菩提树组织培养技术研究
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[3]Seip M,Trygstad O.Generalized lipodystrophy,congenitalandacquired (lipoatrophy)[J].Acta paediatrica Suppl,1996,413:2-28.[4]Reitman M L.The fat and thin of lipin[J].Cell Metab,2005,1:5-6.[5]Donkor J,Sariahmetoglu M,Dewald J,et al.Threemammalian lipins act as phosphatidate phosphatases with distinct tissue expression patterns[J].J Biol Chem,2007,282:3450-3457.[6]P éterfy M,Phan J,Xu P,et al.Lipodystrophy in the fld mouse results from mutation of a new gene encoding a nuclear protein,lipin[J].Nat Genet,2001,27:121-124.[7]Phan J,Reue k.Lipin,a lipodystrophy and obesity gene [J].Cell Metab,2005,1:73-83.[8]He X P,Xu X W,Zhao S H,et al.Investigation of Lipin1as a candidate gene for fat deposition in pigs [J].Mol Biol Rep,2008.[9]Reue K,Zhang P.The lipin protein family:dual roles in lipid biosynthesis and gene expression [J].FEBS Lett,2008,582(1):90-96.[10]Han G S,Wu W I,Carman G M.The Saccharomycescerevisiae Lipin homolog is a Mg 2+-dependent phosphatidate phosphatase enzyme [J].J Biol Chem,2006,281:9210-9218.[11]Phan J,P éterfy M,Reue K.Lipin expression precedingperoxisome proliferator-activated receptor-gamma is critical for adipogenesis in vivo and in vitro [J].J Biol Chem,2004,279:29558-29564.[12]P éterfy M,Phan,Reue K.Alternatively spliced lipinisoforms exhibit distinct expression pattern,subcellular localization,and role in adipogenesis [J].J Biol Chem,2005,280:32883-32889.[13]Suviolahti E,Reue K,Cantor R M,et al.Cross-speciesanalyses implicate Lipin 1involvement in human glucose metabolism [J].Hum Mol Genet,2006,15:377-386.[14]van Harmelen V,Ryd én M,Sj lin E,et al.A role oflipin in human obesity and insulin resistance:relation to adipocyte glucose transport and GLUT4expression [J].J Lipid Res,2007,48(1):201-206.[15]Cao H,Hegele R A.Identification of single-nucleotidepolymorphisms in the human LPIN1gene[J].J Hum Genet,2002,47(7):370-372.[16]何小平,彭中镇,刘榜.猪LPIN1基因多态性与胴体和肉质性状间的关联分析:第十四次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C].北京:中国农业科技出版社,2007...0植物组织培养新技术研究进展李盟,高亦珂(北京林业大学园林学院,北京100083)摘要:综述了发光二极管作为光源,聚四氟乙烯树脂膜作为培养容器,外施CO 2作为碳源替代蔗糖等组织培养新技术在国内外的研究情况,包括光源对组培植物生长的研究进展、无糖组织培养技术的优势及研究进展、植物组织培养中新型培养容器的应用等方面。
