耐热糖化酶的分离纯化及部分性质
- 格式:pdf
- 大小:434.57 KB
- 文档页数:3


糖化酶糖化酶Gluco-Amylase 又称葡萄糖淀粉酶(EC3.2.1.3),是以黑曲霉变异菌株经发酵制得的高效生物催化剂。
糖化酶能在常温条件下将淀粉分子的a-1.4和a-1.6糖苷键切开,而使淀粉转化为葡萄糖。
凡是以淀粉为原料又需糖化的生产过程,均可使用糖化酶以其提高淀粉糖化收率。
不含转苷酶将具有极高的转化率。
其系列产品有固体和液体两种类型,适用于淀粉糖、酒精、酿造、味精、葡萄糖、有机酸和抗菌素等工业.一、产品特性:1、作用方式:糖化酶又称葡萄糖淀粉酶,它能从淀粉分子的非还原性末端水解a—1,4葡萄糖苷糖,生产葡萄糖,也能缓慢水解a—1,6葡萄糖苷键,转化为葡萄糖. 2、热稳定性:在60℃下较为稳定,最适作用温度58—60℃. 3、最适作用:PH4.0—4.5 4、产品质量符合QB1805.2—93标准.二、产品规格. 项目指标固体糖化酶液体糖化酶外观黄褐色粉末褐色液体酶活力5万、10万、15万10万、15万水份(%)≤8 细度(目)80%通过40目酶存活率半年不低于标定酶活三个月不低于标定酶活三、酶活力定义:1克酶粉或1ml酶液于40℃PH4.6条件下,1小时分解可溶性淀粉产生1mg 葡萄糖的酶量为1个酶活单位。
四、应用参考酒精工业:原料经中温蒸煮冷却到58—60℃,加糖化酶,参考用量为80—200单位/克原料,保温30—60分钟,冷却至30℃左右发酵。
淀粉糖工业:原料经液化后,调PH到4.2—4.5,冷却到58—60℃,加糖化酶,参考用量为100—300单位/克原料,保温糖化24—48小时。
啤酒行业:生产“干啤酒”时,在糖化或发酵前加入糖化酶,可以提高发酵度。
酿造工业:在白酒、黄酒、曲酒等酒类生产中,以酶代曲,可以提高出酒率,也普遍用于食醋工业。
其他工业:在味精、抗菌素等其他工业应用时,淀粉液化后冷却到60℃,调PH4.2—4.5,加糖化酶。
参考用量100—300单位/克原料。
淀粉酶生物学中文名称:淀粉酶英文名称:Amylase定义:又称糖化酶,是指能使淀粉和糖原水解成糊精、麦芽糖和葡萄糖的酶的总称。
米曲霉耐热木聚糖酶纯化及酶学特性研究覃拥灵;何海燕【期刊名称】《工业微生物》【年(卷),期】2011(41)4【摘要】对米曲霉原始发酵液中耐热木聚糖酶进行纯化和酶学特性研究,利用甘蔗渣为碳源培养米曲霉,通过超滤和阴离子交换柱两步纯化得到木聚糖酶XynH1,分子量35.402 kDa,利用飞行时间质谱和SDS-PAGE分析,推断XynH1为Xylanase XynF1,分子量为35.402 kDa.XynH1属于糖苷水解酶家族10,酶活为442.2IU/mg,最适pH和温度分别为pH 6.0 和65 °C,80℃以下及pH 4.0~10.5范围内较稳定.%These studies were constrtuted of the investigalion of the purffication of a therm ostabje xylanase X ynH 1 using ferm entation broth of A spergillus oryzae. the brDth of sugar cane bagasse ferm entation of A . oryzae subjected to ultrafiltration and ion exchange chrom atography . The xylanase X ynH 1 was purified . Time-of-fjight mass spectrom etry coupled with SD S-PAGE analysis revealed that X ynH 1 was identcal to xylanase X ynF1 with a molecular weight of 35.402 kDa. Sequence analysis indicated that X ynH1 belonged to glycosyl hydrolases family 10 . The enzym atic activity of X ynH1 was measured 442 .2 IU /m g . X ynH1 was optim ally active at pH 6.0 and 65℃ , displaying stability with in pH 4.0~10 .5 and at tem perature below 80℃ .【总页数】6页(P77-82)【作者】覃拥灵;何海燕【作者单位】河池学院化学与生命科学系,广西宜州,546300;河池学院化学与生命科学系,广西宜州,546300【正文语种】中文【相关文献】1.一种新的镰刀菌 Q7-31木聚糖酶 Xyn9的分离纯化鉴定及酶学特性 [J], 赵联正;谢占玲;赵朋2.米曲霉产木聚糖酶酶学性质研究 [J], 王中兴3.耐热碱性纤维素酶分离纯化及酶学特性研究 [J], 陈伟钊;刘森林;邢苗4.新型耐热耐酸普鲁兰酶的分离纯化与酶学特性分析 [J], 高兆建;陈雪莲;王先凤;许祥;李宝林;焦魏;芦宁;尚业成5.新分离到的嗜热拟青霉中不含纤维素酶的耐热木聚糖酶的分离纯化及特性研究[J], Li;L;宫倩(译);胡又佳(校)因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
第四章酶的提取与分离纯化第四章酶的提取与分离纯化1、细胞破碎的目的、方法。
大多数酶都存在于细胞内部,为了获得细胞内的酶,首先要收集细胞并进行细胞破碎,使细胞的外层结构破坏,然后进行酶的提取与分离纯化。
机械法物理法化学法酶促破碎法(酶解)2 选择细胞破碎方法的依据。
(1)细胞的处理量:大规模用机械法,小规模用非机械法。
(2)细胞壁的强度与结构(3)目标产物对破碎条件的影响。
机械法考虑剪切力,酶法考虑对目标产物是否具有降解作用。
(4)破碎程度:高压匀浆法,细胞碎片细小,固液分离困难。
(5)提取分离的难易3. 酶抽提的目标及方法。
提取目标:a. 将目的酶最大限度地溶解出来。
b. 保持生物活性。
提取原则a. 相似相溶。
b. 远离等电点的pH值,溶解度增加。
4.三种离心方法(差速离心、密度梯度离心和等密度梯度离心)的特点。
(1)差速离心特点:用于分离大小和密度差异较大的颗粒。
(2)密度梯度离心特点::区带内的液相介质密度小于样品物质颗粒的密度。
适宜分离密度相近而大小不同的固相物质。
(3)等密度梯度离心特点:介质的密度梯度范围包括所有待分离物质的密度。
适于分离沉降系数相近,但密度不同的物质。
5. 酶的分离纯化过程中常用沉淀法的种类及原理。
种类:⑴中性盐沉淀(盐析法)基本原理(盐溶和盐析)向蛋白质或酶的水溶液中加入中性盐,可产生两种现象:1) 盐溶(salting in):低浓度的中性盐增加蛋白质的溶解度。
2) 盐析(salting out):高浓度的中性盐降低蛋白质的溶解度。
⑵有机溶剂沉淀利用酶等蛋白质在有机溶剂中的溶解度不同而使之分离的方法。
1. 沉淀机理降低溶液的介电常数部分地引起蛋白质脱水2. 常用有机溶剂丙酮>乙醇>甲醇,用量一般为酶液体积的2倍左右,终浓度为70%。
⑶选择性沉淀(热变性和酸碱变性)选择一定的条件使溶液中存在的某些杂蛋白质变性沉淀而不影响所需蛋白质的方法。
⑴热变性几乎所有的蛋白质都因加热变性而凝固,加热升高温度使杂蛋白变性沉淀而保留目的物在溶液中。