌；凡呈红色者，称为（革兰氏阴性）细菌。 6. 有机废水的厌氧生物处理，主要依靠（产酸发酵菌群）、（产氢产乙酸菌群）、（同型产乙酸菌群）和（产甲烷菌群）等四大类群微生物作用完成的。 二、术语解释（3分×8） 1. 温和性噬菌体：噬菌体侵染寄主细胞后并不总是呈现裂解反应。当噬菌体侵入细菌后，细菌不发生裂解而能继续生长繁殖，这种反应称为溶原性反应，这种噬菌体称为温和性噬菌体。 2. 菌胶团：产生荚膜与粘液层的细菌，相互粘连在一起，形成具有一定形态的细菌集团，具有共同的粘液层，内含许多细菌。 3.质粒：质粒是指独立于染色体外，存在于细胞质中，能自我复制，由共价闭合环状双螺旋DNA分子所构成的遗传因子。其相对分子质量较细菌染色体小，每个菌体内有一个或几个，也可能有很多个质粒。 4. 选择培养基：根据所要筛选微生物的特殊营养需求而配制的，只适合目标微生物的生长繁殖而不利于其他微生物生长的培养基。
微生物类群介绍 微生物（Microorganism/Microbe） 是指一群个体微小、结构简单、低等生物的统称。它不是一个分类学上的专门名词，而是指所有肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。虽然对于微生物的认识晚于植物和动物，但是人们和微生物打交道已有8000多 年的历史了，当时人们是不自觉地利用微生物，如大家熟知的发面和酿酒。在生活中，人们与微生物的关系非常密切，如用谷物、大豆可以做出面包、酒精和酱油；通过发酵可以大量生产抗生素、味精和酶制剂；农业上利用豆科植物轮作可以提高肥力；衣服发
霉、食品腐败；人类和其他动植物传染病的流行等，所有这些都是微生物作用的结果。 说到微生物的类群，首先要知道生物的界级划分研究简史。生物的分界是随着科学发展的水平在不断地改变及深化的。在林奈的时代，对生物的观察仅限于肉眼所能看到的特征及区别，那时生物仅分为植物界（Plantae）与动物界（Animalia）两大界。到19世纪中叶，霍洛（Hogg，1860）等提出了生物的三界系统，即原生生物界（Protista）、植物界与动物界，其中原生生物界包括单细胞动物、藻类及真菌，他们的三界系统
反映了单细胞生物与多细胞生物的 区别。1959年魏塔克（Whittaker）提出了四界系统，即原生生物界、真菌界（Fungi）、植物界与动物界。其中将原生生物界的真菌独立成为 了一界。1974年李代尔（Leedale）又提出了原核界（Monera），其中包含细菌及蓝细菌，仍为四界系统，即原核界、植物界、真菌界及动物界。直到1969年，魏塔克将分类系统进行了完善，提出了五界系统：真菌界、原核生物界、原生生物界、植物界、动物界。按照从高到低的顺序，依次有界、门、纲、目、科、属、种7个单元。
季污染控制微生物试题C 一、填空（0.5分×30） 1.微生物一词并非（生物分类学上）的专用名词，而是指所有（形体微小）、（结构较为简单），一般须借助光学显微镜甚至电子显微镜才能观察到的低等生物的（统称），包括病毒、（原核生物）、（真菌）、（单细胞藻类）以及（原生动物）和（后生动物）等。 2. 无论是动、植物病毒或噬菌体，其增殖过程基本相同，大致分为（吸附）、（侵入和脱壳）、（生物合成）和（装配与释放）等连续几个阶段。 3. 微生物数量的测定可以采用：显微镜计数法、（比浊）法、（平板菌落计数）法和（薄膜过滤计数）法等。 4. 基因重组的主要方式包括（转化）、（接合）和（转导）。 5. 有机废水的厌氧生物处理，主要依靠（产酸发酵菌群）、（产氢产乙酸菌群）、（同型产乙酸菌群）和（产甲烷菌群）等四大类群微生物作用完成的。 6. 组成RNA的碱基包括（A ）、（G ）、（C ）和（U ）等四种。 7. 有机废水厌氧生物处理中，常见的产酸发酵类型有（乙醇型发酵）、（丙酸型发酵）和（丁酸型发酵）等三种。 二、术语解释（2分×10） 1. 异染粒：又称捩转菌素，主要成分是多聚偏磷酸盐，具有较强的嗜碱性或嗜中性。因为它被蓝色染料(如甲烯蓝)染色后不呈蓝色而呈紫红色而得名。一般认为它可能是磷源和能源性贮藏物。 2. 菌胶团：产生荚膜与粘液层的细菌，相互粘连在一起，形成具有一定形态的细菌集团，具有共同的粘液层，内含许多细菌。 3.培养基：由人工配制的，供给微生物生长繁殖或积累代谢产物所用的营养基质，叫做培养基。它是科学研究、生产微生物制品及应用等方面的基础，由于各种微生物所需要的营养物质不同，所以培养基的种类也很多。