中国中医急症２０１２年６月第２１卷第６期 ＪＥＴＣＭ．Ｊｕｎ．２０１２，Ｖｏ１．２１，Ｎｏ．６
益气活血解毒汤对心肌缺血大鼠ＴＮＦ一 、ＩＬ一６
及心肌组织的影响木
陈 浩 胡业彬
（１．江苏省无锡市中医医院，江苏无锡２１４００１，２．安徽中医学院第一附属医院，安徽合肥
２３００３１）
中图分类号：Ｒ２８５．５ 文献标志码：Ａ文章编号：１００４—７４５ｘ（２Ｏ１２）０６—０９１１－０３
【摘要】目的观察益气活血解毒汤对实验性心肌缺血大鼠肿瘤坏死因子一ＯＬ（ＴＮＦ一仅）、白细胞介素～６（ＩＬ一６）
及心肌组织的影响．探讨其抗心肌缺血的作用机理。方法将７Ｏ只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为空白对照组，模型组，
益气活血解毒汤低、中、高剂量组及复方丹参滴丸组，硝酸异山梨酯组，每组１０只。采用腹腔注射异丙肾上腺
素（ｉｓｏ）制造心肌缺血模型，记录各组大鼠心电图，造模后３０ ｍｉｎ处死动物，测定ＴＮＦ一 、ＩＬ一６，取心尖部全
层心肌观察心肌损伤情况。结果益气活血解毒汤可以降低心肌缺血大鼠Ｊ点总偏移值；降低血清ＴＮＦ—Ｏｔ、
ＩＩ，－６水平，减轻心肌缺血导致的病理损伤，以高剂量效果最为明显。结论益气活血解毒汤对ＩＳＯ造成的心
肌缺血大鼠具有保护作用，其作用机制可能与其抑制炎症反应，降低ＴＮＦ一０【、ＩＬ一６的水平有关。
【关键词】 益气活血解毒汤 急性心肌缺血ＴＮＦ一 ＩＬ一６心肌组织损伤
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｙｉｑｉｈｕｏｘｕｅｊｉｅｄｕ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ＴＮＦ－ａ，ＩＬ－６ ａｎｄ Ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ Ｔｉｓｓｕｅ ｏｆ Ａｃｕｔｅ Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ Ｉｓ－
ｃｈｅｍｌａ Ｒａｔｓ ＣＨＥＮ Ｈａｏ ，ＨＵ Ｙｅ－ｂｉｎ２．１ Ｗｕｘｉ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＴＣＭ，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｗｕｘｉ，２１４００１；２ Ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆｆｉｌｉａｔ－
ｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＡｎｈｕｉ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｗｉｎｅ，Ａｎｈｕｉ，Ｈｅｆｅｉ，２３００３１
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ Ｙｉｑｉｈｕｏｘｕｅｊｉｅｄｕ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｏｎ ＴＮＦ一 ，ＩＬ一６ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｔｉｓｓｕｅ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｃｕｔｅ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｓｅｖｅｒａｌ ｇｒｏｕｐｓ ｓｕｃｈ
ａｓ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ Ｙｉｑｉｈｕｏｘｕｅｆｉｅｄｕ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｄａｎｓｈｅｎ Ｐｉｌｌ ｇｒｏｕｐ
ａｎｄ ｔｈｅ ｉｓｏｓｏｒｂｉｄｅ ｄｉｎｉｔｒａｔｅ ｇｒｏｕｐ．Ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ＩＳＯ ｉｎｔｏ ａｂｄｏｍｉｎａｌ ｃａｖｉｔｙ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ａｃｕｔｅ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｉｓ—
ｃｈｅｍｉａ ｍｏｄｅｌ，Ａｎｄ ｔｈｅｎ ｔｈｅ ＥＣＧ，ｔｈｅ ＴＮＦ－ｃｔ ａｎｄ ｔｈｅ ＩＬ－６ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅ ｉｎ ｔｈｅｓｅ ｇｒｏｕｐｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ Ｙｉｑｉｈｕｏｘ—
