冠脉结扎法制做大鼠心肌缺血模型
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一、T TC染色原理：TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感复合物，1894年首次合成用来检测种子的生存能力，1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。
它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体，与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色，而缺血组织内脱氢酶活性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白。
二、TTC溶液配制：（1 0.1M Na2HPO4: 14.2 mg in 1L distilled H2O2 0.1M NaH2PO4: 12 mg in 1L distilled H2O3 Mix 1L 0.1M Na2HPO4 with 0.5L 0.1M NaH2PO4 adjust pH to 7.44 Dissolve 1g TTC powder (sigma T 8877) in 100ml phosphate solution注意事项：1、TTC新鲜配置。
2、再灌注3小时以上。
3、新鲜组织切薄片2mm左右放置TTC溶液内。
4、TTC放置37度温箱内15-30分钟。
5、如当天显色不好，可从TTC中拿出置入10%甲醛过夜再看。
二、心肌缺血和梗死范围测定a. 完成全部采血后，开胸再次钳夹左前降支，于颈静脉注入3％Evans 蓝2～3ml，（也可以切下心脏再从主动脉注入EB但切记原结扎部位一定要重扎紧）。
确定未缺血与缺血心肌(未缺血心肌呈蓝色，危险区域不染色)。
b.经耳缘静脉推注10%氯化钾（2ml/kg），使心脏停于舒张期,开胸取出心脏。
c.生理盐水冲洗心脏，剥离心包后称重。
d. 将离体心脏用保鲜膜包裹，置于-20℃下保存1h，切取左、右心房及右心室标本，从非梗死区纵行切开左心室。
e. 将缺血区心室肌以平行于房室沟的方向切成4 片，每片厚1～2mm。
置入1％氯化三苯基四氮唑(TTC)磷酸缓冲液(pH7.4)中37℃水浴10～15min。
(避光，振荡)f. 10％福尔马林固定10ming. 梗死区不染色，未梗死区染为红色，红色区与未染色区之和为缺血区。
大鼠心肌梗死模型构建和评价方法的改良
大鼠心肌梗死模型构建和评价方法的改良杨涛涛;肖颖;奚赛飞;马毅超;方明笋;寿旗扬;潘永明;陈民利【摘要】目的优化和改良大鼠心肌梗死模型的构建和评价方法,提高模型的可靠性和稳定性.方法取雄性SD大鼠结扎左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,在模型的构建过程中从麻醉、插气管、保温、手术操作、术后护理等环节进行优化和改进,并观察不同的麻醉方法和术后时间对心肌梗死程度的影响,用不同的染色方式进行心肌梗死模型的评价.结果对比大鼠心肌梗死模型构建过程中各组大鼠麻醉时间、术后恢复以及心肌梗死面积的结果,戊巴比妥钠是更合适的麻醉药;结扎手术后时间对模型心肌梗死范围无明显影响(P>0.05),但心肌缺血危险区面积随术后时间的延长明显减少(P<0.01);TTC与依文思蓝双重染色相对TTC染色能明显观察到心肌缺血危险区和梗死区范围.结论优化和改进后的大鼠心肌梗死模型,提高了动物福利,制备和评价方法更加客观准确.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2014(024)002【总页数】7页(P46-51,后插4)【关键词】大鼠;心肌梗死模型;方法;改良【作者】杨涛涛;肖颖;奚赛飞;马毅超;方明笋;寿旗扬;潘永明;陈民利【作者单位】浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053【正文语种】中文【中图分类】R33心肌梗死是一种严重的心血管系统疾病，已成为中老年人群死亡的主要病因之一。
心肌梗死动物模型具体方法及步骤
心肌梗死动物模型具体方法及步骤原型物种人来源结扎冠状动脉左前降支（LAD）导致心梗模式动物品系SPF级SD大鼠，健康，3-4W，雌雄各半，体重为180g-200g。
实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
实验周期72h建模方法心肌梗死是指心肌的缺血性坏死，是一种急性及严重的心脏状态。
心脏作为血液循环动力中心这一功能的实现，需要冠状动脉不断提供的血流供应，当冠状动脉发生病变而狭窄或堵塞，使得冠状动脉的血流急剧减少或中断，便会使相应的心肌出现严重而持久地急性缺血，心肌无法得到足够氧气，最终导致心肌不可逆的缺血性坏死，心脏的收缩和舒张功能降低，机体供血不足，严重者最终导致机体死亡。