为此，在配制培养基时需要针对微生物不同的营养类型，满足特定的生长条件，并根据不同的培养目的，选择适宜的培养基。 4. 固有酶与适应酶：微生物生活过程中分泌的，与其作用底物存在与否无关的酶称为固有酶；一般情况下并不表达，只有在一定条件刺激下才会分泌的酶称为适应酶。 5. 呼吸链：在有氧呼吸中，被氧化有机物脱下的质子和电子并不直接传递给氧，而是在多种酶及辅因子的作用下，依次传递，最终传递给氧原子，生成水，能量是在这一电子传递过程中产生的。电子传递体系又称呼吸链，辅酶NADH和FADH2为电子传递体，参与电子传递的各种辅因子称为电子中间传递体，O2最终电子受体。 6.生态位：生态位是指每个种群受群落中生态因子限定的空间地位及其功能作用。 7. 性状：由遗传物质决定，生物体所表现出的，可以观测到的，可以用物理、化学方法测定的性质和形状。 8．水体自净：水体自净是指水体在接纳了一定量的污染物后，通过物理的、化学的和水生生物(微生物、动物和植物)等因素的综合作用下得到净化，水质恢复到受污染前的水平和状态的现象。 9．Hfr菌株：雄性细菌含有F因子，并且根据F因子在细菌细胞中的存在状态不同而有不同的名称。有些细菌含有游离的F因子,这些细菌称为F+菌株；另一些细菌所含F因子可以开环，并整合在细胞核的DNA上，由于这种雄性菌株与F-菌株的重组率极高，所以称为高频重组菌株，即Hfr菌株。
一、 二、名词解释（2分×10） 1.氧化磷酸化 2.孢子与孢芽 3.裂解量 4.无氧呼吸 5.载体蛋白 6.生态演替 7.基因工程 8.生态幅 9.呼吸与发酵 10.同型分裂 二、填空（20×1） 1.放线菌的孢子繁殖方式有（）（） （） 2.病毒的化学组成（）（） 3.微生物在自然界碳素循环中的作用是（）和 （） 4.米门方程的推导依据是（） 5.乳糖蛋白胨培养基中甲酚紫的作用是（） 6.EMP途径的产物是（）（）（） 7.根据碳源的不同将微生物分为（）（）
8. （）（）和结构基因构成构成操纵子 9．根据（）（）（）实验证明核酸是遗传物质 三、单选（） 1.细菌形成荚膜在（）期（答案C.稳定期） 2.检验水中病毒的方法（）（答案B.蚀斑检 验法） 3.产甲烷菌能将哪些物质转化为甲烷（答案B.一碳有 机物） 4.使蛋白质变性导致酶促反应速度下降的因素是 C.温度 D.抑制剂 5.下列哪项不是芽胞的作用 A．繁殖B.休眠 四．简答(10×5) 1.原核细胞和真核细胞的区别 2.底物浓度与酶促反应关系 3.为何湿热灭菌效果优于干热灭菌？ 4.解释由于反硝化作用引起二沉池沉淀效果变差的原因 5.铁细菌的营养方式，在输水管线中的危害 6. 赤潮的微生物学原理
7.细胞壁的化学组成及生理功能 8.配置培养基基本原则 9.举例说明在废水生化处理系统中的竞争关系 10.诱变育种主要过程 五．实验 1．利用比浊法及活菌计数法均能测得细菌的生长曲线，两者有何异同 2.怎样筛选出目标微生物 六．论述10 描述活性污泥中微生物的演替规律和指导作用 七．综述25 分析A/O工艺中有机污染物在系统内的转化规律 08真题手写版（根据老师上课记录）
第一章绪论 1、何谓微生物？微生物有何特点？ 微生物一词并非生物分类学上的专用名词，而是指所有形体微小单细胞的，或个体结构较为简单的多细胞，甚至无细胞，必须借助光学显微镜甚至电子显微镜才能观察到的低等生物的通称。微生物类群十分复杂，其中包括不具备细胞结构的病毒，单细胞的细菌和蓝细菌，属于真菌的酵母菌和霉菌，单细胞藻类和原生动物、后生动物等。 微生物具有个体微小，分布广泛；种类繁多，代谢旺盛；繁殖快速，易于培养；容易变异，利于应用特点。 2、何谓原核微生物和真核微生物？二者有何区别？ 凡是细胞核发育不完全，仅有一个核物质高度集中的核区，不具核膜，核物质裸露，与细胞质没有明显的界限，没有分化的特异细胞器，只有膜体系的不规则泡沫结构，不进行有丝分裂的细胞成为原核细胞，由原核细胞构成为微生物称为原核微生物。反之，凡是具有发育完好的细胞核，有核膜，有高度分化的特异细胞器（如线粒体、叶绿体、高尔基体），进行有丝分裂的细胞成为真核细胞，由真核细胞构成的微生物称为真核微生物。 3、概述微生物在环境污染控制中的作用。 a、在给水工程中的应用 水中往往存在致突变污染物，这些物质可以利用微生物检测出来。另外，藻类大量滋生时会堵塞给水厂的滤池，并会使水中带有异味和增加水的色度和浊度等，因此，在给水工程中应尽可能出去这些微生物，以提供符合标准的生活饮用水和工业生产用水。同时，也可利用工程菌形成固定化生物活性炭，来消除水中的微量有机物；利用微生物生产生物絮凝剂，取代无机和有机絮凝剂，以进一步提高水质、 b、在排水工程中的应用 可以利用各种微生物的分解作用，对废水中的污染物进行降解和转化，使之矿化且使水中的重金属得以适当转化。另外，在受污染水体的生物修复技术中，微生物起着极为重要的作用。 c、在土壤净化中的作用
植物相关细菌群体感应信号分子的检测 *刘晓光1, 2, 高克祥2, 高吉刚3 1江苏大学生命科学研究院镇江（212013） 2山东农业大学植保学院泰安（271018） 3 山东农业大学化学与材料科学学院泰安（271018) E-mail：xgliu66@https://www.doczj.com/doc/d46628695.html, 摘要：许多革蓝氏阴性细菌以种群密度依赖的方式调控基因的表达，这种称为群体感应的调控机制主要基于细菌产生的可扩散的小分子信号物质——酰基高丝氨酸内酯（AHLs）。通过组合使用灵敏度不同的系列报告菌株，基于琼脂平板的生物检测及反相C18薄层层析（TLC）分析，比较研究了3株植物固氮内生菌Herbaspirillum spp.和2株植物根际促生菌Serratia plymuthica产生AHLs的模式。结果显示了植物细菌AHLs的多样性。3株固氮内生菌Herbaspirillum spp.和S. plymuthica菌株IC1270都与小麦根际生防细菌Pseudomonas fluorescens 2-79具有相似的模式，产生OH-取代基的AHLs。而2个S. plymuthica 菌株，从葡萄根际分离的IC1270和从油菜根际分离的菌株HRO-C48则产生完全不同类型的AHLs。菌株IC1270主要产生OH-取代基的HHHL，HOHL， HRO-C48却产生无取代基的BHL , HHL 和优势种O-取代基的OHHL。由此说明不同属的植物细菌可能具有相似的AHLs模式；相反，即使生态位相似的同种植物根际细菌S. plymuthica的不同菌株间，却可能产生完全不同类型的AHLs，似乎与亲缘关系无关。 关键词：Serratia plymuthica；Herbaspirillum spp.; 群体感应系统；酰基高丝氨酸内酯 中图分类号：Q933 1.引言 在革蓝氏阴性细菌中，有3个重要的基因表达的全局调控系统，即GacA/GacS双因子信号转导系统（GacA/GacS two-component system），胁迫和稳定期的δ因子RpoS，以及细胞种群密度依赖的Quorum-sensing（QS）系统。它们控制植物相关细菌的许多表型，如植物生长促进能力、致病性、次生代谢物的产生、生物膜形成以及蛋白和酶的分泌等[1]。酰基高丝氨酸内脂N-acyl homoserine lactones（AHLs/acyl-HSLs）是许多革兰氏阴性细菌都产生的群体感应信号分子，它作为自身诱导物（autoinducer）在革蓝氏阴性细菌中介导以种群密度依赖和生长发育阶段(指数生长后期和稳定期)依赖方式的基因表达调控。植物相关细菌的QS系统调控微生物种群之间以及与寄主植物之间的相互作用，包括共生、致病性、抗生素及胞外酶的产生等特性，因此在农业、医学、环境保护等领域具有广阔的应用前景。而且AHLs在自然界中作为全局调控的信号分子，通常是在GacA/GacS两组分信号转导系统的控制之下。许多研究已证实这3个全局调控系统之间存在着密切联系，交互作用（cross-talk）。尽管有些结果相互矛盾，依然可以推测这种调控的级联反应在细菌中可能是一个普遍的现象[2, 3]。 本文通过组合使用多种系列灵敏度不同的AHLs信号分子的报告菌株或质粒，以植物根基金项目：本课题受国家自然科学基金（项目编号：30370954，30670030）资助
第一章 1.微生物：肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。 2.按照细胞核结构和细胞器分化程度不同，全部生物可分为原核生物和真核生物. 3.凡是细胞核发育不完全，不具核模，核物质裸露，与细胞质没有明显的界限，没有分化的特异细胞器，只有膜体系的不规则泡沫结构，进行二分裂的细胞称为原核细胞. 4.凡是具有发育完好的细胞核，有核膜(使细胞核与细胞质具有明显的界限)，有高度分化的特异细胞器(如线粒体、叶绿体、高尔基体等)，进行有丝分裂的细胞称为真核细胞. 5.微生物分类就是把各种微生物按照它们的亲缘关系分群归类，编排成系统。 6.每一种微生物的学名都依据属和种而命名。