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非光暴露皮肤经窄谱中波紫外线照射前后MMP_1的表达

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非光暴露皮肤经窄谱中波紫外线照射前后MMP21的表达徐慧,刘健航,陈向东,汪蓓青,沈征宇,吴品茹,费烨

[摘　要]　目的　探讨非光暴露皮肤经窄谱中波紫外线B(NB2UVB)照射前后基质金属蛋白酶21(MMP21)的表达

及意义。方法　观察志愿者照光前后的非光暴露皮肤的光老化表现;免疫组化检测其照光前后皮肤MMP21的表达;用ELISA方法检测不同剂量NB2UVB照射后人成纤维细胞MMP21的表达。结果　所有病例均出现皮肤光老化表现。28例志愿者中MMP21的表达光照前5例(17.90%)阳性,光照后9例(32.10%)阳性(P<0.05)。不同剂量的NB2UVB(0,10,

20,30,50,60,80,120mJ/cm2)照射后,成纤维细胞的MMP21的表达在20mJ/cm2时明显增高,有统计学意义(P<0.05),并

呈剂量依赖方式增高。结论　NB2UVB照射对MMP21的表达起促进作用。推测NB2UVB促进MMP21的表达,加快皮肤胶原蛋白的分解,加速皮肤老化。[关键词]　窄谱中波紫外线B;基质金属蛋白酶21;免疫组化;ELISA;非光暴露皮肤[中图分类号]　R751 [文献标识码]　A [文章编号]　1001-7089(2009)01-0011-02

DifferentExpressionofMMP21inNon2sun2exposedSkinbeforeandafterTreatmentbyNB2UVBXUHui,LIUJian2hang,CHENXiang2dong,etal(DepartmentofDermatology,ShanghaiNinthPeopleHospitalAffiliatedtoShanghaiJiaotongUniversity,SchoolofMedicine,

Shanghai200011,China)Abstract:Objective　ToinvestigatetheMMP21expressioninnon2sun2exposedskinbeforeandafterthetreatmentof311nmNB2UVB.Methods　Wecomparedtheparametersofphotoaginginvolunteerπsnon2sun2exposureskinbeforeandaftertreatmentof311nmNB2UVB;TheMMP21expressioninskinwasmeasuredimmunohistochemically;MMP21expressionoffibroblastswasde2tectedbyELISAafterdifferentdosageofNB2UVB.Results　Allpatientsshowedsignsofphotoaging.Amongthe28non2sun2ex2posedskinspecimens,theexpressionofMMP21waspositivein5specimens(17.9%)beforethetreatment,andtheexpressionofMMP21waspositivein9specimens(32.1%)afterthetreatment.(P<0.05);AfterdifferentdoseofNB2UVBradiation(0,10,20,30,50,60,80,120mJ/cm2),theexpressionofMMP21infibroblastincreasedconsiderablyatthedoseof20mJ/cm2.Theex2pressionincreasedinadose-dependentmanner,whichshowedstatisticalsignificance(P<0.05).Conclusion　RadiationofNB2UVBinhancestheexpressionofMMP21andacceleratesphotoaging.Keywords:Narrow2bandultraviolet;Matrixmetalloproteinase21;Immunehistologicalstain;ELISA;Non2sun2exposedskin

皮肤老化分为自然老化和光老化。目前认为遗传基因改变是皮肤自然老化的根本,而紫外线照射是造成光老化的主要原因。光老化皮肤主要表现为皮肤色素沉着、干燥、纹理变粗、皱纹形成、癌变等[1]。MMP21为胶原蛋白分解酶,也是分解皮肤胶原纤维的主要因子,参与皮肤老化过程[2]。为了观察NB2UVB对皮肤老化的影响,笔者对同一志愿者非光暴露皮肤经NB2UVB照射前后进行观察,并检测其MMP21表达的变化。1　材料与方法1.1　研究对象及标本来源　于2004年1月～2005年12月在本科进行NB2UVB(德国Walkmann公司生产的UV1000KL全舱治疗仪)照射治疗的银屑病患者中征集志愿者,入选标准为愿意配合实验,并完成照射多于30次。排除标准:光敏性疾病患者;自身免疫性疾病患者;眼、肝、肾等系统性疾病者;妊娠及可能妊娠　[作者单位]　上海交通大学医学院第九人民医院皮肤科,上海200011　[作者简介]　徐慧(1965-),女,江苏人,副主任医师,医学博士,主要研究方向为皮肤病理及皮肤美容。者;未能坚持治疗者。共入选28例,男17例,女11

