γ-干扰素体外释放试验43页PPT
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γ干扰素释放试验标准操作流程γ干扰素释放试验标准操作流程概述•γ干扰素释放试验(gamma interferon release assay)是一种用于检测某些感染病原体引起的细胞免疫反应的方法。
•本文将详细说明γ干扰素释放试验的标准操作流程,包括前期准备、实验步骤、数据分析等内容。
前期准备1.确保实验室拥有所需设备和试剂。
2.准备受试者血样(采用血液抽取方法)。
3.验证实验室的操作人员已经接受相关培训,熟悉操作步骤和安全注意事项。
实验步骤1.血样准备–将采集的血样转移到合适的试验管中,确保血样完整且无凝块。
–使用离心机离心血样,将血细胞和血浆分离开来。
2.细胞培养–取得合适的细胞培养板,加入培养基。
–将离心后的血细胞加入培养基中,控制细胞密度在合适范围内。
–孵育细胞,保持适当的温度、湿度和二氧化碳浓度。
3.刺激试剂添加–在培养的细胞上加入激发剂,如特定抗原。
–同时设置阴性对照(如未加刺激剂的细胞)和阳性对照(如已知患者血样)。
4.孵育试验–将细胞培养板放入恒温箱中,保持合适的孵育时间和条件。
–注意观察培养过程中的任何异常变化,记录相关信息。
5.液相检测–采用合适的方法(如ELISA等)检测培养液中的γ干扰素水平。
–按照厂家指南操作试剂盒,记录结果并进行质量控制的数据分析。
1.收集所有实验数据,包括阳性对照、阴性对照和受试者样本的γ干扰素水平测定结果。
2.进行质量控制分析–首先,检查实验数据是否符合预期的范围。
–其次,对比阳性对照和阴性对照的水平,确保实验结果可靠。
3.数据解释–根据实验结果判定受试者是否对特定抗原产生γ干扰素反应。
–结合临床资料和相关标准,进行结果的解读和诊断。
结论•本文提供了γ干扰素释放试验标准操作流程的详细说明,以帮助实验室完成该项实验。
•严格按照操作流程进行实验可提高实验的可重复性和结果的准确性。
•数据分析部分应根据实验目的和临床背景进行合理解读,以辅助疾病的诊断和研究。
γ干扰素释放试验在中国应用的建议γ—干扰素释放试验(interferon—γ release assays,IGRAs)是检测结核分枝杆菌(MTB)特异性抗原刺激T 细胞产生的γ—干扰素,以判断是否存在MTB 的感染。
IGRAs 可弥补PPD 试验的不足,目前多个国家已将其用于诊断MTB 潜伏感染(latent tuberculosis infection,LTBI),我国部分医院也已常规开展此项检测,且多家IGRAs 试剂已经或即将进入临床应用。
LTBI 是宿主感染MTB 后的一种特殊状态,感染者体内的MTB 处于持留状态,不能诊断为活动性结核病,但具有发展为活动性结核病的风险.对LTBI 的高危人群进行早期诊断和适当干预,在结核病控制中具有积极意义.PPD 试验作为诊断MTB 感染的传统方法,具有操作简便、成本低廉的特点,至今仍广泛使用,但该方法使用的PPD 抗原成分复杂,易受卡介苗接种和非结核分枝杆菌(nontuberculosismycobacterium,NTM)的影响,特异度较低,且对人免疫缺陷病毒(HIV)感染及重症疾病患者等免疫功能受损人群的敏感度不足。
研究结果提示,IGRAs 诊断MTB 感染的特异度高于PPD 试验,但也有文献报道,特别是在中、低收入国家,IGRAs 与PPD 试验相比并没有足够的优势。
IGRAs 技术要求高,操作程序复杂,样本检测时限短,难以实现高通量,价格昂贵。
由于缺乏严谨、大规模和前瞻性的人群研究数据,故IGRAs 的应用范围及结果解读存在较大争议。
为了指导IGRAs 在我国的合理应用,中华医学会结核病学分会与《中华结核和呼吸杂志》编辑委员会组织有关专家经过长时间的反复研讨,在借鉴世界卫生组织(WHO)关于中低收入国家IGRAs 应用说明的基础上,结合我国IGRAs 应用现状,提出以下建议。
一、IGRAs 简介但在实际使用中发现,IGRAs 在不同地区、不同人群中的特异度和敏感度均存在较大差异,在某些人群中并未显示其敏感度和特异度优于PPD 试验。