属名+种名(+命名者等) 7.微生物分类是在对大量微生物进行观察、分析和描述的基础上，以它们的形态、结构、生理生化反应和遗传性等特征的异同为依据，将微生物分类。 8.微生物的特点：个体微小，分布广泛；种类繁多，代谢旺盛；繁殖快速，易于培养；容易变异，利于应用 9.微生物学是研究微生物及其生命活动规律的一门基础学科。 10.研究的内容涉及到微生物的形态结构、分类鉴定、生理生化、生长繁殖、遗传变异、生态分布，微生物各类群之间、微生物与其他生物之间及微生物与环境之间的相互作用、相互影响的复杂关系等，目的是为了更好地认识、利用、控制和改造微生物，造福于人类。 11.污染控制微生物学是环境污染治理与微生物学相结合而产生发展起来的一门边缘性学科。 12.污染控制微生物学是研究污染控制过程中涉及到的微生物，并分析其生命活动规律的一门应用学科。 13.微生物学的真正发展大致经过三个阶段：形态学、生理学和分子生物学 第二章 1.原核微生物主要指细菌、放线菌和蓝细菌 2.细菌多数在1μm左右，在一定的环境条件下，有相对恒定的形态和结构。 3.细菌基本形态有三种：球状、杆状和螺旋状。在自然界中杆菌最常见，球菌次之，螺 旋状最少。丝状杆菌可引起活性污泥膨胀。 4.原生质体：细胞膜、细胞质、核质体、内含物 5.细胞壁构成的主要成分是肽聚糖、脂类和蛋白质。根据细胞壁成分和结构的不同，将细菌分为革兰氏阳性(简称G+)细菌和革兰氏阴性(简称G-)细菌。 6.形态特征是鉴别菌种的主要依据之一。 7.革兰氏染色法是细胞形态观察最常用的复染色方法。 8.由于细菌的等电点较低，在2－5之间，原生质体带负电，易与阳离子染料相结合，因此细菌染色常用碱性染料。 9.染色步骤：先用碱性染料结晶紫染色，再加碘液媒染，然后酒精脱色，最后用复染液（沙黄或番红）复染。能够固定结晶紫与碘的复合物而不被酒精脱色，仍呈现紫色，称为革兰氏阳性菌，能被酒精脱色，经复染着色，菌体呈现红色，称为革兰氏阴性菌。 10.细菌的染色反应和细胞壁结构和组成有关。 11.革兰氏染色的机理：细胞壁的结构和组成与革兰氏染色反应有关。在染色过程中，细胞内形成了深紫色的结晶紫-碘的复合物。由于G+细菌细胞壁较厚，特别是肽聚糖含量较高，网格结构紧密，脂类含量又低，当被酒精脱色时，引起了细胞壁肽聚糖层网状结构孔径缩小以至关闭，从而阻止了不溶性结晶紫-碘的复合物的浸出，故菌体仍呈深紫色；相反，G-
哈工大 2003 年 春 季学期 污染控制微生物学 试卷 （A ） 一、 填空（0.5分×30） 1. 微生物一词并非（ ）的专用名词，而是指所有（ ）、（ ），一般须借助光学显微镜甚至电子显微镜才能观察到的低等生物的（ ），包括病毒、（ ）、（ ）、（ ）以及（ ）和（ ）等。 2. 无论是动、植物病毒或噬菌体，其增殖过程基本相同，大致分为（ ）、（ ）、（ ）、和（ ）等连续几个阶段。 3. 微生物数量的测定可以采用：显微镜计数法、（ ）法、（ ）法和（ ）法等。 4. 原核微生物基因重组的主要方式包括（ ）、（ ）和（ ）。 5. 有机废水的厌氧生物处理，主要依靠（ ）、（ ）、
（）和（）等四大类群微生物作用完成的。
试题：班号：姓名： 6. 组成RNA的碱基包括（）、（）、（）和（）等四种。 7. 有机废水厌氧生物处理中，常见的产酸发酵类型有（）、（）和（）等三种。 二、术语解释（2分×10） 1. 异染粒 2. 菌胶团 3. 培养基 4. 固有酶与适应酶 5. 呼吸链 6. 生态位 7. 性状 8. 生物修复技术 9. Hfr菌株
10. 硝化作用和反硝化作用 三、问答题（5分×6） 1.微生物的基本特点有哪些？。 2. 在自然环境中，细菌为何带负电？ 3. 微生物的营养类型及其比较。 4. 无氧呼吸与发酵的区别。 5. 分子遗传学的中心法则。 6. 厌氧生物处理工程中，非产甲烷菌和产甲烷菌的相互关系。 四、实验题（8分×2） 1.大肠杆菌和产气肠杆菌都属正常肠道细菌，请设计试验对两者进行区别鉴定。
2.说明革兰氏染色的基本原理及主要操作步骤。 五、综合题（10分） 根据微生物群体生长规律，采取怎样的措施可以缩短污泥接种后的迟缓期，以加速废水生物处理系统的启动过程。 六、讨论题（9分） 谈谈水体自净对污水处理的指导意义。 2003年秋季污染控制微生物试题A答案 二、填空（0.5分×30） 1. 微生物一词并非（生物分类学上）的专用名词，而是指所有（形体微小）、（结构较为简单），一般须借助光学显微镜甚至电子显微镜才能观察到的低等生物的（统称），包括病毒、（原核生物）、（真菌）、（单细胞藻类）以及（原生动物）和（后生动物）等。 2. 无论是动、植物病毒或噬菌体，其增殖过程基本相同，大致分为（吸附）、（侵入和脱壳）、（生物合成）和（装配与释放）等连续几个阶段。 3. 微生物数量的测定可以采用：显微镜计数法、（比浊）法、（平板菌落计数）法和（薄膜过滤计
