竞争法胶体金检测卡原理教学提纲

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胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带 负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶体金标记技术（Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
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二、胶体金试纸条诊断技术的原理
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H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
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谢谢观看!
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快乐工作，快乐生活！ 感谢您的聆听！ ！
欢迎批评指导！！
2019
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最常用的是双抗夹心法检测抗原检测线质检线吸收垫样品垫硝酸纤维素膜连接垫胶体金垫底板测定时将试纸条下端浸入液体标本中下端吸水材料即吸取液体向上端移动流经c处时使干片上的免疫金复合物复溶若标本中有待测特异抗原即可与免疫金复合物中的抗体结合此抗原抗体复合物流至测试区即被固相抗体捕获在膜上显出红色反应线条t
胶体金试纸条诊断技术
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一、简 介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗 滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫 学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素 （ HCG） 的 测 定 和 乙 型 肝 炎 病 毒 表 面 抗 原 （HBsAg）等检测。
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胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附功 能，而不被坏其生物活性，可以与蛋白质 等（葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白）等非 共价结合，形成胶体金标记物。
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➢胶体金的质量判定标准

poct胶体金法（原创版）目录一、POCT 胶体金法的概述二、POCT 胶体金法的原理三、POCT 胶体金法的应用领域四、POCT 胶体金法的优势与局限性五、POCT 胶体金法的未来发展趋势正文一、POCT 胶体金法的概述POCT（Point-of-Care Testing）即床边检测，是指在病人就诊地点附近进行的快速、简便的医学检测方法。

胶体金法是 POCT 中的一种重要技术，主要利用胶体金纳米颗粒与生物分子的特异性结合，通过颜色变化反映检测结果。

这种方法操作简便、结果快速且准确，非常适合临床现场检测。

二、POCT 胶体金法的原理POCT 胶体金法的原理主要基于金纳米颗粒与生物分子的特异性结合。

首先将金纳米颗粒与生物分子（如抗体）结合，形成特异性的纳米颗粒复合物。

然后将这些复合物固定在检测卡片上的相应区域。

当待检测样本中存在目标分子时，目标分子会与纳米颗粒复合物结合，引起颜色变化。

通过观察颜色变化，便可判断待检测样本中目标分子的含量。

三、POCT 胶体金法的应用领域POCT 胶体金法广泛应用于临床检测，如血糖、血红蛋白、尿蛋白、心肌标志物等指标的检测。

此外，该方法还可应用于病原微生物检测、肿瘤标志物检测等领域。

随着技术的不断发展，POCT 胶体金法在疾病诊断、病情监测和疗效评价等方面的应用范围将不断扩大。

四、POCT 胶体金法的优势与局限性优势：1.操作简便：POCT 胶体金法无需专业设备，操作简单，适合床边检测。

2.速度快：该方法结果快速，仅需数分钟，有利于病情的及时诊断和处理。

3.灵敏度高：POCT 胶体金法具有较高的灵敏度，可检测到较低浓度的目标分子。

4.便携性好：检测卡片便于携带，适用于各种现场检测环境。

局限性：1.检测范围有限：POCT 胶体金法适用于检测特定指标，不能满足所有检测需求。

2.结果可受干扰：由于颜色判断的主观性，结果可能受到操作者经验和环境等因素的影响。

3.试剂卡片保存条件较高：需要避光、防潮、低温保存，否则可能影响检测结果。

3.胶体金检测卡的组成
3.1结构：主要由样品垫、金垫、硝酸纤维素膜（NC 膜），吸水垫4个部分组成，从下至上依次首尾互相衔 接，粘贴在PVC底板上。
3.胶体金检测卡的组成
3.2作用： ⑴样品垫：检测样本滴加位置，对检测样本具有一定的
过滤和缓冲作用，降低样本中离子强度或者酸碱度对 检测结果的干扰。
pH调至8.0 标记抗体
BSA或PEG
封闭
12000转/分
离心
复溶
封闭多余的游离胶体金， 稳定胶体金标记物 将胶体金标记物沉淀
将胶体金标记物重新溶解
3.胶体金检测卡的组成
（3）金垫制备 将标记好的金标复合物喷涂在玻璃纤维素膜上，在 干燥间或烘箱中37℃将其烘干。 （4）样品垫制备 将样品垫处理液浸涂在玻璃纤维素膜上，在干燥间 或烘箱中37℃将其烘干。
T:Clen-BSA Y2:羊抗鼠抗体
预先在硝酸纤维素膜上的检测线（T）和质控线（C） 分别包被上盐酸克伦特罗抗原（Clen-BSA）和羊抗 鼠二抗，将胶体金标记克伦特罗免疫鼠抗体并固着在 玻璃纤维上制成金垫，组装成试纸条。将检测的尿样 滴加在样品垫上，当尿样中盐酸克伦罗达到一定的浓 度时，即于固着在载体上的胶体金标记抗体结合，从 而阻止其与固着在检测线（T）的抗原结合，无法在 检测区形成紫红色条带。若尿样中不含盐酸克伦特罗 （Clen)或其代谢物时，胶体金标记抗体与检测区的 抗原结合，在检测线（T）形成紫红色条带。样品和 金标记复合物继续往上移动，在质控线（C）上与包 被的羊抗鼠二抗结合，在质控线（C）上形成一条紫 红色条带，证明本检测卡有效。无论尿样中是否含有 盐酸克伦特罗（Clen)在质控线（C）均应出现一条 紫红色条带。
⑵金垫：将胶体金标记抗体通过干燥固定在玻璃纤维素 膜上，是追踪抗体与抗原的反应。

四 样本处理
3 用手紧握提取管壁，将鼻咽拭子在提取管 中至少旋转6圈（大于30秒）。 4 静置1分钟后，用手挤压提取管壁（要挤压 到拭子头部，至少5次，将拭子头部所含液体 挤出）→弃去拭子，盖紧提取管滴头。
五 样本检测
取出检测卡→将提取管中液体滴4滴（约 100ul)到加样孔。
六 结果判读
•15分钟时判读结果，20分钟后判读无效。
• 为保障质量安全、避免医患之间交叉感染，发热（诊室） 门诊开展抗原检测需同时满足以下条件：
• 1.样本采集、检测人员均应当经过生物安全培训和技术 操作培训，并考核合格。
三、发热（诊Leabharlann ）门诊抗原检测应用• 2.具备生物安全柜等适宜的仪器设备，检测过程中做好 医务人员防护。
• 3.检测操作宜在相对独立且通风良好的空间内进行；基 层医疗卫生机构鼓励在实验室内进行检测操作。
针对抗原检测阳性人员
• 针对抗原检测阳性人员，基层医疗机构应当 立即向县疾控中心报告，由县120指挥中心 按照新冠肺炎疫情相关人员转运工作指南， 将抗原阳性人员转运至设置发热门诊的医疗 机构进行核酸检测。 • 抗原检测阳性的采样对象，须立即单人单间 隔离管控，等待核酸检测结果予以确认。
针对抗原检测阴性人员
六、核酸检测的确认
• 核酸检测是新冠病毒感染的确诊依据。在进行 核酸检测确认的过程中，如核酸检测阳性，不 论抗原检测结果是阳性还是阴性，均按照新冠 病毒感染者或新冠肺炎确诊患者采取相应措施； 如核酸检测阴性但抗原检测阳性，则视同新冠 病毒感染者采取集中隔离等措施，密切观察， 连续进行核酸检测。
新型冠状病毒抗原检测策略
五、交通暖心服务卡点抗原检测应用
• 3.建立交通暖心服务卡点抗原检测管理流程，包括人员 信息登记核对、抗原现场检测、结果上报等。