灵芝发酵技术进展
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灵芝制备菌种页数:6
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灵芝液体发酵流程
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1. 确定菌种：选择适合液体发酵的灵芝菌种。
灵芝深层液体发酵过程研究
维普资讯
第 ｌ Ｏ期（ 总第 １５期） １ ２０ ０７年 ｌ Ｏ月
农产品加工 ・ 学刊 Ａ ａｅ ｃＰ ｒ ｄｃｌ ｆ ａｍ ｒｄ ｃｓ ｒｃｓｉｇ ｃｄｍｉ ｅｉ ｉａ ｏ Ｆ ｒ Ｐｏｕ ｔＰ本低 、适于工厂化生产等显著优点。 经测 定 ，灵芝 深层 培养 液具有 十分 丰 富 的营养物 质和药用价值１ ２ ／ ，用液体深层 培养法生产 的灵芝菌丝 体及 培养 液经加 工 提取 ，可 制成食 品添加 剂 和 医疗 保 健食 品。深层发酵是近代大规模工业化生产食 （ ） 药 用真 菌及 代谢产 物 的主要 方法 ，已发 展成 为生 物工 程 的一种 新兴 产业 ，具 有很 多优越 性 和广 阔的前 景 。本 文作者 就灵 芝液 体菌种 的培养 时间对 灵芝 液体 发酵 的 影 响进 行 了详细 研究 ，希 望为缩 短灵 芝深 层液 体发 酵 的周期 提供 理论依 据 。
１ 材 料与 方法
１ 主要仪器及设备 ． ３ 往复式恒温振荡器 、恒温干燥箱 、离心机 、电子 分析 天平 。 １ 试验 方法 ． ４
１ ． 斜 面菌种 活化 ．１ ４
将 灵芝 菌丝 块接 种于母 种斜 面 培养基 上 ，在温 度 ２ ５℃下培 养 ６ｄ ，活化 １ 。 次 １ ． 接 种与 培养 ．２ ４
（ ｉ ｉ ｏｅｔ ｎ ｒ ｉＴ ｅ ｓｔｔ ，Ｔａ ｊ ０ １ ２ ｈｎ ） Ｔａ ｉ Ｆ ｒｓ ｙａ ｄ Ｆ ｕ ｒ Ｉ ｔｕｅ ｉ ｉ ３ ｏ 。Ｃ ｉ ｎｎ ｒ ｔ ｅｎｉ ｎｎ １ ａ
Ａｂ ｔ ｃ ： Ｅｆ ｃ ｓｏ ｕｔ ｒ ｉ ａ ｏ ｅ ｉａ ｓｒ ｉ ｓｏ ｉ ｕ ｄ ｆｒ ｎ ａｉｎ ａ ｄ ｍｙ ｅ ｉｍ ｏｕ ， Ｇ ｎ ｄ Ｆ ｌ ｏ ｙ ａ ｃ ａ ｓｒ ｔ ａ ｆ ｔ ｆ ｌ ｅ ｔ ｅ ｃ ｕ ｍｅ ｏ Ｇ ｎ ｄ Ｆ ｌ ｔ ｎ ｎ ｌ ｉ ｅ ｍｅ ｔｔ ｎ ｃ ｌ ｆ Ｔ ａ ｑ ｏ ｕ ｖ ｌ ｍｅ ａ ｏ ｅ Ｉａ ｐ ｌ ｓ ｃ ｈ － Ｔ ｒ ｅ ｏｕ ｎ Ｈ ｃ ａ ｇ ｄ ｗｉ ｉ ａ ｅ ｂ ｅ ｔ ｄｅ ｎ ｔ ｉ ｒ ｐ ｒ． ｔ ｅ ｒ ｓ ｌ ｈ ｗｅ ｈ ｔ ｔｅ ｓｘ ｄ ｙ Ｓｒ ｉ Ｓ ｔ ｅ ｉ ｓ ｖ ｌ ｍｅ ａ ｄ ｐ ｈ ｎ ｅ ｔ ｔ ｄ ｈ ｍｅ ｈ ｖ ｅ ｎ ｓ ｉ ｄ ｉ ｈ ｓ ｅ ｏ ｔ ｈ ｅ ｕ ｔ ｓ ｏ ｄ ｔ ａ ｈ ｉ— ａ ｔ ｎ ｉ ｈ ｕ ｓ ａ ｂ ｓ ． ｉ ｅ ｅ ｅ ｔ ａ ｃ ｌ ｍ ｏｕ ｅ ｔ ｎ ｔ ｓ ｖ ｎ ｈ ｄ ｙｍｙ ｅｉ ｖ ｌｍｅ’ ｔ ｅ ｍｏ ｔ ｐ ｉ ｅ ｌｗ ｓ． ｈ ｕ ｓ ｈ ｓ ． Ｈ Ｓｔ ｏ ｅ ｔ ｈ Ｋｅ ｒ ｓ Ｇ ｏ ｅｍａ Ｌ ｃｄ ｍ ； ｌ ｕｄ 南ｒ ｎ ａｉｎ； ｃ ｌ ｒ ｍｅ ｙ ｗｏｄ ： ａ ｄ ｒ ｕ ｉ ｕ ｎ ｉ ｉ ｑ ｍｅ ｔｔ ｏ ｕｔ ｅ ｔ ｕ ｉ
第 ｌ Ｏ期（ 总第 １５期） １ ２０ ０７年 ｌ Ｏ月
农产品加工 ・ 学刊 Ａ ａｅ ｃＰ ｒ ｄｃｌ ｆ ａｍ ｒｄ ｃｓ ｒｃｓｉｇ ｃｄｍｉ ｅｉ ｉａ ｏ Ｆ ｒ Ｐｏｕ ｔＰ本低 、适于工厂化生产等显著优点。 经测 定 ，灵芝 深层 培养 液具有 十分 丰 富 的营养物 质和药用价值１ ２ ／ ，用液体深层 培养法生产 的灵芝菌丝 体及 培养 液经加 工 提取 ，可 制成食 品添加 剂 和 医疗 保 健食 品。深层发酵是近代大规模工业化生产食 （ ） 药 用真 菌及 代谢产 物 的主要 方法 ，已发 展成 为生 物工 程 的一种 新兴 产业 ，具 有很 多优越 性 和广 阔的前 景 。本 文作者 就灵 芝液 体菌种 的培养 时间对 灵芝 液体 发酵 的 影 响进 行 了详细 研究 ，希 望为缩 短灵 芝深 层液 体发 酵 的周期 提供 理论依 据 。
１ 材 料与 方法
１ 主要仪器及设备 ． ３ 往复式恒温振荡器 、恒温干燥箱 、离心机 、电子 分析 天平 。 １ 试验 方法 ． ４
１ ． 斜 面菌种 活化 ．１ ４
将 灵芝 菌丝 块接 种于母 种斜 面 培养基 上 ，在温 度 ２ ５℃下培 养 ６ｄ ，活化 １ 。 次 １ ． 接 种与 培养 ．２ ４
（ ｉ ｉ ｏｅｔ ｎ ｒ ｉＴ ｅ ｓｔｔ ，Ｔａ ｊ ０ １ ２ ｈｎ ） Ｔａ ｉ Ｆ ｒｓ ｙａ ｄ Ｆ ｕ ｒ Ｉ ｔｕｅ ｉ ｉ ３ ｏ 。Ｃ ｉ ｎｎ ｒ ｔ ｅｎｉ ｎｎ １ ａ
Ａｂ ｔ ｃ ： Ｅｆ ｃ ｓｏ ｕｔ ｒ ｉ ａ ｏ ｅ ｉａ ｓｒ ｉ ｓｏ ｉ ｕ ｄ ｆｒ ｎ ａｉｎ ａ ｄ ｍｙ ｅ ｉｍ ｏｕ ， Ｇ ｎ ｄ Ｆ ｌ ｏ ｙ ａ ｃ ａ ｓｒ ｔ ａ ｆ ｔ ｆ ｌ ｅ ｔ ｅ ｃ ｕ ｍｅ ｏ Ｇ ｎ ｄ Ｆ ｌ ｔ ｎ ｎ ｌ ｉ ｅ ｍｅ ｔｔ ｎ ｃ ｌ ｆ Ｔ ａ ｑ ｏ ｕ ｖ ｌ ｍｅ ａ ｏ ｅ Ｉａ ｐ ｌ ｓ ｃ ｈ － Ｔ ｒ ｅ ｏｕ ｎ Ｈ ｃ ａ ｇ ｄ ｗｉ ｉ ａ ｅ ｂ ｅ ｔ ｄｅ ｎ ｔ ｉ ｒ ｐ ｒ． ｔ ｅ ｒ ｓ ｌ ｈ ｗｅ ｈ ｔ ｔｅ ｓｘ ｄ ｙ Ｓｒ ｉ Ｓ ｔ ｅ ｉ ｓ ｖ ｌ ｍｅ ａ ｄ ｐ ｈ ｎ ｅ ｔ ｔ ｄ ｈ ｍｅ ｈ ｖ ｅ ｎ ｓ ｉ ｄ ｉ ｈ ｓ ｅ ｏ ｔ ｈ ｅ ｕ ｔ ｓ ｏ ｄ ｔ ａ ｈ ｉ— ａ ｔ ｎ ｉ ｈ ｕ ｓ ａ ｂ ｓ ． ｉ ｅ ｅ ｅ ｔ ａ ｃ ｌ ｍ ｏｕ ｅ ｔ ｎ ｔ ｓ ｖ ｎ ｈ ｄ ｙｍｙ ｅｉ ｖ ｌｍｅ’ ｔ ｅ ｍｏ ｔ ｐ ｉ ｅ ｌｗ ｓ． ｈ ｕ ｓ ｈ ｓ ． Ｈ Ｓｔ ｏ ｅ ｔ ｈ Ｋｅ ｒ ｓ Ｇ ｏ ｅｍａ Ｌ ｃｄ ｍ ； ｌ ｕｄ 南ｒ ｎ ａｉｎ； ｃ ｌ ｒ ｍｅ ｙ ｗｏｄ ： ａ ｄ ｒ ｕ ｉ ｕ ｎ ｉ ｉ ｑ ｍｅ ｔｔ ｏ ｕｔ ｅ ｔ ｕ ｉ
灵芝多糖发酵工艺探析
１ ０ｐ ５ ｒ ｍ摇 床 培 养 ９ ｄ。
如图１ 不 。 所
１ 主要培养基配方
（） １斜面培 养基 ： 马铃 薯（ 皮 ）Ｏ 葡 萄 去 ２ ％， 糖 ２ 琼 脂２ 自然ｐ （） ％， ％， Ｈ。２基础培 养基 ： 葡萄 糖 １ 蔗糖２ 蛋 白胨 １ 酵母 浸膏０ ５ 磷 ％， ％， ％， ．％， 酸二氢 钾０ １％， Ｓ ． ５ ．０ Ｍｇ Ｏ ０ ０ ％
（ ） 同碳源 对 灵 芝 菌丝 体生 物 量 及发 ４不 酵 液 多 糖 的 影 响 试 验 ： 别 以不 同 的 碳源 分 （ ％葡萄 糖 、 ％蔗糖 、 ％麦 芽糖 、 ％ 溶 性 １ １ １ １可 淀 粉 、 ％ 麸 粉 、 ％小麦 粉 ） １麦 １ 代替 基 础培 养 基 中的 碳 源（ 萄 糖１ 蔗糖 ２ ， 它成份 葡 ％、 ％）其 不 变 。 别 进行 发 酵 实验 ， 定 灵 芝菌 丝体 分 测 生 物 量 及 发 酵液 多糖 的含 量 。 （ ） 同氮源 对 灵 芝 菌丝 体 生物 量 及 发 ５不 酵 液 多 糖 的影 响 试 验 ： 最适 碳 源 １ 在 ％浓度 下 ， 别 以 不 同氮 源 （ ％蛋 白胨 、 ％牛 肉浸 分 １ １ 膏 、 ％黄 豆饼 粉 、 ％硝酸 钾 、 ％硫 酸铵 、 ％ １ １ ｌ １ 氯 化 铵 ） 替 基 础 培 养 基 中氮 源 （ ％蛋 白 代 １ 胨 、 ． ％ 母 浸膏 ） 其它 成 份 不变 。 ０５ 酵 ， 设不加 氮 源 为对 照 。 别进 行发 酵 实 验 ， 定 灵芝 分 测 菌 丝 体 生 物 量 及 发 酵 液 多 糖 的 含量 。 （） ６ 无机 盐 对 灵芝 菌 丝 体生 物 量 及发 酵 液 多糖 的影 响 试验 ： 发酵 液 在 １ ％碳 源和 １ ％ 氮 源 下 ， 添 加 磷 酸 二 氢 钾 和硫 酸 镁 为 对 不 照 ， 它成 份不 变 。 其 进行 发酵 实验 ， 测定 灵芝 菌 丝体 生物 量 及发酵 液 多糖 的含 量 的变化 。