群体感应 1.群体感应概念 细菌分泌一种或者几种小分子量的化学信号分子促进细菌个体间相互交流，协调群体行为，该现象称为群体感应( quorum sensing ，QS)。 细菌利用信号分子感知周围环境中自身或其他细菌的细胞群体密度的变化，并且信号分子随着群体密度的增加而增加，当群体密度达到一定阈值时，信号分子将启动菌体中特定基因的表达，改变和协调细胞之间的行为，呈现某种生理特性，从而实现单个细菌无法完成的某些生理功能和调节机制。 20世纪70年代，QS系统首先是在海洋细菌费氏弧菌(Vibrio fiscberi)中发现的，V. fiscberi 可以与某些海生动物共生，宿主利用其发出的光捕获食物、躲避天敌以及寻觅配偶，而V.fiscberi也获得了一个营养丰富的生存环境。 对细菌的QS 研究始于20 世纪90 年代初. 从已有的研究成果看: 其一, 大部分细菌一般均有两套群体感应系统, 一套用于种内信息交流, 一套用于种间信息交流; 其二, QS 对细菌的许多生理功能都有调节作用, 如生物发光、毒素的产生、质粒的转移、根瘤菌的结瘤、抗生素的合成, 等等. 群体感应参与调控细菌的多种生活习性以及各种生理过程,如生物发光、质粒的接合转移、生物膜与孢子形成、细胞分化、运动性、胞外多糖形成等[ 1 , 3],尤其致病菌的毒力因子的诱导、细菌与真核生物的共生、抗生素与细菌素合成等与人类关系密切的细菌生理特性相关。因此, 细菌QS系统研究,深受医学、生物工程、农业和环境工程、食品科学等领域研究者广泛关注。当前, 对致病菌的QS系统及以其为靶点的新型疗法和抗菌药物研究、根瘤菌QS系统及其在根瘤菌与植物互作中的作用研究、植物病原菌QS系统及寻找生物技术防治细菌病害的新靶点研究较为深入 意义：一方面有助于人们了解单细胞微生物的信息交流与行为特性的关系，建立起化学信号物质和生理行为之间的联系；另一方面则可通过人为地干扰或促进微生物的群体感应系统从而调控其某种功能，以达成其在实际意义上的应用。 2.群体感应分类 2.1革兰氏阴性菌的群体感应系统
活性污泥中主要微生物类群的特征及作用 活性污泥是活性污泥处理系统中的主体作用物质，在废水生物处理中，不论采用何种方法处理构筑物及何种工艺流程，都是通过处理系统中活性污泥或生物膜微生物的新陈代谢的作用，使活性污泥具有将有机污染物转化为稳定无机物的活力，在有氧的条件下，将废水中的有机物氧化分解为无机物，从而达到废水净化的目的。处理后出水水质的好坏同组成活性污泥的微生物的种类、数量及其活性有。 活性污泥是由细菌、微型动物为主的微生物与悬浮物质、胶体物质混杂在一起所形成的茶褐色的絮凝体。其中的微生物主要由细菌组成，细菌主要有菌胶团细菌和丝状菌，数量可占污泥中微生物总量的90%～95%左右，细菌在有机废水的处理中起着最重要的作用，如在A-B活性污泥法中，A段在很高的负荷下运行，停留时间、污泥龄期都相对较短，在这种情况下，较高级的真核微生物无法生存，只有某些短世代的原核细菌才能适应、生存并得以生长繁殖。此外，活性污泥中还有原生动物和后生动物等微型动物。 在处理生活污水的活性污泥中存在大量的原生动物和部分微型后生动物，通过辨别认定其种属，据此可以判别处理水质的优劣，因此将微型动物称为活性污泥系统中的指示生物。 1微生物类群的分类 1.1肉足虫 其细胞质可伸缩变动而形成伪足，作为运动和摄食的胞器，常见的有变形虫和表壳虫。 1.2鞭毛虫 具有一根或一根以上的鞭毛，鞭毛是其运动器官，常见的有滴虫、聚屋滴虫、眼虫、豆形虫和粗袋鞭虫等。 1.3纤毛虫