热带作物学报2020, 41(4): 755 763Chinese Journal of Tropical Crops屏南龙源‘四季杜鹃’古树组培快繁技术研究胡计红1,陈桂信1*,杨惠婷1,康建坂2,甘代奎3**1. 福建农林大学园艺学院,福建福州350002;2. 福建省屏南县统战部,福建屏南352300;3. 屏南三木苗业基地,福建屏南352300摘要:以屏南县棠口乡龙源村400多年‘四季杜鹃’古树的顶芽为外植体,开展离体快繁技术研究,探讨外植体消毒方式、取材时间对无菌系建立的影响,培养基中植物生长调节剂种类和配比对芽苗继代增殖的影响,以及培养基中植物生长调节剂的种类与配比对无根苗瓶内生根的影响。
试验结果表明,外植体表面消毒以75%酒精作用30 s后再用0.1% HgCl2消毒8 min,消毒效果最好。
外植体最佳的取材时间为5月中旬前后。
在无菌系建立中污染的外植体可采用75%酒精消毒20 s,然后用0.1% HgCl2消毒5 min,再经4次转瓶后成功率可达71%。
初代培养的最适培养基为WPM+3.0 mg/L ZT+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L GA3 ,平均有效芽数为3.45。
在增殖培养中,带腋芽茎段诱导丛生芽的增殖效果优于顶芽,最适培养基组合为Anderson+0.5 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA,增殖系数达13.23。
最适的瓶内生根培养基为:WPM+0.1 mg/L ZT+0.5 mg/L NAA,生根率达92.6%。
本研究的结果可为‘四季杜鹃’古树的保护与开发利用提供理论与技术支持。
关键词:屏南四季杜鹃;古树;离体快繁中图分类号:Q813.1 文献标识码:ATechnology for Rapid Propagation in Vitro of Ancient Four-season Rhododendron Tree in Longyuan of PingnanHU Jihong1, CHEN Guixin1*, YANG Huiting1, KANG Jianban2, GAN Daikui3**1. College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou, Fujian 350002, China;2. United Front Work Department of CPC Pingnan County Committee, Pingnan, Fujian 352300, China;3. Base of Sanmu Seedling Industry of Pingnan, Pingnan, Fujian 352300, ChinaAbstract: Rapid propagation in vitro was explored using the apical buds of an ancient Four-season Rhododendron tree, more than 400 years, from Longyuan Village, Tangkou Town, Pingnan County as the explants to find the effects of sterilizing methods and time of explants on the development of sterile cultures, effects of kinds and ratios of plant growth regulators added in the media on the proliferation of shoots and rooting of rootless shoots. The optimum sterilization conditions were the explants treated with 75% of ethanol for 30 seconds and then dipped with 0.1% of HgCl2 for 8 minutes. The optimum sampling period for explants was about middle to late May. After four times of bottle transfer success rate of re-sterilizing reached 71% through rescuing of the contaminated explants in the development of sterile cultures by treating with 75% of ethanol for 20 seconds and then dipping with 0.1% of HgCl2 for 5 minutes. The optimum components of the medium in the primary culture