1. 大鼠用3%戊巴比妥钠（30mg/kg），腹腔注射麻醉，用小动物剃毛器剃除大鼠胸部及腋下毛发（充分暴露手术区），用碘酒和75％乙醇术区消毒。
2.气管插管：麻醉后，夹趾检测无反应即可进行MI手术。
打开外置光源、显微镜开关，打开呼吸机，设置好各参数（呼吸比2：1，潮气量6-8 mL，频率70 次/min），将气管插管沿声门插入气管，取下大鼠接上呼吸机，观察大鼠呼吸状况，胸廓起伏与呼吸机频率一致表示插管成功，即可进行MI手术。
3. 大鼠采用右侧卧位，用眼科剪在左前肢腋下，用显微剪于三、四肋间打开胸腔充分暴露心脏，显微直镊轻轻夹起少量心包并于左心耳下撕开少许心包，充分暴露左冠状动脉前降支（LAD）或所在区域。
4. 结扎冠状动脉：于显微镜下找到LAD走向或可能所在位置,持针器持取5-0带针缝合线，于左心耳根部下方肺动脉圆锥旁以5-0 无创缝合线穿过左冠状动脉前降支( LAD)，以完全阻断LAD血流。
5.关胸：结扎完成后，5-0缝线完全缝合胸腔开口（保证无缝隙、无错位）关闭胸腔，由内向外逐层缝合各层肌肉和皮肤。
6.术后管理：术后密切关注大鼠状态，有无呼吸异常等。
待大鼠自然苏醒后将大鼠从呼吸机上取下并取下气管插管，正常饲养。
大鼠心肌梗死模型建立方法选择及心电图表现
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中国实验动物学报 2011 年 12 月第 19 卷第 6 期
Acta Lab Anim Sci Sin ， December ， 2011 ， Vol． 19. No． 6
spectively． There was no myocardial infarction and the survival rate was 100% in the sham operation group． ECG ： QRS-T wave displayed an intersection “M ” shape in the sham group and before left coronary artery ligation． The R wave and T wave fused into one large tent-like single wave after the left coronary artery ligation ，and without visible ST segment． Histopathological changes of myocardial infarction were seen at 4 weeks after operation． Conclusions tip ，and all ECG showed no visible ST segment in the rats． 【Key words 】 Rat ； Model ，myocardial infarction ； Electrocardiogram It is a novel method to establish myocardial infarct model that the suture is placed about 2 mm distal to the horizontal line of left atrial appendage
冠脉结扎法制作大鼠心肌缺血模型
冠脉结扎法制作大鼠心肌缺血模型1.1实验材料1.1.1实验动物清洁级Wistar近交系大鼠100只(购自中国科学院上海实验动物中心)，均为雄性，体重245～320g(平均278.2±22.2g)，饲养环境为清洁级。
1.1.2试剂3%戊巴比妥钠，1%肝素钠，Evans蓝和N-BT磷酸缓冲液(Sigma公司)。
1.1.3实验仪器心电图机，动物呼吸机(浙江医科大学医疗仪器设备厂，DH150型动物呼吸机)，Buxco系统(Buxco公司)。
1.2模型制作1.2.1动物分组根据研究目的，实验动物共分六组；其中五个组需手术制作模型，合称手术组，另一个组为假手术组。
为满足每组12只的要求，先后有100只动物随机进入手术组(85只)与假手术组(15只)。
1.2.2制作方法1.2.2.1手术组用3%戊巴比妥钠(30mg/kg)行腹腔注射麻醉，麻醉满意后置于手术台，四肢及头部仰卧固定于手术台上，四肢皮下连接心电图电极，记录标准Ⅱ导联心电图，颈部皮肤备皮消毒，胸骨上窝上正中切开皮肤0.5cm，向上钝性分离推开下颌下腺，剪除气管前肌肉，使气管在没有任何拉钩牵引的情况下能充分显露，彻底止血后于第2～3气管环间行气管横行切开，注意不要切断气管软骨环，切口长度不超过气管周径的1/3，擦干其内分泌物后插入气管插管(用小儿吸痰管自制)，深度为0.5～1cm。