例,平均年龄(39.00±6.28)岁。在其治疗前后各采取臀部约(1.0×0.5)cm2椭圆形无皮损皮肤。入选者均签署知情同意书。1.2　标本制备及免疫组化染色　标本均经10%甲醛固定,石蜡包埋。4μm厚度连续切片。分别行苏木精-伊红染色和免疫组化染色。MMP21试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司。采用免疫组化SP法检测组织中MMP21的表达。AEC显色,Mayer苏木素复染,水性封片剂封片,PBS代替一抗作空白对照。1.3　细胞培养和NB2UVB照射　原代培养的成纤维细胞来自儿童包皮,经4～8次传代后使用。细胞培养至接近融合时照射不同剂量的UVB,参阅文献[3-4]本研究采用的剂量分别为0,10,20,30,50,60,80,

120mJ/cm2,24h后分别收集其培养上清液,采用ELISA法检测上清液MMP21,严格按照操作说明进行,试剂盒的灵敏度为8ng/mL,最大检测浓度为1000ng/

mL。每个样本做3个复孔。1.4　结果判定　根据胞质染色程度及染色细胞的百分比进行评分:①基本不着色为0分;淡褐色为1分;

・11・中国皮肤性病学杂志2009年1月第23卷第1期 ChinJDermVenereol,Jan.2009,Vol.23,No.1深褐色为2分。②染色细胞<5%为1分;>6%为2分。二者相加0～1分为阴性,2～4分为阳性。患者治疗前后均拍照记录,对非光暴露皮肤在色泽、纹理、滋润程度等方面的变化采取医生和患者联合目测,同时结合照片对照的方法进行评估。1.5　统计学处理　采用SPSS13.0统计软件进行数据处理。免疫组化结果采用χ2检验,α=0.05作检验水准。ELISA的检测结果采用完全随机设计秩和检验,α=0.05作检验水准。2　结果2.1　所有病例照射5次后均出现皮肤变黑,并随着照射次数的增多色素沉着也进一步加剧,1例出现肤质干燥;照射10次后均出现肤质干燥,2例出现纹理变粗;完成30次照射的患者均出现皮肤色泽变暗、肤质干燥、纹理变粗(见表1)。表1　非光暴露皮肤治疗前后出现的光老化症状Tab.1　Hyotoagingsymptomsofnon2sun2exposedskinaftertreatmentTimeHyperpigmentationSkindrynessRoughskinAfter5treatments28/281/280/28After10treatments28/2828/282/28After30treatments28/2828/2828/282.2　MMP21检测结果　MMP21蛋白为细胞质染色,MMP21阳性信号为细胞质中深褐色的颗粒。非光暴露皮肤NB2UVB照射前有5例阳性,占17.9%;照射后9例阳性,占32.1%(χ2=5.24,P<0.05),差异有显著性。NB2UVB照射后的成纤维细胞经24h培养后,其MMP21的表达随NB2UVB照射剂量的增加而呈增高趋势,0,10,20,30,50,60,80,120mJ/cm2照射剂量MMP21的表达分别为705.4±3.5,720.1±5.0,767.0±1.2,766.7±2.1,959.7±17.3,970±10.3,990.9±4.5,1063.0±4.6ng/mL。由于数据呈非正态分布,采用秩和检验。分组检验结果:10mJ/cm2组MMP21的表达与未照射组差异无显著性;20mJ/cm2组的表达显著增高,差异有显著性;30mJ/cm2组与20mJ/cm2组差异无显著性;50mJ/cm2组与60mJ/cm2组的表达差异无显著性,但与20mJ/cm2组比较差异有显著性;80mJ/cm2组与50,60mJ/cm2组MMP21的表达差异有显著性;120mJ/cm2组的表达超过了最大检测剂量。3　讨论笔者观察到NB2UVB照射能使皮肤产生色素沉着,可能与NB2UVB刺激人角质形成细胞释放白介素(IL)21、酪氨酸酶和碱性成纤维细胞生长因子等,促使黑素细胞增殖和分化,诱导色素再生[5-6]有关。在体外实验中也观察到经UVB照射后黑素细胞增殖明显,黑素含量增加,酪氨酸酶活性提高[7]。与笔者观察到患者均出现不同程度的皮肤变黑相吻合。本研究还观察到NB2UVB照射会使皮肤肤质干燥、纹理变粗,说明NB2UVB照射能使皮肤出现光老化,与国外Diederen等[9]研究不同。经免疫组化染色证实,照射后的皮肤组织中MMP21表达明显增强。ELISA结果也证实NB2UVB照射能直接刺激成纤维细胞分泌MMP21,并且这种刺激与照射剂量呈依赖性关系。夏济平等[9]研究发现中波紫外线辐射不能直接增加体外培养的表皮角质形成细胞分泌MMP21,但能增加体外培养的真皮成纤维细胞分泌MMP21。本研究结果与之相符。有研究证实紫外线辐射的表皮角质形成细胞释放出细胞因子,