世界灵芝研究近况
世界灵芝研究近况
从秦始皇旨令方士提炼仙丹，寻找灵芝开始，经过历代科学家的努力，对灵芝有效成分和疗效研究已经取得了很大的进展。
尤其是20世纪70年代后，仅仅30年的时间，以中国、日本为核心的学者、对灵芝的研究已涉及到真菌学、细胞学、生物化学、植物生理学、遗传学、高分子生物学、药学、药理学、毒理学、临床医学等学科领域，成为世界瞩目的重要课题题。
目前世界共有40多个国家在灵芝的资源分类、生物学特征、人工栽培、工业发酵及提取工艺等方面进行研究，研究的灵芝有赤芝Ganoderma lucidum）薄盖树（G．capense）树否（平盖灵芝）（G applanatum）、松杉灵芝（G．tsugae）、紫芝（G．Sinense）等灵芝，研究这几种灵芝的子实体，丝体，孢子2粉及发酵液的有效化学成分、药理学、临床医学。
北京医科大学林志彬教授写的《灵芝》一书及他在1991年北京“灵芝研究专题研讨会”上发表有关灵芝根的论文《近十年灵芝研究的进展》，上海市农科院陈国良研究员编写的《灵芝治百病》都比较全面地叙述了当今灵芝研究的进展。
深层发酵生产灵芝菌丝体多糖研究
０ 前 言
近年来 ， 随着灵芝 的人工栽培技术及 药理研
究 的 发 展 ， 芝 已成 为 功 能 食 品 的 一 种 重 要 原 灵 料 … 。研 究证 明 ， 芝 类 真 菌 的 化 学 组 成 复 杂 ， 灵
封 闭 的条件 下进 行 ， 没有病 虫 害 ， 也就 避免 了农 药
污染 ， 以是 完全 “ 色” 品。本 文 旨在研究 所 绿 产 ５０Ｌ全 自动不 锈 钢 发 酵 罐 深 层 发 酵 灵 芝 工 艺 ， ０ 为进一步利用灵芝 资源 ， 工业化 生产灵芝菌丝体 多糖提供理论及实践依据 。
深层发酵 生产灵 芝菌丝体多糖研究
魏赛 金 ， 涂晓嵘 ， 黄 林 ， 国全 涂
（ 江西农业 大学 生物科学与工程学院 ， 江西 南昌 ３ ０ ４ ） ３０ ５
摘要 ： 采用 生物 工程发 酵技 术进行 灵芝菌 ７ ０菌丝体 多糖 扩大生产 ， ５０Ｌ全 自动 不锈 钢发 酵罐 中通 过控 ３ 在 ０ 制深 层发酵 工艺条件获得灵 芝菌丝体 、 灵芝 多糖 。结果表 明 ： 发酵 ７ ， Ｏｈ 镜检 菌丝壁上无 明显 的芽头和锁状联 合， 菌丝体有 少许 自溶 ， 无杂 菌。灵 芝菌丝体的浓度达到 ３ ％左右 ， 外灵 芝 多糖和胞 内灵 芝多糖 分别达 ３ ５ ０ 胞 ．
维普资讯 第２ ５卷第Fra bibliotek３期 江
西
科
学
Ｖｏ ． ５ Ｎｏ ３ １２ ．
２０ ０ ７年 ６ 月