was WPM medium added 3.0 mg/L of zeatin (ZT), 0.1 mg/L of NAA and 0.5 mg/L of GA3, on which the average number of induced valid buds was 3.45. In the proliferation culture, the clustered shoots were induced from apical and stem segments with axillary buds of sterile plant-lets inoculated on Anderson medium added 0.5 mg/L of TDZ and 0.1 mg/L of NAA, multiplication coefficient of stem segments with axillary buds was higher than that of apical buds, reached 13.23. In the rooting culture of rootless shoots, the optimum medium was WPM medium added 0.1 mg/L of ZT and 0.5 mg/L of NAA, on which the rooting rate reached 92.6%. The收稿日期 2019-08-02;修回日期 2019-09-02基金项目 闽林科便函(No. [2018]26)。
第1篇 一、实训目的 本次植物组织培养实训旨在通过实际操作,使学生掌握植物组织培养的基本原理、技术流程以及实验室操作规范,提高学生对植物细胞工程和植物育种等领域的认识,培养实验操作技能和科学思维能力。
二、实训时间 2023年X月X日至2023年X月X日 三、实训地点 XX大学植物组织培养实验室 四、实训内容 1. 植物组织培养基本原理 2. 植物组织培养技术流程 3. 实验室操作规范 4. 实验操作与结果分析 五、实训过程 (一)植物组织培养基本原理 1. 植物细胞的全能性:植物细胞具有发育成完整植株的潜能,这是植物组织培养的理论基础。
2. 植物激素的作用:生长素、细胞分裂素等激素在植物组织培养过程中起着关键作用,调节细胞的分裂和分化。
3. 外植体选择:选择适宜的外植体是植物组织培养成功的关键,通常选用茎尖、叶片、茎段等部位。
(二)植物组织培养技术流程 1. 材料准备:选取健康植株,消毒处理外植体。 2. 外植体接种:将消毒后的外植体接种到培养基上。 3. 培养条件:控制适宜的温度、光照、湿度等条件,促进外植体的生长和分化。 4. 培养过程:定期观察外植体的生长情况,调整培养基成分,进行继代培养。 5. 培养结果分析:分析培养过程中出现的问题,总结经验。 (三)实验室操作规范 1. 实验室安全:遵守实验室安全规定,使用安全防护用品。 2. 实验器材:正确使用实验器材,保持实验器材的清洁和完好。 3. 实验记录:详细记录实验过程和结果,确保实验数据的准确性。 (四)实验操作与结果分析 1. 实验操作: (1)选取健康植株,消毒处理外植体。 (2)将外植体接种到含有适宜激素的培养基上。 (3)将培养皿放入培养箱,控制适宜的温度、光照、湿度等条件。 (4)定期观察外植体的生长情况,调整培养基成分,进行继代培养。 2. 结果分析: (1)外植体在培养基上生长良好,出现愈伤组织。 (2)愈伤组织分化出芽和根,形成完整植株。 (3)培养过程中出现污染现象,及时处理。 六、实训总结 通过本次植物组织培养实训,我掌握了以下知识和技能: 1. 植物组织培养的基本原理和技术流程。 2. 实验室操作规范和安全知识。 3. 实验数据的观察、分析和总结能力。 在实训过程中,我深刻体会到植物组织培养技术的复杂性和严谨性,同时也认识到实验操作技能和科学思维能力的重要性。以下是我对本次实训的几点体会: 1. 严谨的实验态度是实验成功的关键。 2. 实验操作技能的提高需要不断练习和总结经验。 3. 团队合作是实验顺利进行的重要保障。 七、建议 1. 加强实验室安全管理,提高实验操作技能。 2. 丰富实训内容,增加实验操作的多样性。 3. 邀请相关领域的专家进行讲座,拓宽学生的知识面。 八、附录 1. 实验记录表 2. 实验数据统计表 3. 实验结果分析报告 九、参考文献 [1] 张三,李四. 植物组织培养技术[M]. 北京:科学出版社,2020. [2] 王五,赵六. 植物细胞工程[M]. 上海:上海科学技术出版社,2019. (注:本报告为示例性文本,实际字数可能不足2500字。请根据实际情况进行补充和修改。)
平枝栒子的组培快繁技术
郭伟珍;林艳;曹军合
【期刊名称】《林业实用技术》
【年(卷),期】2006(000)010
【摘要】平枝枸子(Cotoneaster horizontalis)又名铺地蜈蚣、矮红子,蔷薇科灌木,枝叶横展,叶片小而稠密,生长季浓绿发亮,晚秋时变红,夏季粉红色的小花密满枝头,秋季鲜红色的果实挂满枝头,经冬不落,叶、花、果具有较高的观赏性。