动物周身表面或部分表面具有纤毛，作为运动或摄食的工具，具有胞口、口围等吞噬和消化的器官，分固着型和游泳型两种，常见的游泳型有漫游虫、草履虫、管叶虫、斜管虫等;常见的固着型有钟虫、盖虫、独缩虫、聚缩虫、吸管虫、累枝虫等。 1.4后生动物 在活性污泥系统中是不经常出现的，在出水水质较好或较稳定时出现，常见的有轮虫、红斑票贝体虫等。根据污水厂两年的镜检记录，红斑票贝体虫平时几乎不见，多在8-9月份出现，这时水温较高，一般为22℃左右。 2代谢捕食方式 ①通过体表吸收溶解性的有机物，吞噬废水中细小的有机物颗粒，经过新陈代谢作用，然后使之氧化分解为稳定的无机物。 ②捕食细菌或游离细菌，维持活性污泥系统中生态平衡及改善出水水质。通过捕食细菌，能促进细菌的生长，使细菌的生长能维持在对数生长期，防止种群的衰老，提高细菌的活力;由于游离细菌密度小，较难沉淀，易被出水带出而影响水质，微型动物吞噬游离可大大改善水质。 ③固着型纤毛虫及吸管虫还可分泌粘液，使之附着在絮凝体上生长;对悬浮颗粒及细菌均有吸附作用，从而有利于菌胶团及絮体的形成。 3提高出水水质方面的作用 ①通过某些原生动物的分泌物，在沉降过程中促进游离细菌的絮凝作用，提高细菌的沉降效率和去除率。 ②原生动物捕食细菌，提高细菌活动能力，提高对可溶性有机物的摄取能力。 ③原生动物和细菌一起，共同摄食病原微生物。 4在活性污泥系统中的指示作用
哈工大历年真题总结 一、名词解释 1.共代谢： 2.双名法：由两个名字组成的命名方法，即一个物种的名字，是由它所属的属名后面 加上种名形容词所组成的（属名+种名） 3.菌落：将细菌接种在固体培养基中，由于单个细胞在局部大量繁殖，形成肉眼可见 的细菌群体，称为菌落 4.细菌的特殊结构：指部分细菌所具有的可变结构,包括：荚膜、鞭毛、芽孢 5.菌胶团：产生荚膜与粘液层的细菌，相互粘连在一起，形成具有一定形态的细菌集 团，具有共同的粘液层，内含许多细菌 6.中体：细菌细胞质中的主要膜状结构，由细胞膜以最大量的褶皱内陷而形成的层状、 管状或囊状物，常伸入细胞内 7.二次生长曲线：当大肠杆菌在含有葡萄糖和乳糖的液体培养基中生长时，大肠杆菌 首先利用葡萄糖而不利用乳糖，只有当葡萄糖被利用完后才开始利用乳糖，大肠杆 菌呈现二次生长现象 8.溶原性：温和噬菌体侵染细菌后并不立即使细菌发生裂解，而是将其核酸整合在细 菌染色质体的一定位置上，并与细菌的染色质体一道复制，随着细菌的分裂传给每 个子代细胞；含有温和噬菌体的细菌的这一特性称为溶原性 9.温和型噬菌体：当噬菌体侵染细菌后细菌不发生裂解而能继续生长繁殖，这种噬菌 体称为温和型噬菌体。含有这种温和性噬菌体的细胞称为溶源性细菌 10.裂解量：每个噬菌体增殖后释放出新的噬菌体的平均数称为裂解量 11.营养缺陷型：丧失合成一种或多种生长因子能力的微生物 12.生态位分离：是指在稳定的环境中，不同种群在同一生境长期共存时，必须有各自 不同的（实际）生态位，从而避免种群间长期而又激烈的竞争，并有利于每 个种群在生境内进行有序的和有效的生存。 13.生物修复：有毒有害的有机污染物不仅(由于工业废水的排放)存在于地表水中，而 且更广泛地存在于土壤、地下水和海洋中。利用生物特别是微生物催化降解有机污 染物，从而去除或消除环境污染的一个受控或自发进行的过程，称为生物修复 14.生长因子：些微生物不能从普通的碳源、氮源物质合成，而只有通过外源供给才能 满足机体生长需要的有机物质，称为生长因子 15.生态平衡：生态系统发展到成熟的阶段，它的结构和功能，包括生物种类的组成， 各个种群的数量比例以及能量的和物质的输入、输出都处于相对稳定的状态，这种 状态称为生态平衡 16.CoA: 具巯基的辅酶，作为酰基的载体 17.质粒：质粒是指独立于染色体外，存在于细胞质中，能自我复制，由共价闭合环状 双螺旋DNA分子所构成的遗传因子。其相对分子质量较细菌染色体小，每个菌体内 有一个或几个，也可能有很多个质粒 18.糖酵解：微生物在厌氧条件下，通过氧化还原反应（脱氢）将葡萄糖分解为丙酮酸， 并产生可供机体生长的能量的过程，称为糖酵途径 19.无氧呼吸：以NO3-、SO4-、CO3-等为最终电子受体的氧化还原过程 有氧呼吸：以氧气为最终电子受体的氧化还原过程 发酵：呼吸是指底物在氧化过程中脱下的氢或电子不是直接与中间代谢产物相偶联，
哈工大2004 年秋季学期 污染控制微生物学试题 一、填空（0.5分×40） 1. 微生物一词并非（）的专用名词，而是指所有（）、（），一般须借助光学显微镜甚至电子显微镜才能观察到的低等生物的（），包括病毒、（）、（）、（）以及（）和（）等。这些微小生物通常不能被（）直接分辨，而必须借助（）甚至（）才能观察到。 2. 微生物具有多种特点，主要体现在（）、（）、（）、（）、（）等方面。 3. 无论是动、植物病毒或噬菌体，其增殖过程基本相同，大致分为（）、（）、（）、（）等一系列的连续步骤。
