细胞工程

细胞工程名词解释

名词解释

动物细胞培养（animal cell culture）：是将来自动物体的某些器官或组织的细胞，在模拟体内生理条件下在体外进行培养，使之存活并生长。

原代培养(primary culture)：以直接取自生物体细胞、组织、或器官的培养。

传代培养（passage culture）：将原代培养的细胞继续转接培养的过程。细胞的体外大量增殖是通过传代培养实现的。

细胞系(cell line)由原代培养经传代培养纯化，获得的以一种细胞为主，能在体外生存的不均一细胞群体,。第一次传代培养后的细胞即为细胞系。

细胞株：从一个经过生物学鉴定的细胞系由单细胞分离培养或通过筛选的方法由单细胞增殖形成的细胞群叫细胞株(cell strain).

接触抑制：动物细胞体外培养的方式之一，指由于细胞相互接触而抑制细胞运动性现象。

密度抑制：细胞接触汇合成片后，只要营养充分，细胞仍能进行增殖分裂，但当细胞密度达到一定程度后，营养相对缺乏，代谢产物增多，发生抑制现象。

动物细胞大规模培养：指人工条件下高密度大量培养有用动物细胞生产珍贵药品的技术,是生物工业中大量增殖基因工程、融合或转化细胞所所不可缺少的培养技术。

传代细胞：二倍体细胞，具二倍染色体，具有贴壁和接触依赖性，有限增殖能力，无致瘤性

转化细胞：是通过正常细胞转化而来到的分化不成熟、具有无限增殖能力的细胞株。微载体：依赖贴壁生长的细胞可以附着在微珠的表面繁殖，载体携带细胞在容器中呈悬浮状进行大量培养。

半连续式培养（Semi-continuous culture）：在细胞增长和产物形成过程中，每 间隔一段时间从中取出部分培养液或者细胞剩余的细胞作为种子，再用新的培养液补足到原有体积。

灌流式培养（Perfusion culture）：是把细胞和培养基一起加入生物反应器后，在细胞增长和产物形成过程中，不断地将部分培养液取出，同时又连续不断地补充新的培养

细胞工程 复习题

一、名词解释

[1] 细胞工程：是指主要以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。

[2] 细胞融合：是指使用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。

[3] 细胞重组：从活细胞中将细胞器及其组分分离出来，再在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分重新组合，使之重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术

[4] 细胞培养：泛指所有体外培养，其含义是指从动物活体体内取出组织，于模拟体内生理环境等特定的体内条件下，进行孵育培养，使之生存并生长

[5] 细胞全能性：指分化细胞保留全部的核基因组，具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能。

[6] 细胞分化：是指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程，包括时间上和空间上的分化。

[7] 细胞核移植： 是一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。主要包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植。

[8] 细胞悬浮培养：是将细胞接种于液体培养基中并保持良好的分散状态的培养方式

[9] 细胞系：由原代培养经传代培养纯化，获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一的细胞群体。第一次传代培养后的细胞即称之为细胞系

[10] 细胞株：是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群，称细胞株

[11] 细胞凋亡：也叫程序性细胞死亡是机体维持环境稳定、有基因控制的细胞自主的有序性死亡

[12] 细胞团培养：细胞培养时，本身代谢就慢或者脆弱，细胞密度太低或者太高都会导致细胞的凋亡，死亡的细胞裂解物包裹未凋亡的细胞形成絮状物，这些絮状物在显微镜下看就是细胞聚集。

[13] 体细胞核移植：体细胞核移植又称体细胞克隆，原理即细胞核的全能性，是动物细胞工程技术的常用技术手段

1 细胞工程

第一章 绪论

1、什么是细胞工程？其研究范围有哪些？

(cell engineering) ：是指通过无菌操作，大量培养细胞、组织乃至完整个体，或者应用细胞生物学和分子生物学等方法进行细胞水平的遗传操作，以快速繁殖生物个体、改良品种、生产生物产品或活性成分的一门综合性科学技术。