ＣＩ ＪＡＮＧ Ｓ ＥＮＣＥ Ｉ ＸＩ
Ｊｎ ２ ０ ｕ ．０ ７
文章 编 号 ：０ １ ３ ７ （ ０７ ０ ０ ９ ０ １０ — ６ ９ ２ ０ ） ３— ２ ２— ４
ｒ ｓ ｅ ｔｖ ｌ ． ｅ ｐ ｃ ｅｙ ｉ
灵芝多糖发酵工艺优化_常景玲
胆结石、泌尿系统结石是极为常见而又难以治 愈的疾病。黑木耳中含有发酵素和植物碱, 能够促 使消化系统及泌尿系统各种腺体的分泌, 协助催化 结石、润肠 管道, 及 时排除结石。黑木耳还含有多 种矿物质, 能与结石产生较强的化学反应, 能使被 分解、侵蚀、碎屑的结石很容易经管道排除。 117 提供人体必需的纤维素
3 结论
311 灵芝多糖 发酵培 养基 中, 无机 碳源 与有 机碳 源和无机氮源与有机氮源配合使用, 不仅有利于菌 丝体的大量生长与繁殖, 而且可以诱导、促进多糖 的产生和积累, 单独使用无机碳源不利于灵芝菌丝 体的生长繁殖。
312 pH 对灵芝菌丝体的生 长和多糖 产生积累 有明 显的影响, 实验表明最适 pH 为 51 0~ 515。 313 正 交优化 实验确 定的灵 芝多糖 发酵最佳 培养
[ 3] 三崎旭. B- glucans 制造法 U 用途. 日本, 公开特 许 公报, 60- 188402. 1985.
[ 4] 罗立新, 姚 汝华, 周 少 奇. 灵芝 多糖 的分 离 与纯 化 [ J] . 食品工业科技. ( 下转第 52 页)
52
中国 食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA
B
1 2 3 1 2 3 1 2 3 281 4 291 05 251 45 21 2
正 交 实 验 结 果 L9 (33)
C
多糖
1 2 3 1 2 3 1 2 3 261 95 231 85 271 15 01 8
515 718 814 2155 818 7171 9183 121 2 131 3
由表 1 可知, 葡萄 糖与 玉米 粉配合 作为 碳源, 多糖产量较高。原因 可能 是玉米 粉中 含有维 生素、
48
3 结论
311 灵芝多糖 发酵培 养基 中, 无机 碳源 与有 机碳 源和无机氮源与有机氮源配合使用, 不仅有利于菌 丝体的大量生长与繁殖, 而且可以诱导、促进多糖 的产生和积累, 单独使用无机碳源不利于灵芝菌丝 体的生长繁殖。
312 pH 对灵芝菌丝体的生 长和多糖 产生积累 有明 显的影响, 实验表明最适 pH 为 51 0~ 515。 313 正 交优化 实验确 定的灵 芝多糖 发酵最佳 培养
[ 3] 三崎旭. B- glucans 制造法 U 用途. 日本, 公开特 许 公报, 60- 188402. 1985.