可间接促进真皮成纤维细胞的MMP表达[5]。本研究表明NB2UVB能使皮肤出现光老化,光老化程度与照射时间及剂量呈正相关性,并且NB2UVB能直接刺激真皮成纤维细胞MMP21的表达增强。推测NB2UVB

照射后真皮成纤维细胞MMP21表达增加,基质中胶原蛋白分解加剧,基质萎缩加快,三维结构遭到破坏,从而出现明显光老化症状。MMP21表达与肿瘤的发生发展有一定的关系,虽然短期内没有检索到NB2UVB

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卤米松乳膏联合窄谱中波紫外线治疗白癜风疗效观察

卤米松乳膏联合窄谱中波紫外线治疗白癜风疗效观察

卤米松乳膏联合窄谱中波紫外线治疗白癜风疗效观察白癜风是一种临床常见的色素异常性皮肤病，其发病机理未完全明确，治疗比较棘手，方法很多，但无满意疗效，治疗周期较长。

近年来，笔者科室应用卤米松乳膏联合窄谱中波紫外线（nb-uvb）治疗白癜风患者，取得了满意效果，现报道如下。

1 资料和方法1.1 临床资料：白癜风患者104例，其中男56例，女48例，符合临床诊断标准，年龄12～65岁，病程5周～20年，皮损为局限性78例，泛发型26例；稳定期66例，进展期38例。

患者无系统疾病，无光敏史。

排除妊娠、哺乳期妇女，近2个月以来未外用过其他激素类药物，以及未口服其他治疗白癜风的药物。

随机分为两组：照射组和药物组各52例，两组在性别、年龄、皮损情况及病程上无差异，有可比性。

患者自愿参加本试验并签订同意书，服从医嘱。

1.2 治疗方法：照射组：52例，外用0.05%的卤米松乳膏，每日2次，同时给予uv100l型紫外线治疗仪（德国waldmann公司）进行照射治疗，波长310～315nm，峰值是311nm,患者照射部位距离机器约20cm。

初始照射剂量为70%的最小红斑量，约为0.3～0.4j/cm2,照射时戴防护眼镜，每周照射3次，照射量每次递增0.1j/cm2，如果患者照射区出现痛性红斑或者水疱则停止照射，待皮损恢复正常再进行下一次治疗，照射量较前一次减少0.1j/cm2，患者总照射次数约30次；药物组：52例，仅给予0.05%的卤米松乳膏外用，每周5次，2次/天，若患者在外用药物过程中出现皮肤萎缩，毛细血管扩张等激素副作用时则减量使用至1次/天。

两组整个疗程为3个月，嘱患者每周复诊1次，记录患者感觉症状、皮肤白斑变化和不良反应情况。

1.3 疗效判断标准[1] ：痊愈：白斑全部消退，恢复正常肤色；显效：白斑消退或缩小，恢复正常肤色面积≥50%；好转：白斑部分消退或缩小，50%＞恢复正常肤色面积＞10%；无效：为白斑无色素再生或者白斑面积扩大。