ｕｅｊｉｅｄｕ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｔｈｅ ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｅｌｅｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｊ Ｄｏｔ ａｎｄ ｌｏｗｅｒｅｄ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ＴＮＦ—— ａｎｄ ＩＬ－６．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ．ｉｔ ａｌｌｅｖｉａｔｅｄ ｔｈｅ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｊｕｒｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｙｉｑｉｈｕｏｘｕｅｊｉｅｄｕ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ
ｈａｓ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ａｃｕｔｅ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｒａｔｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ＩＳＯ．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｃａｎ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｐｒｏｂａｂｌｙ ｔｏ ｉｎｈｉ—
ｂｉｔｉｏｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ＴＮＦ— ａｎｄ ＩＬ－６．
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｙｉｑｉｈｕｏｘｕｅｊｉｅｄｕ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ；Ａｃｕｔｅ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ；ＴＮＦ－ｃｔ；ＩＬ－６；Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｊｕｒｙ
急性心肌缺血是由于心肌供血不足和（或）心肌耗氧量增
加，引起一系列心肌血氧供需平衡障碍，可导致心肌坏死。心肌
缺血最常见的原因是由于冠状动脉粥样硬化导致冠状动脉管腔 狭窄或闭塞，以及在狭窄的基础上发生冠状动脉痉挛而出现急
性或慢性心肌供血不足 １］。本课题组认为。本病乃本虚标实之 证，气虚为发病的始动因素，气虚无力行血而致瘀血内阻，血瘀
日久酿生毒邪，瘀毒阻络为急性心肌缺血的基本病机。因此．本
研究拟观察中药益气活血解毒汤对实验性心肌缺血大鼠心电 图、肿瘤坏死因子一ｃｔ（ＴＮＦ一仅）、白细胞介素（ＩＬ一６）及心肌组织的
影响，探讨其抗心肌缺血的机制。
１材料与方法
１．１ 实验动物 选用健康成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠７Ｏ只，雌雄各半。体
质量２００～２２０ ｇ，由安徽省医学科学研究所提供。合格证号：皖医
动准字０８１６４６号。颗粒饲料，购于安徽省医学科学研究所。
基金项目：安徽省自然科学基金项目（Ｎｏ．２００６ＫＪ３４０Ｂ） ・９１１・
・实验研究・
１．２仪器８０—２离心机：上海手术器械厂；５ｌ１大鼠心电图仪：
上海光电医学仪器公司：Ｏｌｙｍｐｕｓｂｘ显微镜：日本Ｏｌｙｍｐｕｓ公司 生产；石蜡切片机：德国徕卡公司；ＧＣ一９１０放射免疫计数器：中
国科技大学创新股份有限公司：ＫＤＣ一２０４６低速冷冻离心机：中
国科技大学创新股份有限公司；兴建干燥仪：青岛化工制造厂；
ＳＨ一８０１放免计数仪：国营二六二厂。
１．３试药ＴＮＦ一仅试剂盒：解放军总医院科技中心放免所．批
号：２００８０６１１；ＩＬ一６试剂盒：解放军总医院科技中心放免所，批
号：２００８０６１１：复方丹参滴丸：天津天士力制药股份有限公司生
产。硝酸异山梨酯片：５ ｍｇ／粒，由天津太平洋制药有限公司生
产；异丙。肾上腺素注射液：１ ｍｇ／支，由上海禾丰制药有限公司生
产；水合氯醛：北京化学试剂公司生产。益气活血解毒汤：由红参
５ ｇ，丹参１０ ｇ，水蛭３ ｇ，丹皮１０ ｇ，连翘１０ ｇ，黄芩１０ ｇ等组成，
为成人每日剂量．原生药共计４８ ｇ。生药饮片一次性购于安徽中
医学院第一附属医院。除水蛭、红参外的药物先浸泡３０ｍｉｎ；水