[ 4] 罗立新, 姚 汝华, 周 少 奇. 灵芝 多糖 的分 离 与纯 化 [ J] . 食品工业科技. ( 下转第 52 页)
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中国 食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA
B
1 2 3 1 2 3 1 2 3 281 4 291 05 251 45 21 2
正 交 实 验 结 果 L9 (33)
C
多糖
1 2 3 1 2 3 1 2 3 261 95 231 85 271 15 01 8
515 718 814 2155 818 7171 9183 121 2 131 3
由表 1 可知, 葡萄 糖与 玉米 粉配合 作为 碳源, 多糖产量较高。原因 可能 是玉米 粉中 含有维 生素、
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灵芝深层发酵工艺研究
灵芝 是我 国传统 的名 贵 中药 ， 直被 用 来治 疗 肝 一
发酵液 体 培 养 基 （ ｇ・Ｌ ） 葡 萄 糖 ５ 、 饼 粉 ： ０豆 １ 、 米浆 ３ 糖 蜜 ６ ＫＨ２ Ｏ ０玉 、 、 Ｐ ・３ Ｏ １ ５ Ｍｇ Ｏ Ｈ２ ． 、 Ｓ ・
７ Ｏ ０ ７ 、 十烷醇 １ ０ ， Ｈ 值 ５ ５ 。 。 Ｈ２ ． ５ 三 ×１ 一 ｐ ． ～６ ０
６ ０ 最佳 摇 瓶发 酵 条件 为 ： 龄 ７ ～ ９ 、 种 量 ５ 、 液量 ５ Ｌ、 ．。 种 ２ ６ｈ 接 装 Ｏｍ 摇床 转 速 １ ０ ・ ｎ 、 ５ ｍｉ ｒ ～ 温度 ２ ℃ 、 始 ｐ 值 ５ ５ ８ 初 Ｈ 。 ～ ６ ０ 最佳发 酵工 艺条 件 为 ： ．。 温度 ２ ℃ 、 拌转 速 １ ０ ０ ・ ｎ 、 ８ 搅 ５ ￣２ ０ ｒ ｍｉ ～ 装液 量 ５ Ｌ 通风 量 ３ ５Ｌ・ ｎ 、 始 ｐ 值 ５ ５ 、 ～ ｍｉ～ 初 Ｈ 。。
将新培 养 的斜 面 菌种 转 入 基础 培 养 基，８ 、 ２℃ １ ０ｒ ｍｉ 培养 ３ｄ 镜 检无杂 菌后 ， ５ ５ ・ ｎ ， 按 ％的接种量 转入发 酵摇瓶 ， 发酵 ５ ， ～７ｄ 发酵 液 残糖在 １ 左 右结 束培养 ，０ ０ｒ・ ｎ 离心 １ ｎ 称菌 丝体干 重 ， ３ ０ ｍｉ ０ｍｉ ， 用 乙醇提 取法提 取胞外 粗 多糖 ｎ ， 测定其 浓度 。 ］并 １ ３ ２ 发酵罐 培养 ．． 采 用 ８Ｌ全 自动玻 璃 罐 ， 液量 为 ６ 、 种 量 装 ０ 接
１ ３ 菌 丝体 的 培 养 方 法 ． １ ３ １ 摇 瓶 培 养 ．．
病、 肾炎 、 胃溃疡 、 高血压等疾病 ， 市场需求 量与 日俱增 。
利用深层培养技 术大 规模 生产 灵芝 菌丝体 并从 中 获取 有效成分 ， 具有 周期 短 、 成本 低 、 产量 大 、 作方 便 的特 操 点， 已成为 当前名贵真菌开发 的热点之一 。作者在 此对 灵芝摇瓶发酵和反应罐发 酵进行 研究 ， 优化 了发 酵工 并 艺条件 。