卤米松乳膏联合窄谱中波紫外线对治疗白癜风的应用价值及效果分析

卤米松乳膏联合窄谱中波紫外线对治疗白癜风的应用价值及效果分析

卤米松乳膏联合窄谱中波紫外线对治疗白癜风的应用价值及效果分析【摘要】目的：为有效提高白癜风的治疗效果，对卤米松乳膏联合窄谱中波紫外线效果作进一步探究，为临床提供参考依据。

方法：回顾性分析2020年1月-2021年12月期间在本院接受治疗的白癜风患者为研究对象，共计60例，按接收治疗顺序平均分为对照组和观察组（每组各30例）。

结果：统计研究表明，两组患者在采取不同的治疗方法后，通过卤米松乳膏联合窄谱中波紫外线治疗的观察组患者治疗总有效率明显高于对照组，治疗后患者满意度更高，组间数据差异明显，P＜0.05，说明存在对比意义。

结论：分析表明，卤米松乳膏联合窄谱中波紫外线治疗对白癜风患者的治疗效果显著，应用价值良好，对此治疗方案建议大力推广应用。

【关键词】卤米松乳膏；窄谱中波紫外线；联合治疗；白癜风；治疗效果白癜风是临床上常见的一种皮肤色素异常性难治皮肤病，发病机制未完全明确，具有进展性、获得性及多因素，治疗较棘手，方法很多，但无比较满意的治疗效果，并且治疗周期较长。

白癜风相当顽固、难治，临床治疗白癜风的方法主要有系统用药、光疗、手术及局部用药等方式[1]。

回顾性分析2020年1月-2021年12月期间本院收治的白癜风患者60例进行卤米松乳膏联合窄谱中波紫外线治疗与卤米松乳膏治疗对照研究，经临床结果观察显示，本研究取得满意效果，具体内容如下。

1 资料与方法1.1 一般资料回顾性分析2020年1月-2021年12月期间在本院接受治疗的白癜风患者为研究对象，共计60例，按接收治疗顺序平均分为对照组和观察组（每组各30例）。

观察组患者男17例，女13例；患者年龄（11-55）岁，均值（27.73±3.89）岁；病程0.5-13年，均值(4.17±0.73)年；对照组患者男18例，女12例；患者年龄（10-53）岁，均值（25.58±3.16）岁；病程0.2-11年，均值(3.65±0.52)年；两组数据比较，p＞0.05，具有可比性。

他克莫司软膏联合窄谱中波紫外线治疗白癜风疗效观察

他克莫司软膏联合窄谱中波紫外线治疗白癜风疗效观察

他克莫司软膏联合窄谱中波紫外线治疗白瘢风疗效观察（江阴市中医院江苏江阴214400）口的观察窄谱中波紫外线（NB — UVB）全身照射和他克莫司软膏外用治疗白瘢风的临床疗效。

方法对25例口瘢风患者进行随机分组，治疗组釆用NB — UVB联合他克莫司软膏外用；对照组釆用NB-UVB,每周2次。

结果两组的有效率分别为69.2%、50.0% ,两组间疗效比较差异有统计学意义（P<0.05）o 结论提示窄谱中波紫外线全身照射治疗白瘢风起效快，联合他克莫司软膏外用治疗，能提高疗效，值得在临床上应用。

标签：口瘢风；他克莫司；窄谱中波紫外线1资料与方法1」临床资料25例病人均为我院门诊患者，其中男15例，女10例，年龄11〜60岁，病程2月〜22年。

根据全国中西医结合皮肤性病学会色素病学组的分型标准分型[1]，其中节段型7例，散发性8例，泛发性5例，肢端性5例。

入选标准：无心、肝、肾疾病，无光敬性疾病，无白内障、无皮肤癌史，非妊娠、哺乳期患者。

将25例患者随机分两组，两组患者的年龄、性别、病程、临床分型等方面比较差异无统计学意义（P>0.05）,具有可比性。

1.2方法1.2.1仪器治疗仪器采用德国waldmannUV紫外线全身照射治疗仪，波长310-315 mm,峰值311 nnio122最小红斑量测定最小红斑量（MED）测定治疗前对每例患者的背部皮肤进行MED测定，24h 后判定结果。