研究范围 ：

据研究水平：个体水平、器官水平、组织水平、细胞水平、细胞器水平、分子水平；

据研究生物类型：植物细胞工程、动物细胞工程、微生物细胞工程

据实验操作对象：细胞培养，细胞融合，细胞核移植，染色体工程，胚胎工程，干细胞与组织工程

2、植物细胞工程技术的发展阶段与标志性成就。

（1）萌芽阶段：理论渊源和早期的尝试（1902-1929） Haberlandt：提出细胞全能性

（2）奠基阶段：培养技术建立阶段（1930-1955） ①培养基模式的建立。1934年，White 等用番茄根尖建立了第一个活跃生长的无性繁殖系。提出植物细胞全能性假设。

②激素调控模式的建立。 40年代末开始，探讨器官再分化的研究。 1948年：Skoog和崔澂培养烟草茎段时，发现腺嘌呤或腺苷可解除生长素对芽生长的抑制作用，腺嘌呤/生长素高，生芽；低，生根；相等，不分化。 1955年：Miller 分离出Kinetin，Kinetin / 生长素

培养技术建立阶段（1930-1955） 1943年：White植物组织培养手册《A Handbook of Plant

Tissue Culture》，标志组织培养成为一门新兴学科 组织培养的奠基人

（3）蓬勃发展阶段（1956- ） 1958年：美国科学家Steward F.C. 用胡萝卜根的细胞悬浮培养，发现单个细胞能象受精卵发育成胚一样的途径，发育成完整植抹。证实了植物细胞全能性学说。

3、动物细胞工程发展的主要标志性阶段。

1、细胞融合现象的发现 2、动物细胞培养技术的建立 3、细胞融合技术的建立和杂交瘤技术的诞生 4、动物克隆技术的建立

植物细胞全能性: 植物体的每个细胞都携带有该物种的全部遗传信息，因而只要在适当的条件下，植物一切生活细胞都具有分化为一个完整植株的潜在能力，这就是细胞的全能性。这是细胞工程的理论基础。

细胞分化: 个体细胞发育过程中，后代细胞在形态、结构和生理功能上发生差异的过程。

脱分化: 原已分化的细胞，失去原有的形态和机能，又回复到没有分化的无组织的细胞团或愈伤组织，这个过程称为脱分化。

再分化: 由脱分化状态的细胞再度分化形成另一种或几种类型的细胞的过程，称为再分化

愈伤组织: 外植体在离体条件下，细胞经脱分化等一系列过程，转变为一种能迅速增殖的无特定结构和功能的细胞团，称为愈伤组织。愈伤组织细胞大而不规则,高度液泡化、没有次生细胞壁和胞间连丝。

继代培养:对来自于外植体所增殖的培养物通过更新新鲜培养基及不断切割或分离,进行连续多代的培养.

外植体: 植物组织培养中用来进行离体无菌培养的材料,可以是器 官、组织 、细胞 和原生质体。

器官发生:指离体培养条件下的组织或细胞团分化形成不定根、不定芽等器官过程。

体细胞胚：由外植体可直接形成胚状体，外植体也可以经脱分化先形成愈伤组织，再由愈伤组织形成胚状体。胚状体是由体细胞发育而来

人工种子：通过将植物组织培养中所产生的体细胞胚或珠芽等包埋在“人工胚乳”和“人工种皮”里，制成的具有播种功能、类似天然种子的颗粒就称为人工种子。

繁殖系数：也叫增殖系（倍)数或增殖率，是指繁殖材料在一个培养周期内增殖的倍数。

污染：指在组织培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌，导致培养失败的现象。

褐变：指在组织培养中，由于材料被切割而使多酚氧化酶活化将组织中的酚类物质氧化形成棕褐色的醌类物质，并向培养基中扩散，抑制培养物生长甚至导致其死亡的现象。

玻璃化：指组织培养过程中的特有的一种生理失调或生理病变，试管苗呈半透明状外观形态异常的现象。

悬浮培养：将游离的单细胞或小的细胞团，按照一定的细胞密度，悬浮在液体培养基中进行培养的方法。