4. 细菌细胞的基本结构主要包括（）、（）、（）、（）及（）等。有些细菌还可能有（）、（）和（）等特殊结构。 5. 革兰氏染色法为（）染色法，其主要步骤是：先用碱性染料（）染色，再加（）媒染，然后用（）脱色，最后以（）复染。凡呈紫色者，称为（）细菌；凡呈红色者，称为（）细菌。 6. 有机废水的厌氧生物处理，主要依靠（）、（）、（）和（）等四大类群微生物作用完成的。 二、术语解释（3分×8） 1. 温和性噬菌体
2. 菌胶团 3.质粒 4. 选择培养基 5. 生态位 6. 水体自净7．限制因子
8．生物修复 三、简答（5分×6） 1. 细菌细胞膜的主要生理功能有哪些？ 2. 微生物的营养类型是根据什么划分的？各有什么特点？
3. 试述无氧呼吸与发酵的区别。 4. 废水生物处理的基本原理是什么？ 5. 试述有机废水生物脱氮处理的机理。
6．试述生物虑池的工作原理。 四、实验（6分） 水中细菌总数的测定是进行水质检验的必要项目之一。请说明检测水中细菌总数的倍比稀释法的基本原理和基本操作步骤。
【摘要】注射剂是一种直接进入人体血液循环而发生作用的药品，为此要严格控制注射液微生物污染。因此本文从注射剂选择适应的灭菌参数、f0值灭菌应用、灭菌效果验证方面进行探究注射剂生产过程中微生物的质量风险控制,以此保障灭菌过程均匀完善，提高注射液的安全性、稳定性、有效性。在探究后总结，注射剂生产过程中微生物的质量风险控制主要还是保证生产过程中应用适当的灭菌工艺，并且严格执行gmp管理，以此保障良好的无菌生产体系，这就要求注射液在生产的各个环节应采取有效措施严格控制微生物污染，确保无菌安全，避免微生物风险，在生产过程中尽可能的完全灭菌，以此保证注射液产品的无菌安全。 【关键词】注射剂；生产过程；微生物；质量风险控制 注射剂是一种直接进入人体血液循环而发生作用的药品，为此要严格控制注射液微生物污染，就显得尤为重要。因此全部生产过程中的灭菌成为保障该注射液药品质量安全的关键工序，同时灭菌过程均匀完善程度直接关系到注射液的安全性、稳定性、有效性[1]。 1注射剂选择适应的灭菌参数 要根据药物的理化性质、稳定性和生物学特性及临床用药的顺应性来保证制剂无菌水平。一般湿热灭菌条件采用121℃×15min、121℃×30min、116℃×40min的程序，以此必须保证邪君后的微生物存活率≤10-6，即没100万个注射剂中存活微生物不得超过1个，以此保证灭菌后制剂的无菌保证水平。 注射剂生产过程中，为保证灭菌效果，应在密闭的制剂灭菌容器内，进行加压高温灭菌，若压力和灭菌时间不当，则不能有效杀死所有芽孢和细菌繁殖体。对于含糖类注射剂和氨基酸类营养性注射液，高温灭菌条件会影响药物产生不稳定性，因此注射剂选择适应的灭菌参数时，要保障高温灭菌的安全性，也要保障注射剂的稳定性，以此能够即可有效去除微生物，确保药剂治疗的稳定性。若灭菌方式方法不当，灭菌温度低、灭菌时间短，达不到灭菌目的；灭菌温度高、时间长，注射剂会产生杂质。因此，要正确选择适当的灭菌温度，保证注射剂质量[2]。 2 f0值灭菌应用 f0值是灭菌周期验证中所应用的术语。高温高压灭菌程序中，121℃下的等效灭菌时间，是标准灭菌时间，是一个可靠的灭菌参数。f0值的计算直接作用于生产灭菌过程的设计和灭菌效果。通常包装材料性能等因素会引起不同的升温速度，包括容器大小、形状及热穿透系数；灭菌产品溶液的粘稠度和容器的填充量；容器在灭菌器中的数量和分布。溶蚀由于f0值会随上述因素温度变化而呈现出的指数也不同，也就是说温度即使有很小的差别也会影响f0值，由此测定灭菌物的实际温度有利于灭菌器和灭菌技术的验证。 3灭菌效果验证 为控制注射剂生产过程中微生物的质量风险，必须进行全效可行的灭菌效果验证，高温高压灭菌时，需要对灭菌器的空载、满载分布进行试验、热穿透试验、生物指标试剂挑战试验，同时，再采用蒸汽灭菌生物指示剂进行验证。 3.1空载、满载分布试验空载、满载分布试验是为了检查灭菌器内腔的热分布情况，检查灭菌器内腔是否有冷点，达不到高温高压灭菌的目的。试验中，将温度探头均匀分布在灭菌器内腔各处，再进行灭菌操作，操作过程中，记录各个温度点[3]。 3.2热穿透试验热穿透试验是在热分布基础之上，确定灭菌器内腔中的“最低温度点”，检查该点f0值是否在无菌保证值之上。试验中，按照注射液的工艺灭菌温度进行操作，检测出“最低温度点”，将此点与注射液接触，监测其温度，记录数据作为热穿透试验数据。 3.3生物指示剂试验生物指示剂能够有效确认监控的灭菌效果。根据热分布试验和热穿透试验的结果，通过生物指示剂试验，对灭菌器内腔中的“最低温度点”进行验证，以此检查确认灭菌效果。通过灭菌器内腔中的“最低温度点”进行灭菌，灭菌后再进行无菌过滤，