蛭研粉，打末后混于药液中；红参另煎成汁液后兑人。
・９１２・ 中国中医急症２０１２年６月第２ｌ卷第６期 ＪＥＴＣＭ．Ｊｕｎ．２０１２，Ｖｏ１．２１，Ｎｏ．６
１－４分组与给药 大鼠适应性喂养１周后，随机分为７组，分 别为益气活血解毒汤高、中、低剂量组，空白对照组，模型组，复
方丹参滴丸组，硝酸异山梨酯组，每组ｌ０只。益气活血解毒汤
高、中、低剂量组分别按成人等效剂量的１４倍、７倍、３．５倍灌胃
给药（１ ｍＬ／１００ ｇ体质量），生药剂量分别为１１．２、５．６、２．８ ｋｇ。
复方丹参滴丸组：复方丹参滴丸用蒸馏水溶解为０．３５粒／１００ｍＬ，
按ｌｍＥ／１Ｏ０ ｇ体质量灌胃。硝酸异山梨酯组：硝酸异山梨酯片用
蒸馏水溶解为０．３５ｍｇ／１００ｍＬ。按１ ｍＬ／１００ ｇ体质量灌胃。空白 对照组和模型组予蒸馏水按１ ｍＬ／１００ ｇ体质量灌胃。每日１次，
连续７ ｄ。 １．５模型制备于给药第６、７日，大鼠腹腔注射异丙肾上腺素
（ＩＳＯ）１０ｍｇ／ｋｇ，空白对照组腹腔注射０．９％氯化钠注射液２ｍＬ。
１．６标本采集与检测
１．６．１心电图给药第６日灌胃３０ｍｉｎ后给予大鼠水合氯醛
麻醉，四肢、胸前放置电极，记录动物正常标准Ⅱ、Ｖ 导联心电
图。造模后即于３０ Ｓ、ｌ ｍｉｎ、２ ｍｉｎ、３ ｍｉｎ、５ ｍｉｎ、１０ ｍｉｎ、３０ ｍｉｎ
记录Ⅱ导联、Ｖ 导联心电图。按文献报道的方法［２］观察各组上述 时间点Ｊ点（ＱＲＳ波群与Ｔ波交点）的下降和上升的绝对值（记
为△Ｊ值＝注射ＩＳＯ后各时间点Ｊ点值一注射前Ｊ点值）。以ＸＡＪ
总偏移值的平均值作为衡量心肌损伤程度的观察指标。ＥＣＧ纸
速调整为５０ ｍｒｒｄｓ。 １．６．２血液指标给药第７日灌胃３０ ｒａｉｎ后给予大鼠腹腔注
射水合氯醛麻醉。腹主动脉取血约５－６ ｍＬ，离心取血清按试剂
盒规定检测ＴＮＦ一仅、ＩＬ一６。
１．６＿３心肌组织形态学取血处死大鼠后．取出心脏，用生理盐
水冲洗，滤纸吸干水分．取左室游离壁横断面心肌组织。按以下
步骤操作：将左心室组织浸泡４％多聚甲醛充分固定，梯度乙醇
脱水，二甲苯透明，常规石蜡包埋，蜡块从左心室心尖部作连续
切片，厚度为５ ｍ；ＨＥ染色，光镜下观察细胞形态。
１．７统计学处理应用ＳＰＳＳ１３．０软件分析。计量资料以（Ｘ＿－ＥＳ）
表示，采用单因素方差分析及ＬｓＤ—ｔ检验。Ｐ＜０．０５为差异有统
计学意义。
２结 果 ２．１ 各组大鼠ＴＮＦ—Ｏｔ、ＩＬ一６水平比较见表１。模型组大鼠血 清ＴＮＦ—Ｏｔ、ＩＬ一６含量最高．与其余各组比较均有显著差异（Ｐ＜
０．０５或０．０１）。各用药组比较虽然有轻微差异，但并无统计学意
义（Ｐ＞０．０５）。结果表明益气活血解毒汤能降低急性心肌缺血大
鼠的ＴＮＦ—Ｏ／、ＩＬ一６含量．改善急性心肌缺血大鼠的内环境紊乱。 表１各组大鼠ＴＮＦ—ｄ、ＩＬ一６水平Ｖｈ￣．（ｎｇ／ｍＬ， 蟠）
与模型组比较，｝Ｐ＜Ｏ．０５， ｝Ｐ＜０．Ｑ１。 ２．２各组大鼠造模前后∑△Ｊ总偏移值的平均值变化 见表２。
模型组Ｊ点总偏移值的平均值最大，提示心肌损伤最为严重。模 型组与益气活血解毒汤高剂量组、硝酸异山梨酯组比较有显著
性差异（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）。与益气活血解毒汤中剂量组、低剂量组、复方 丹参滴丸组比较有差异（Ｐ＜０．０５）。表明益气活血解毒汤对ＩＳＯ导 致的心肌损伤具有一定的保护作用，以高剂量组效果最为显著。 表２各组大鼠造模前后ＸａＪ总偏移值的平均值比较（；±ｓ）
２．３对心肌缺血大鼠心肌病理损伤程度的影响 见图１。空白
对照组心肌细胞排列整齐．无明显变性坏死，间质无炎细胞浸
润，无水肿；模型组主要表现为心肌广泛水肿，间质增宽，小灶性
心肌细胞变性坏死，坏死处心肌细胞肌浆溶解或空泡变，局部有 炎细胞浸润，部分区域心肌横纹消失、扭曲、紊乱，心肌间质血管
扩张充血，心肌细胞胞浆淡染；益气活血解毒各给药组均能减轻
心肌病理损伤的作用。尤以高剂量组最佳。
一●■
空白对照组 益气活血解毒汤高剂量组 益气活血解毒汤中剂量组
一■睡
益气活血解毒汤低剂量组 复方丹参滴丸组 硝酸异山梨酯组
模型组 模型组 图１各组心肌组织形态学（ＨＥ，ｘ２００）
３讨论 急性心肌缺血及冠状内皮损伤后，可引起局部的炎症反应，
使冠脉收缩和痉挛，进一步损伤血管和心肌。研究表明＿３ ］，
ＴＮＦ一仅、ＩＬ一６与急性心肌缺血关系密切，本研究表明益气活血解
毒汤可降低ＴＮＦ一仅、ＩＬ一６的水平，与模型组比较差异有统计学
意义。证实益气活血解毒汤可抑制炎症反应对缺血心肌起保护
作用。
ＩＳＯ是Ｂ受体激动剂，ＩＳＯ与Ｂ受体结合后，促进Ｇｓ蛋白
释放Ｂ亚单位激活乙酰胆碱诱导的离子通道，减少细胞质Ｃａ２＋
浓度和Ｎａ＋内流，并成线粒体钙超载，从而引起心肌电生理变
化，表现心电图曲线中Ｊ点下移，Ｔ波下降［６］。已有研究表明注射
ＩＳＯ前后比较Ｔ波下降并无显著差异。本实验选用Ｊ点下移值
（下转第９３５页）