连接空气呼吸机进行人工控制呼吸，呼吸频率90次/分，潮气量10～12ml，吸呼比设为1﹕1。
左前胸去毛，消毒铺巾，顺肋间隙方向于胸骨左旁第3～4肋间切开皮肤，长约1cm，逐层分离皮下组织、肌肉，于2～3肋骨间撑开进胸，向右上方推开胸腺，可暴露心脏及大血管根部，切开心包，轻挤大鼠胸廓，将心脏挤出，有部分动物在左心耳下缘与肺动脉圆锥间可以看见左冠脉前降支起始部，用6-0Prolene线缝针，进针深度控制在0.1cm，宽度为0.1～0.2cm(图1)；回纳心脏入胸廓，待动物的数十次心动周期后，收线打结；观察数分钟后，彻底止血后逐层关胸。
降脂中药对大鼠急性心肌缺血的影响
降脂中药对大鼠急性心肌缺血的影响张玉华（中国人民解放军第四军医大学）[摘要] 目的：观察第四代降脂宁颗粒对冠脉结扎及垂体后叶素致大鼠心肌缺血模型的影响。
方法：给予第四代降脂宁颗粒7 d后，采用结扎左冠状动脉复制大鼠急性心肌梗死模型，TFC染色后计算梗死心肌占心室的百分比；采用垂体后叶素注射致大鼠急性心肌缺血模型，观察给予第四代降脂宁颗粒7 d后对造模后心电图sT、T波的影响。
结果：第四代降脂宁颗粒各剂量组均可以不同程度地降低心肌梗死范围，差异具有统计学(P<0．05)；第四代降脂宁颗粒各剂量组能减少大鼠心电图的T波和sT段在给予垂体后叶素30 S内的上抬幅度，和模型组比较具有统计学差异(P<0．05，P<0．01)。
结论：第四代降脂宁颗粒对大鼠急性心肌缺血具有一定的保护作用。
[关键词] 第四代降脂宁颗粒；心肌缺血；心肌梗死；心电图ST 冠心病心绞痛相当于中医胸痹心痛的范畴，早在《内经·素问》中就有对此病的描述、预后分析及治疗的记载。
张仲景《金匮要略》列专篇对其论述，并创立了治疗心绞痛的治疗体系。
近年来的研究提示中医药在治疗冠心病心绞痛方面具有速效、疗效稳定、毒副作用小等优点，在中成药的研究开发等方面亦进行了大量的工作，为冠心病的防治做出了突出的贡献。
然而，当前的国内中成药市场上中成药的功能比较单一，或者以活血化瘀止痛为主，或者以芳香开窍急救为主；或者以益气、养阴培本为主；尚缺乏针对气阴两虚、瘀阻心脉型胸痹的药物。
而我们在临床实践中观察到，胸痹心痛(冠心病心绞痛)往往由多种危险因素长期作用于人体后发生，多发于40岁以上的中老年人，其证往往虚实夹杂，本虚标实。
单纯实证或虚证非常少见。
根据这一临床实际，我们结合临床病症特点和多年诊治冠心病的经验，用第四代降脂宁颗粒，既针对患者气阴不足的本虚，又充分考虑病发时瘀血痹阻的标实，经过数年临床实践，证实第四代降脂宁颗粒疗效较单用益气养阴或活血化瘀治法为优。
大鼠心肌梗死模型图解
大鼠心肌梗死模型制作图解庄瑜制作南京市第一医院南京医科大学附属南京第一医院南京市心血管病医院心胸外科/制作前准备1．器械：动物呼吸机，开胸制作心梗模型，维持呼吸至关重要。
虽然据说某些牛人可以不用呼吸机，但是我想这是经验积累的结果，开始时必然要用；况且需要看此说明的人应该没有牛到这个程度。
当然，如果你经费异常充足，不在乎死亡成千上万的大鼠也可以。
显微器械，最主要的是针持，大鼠胸腔、心脏均很小，常规器械无法进入胸腔缝扎。
其他手术器械以眼科器械为主。
2．动物：应选择成年健康大鼠，耐受性较好。
最重要的是要充分利用每一只动物，包括死亡的大鼠。
许多人都知道制作大鼠模型需要多练习，但是练习不是买一大批大鼠，不停地缝扎，然后不停地扔掉死的大鼠；当然，制作心梗模型死亡一些大鼠是很正常的事情。
练习的前提是对大鼠解剖及操作过程的熟悉，如果可能的话，最好先找一份大鼠的解剖图谱，熟悉手术区域的解剖结构；同时研究实验流程，熟悉每一个实验步骤。
大鼠死亡后，不要急着扔掉，利用它练习每一个你不熟悉的操作步骤，直到熟练为止。
3．实验者：实验者必须具有一种平和的、耐得住寂寞的心态，制作模型需要时间，尤其是早期，需要耐心、仔细的摸索；必须对每一个步骤进行认真地研究。
最熟练的制作者做一只大鼠模型也需要30到40分钟的时间，加上准备及扫尾的时间，制作十只模型就需要一天的时间，如果你废寝忘食多用用功也可能做到15只左右，这样一天下来腰酸背痛是必然的，你能坚持多久？不熟练的话，一只就要两、三个小时；同时还要看着大鼠在你的手中死亡，这是很揪心的事情。
因此，实验者必须具备良好的心态，急于求成、难耐寂寞者不适合做此实验。
本人系气管切开插管，缝扎LAD制作模型。
亦有人经口插管，液氮冷冻制作模型；不在本人讨论范围之内，哪位有经验的话可以传上来，一起讨论。
最后祝各位早日成功！！导师简介陈 鑫 主任医师、教授，1963年2月出生于江苏靖江，1985年毕业于南京铁道医学院，同年进入南京市第一医院工作，1993年2月获南京医科大学硕士研究生学位，1993.3 - 1994.2至 Ocala Heart Institute, Ocala, FL, USA.学习，回国后从事心胸血管外科的临床、科研及教学工作，1999年成为南京医科大学硕士研究生导师，培养多名专业人才。
智慧树知到 《中药药理学》章节测试答案