1.2.3治疗方法将病人随机分为两组，治疗组13例，釆用NB —UVB联合他克莫司软膏外用，NB-UVB照射，每周2次，2次之间至少间隔2d,治疗初始剂量为70% MED,以后每次递增20%,最高单次照射剂量达3.0 J/cm2,治疗后若出现淡红斑则维持该剂量，若出现疼痛性红斑或水疱则暂停照射，待红斑消退后再行照射，恢复照射时剂量较前减少50%,照射时露岀患处，嘱患者站立于治疗仪中。

窄谱中波紫外线治疗皮肤病的近期不良反应及处理

窄谱中波紫外线治疗皮肤病的近期不良反应及处理

采 用 ｕｖ 系 列 紫 外 光 皮 肤 病 治 疗 仪 ＩＯＯＬ治 疗 系 统 （德 国 Ｗａｌｄｍａｎｎ公司），使用 Ｔ【，．０１灯管 ，波长 为 ３１１ ｎｍ，照射距离 为 １０ ｅｍ，ＨＩ型 皮 肤 起 始 量 为 ０．５ Ｊ／ｅｒａ ，１Ｖ型 皮 肤 为 ０．６ Ｊ／ｃｍ 每 周 ３次 ，每次照射剂量递增 ０．１ Ｊ／ｃｍ 。接受照射时患者需戴专用 防 护 眼罩 ，由专 人负责观察 ，每次 观察时记 录不 良反应及 其出现 的 时 间 、消 退 时 间 、处 理 方 法 。
［关键词】 紫外线 ，中波 ，窄谱 ；不 良反应
［中 图 分类 号 】 Ｒ４５４．２
［文献 标 识 码 】 Ｂ
［文 章编 号】 １０００—４９６３（２００６）１０—６７９—０２
近年来随着 窄谱 中波紫外线 （ＮＢ—ＵＶＢ）在皮肤科的广泛应 用 ，其 近 期 不 良反 应 受 到 了大 家 的 关 注 。我 科 于 ２００４年 １２月一 ２００５年 １１月 采 用 ＮＢ—ＵＶＢ治 疗 寻 常性 银 屑病 、玫瑰 糠 疹 、白癜 风 患 者共 １７１例 。现 将 随 访 资 料 完 整 的 １５２例 患 者 经 ＮＢ—ＵＶＢ 治 疗 后 出现 的近 期不 良反 应 及处 理 方 法 总结 报 告 如 下 。
４ 讨 论
紫外线是治疗皮肤病的重要方法 ，不 同波长范围的紫外线 具 有 不 同 的生 物 学 效 应 ，紫 外线 的 治 疗 作 用 及 不 良反 应 均 与 其 生 物 学效 应 密 切 相 关 。ＮＢ—ＵＶＢ波 长 在 ３１ １ ａｍ，是 ＵＶＢ治 疗 效 果最佳的波段 ，由于滤除 了其 他波 长紫外线 ，与 ＵＶＢ相 比更不 容易发 生红斑效应 ．可以使用更高 的照射剂量 ，从而获得 更好 的 疗 效Ｉ２１。因而 ＮＢ—ＵＶＢ广 泛 用 于皮 肤 病 的治 疗 ，因其 不 良反 应 相对较小 ，易被 人们忽视 。笔者通过 观察 １５２例接受 ＮＢ—ＵＶＢ 治 疗 的患 者 近 期 不 良 反 应 ，发 现 不 同 程 度 的 色 素 沉 着 、红 斑 反 应 、皮 肤 干燥 是 ＮＢ—ＵＶＢ最 常 见 的 近 期 不 良反 应 。其 次 为 皮 肤 瘙 痒 、灼 热 感 、灼 痛 感 ．轻 者 无 需 特 殊 处 理 ．部 分 适 当 延 长 光 疗 间隔时 间 ，调整 每次照射剂 量 、照射距离 、遮盖 非皮损部 位 ，继 续 光 疗 症 状 逐 渐 缓 解 。 灼 痛 明 显 者 给 予 消 炎 痛 口服 ，该 药 通 过 抑制前列腺素 Ｅ 的表达抑 制 ｕＶ引起的红斑 反应＿］Ｉ 兼有镇 痛 作用 。