第一章 √微生物的特点及其特点在水处理过程中的应用 1.个体小，形态简单； 2.分布广，种类多； 3.繁殖快，数量大； 4.比值大，代谢强； 5.适应强，易变异。 ·微生物（Microbe Microorganism）:一类形体微小，结构简单，必须借助显微镜才能看清它们面目的生物，包括原核微生物，真核微生物，病毒和类病毒。 第二章 为什么说微生物的降解方法有很大的潜力 1.微生物自身特点 极其多样的代谢类型，各种有机物可被利用；有很强的变异性。 2.共代谢作用与生物降解性 ·共代谢作用（Co-metabolism）：指微生物在有它可利用的碳源存在时，对它原来不能利用的物质也可能分解代谢的现象。 共代谢作用存在情况： 靠降解其它有机物提供能源和碳源；或通过微生物的协同作用；由其它物质的诱导产生相互的酶系，发生共代谢作用。 3.污染物的化学结构与其生物降解的关系： 烃类化合物，对于相同碳原子数，一般是链烃比环烃易降解，直链烃比支链烃易降解，不饱和烃比饱和烃易降解；主要分子链上碳元素被其它元素取代时；碳氢键；官能团的性质及数量；分子量大小对其生物降解性影响也比较大。 生物降解性常见的测试方法 1.测B/C ：表示废水的可生化处理的程度。 B/C>0.45，生化性较好；B/C>0.3，可生化；B/C<0.3，较难生化。 B/C>0.5，多直接采用生化处理；对开B/C较低的废水往往采用一些物化预处理方法，提高废水的可生化性后，再采用生物方法处理。 2.测COD30 取一定量的待测废水，预处理后，一般PH 6~8，投加少量活性污泥引入菌种，连续曝气；通过比较废水起始CODcr与第30天后CODcr（COD30），可用来推测废水的可生化性和估计用生化法处理可得到的最高COD去除率。 废水处理上很少使用这种方法，测定时间长。 3.测定生物氧化率 用训化好的活性污泥作为测定用的微生物，将一定量单一的被测有机物作为底物，也就是作为活性污泥中微生物的唯一营养源，在瓦氏呼吸仪上检测其耗氧量，与该底物完全氧化的理论需养量之比，即为被测有机物的生物氧化率（%）。 4.测呼吸线 以单一的有机物为基质、营养物，在活性污泥中微生物的作用于该有机物的过程中，测其耗氧量与时间的变化曲线，可以得到的一条特征曲线，即生化呼吸线。 5.测定相对耗氧速率曲线 耗氧速率，就是单位生物量在单位时间内的耗氧量。 在提供相同的活性污泥量，也就是微生物种类、数量一定，比较不同浓度下有机物作基质、营养物的条件下，微生物在单位时间内的耗氧量，这样可作出相对耗氧速率曲线。 √相对耗氧速率曲线（各种曲线所代表的意思和含有的信息，物质推出曲线，曲线推出物质）
《食品微生物学》授课教案 第二章微生物主要类群的形态、结构和功能 教学目的： 1、掌握原核生物和真核生物的主要区别。 2、掌握细菌细胞的形态结构、化学组成和生理功能以及细菌的繁殖特点和菌落特征。 3、掌握酵母菌细胞的形态结构、菌落特征的繁殖方式。 4、掌握霉菌细胞的形态结构、繁殖特点、菌落特征和生活史类型。 5、掌握噬菌体的形态结构以及烈性噬菌体和温和性噬菌体的繁殖特点。 6、掌握噬菌体与工业发酵的关系。 教学重点： 1、掌握细菌细胞的形态结构、化学组成和生理功能以及细菌的繁殖特点和菌落特征。 2、革兰氏染色的步骤与机理 3、掌握噬菌体的形态结构以及烈性噬菌体和温和性噬菌体的繁殖特点。 教学难点： 1、革兰氏染色的步骤与机理 2、掌握噬菌体的形态结构以及烈性噬菌体和温和性噬菌体的繁殖特点。 教学课时：8学时 教学方法：多媒体教学 教学内容：
原核微生物与真核微生物的区别归纳起来概括以下几方面，即细胞核、细胞膜、核糖体、繁殖等。 非细胞型：病毒 细胞型：原核微生物：细菌、放线菌等，无明显核，也无核膜、核仁。真核微生物：酵母菌、霉菌，有明显核，有核膜、核仁。 一、细菌 （一）细菌的形态和大小 1、基本形态： 球菌 杆菌：是细菌中种类最多的。 螺旋菌 2、细菌大小： 显微测微尺 （二）细菌细胞结构 分为基本结构和特殊结构。基本结构是细胞不变部分，每个细胞都有，如细胞壁、膜、核。特殊结构是细胞可变部分，不是每个都有，如鞭毛、荚膜、芽孢。 1、基本结构 1）细胞壁：位于细胞表面，较坚硬，略具弹性结构。 功能：维持细胞外形；保护细胞免受机械损伤和渗透压危害；鞭毛运动支点；正常细胞分裂必需；一定的屏障作用；噬菌体受体位点所在。 另外与细菌的抗原性、致病性有关。 革兰氏染色：