智慧树知到《中药药理学》章节测试答案第一章1、下面哪项不属于中医药理论( )A: 藏像学说B:经络学说C:药性理论D:解剖理论正确答案：解剖理论2、下列哪项不属于中药药理学的学科任务（）A:探讨中药防治疾病的科学内涵B:开发和研制中药新药C:研究中药有效成分的理化性质D:为临床进一步合理用药提供依据正确答案：研究中药有效成分的理化性质3、中药药理学研究的内容有哪些？（）A: 中药药效学B:中药药动学C:中药鉴定学D:中药化学正确答案：中药药效学,中药药动学4、中药药理学是运用现代科学技术研究中药与机体相互作用及作用规律的科学。
A:对正确答案：错5、中药药理学研究的对象是指的单味中药和中药复方。
A:对B:错正确答案：错6、中药是指在中医药理论指导下，用于治疗、预防疾病的物质。
A:对B:错正确答案：对7、中药毒理学的研究现状是（）A:中药临床应用的禁忌问题正得到重视B:中药的毒理学研究已经开展C:有毒中药的开发、研究D:以上都是正确答案：以上都是8、中药药物效应动力学包括药物作用和作用机理两方面的研究。
A:对B:错正确答案：对9、中药药效学和药动学是相互独立，没有联系的两个过程。
A:对正确答案：错10、中药药物代谢动力学研究的是药物在体内（）的过程。
A:吸收B:分布C:代谢D:排泄正确答案：吸收,分布,代谢,排泄第二章1、中药的基本作用包括()A:扶正作用B:祛邪作用C:调节作用D:兴奋作用正确答案：扶正作用,祛邪作用,调节作用2、药物的扶正作用包括()A: 抗应激B:自我修复C:兴奋作用D: 增强机体免疫功能正确答案：抗应激,自我修复, 增强机体免疫功能3、对于黄芪的描述下列正确的是A:黄芪可以抑制体液免疫B:黄芪可以增强体液免疫C:黄芪可以抑制细胞免疫D:黄芪可以增强细胞免疫正确答案：黄芪可以增强体液免疫,黄芪可以增强细胞免疫4、中药的主要作用的特点是()A: 多效性B:双向调节C:低毒性D: 高效性正确答案：多效性,双向调节5、药物对机体的作用功能降低的称为抑制作用A:对B:错正确答案：对6、中医所谓的邪泛指各种致病因素及病理产物。
常见心脑血管疾病的动物模型选择与建立
常见心脑血管疾病的动物模型选择与建立学号：11311032 姓名：钱江平 班级：11中药（1）班摘要：目的：探讨常见心脑血管疾病的动物模型及其建立。
方法：通过查阅资料，了解常见心脑血管疾病的类型，进而再通过查阅论文等，理出常见心脑血管疾病模型的建立方法。
结论：通过对各种心脑血管疾病的动物模型的研究，可以看出不同动物在面对不同心脑血管疾病是，他们各有优缺点。
我们在选择动物时，应具体考虑。
关键词:心脑血管疾病 动物模型 动物模型建立我国老龄化的加快老年人心血管疾病日益突出其发病率和死亡率日趋升高,提高心血管疾病的防治水平刻不容缓"随着现代医学的快速发展心血管疾病的预防!诊断和治疗等方面都取得一定的进展。
我国每年因心脑血管疾病而死亡的人数大约为260万,约占总死亡比例的45%。
实验动物作为生命科学研究的基础和重要的支撑条件，广泛应用于临床医学和实验医学研究[2]，通过建立实验动物模型，能为临床应用提供很多理论指导。
一、高血脂及动脉粥样硬化症动物模型（一）概述腹腔注射蛋黄乳液造成小鼠高血脂模型是一种适合于药物大面积初筛的高血脂动物模型。
通过在动物饲料中加入过量的胆固醇和脂肪，饲养一定时间后，它的主动脉及冠状动脉处会逐渐形成粥样硬化斑块，并出现高血脂症。
高胆固醇和高脂饮食，加入少量胆酸盐，可增加胆固醇的吸收，如再加入甲状腺抑制药--甲基硫氧嘧啶或丙基硫氧嘧啶可进一步加速病变的形成。
（二）方法:1.小型猪：猪在许多生物学指标上与人类非常相似,被认为是研究人类疾病最合适的实验动物模型,既经济实用,又克服了同种器官的短缺。
如在比较医学中,科学家根据猪自身生理病理发生的过程研究人类衰老的机理,根据猪与人共同感染的疾病研究人的疾病在猪中的发生发展规律,从而为人类疾病的诊断、防治和治疗提供理论依据。
小型猪建高血脂模型，一般选用选用Gottigen系小型猪较为理想，用1％～2％高脂食物饲喂6个月即可形成动脉粥样硬化病变。
心力衰竭大鼠造模方法研究进展
心力衰竭大鼠造模方法研究进展从基本原理、具体操作流程及优缺点等方面，对近年来国内的心力衰竭大鼠造模方法进行整理、归纳和比较，旨在可以基于不同条件要求下选出恰当的大鼠造模方法，进而为不同原因造成心力衰竭大鼠模型的选择上，提供理论依据。
标签：心力衰竭；大鼠；造模方法；研究进展心力衰竭作为临床常见病，具有高发病率、高死亡率的特点，随着近年来环境的改变及人们生活方式的变化，其发病率更是迅猛增长。
笔者查找近十年国内文献资料发现，多数作者主要采取了冠状动脉结扎、腹主动脉狭窄、高血压诱导心衰、阿霉素及异丙肾上腺素这五种方法进行治疗。
1 冠状动脉结扎法1.1 基本原理冠脉结扎术通常结扎回旋支冠状动脉或左前降支冠状动脉，以形成一个梗塞区域，使心肌梗死或缺血，以降低射血分数（EF）和心输出量（CO），使左室舒张压（LVEDP）和静脉压升高，当心肌梗死面积超过20%时，会出现心肌收缩力下降及明显的心力衰竭。
