一、选择题
1．下列哪项符合生物药物的药理学特性？（ C ）
A．药理活性低 B．治疗针对性弱
C．毒副作用小、营养价值高 D．无生理副作用
2．关于人体来源药物特点的叙述，下列错误的是（ D ）
A．安全性好 B．效价高，疗效可靠
C．稳定性好 D．资源丰富
3．生物药物在生产制备中具有一些特殊的性质，下列哪项属于这一特性（ C ）
A．稳定性高 B．原料中的有效物质含量高
C．易腐败 D．注射用药，简单方便
1．当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度 （ C ）
A．增大 B. 减小 C. 先增大，后减小 D. 先减小，后增大
2．生物药物原料的保存可采取有机溶剂脱水法，常用的有机溶剂是（ D ）
A．甲醛 B．酒精 C．苯酚 D．丙酮
3．酶和细胞的固定化载体需符合一定条件，下列哪项是正确的？（ B ）
A．对酶碱无耐受性 B．不引起酶变性
C．对酶无耐受性 D．结构结实，无疏松孔
3．固定化酶属于（ B ） A．天然酶 B．修饰酶
C．天然酶或修饰酶 D．细胞产生的酶
4．固定化酶的最大特点是：（ A ）
A．既有生物催化剂功能，又有固相催化剂特性
B．有生物催化剂功能，无固相催化剂特性
C．无生物催化剂功能，只有固相催化剂特性
D．既无生物催化剂功能，又无固相催化剂特性
5．下面哪一种药物属于多糖类生物药物 （ C ）
A、洛伐他汀 B、干扰素 C、肝素 D、细胞色素C
1 / 8
局限性转导：指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因（供体细菌染色体上原噬菌体整合位点附近少数基因）携带到受体菌中，并与后者的基因组整合、重组形成转导子的现象。P227B
移码突变：当基因突变时，在DNA序列中由于一对或少数几对核苷酸的插入或缺失（不是三的倍数）而使其后的全部遗传密码的阅读框架发挥僧移动，进而引起转录或翻译错误的突变，它一般只引起一个基因的表达出现错误。P313 P208B
准性生殖：（霉菌的基因重组）是一种类似于有性生殖，但比它更为原始的一种两性生殖方式，这是一种在同种而不同君主的体细胞见发生的融合，他可不借减数分裂而导致低频率的基因重组并产生重组子。因此，可以认为准性生殖是在自然条件下，真核微生物体细胞见的一种自发性的原生质体融合现象，它是某些真菌尤其在还未发现有性生殖的半知菌类中常见。P234B
巴斯德灭菌法(Pasteurization)：在一控制温度给液体食物或饮料加热以提高保藏质量，同时也消毀有害的微生物。一种用于对牛奶啤酒等不宜进行高温灭菌的也太风味食品和调料的低温消毒方法，他得名于首次用该法控制葡萄酒变质的巴斯德。一般将待消毒的液体食品在63-65°保持30分钟，后迅速冷却，以杀死其中可能存在的病原菌，保持食品的营养和风味，延长食品的保持时间。P289
连续灭菌：是指让培养基连续通过高温蒸汽灭菌塔，维持和冷却，然后流进发酵罐，培养基一般加热至135-340°下维持5-15S，连续灭菌采用高温瞬时灭菌，既彻底地灭了菌，有有效地减少营养成分的破坏，从而提高了原料的利用率。P291
Hfr菌株：（高频重组菌株）含有整合态F因子的菌株叫Hfr菌株。F因子在供体菌中有两种存在状态，游离态和整合态，所谓整合态是指F因子通过其插入序列IS与染色体DNA之间发生重组而将F因子嵌入染色体DNA中，形成一个大的环状DNA分子，含有整合态F因子的菌株叫Hfr菌株。P230B
遗传ＡＥＲＥＤＩＴＡＳ （Ｂｅｉｊｉｎｇ） １６（１）： ４０－４４ １９９４
野油菜黄单胞菌Ｓ－１５２遗传转移系统的
建立及外源性内切葡聚糖酶
基因在其体内的表达
蔡勉刘纯强高培基
（山东大学徽生物研究所济南２５０１００）
摘要通过细胞接合的方式将广宿主质粒ｐＲＫ４０４， ｐＫＴ２３０和ＲＰ４分别转人野油菜黄单胞菌Ｓ－１５２中，其转移频率均在１０－‘数量级上，从而建立起了Ｓ－１５２的转移系统．用同法将由载体质粒ｐＲＫ４０４
和白纹黄单胞菌ＸＡ卜１的ＣＭＣ酶基因构成的重组质粒ｐＮＤ８２转人到Ｓ－１５２中并得到了表达，使Ｓ－１５２ （ｐＮＤ８２）的胞内ＣＭＣ酶酶活比出发菌株Ｓ－１５２提高了１倍．
关锐词野油菜黄单胞菌，细胞接合，遗传转移系统，内切葡聚糖酶。基因表达
Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｔｒａｎｓｆｅｒ Ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ｏｆ ａｎ Ｅｘｔｒａｎｅｏｕｓ Ｅｎｄｏｇｌｕｃａｎａｓｅ Ｇｅｎｅ ｉｎ Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ Ｓ－１５２
Ｃａｉ Ｍｉａｎ Ｌｉｕ Ｃｂｕｎｑｉａｎｇ Ｇａｏ Ｐｅｉｊｉ
（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｊｉｎａｎ ２５０１００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔｈｅ ｗｉｄｅ－ｈｏｓｔ－ｒａｎｇｅ ｐｌａｓｍｉｄ ｖｅｃｔｏｒｓ ｐＲＫ４０４ ａｎｄ ｐＫＴ２３０ ｗｅｒｅ ｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ ｉｎｔｏ ａ ｒｅｃｉｐｉｅｎｔｓｔｒａｉｎ Ｓ－１５２ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｂｙ ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ａｉｄ ｏｆ ｔｈｅ ｈｅｌｐｅｒ ｐｌａｓｍｉｄ ｐＲＫ２０１３ ａｔ ｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓ ｏｆ１０－４， ａｎｄ ａ ｇｅｎｅｔｉｃ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ Ｓ－１５２‘ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ． Ａ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｐｌａｓｍｉｄ ｐＮＤ８２， ｃｏｎ－
- 1 - 关于基因工程菌的稳定性
摘要：研究了定态与周期操作对基因工程酒精酵母质粒稳定性的影响,周期操作有利于提高底物的利用率并增强质粒的稳定性；发现了固定化重组菌高稳定性的原因，另外还讨论了诸多培养条件对基因工程菌稳定性的影响。
关键字：固定化；基因工程菌；质粒；稳定性；基因工程
基因工程菌就是将目的基因导入细菌体内使其表达，产生所需要的蛋白的细菌成为基因工程菌。基因工程菌在传代过程中常出现质粒不稳定的现象。质粒不稳定可分为：分裂不稳定和结构不稳定。分裂不稳定：指工程菌分裂时出现一 定比例不含质粒子代菌的现象。结构不稳定：指外源基因从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变。
1 常见分裂不稳定的两个因素：
1.1 含质粒菌产生不含质粒子代菌的频率；
1.2 这两种菌比数率差异的大小。
2 提高质粒稳定性的方法
2.1 选择合适的宿主菌；
2.2 选择合适的载体，适当增加质粒拷贝数；
2.3 加入选择性压力；
2.4 采用两阶段培养法；
先使菌体生长至一定密度，再诱导外源基因的表达。由于第一阶段外源基因未表达，减小了重组菌与质粒丢失菌的生长速率的差别，增加了质粒稳定性。在培养基中加入抗菌素抑制质粒丢失菌的生长，提高质粒稳定性。调控环境参数如温度、pH、培养基组分和溶解氧浓度。有些含质粒菌对发酵环境的改变比不含质粒菌反应慢，间歇改变培养条件以改变两种菌比生长速率，可改善质粒稳定性。通过间歇供氧和改变稀释数率，都可以提高质粒稳定性。
2.5 控制工程菌的培养条件；
2.6 采用固定化培养
基因工程技术是生物技术的核心和关键,已成功地表达了一系列与人类健康有关的重要多肽物质以及使多种氨基酸和抗生素增产,对人类社会生活产生了深远的影响。基因工程菌中质粒稳定性问题是影响基因工程菌实现规模生产的一个重要因素,这种不稳定性主要表现为两种形式:一种是重组ＤＮＡ质粒的丢失,称为脱落性不稳定;另一种是质粒中的基因结构发生突变,称为结构性不稳定。这两种不稳定都能使细胞失去生产能力。质粒的稳定性与宿主及载体的特性有关,也与培养条件有密切的关系。通过优化培养条件以提高质粒稳定性正是工程人员要做的工作。