资料范本本资料为word版本,可以直接编辑和打印,感谢您的下载γ干扰素释放试验指南地点:__________________时间:__________________说明:本资料适用于约定双方经过谈判,协商而共同承认,共同遵守的责任与义务,仅供参考,文档可直接下载或修改,不需要的部分可直接删除,使用时请详细阅读内容γ干扰素释放试验在中国应用的建议γ- 干扰素释放试验(interferon-γ release assays,IGRAs)是检测结核分枝杆菌 (MTB) 特异性抗原刺激 T 细胞产生的γ- 干扰素,以判断是否存在 MTB 的感染。
IGRAs 可弥补 PPD 试验的不足,目前多个国家已将其用于诊断 MTB 潜伏感染(latent tuberculosis infection,LTBI),我国部分医院也已常规开展此项检测,且多家 IGRAs 试剂已经或即将进入临床应用。
LTBI 是宿主感染 MTB 后的一种特殊状态,感染者体内的 MTB 处于持留状态,不能诊断为活动性结核病,但具有发展为活动性结核病的风险。
对 LTBI 的高危人群进行早期诊断和适当干预,在结核病控制中具有积极意义。
PPD 试验作为诊断 MTB 感染的传统方法,具有操作简便、成本低廉的特点,至今仍广泛使用,但该方法使用的 PPD 抗原成分复杂,易受卡介苗接种和非结核分枝杆菌 (nontuberculosismycobacterium,NTM) 的影响,特异度较低,且对人免疫缺陷病毒 (HIV) 感染及重症疾病患者等免疫功能受损人群的敏感度不足。
研究结果提示,IGRAs 诊断 MTB 感染的特异度高于 PPD 试验,但也有文献报道,特别是在中、低收入国家,IGRAs 与 PPD 试验相比并没有足够的优势。
IGRAs 技术要求高,操作程序复杂,样本检测时限短,难以实现高通量,价格昂贵。
由于缺乏严谨、大规模和前瞻性的人群研究数据,故 IGRAs 的应用范围及结果解读存在较大争议。
γ干扰素释放试验在中国应用的建议γ- 干扰素释放试验(interferon-γ release assays,IGRAs)是检测结核分枝杆菌(MTB) 特异性抗原刺激T 细胞产生的γ- 干扰素,以判断是否存在MTB 的感染。
IGRAs 可弥补PPD 试验的不足,目前多个国家已将其用于诊断MTB 潜伏感染(latent tuberculosis infection,LTBI),我国部分医院也已常规开展此项检测,且多家IGRAs 试剂已经或即将进入临床应用。
LTBI 是宿主感染MTB 后的一种特殊状态,感染者体内的MTB 处于持留状态,不能诊断为活动性结核病,但具有发展为活动性结核病的风险。
对LTBI 的高危人群进行早期诊断和适当干预,在结核病控制中具有积极意义。
PPD 试验作为诊断MTB 感染的传统方法,具有操作简便、成本低廉的特点,至今仍广泛使用,但该方法使用的PPD 抗原成分复杂,易受卡介苗接种和非结核分枝杆菌(nontuberculosismycobacterium,NTM) 的影响,特异度较低,且对人免疫缺陷病毒(HIV) 感染及重症疾病患者等免疫功能受损人群的敏感度不足。
研究结果提示,IGRAs 诊断MTB 感染的特异度高于PPD 试验,但也有文献报道,特别是在中、低收入国家,IGRAs 与PPD 试验相比并没有足够的优势。
IGRAs 技术要求高,操作程序复杂,样本检测时限短,难以实现高通量,价格昂贵。
由于缺乏严谨、大规模和前瞻性的人群研究数据,故IGRAs 的应用范围及结果解读存在较大争议。
为了指导IGRAs 在我国的合理应用,中华医学会结核病学分会与《中华结核和呼吸杂志》编辑委员会组织有关专家经过长时间的反复研讨,在借鉴世界卫生组织(WHO) 关于中低收入国家IGRAs 应用说明的基础上,结合我国IGRAs 应用现状,提出以下建议。
一、IGRAs 简介1.IGRAs 的原理和主要方法:受到MTB 抗原刺激致敏的T 细胞再次遇到同类抗原时可产生γ- 干扰素,IGRAs 通过检测全血或分离自全血的单核细胞在MTB 特异性抗原刺激下产生的γ- 干扰素,判断受试者是否感染MTB。