1.2 操作方法目前多数做法为，采用水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，于距离左冠状动脉前降支起始部2 mm处穿线并结扎。
术后5周用心超检测，以EF值<60%作为心衰模型成功的标志之一。
同时测定血清脑钠肽（BNP）、血流动力学及心肌组织中环磷酸腺苷（AMP）、二磷酸腺苷（ADP）、三磷酸腺苷（ATP）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）等含量，观察心肌细胞线粒体的形态结构，发现模型组大鼠BNP、AMP、ADP、MDA均高于假手术组，模型组左心室收缩压（LVSP）、ATP、血浆中SOD、心肌组织中SOD低于假手术组，且假手术组大鼠线粒体形态正常，模型组大鼠心肌线粒体呈空泡状。
另有学者[1]以心脏重量指数、心肌梗死面积和心室扩张程度和左心室心肌间质胶原容积分（CVF）来评价造模，差异显著。
1.3 优缺点冠脉结扎术构建的充血性心力衰竭（CHF）模型能够很好模拟心肌梗死后心肌肥大，并且可以演变心力衰竭全部病理过程，其所呈现的神经内分泌激活方式和心力衰竭与人类心衰过程极为相似，但冠脉结扎术建立的CHF模型心衰程度严重，模型死亡率高，相对耗时长，建模费用偏高，而且在实际操作中也存在一定困难，一是胸骨、胸骨旁左缘纵横切口和经膈肌的相关手术中，胸骨旁切口为唯一可以避免胸膜损伤的路径，但是该路径冠脉距离体表位置最深，二是中小型动物基础心率比较快。
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手术组: 用 3% 戊巴比妥钠( 30 mg kg) 行腹腔注 射麻醉, 麻醉满意后置于手术台, 四肢及头部仰卧固 定于手术台上, 四肢皮下连接心电图电极, 记录标准
导联心电图, 颈部皮肤备皮消毒, 胸骨上窝上正中 切开皮肤 0 5 cm, 向上钝性分离推开下颌下腺, 剪除 气管前肌肉, 使气管在没有任何拉钩牵引的情况下 能充分显露, 彻底止血后于第 2~ 3 气管环间行气管 横行切开, 注意不要切断气管软骨环, 切口长度不超 过气管周径的 1 3, 擦干其内分泌物后插入气管插管 ( 用小儿吸痰管自制) , 深度为 0 5~ 1 cm。连接空气 呼吸机进行人工控制呼吸, 呼吸频率 90 次 min, 潮 气量 10~ 12 ml, 呼吸比设为 1 1。左前胸去毛, 消毒 铺巾, 顺肋间隙方向于胸骨左旁第 3~ 4 肋间切开皮 肤, 长约 1 cm, 逐层分离皮下组织、肌肉, 于 2~ 3 肋 骨间撑开进胸, 向右上方推开胸腺, 可暴露心脏及大 血管根部, 切开心包, 轻挤大鼠胸廓, 将心脏挤出, 有 部分动物在左心耳下缘与肺动脉圆锥间可以看见左 冠脉前降支起始部, 用 6- 0Prolene 线缝针, 进针深度 控制在 0 1 cm, 宽度为 0 1~ 0 2 cm( 图 1 见封 4) ; 回 纳心脏入胸廓, 待动物的数十次心动周期后, 收线打 结; 观察数分钟后, 彻底止血后逐层关胸。关胸过程 中于切口内 放置排 气管 ( 用 小儿头 皮针的 软管自 制) , 关胸毕, 抽空胸腔积气后拨除。恢复大鼠自主 呼吸, 拨出气管内插管, 清除气管内分泌物, 气管切 口及颈部切口开放, 不作缝合。手术过程中分开胸 后、缝针后、结 扎后和关胸后四个 点记录心电图变 化; 合格动物 2 周及 6 周后均复查心电图。以上手 术均在严格无菌条件下进行。术后肌内注射青霉素 钠 2 105 U d, 连续 5 d 抗感染。
[ 基金项目] 湖南省科技计划项目( 03TCY2012) 。 [ 作者简介] 周文武 ( 1969 ) , 男, 胸心外科 博士研 究生, 研 究方 向为缺血性心脏病的外科治疗、心肌保护。
治疗冠心病的实验研究, 所选用的动物模型中有大 鼠、兔和犬。
1 材料与方法
1 1 实验材料 1 1 1 实验动物: 清洁级 Wistar 近交系大鼠 100 只 ( 购自中国科学院上海实验动 物中心) , 合格证 号: SCXK( 沪) 2003- 0003。均为雄性, 体重 245~ 320 g, 平均( 278 2 22 2) g, 饲养环境为清洁级。 1 1 2 试剂: 3% 戊巴比妥钠, 1% 肝素钠, Evans 蓝
数值变量以 x s 表示, 组间均数以 t 检验, 所 有计算在统计软件 SPSS11 0 上进行, 取 = 0 05。
2 结果
2 1 死亡率 假手术组 15 只动物, 死亡 1 只, 原因为失血性
休克。85 只手术组动物中在 24 h 内 11 只死亡, 死 亡率为 12 9% ( 11 85) , 死亡原因有急性心衰( 5 例) 、 失血性休克( 3 例) 、呼吸衰竭、心律失常和麻醉意外 ( 各 1 只) ; 另对照亚组与模型评估亚组各 2 只于实 验第 4~ 5 周死亡, 死亡原因为慢性心衰, 这 4 只动 物均纳入术后 6 周心梗面积计算中。 2 2 合格情况
Structure of Ischemic Heart Model in Rats by Coronary Artery Ligation
ZHOU Wen- wu1 , LIN Ling2 , CHEN Jun3 , YANG Jin-fu1 , ZHOU Xin-min1 , HU Jian- guo1
心电图以结扎前( 图 3As、3Ao) 为正常, 以利判 别, 存活的 14 只假手术组动物均合格, 心电图( 图
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中国实验动物学报 2004 年 12 月第 12 卷第 4 期 Act a Lab Anim Sci Sin, D ecember, 2004, Vol. 12 No. 4
3Bs) 及术中肉眼观正常, 任选 12 只 进入研究, 6 周 后心脏标本截面整齐均匀, 无心肌变薄或颜色变化 ( 图 4A, 内插 4) , 2 周、6 周后心电 图也无明显变化 ( 图 3Cs、Ds) ; 74 只存 活的手术 组动物的 合格标准 为: 术中见结扎后肉眼观有明确的、一定范围的结 扎线远端心肌活动度减弱或消失, 心肌颜色变暗; 1~ 20 min 后出现不同程度的心电图肢导联 ST 段弓 背向上抬高, 无或仅有短暂的心律失常( 图 4D, 内插 4) ; 脱机后, 呼吸平稳, 不需再次呼 吸机辅助者。 合格动物达到 60 只后, 不再制作模型, 故模型合格 率为 81 1% ( 60 74) 。所有进入实验的动物 2 周后 均再次开胸并复查心电图, 合格动物 2 周后复查心 电图表现有 ST 段弓背向上抬高; QRS 波群幅度 降低; ST 段 低 平等; 无一 例 出 现 心律 失 常 ( 图
中国实验动物学报 2004 年 12 月第 12 卷第 4 期 Acta Lab Anim Sci Sin, December, 2004, Vol. 12 No. 4
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和 N- BT 磷酸缓冲液( 美国 Sigma 公司) 。 1 1 3 实验仪器: 心电图机, 动物呼吸机( 浙江医 科大 学医 疗仪 器设 备厂, DH150 型动 物呼 吸机) , Buxco 系统( Buxco 公司) 。 1 2 模型制作 1 2 1 动物分组: 根据研究目的, 实验动物共分六 组; 其中五个组需手术制作模型, 合称手术组, 另一 个组为假手术组。为满足每组 12 只的要求, 先后有 100 只动物随机进入手术组( 85 只) 与假手术组( 15 只) 。 1 2 2 制作方法
2004 年 12 月 第 12 卷 第 4 期
中国实验动物学报 ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
Dec. , 2004 Vol . 12 No. 4
研究报告
冠脉结扎法制做大鼠心肌缺血模型
周文武1, 林 玲2, 陈 军3, 杨进福1, 周新民1, 胡建国1
Abstract Objective To discuss the method of establishment of cardiac ischemic model in rats. Methods The left anterior descending coronary artery ( LAD) was ligated to form an ischemic area which located at the anterolateral left ventricular free wall, accounting for 20% - 50% of it. Results 85 animals LAD were stitched, and 74 survived. Among these survived an-i mals, 60 with heart dysfunction were confirmed as qualified ischemic model by operative observation, electrocardiogram and histopathology. Conclusion This method can easily create the ischemic heart model with acceptable death rate, but the model s stability is varying, which requires more candidate samples.
左心室 等 容舒 张 期 室内 压 最 大 下 降速 率 ( - dp dtmax ) 。 1 4 心梗面积的计算
除模型评估亚组动物全部计算心梗面积外, 余 各亚组及假手术组各取 4 只计算面积。心功能检测 毕, 自左室导管注入 10% 氯化钾 1 ml, 使心脏停止 在舒张期, 再以 5% 的 Evans 蓝2 ml 注入, 以区分心 肌的心梗区( 不染色) 和非心梗区, 立刻剪下心脏, 用 生理盐水灌洗, 并除去心房与右室组织, 称重。与左 室长 轴 垂 直作 连 续 切 片, 每 隔 2 mm 一 张; 放 入 0 1% 的 N- BT 磷酸缓冲液( pH7 4) 37 水浴 30 min, 梗死心肌细胞中脱氢酶因细胞膜损伤而完全释放而 丢失, 不能使 N- BT 还原染色, 因而梗死心肌不被染 色, 残余存活心肌则 被染成蓝色 ( 图 2, 见内插 4) 。 染色后再用生理盐水冲洗, 将未着色的缺血( 缺血) 区域小心切下, 并称湿重。用以下公式计算缺血心 肌占全心重量的百分比: 心肌梗死范围( % ) = ( 未着 色缺血区域湿重 全心湿重) 100% 。 1 5 统计学方法
图、及病理检查证实有明确的心肌缺血, 心功能下降。结论 该方 法制作 简单可 行, 动 物存活 率满意; 但模 型欠稳
定, 需标本量较大以充分筛选。
关键词 心肌缺血; 模型, 动物; 冠状动脉硬化
中图分类号 R542 2
文献标识码 A
文章编号 1005-4847( 2004) 04- 0226-05
( 1 Department of Cardiothoracic Surgery; 2 Department of Cardiology ; 3 Animal Experimental Centre of T he Second Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410011, China)
( 1 中南大学 湘雅二医院胸心外科, 长沙 410011; 2 中南大学湘雅二医院心内科; 3 中南大学湘雅二医院实验动物中心)
摘要 目的 探讨大鼠心肌缺血动物模型的构建。方法 缝扎大鼠冠脉左前降 支, 于 左室外侧 壁形成缺
导联心电图, 颈部皮肤备皮消毒, 胸骨上窝上正中 切开皮肤 0 5 cm, 向上钝性分离推开下颌下腺, 剪除 气管前肌肉, 使气管在没有任何拉钩牵引的情况下 能充分显露, 彻底止血后于第 2~ 3 气管环间行气管 横行切开, 注意不要切断气管软骨环, 切口长度不超 过气管周径的 1 3, 擦干其内分泌物后插入气管插管 ( 用小儿吸痰管自制) , 深度为 0 5~ 1 cm。连接空气 呼吸机进行人工控制呼吸, 呼吸频率 90 次 min, 潮 气量 10~ 12 ml, 呼吸比设为 1 1。左前胸去毛, 消毒 铺巾, 顺肋间隙方向于胸骨左旁第 3~ 4 肋间切开皮 肤, 长约 1 cm, 逐层分离皮下组织、肌肉, 于 2~ 3 肋 骨间撑开进胸, 向右上方推开胸腺, 可暴露心脏及大 血管根部, 切开心包, 轻挤大鼠胸廓, 将心脏挤出, 有 部分动物在左心耳下缘与肺动脉圆锥间可以看见左 冠脉前降支起始部, 用 6- 0Prolene 线缝针, 进针深度 控制在 0 1 cm, 宽度为 0 1~ 0 2 cm( 图 1 见封 4) ; 回 纳心脏入胸廓, 待动物的数十次心动周期后, 收线打 结; 观察数分钟后, 彻底止血后逐层关胸。关胸过程 中于切口内 放置排 气管 ( 用 小儿头 皮针的 软管自 制) , 关胸毕, 抽空胸腔积气后拨除。恢复大鼠自主 呼吸, 拨出气管内插管, 清除气管内分泌物, 气管切 口及颈部切口开放, 不作缝合。手术过程中分开胸 后、缝针后、结 扎后和关胸后四个 点记录心电图变 化; 合格动物 2 周及 6 周后均复查心电图。以上手 术均在严格无菌条件下进行。术后肌内注射青霉素 钠 2 105 U d, 连续 5 d 抗感染。
[ 基金项目] 湖南省科技计划项目( 03TCY2012) 。 [ 作者简介] 周文武 ( 1969 ) , 男, 胸心外科 博士研 究生, 研 究方 向为缺血性心脏病的外科治疗、心肌保护。
治疗冠心病的实验研究, 所选用的动物模型中有大 鼠、兔和犬。
1 材料与方法
1 1 实验材料 1 1 1 实验动物: 清洁级 Wistar 近交系大鼠 100 只 ( 购自中国科学院上海实验动 物中心) , 合格证 号: SCXK( 沪) 2003- 0003。均为雄性, 体重 245~ 320 g, 平均( 278 2 22 2) g, 饲养环境为清洁级。 1 1 2 试剂: 3% 戊巴比妥钠, 1% 肝素钠, Evans 蓝
数值变量以 x s 表示, 组间均数以 t 检验, 所 有计算在统计软件 SPSS11 0 上进行, 取 = 0 05。
2 结果
2 1 死亡率 假手术组 15 只动物, 死亡 1 只, 原因为失血性
休克。85 只手术组动物中在 24 h 内 11 只死亡, 死 亡率为 12 9% ( 11 85) , 死亡原因有急性心衰( 5 例) 、 失血性休克( 3 例) 、呼吸衰竭、心律失常和麻醉意外 ( 各 1 只) ; 另对照亚组与模型评估亚组各 2 只于实 验第 4~ 5 周死亡, 死亡原因为慢性心衰, 这 4 只动 物均纳入术后 6 周心梗面积计算中。 2 2 合格情况
Structure of Ischemic Heart Model in Rats by Coronary Artery Ligation
ZHOU Wen- wu1 , LIN Ling2 , CHEN Jun3 , YANG Jin-fu1 , ZHOU Xin-min1 , HU Jian- guo1
心电图以结扎前( 图 3As、3Ao) 为正常, 以利判 别, 存活的 14 只假手术组动物均合格, 心电图( 图
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中国实验动物学报 2004 年 12 月第 12 卷第 4 期 Act a Lab Anim Sci Sin, D ecember, 2004, Vol. 12 No. 4
3Bs) 及术中肉眼观正常, 任选 12 只 进入研究, 6 周 后心脏标本截面整齐均匀, 无心肌变薄或颜色变化 ( 图 4A, 内插 4) , 2 周、6 周后心电 图也无明显变化 ( 图 3Cs、Ds) ; 74 只存 活的手术 组动物的 合格标准 为: 术中见结扎后肉眼观有明确的、一定范围的结 扎线远端心肌活动度减弱或消失, 心肌颜色变暗; 1~ 20 min 后出现不同程度的心电图肢导联 ST 段弓 背向上抬高, 无或仅有短暂的心律失常( 图 4D, 内插 4) ; 脱机后, 呼吸平稳, 不需再次呼 吸机辅助者。 合格动物达到 60 只后, 不再制作模型, 故模型合格 率为 81 1% ( 60 74) 。所有进入实验的动物 2 周后 均再次开胸并复查心电图, 合格动物 2 周后复查心 电图表现有 ST 段弓背向上抬高; QRS 波群幅度 降低; ST 段 低 平等; 无一 例 出 现 心律 失 常 ( 图
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和 N- BT 磷酸缓冲液( 美国 Sigma 公司) 。 1 1 3 实验仪器: 心电图机, 动物呼吸机( 浙江医 科大 学医 疗仪 器设 备厂, DH150 型动 物呼 吸机) , Buxco 系统( Buxco 公司) 。 1 2 模型制作 1 2 1 动物分组: 根据研究目的, 实验动物共分六 组; 其中五个组需手术制作模型, 合称手术组, 另一 个组为假手术组。为满足每组 12 只的要求, 先后有 100 只动物随机进入手术组( 85 只) 与假手术组( 15 只) 。 1 2 2 制作方法
2004 年 12 月 第 12 卷 第 4 期
中国实验动物学报 ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
Dec. , 2004 Vol . 12 No. 4
研究报告
冠脉结扎法制做大鼠心肌缺血模型
周文武1, 林 玲2, 陈 军3, 杨进福1, 周新民1, 胡建国1
Abstract Objective To discuss the method of establishment of cardiac ischemic model in rats. Methods The left anterior descending coronary artery ( LAD) was ligated to form an ischemic area which located at the anterolateral left ventricular free wall, accounting for 20% - 50% of it. Results 85 animals LAD were stitched, and 74 survived. Among these survived an-i mals, 60 with heart dysfunction were confirmed as qualified ischemic model by operative observation, electrocardiogram and histopathology. Conclusion This method can easily create the ischemic heart model with acceptable death rate, but the model s stability is varying, which requires more candidate samples.
左心室 等 容舒 张 期 室内 压 最 大 下 降速 率 ( - dp dtmax ) 。 1 4 心梗面积的计算
除模型评估亚组动物全部计算心梗面积外, 余 各亚组及假手术组各取 4 只计算面积。心功能检测 毕, 自左室导管注入 10% 氯化钾 1 ml, 使心脏停止 在舒张期, 再以 5% 的 Evans 蓝2 ml 注入, 以区分心 肌的心梗区( 不染色) 和非心梗区, 立刻剪下心脏, 用 生理盐水灌洗, 并除去心房与右室组织, 称重。与左 室长 轴 垂 直作 连 续 切 片, 每 隔 2 mm 一 张; 放 入 0 1% 的 N- BT 磷酸缓冲液( pH7 4) 37 水浴 30 min, 梗死心肌细胞中脱氢酶因细胞膜损伤而完全释放而 丢失, 不能使 N- BT 还原染色, 因而梗死心肌不被染 色, 残余存活心肌则 被染成蓝色 ( 图 2, 见内插 4) 。 染色后再用生理盐水冲洗, 将未着色的缺血( 缺血) 区域小心切下, 并称湿重。用以下公式计算缺血心 肌占全心重量的百分比: 心肌梗死范围( % ) = ( 未着 色缺血区域湿重 全心湿重) 100% 。 1 5 统计学方法
图、及病理检查证实有明确的心肌缺血, 心功能下降。结论 该方 法制作 简单可 行, 动 物存活 率满意; 但模 型欠稳
定, 需标本量较大以充分筛选。
关键词 心肌缺血; 模型, 动物; 冠状动脉硬化
中图分类号 R542 2
文献标识码 A
文章编号 1005-4847( 2004) 04- 0226-05
( 1 Department of Cardiothoracic Surgery; 2 Department of Cardiology ; 3 Animal Experimental Centre of T he Second Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410011, China)
( 1 中南大学 湘雅二医院胸心外科, 长沙 410011; 2 中南大学湘雅二医院心内科; 3 中南大学湘雅二医院实验动物中心)
摘要 目的 探讨大鼠心肌缺血动物模型的构建。方法 缝扎大鼠冠脉左前降 支, 于 左室外侧 壁形成缺