平枝枸子能耐-20℃的低温及38℃的高温,萌芽能力强,耐修剪,易于成型,是制作盆景的好材料,可孤植、群植,也是良好的地面覆盖植物。
刘泽勇、孙朝辉等对小叶枸子的组织培养进行了研究,关于平枝枸子的组织培养与快繁技术未见报道。
【总页数】1页(P46)
【作者】郭伟珍;林艳;曹军合
【作者单位】河北省林业科学研究院,石家庄,050061;河北省林业科学研究院,石家庄,050061;河北省新乐市林业局
【正文语种】中文
【中图分类】S7
【相关文献】
1.平枝栒子绿化栽培及园林应用探讨 [J], 韩亚利;孙亚东;李志勇
2.杜鹃花属2种木材解剖构造对比及平枝栒子解剖构造分析 [J], 李明月;沈华杰;邱
坚
3.平枝栒子引种试验研究 [J], 王廷华;孔祥;雍明海;万华;宋学云;王国华;韩俊
4.平枝栒子的栽培特点及其园林应用 [J], 王曼; 刘建敏; 师国洪; 郭国有; 肖靖
5.正本清源盆景植物名(十五)——平枝栒子与火棘 [J], 兑宝峰
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‘金皇后’变叶木的组培快繁技术研究引言:‘金皇后’变叶木是一种在园林景观中广泛应用的高档庭院树种,由于其叶色美丽、树形优美,深受人们的喜爱。
由于其繁殖难度大,传统的繁殖方法无法快速大量繁殖,因此限制了其在市场上的应用和推广。
为了解决这一问题,对‘金皇后’变叶木的组培快繁技术进行了深入研究。
本文将对这一研究进行详细介绍。
一、材料和方法1. 随机选择成熟的‘金皇后’变叶木作为实验材料,采集其茎段作为外植体。
2. 将茎段表面进行消毒处理,然后将其切割成小段。
3. 将茎段置于含有植物生长调节剂和营养物质的培养基中进行组织培养。
4. 通过细胞分裂和增殖培养出愈伤组织。
5. 将愈伤组织转接至含有生长调节剂的培养基中进行快速增殖。
6. 将快速增殖的植株转移到含有植物激素的培养基中进行根系培养。
7. 将根系发达的植株从培养基中取出,转入泥土中,进行习化。
以上为主要的实验流程,通过上述步骤可以快速大量繁殖出‘金皇后’变叶木植株。
二、研究结果与分析经过实验研究,我们得出了以下结论:1. ‘金皇后’变叶木茎段在合适的培养基条件下可以快速分化出愈伤组织,并进行快速增殖。
2. 金皇后’变叶木快繁技术是可行的,可以快速大量繁殖出植株。
3. 组培快繁技术研究对‘金皇后’变叶木的应用和推广具有重要的意义。
在研究中,我们还发现了一些问题和存在的不足:1. 在实际操作中,需要控制培养基中激素的浓度和配比,以及温度、湿度等环境条件,这需要较高的技术和经验。
2. 组培快繁技术研究虽然可以快速繁殖出植株,但是在习化阶段容易出现移栽死亡率高的问题,需要对此进行进一步的优化和改进。
三、研究意义通过对‘金皇后’变叶木的组培快繁技术研究,我们对其繁殖机制有了更深入的了解,为该树种的应用和推广提供了新的途径。
该项研究也对植物的快速繁殖技术研究具有一定的指导意义,对园林景观植物繁殖技术的发展具有一定的推动作用。
四、结论与展望‘金皇后’变叶木的组培快繁技术研究为该树种的快速繁殖提供了新的途径,具有重要的应用价值。
三种相思的组培快繁技术研究的开题报告
开题报告:三种相思的组培快繁技术研究
一、研究背景
相思树是一种南美洲原产的常绿灌木或小乔木,因其花朵美观而在
我国广泛种植。
相思树种子含有一种名为DMT的植物碱,具有很高的药用价值,因此被广泛研究。
相思树生长缓慢,种子难以繁殖,因此研究相思树的组培快繁技术
对于促进相思树的大规模栽培和研究其药用价值具有重要意义。
目前,
已有一些学者对相思树的组培快繁技术开展了研究,但其研究结果有限,需要进一步深入研究。
二、研究内容和方法
本研究旨在探究三种相思品种的组培快繁技术,并比较其快繁效果
和营养物质含量。
1. 实验材料
选取相思品种:波多利亚、柯波卡和威尔逊三种作为研究材料。
2. 实验方法
采用组织培养技术,分别以不同的培养基组合为处理组,包括 MS、WPM、B5、N6和 AS培养基。
个体生长情况以及次生代谢产物的积累情况均进行研究。
三、预期成果
本研究预期能够得出以下结论:
1. 相思树三个品种在不同培养基组合下的生长情况和生长速度;
2. 组培快繁技术对相思树的影响以及不同品种对组培快繁技术的适
应性;
3. 相思树次生代谢产物在不同组培条件下的含量和品质;
4. 探究不同培养基对相思树快繁效果的影响,寻找最佳快繁方案。
本研究结果将有助于推动相思树的大规模生产和进一步研究相思树的药用价值。
第19卷第2期 2012年6月 天津农学院学报 Journal of Tianjin Agricultural University Vb1.19,NO.2
June,2012
文章编号:1008—5394(2012)02—0030-04
菩提树组织培养技术研究 王雅稚 ,孙宁 通信储,张磊 ,陈小强 ,许燕萍 (1.天津农学院农学系,天津300384;2.天津滨海中新生态农业发展有限公司,天津300480)
摘要:以菩提树的带芽茎段为外植体,研究了不同外植体消毒时间及外源激素水平对菩提树组织 培养的影响。试验结果表明,外植体以0.1%的HgC1。消毒10 rain可获得较低的污染率和较高的成活率; 初代培养与分化增殖均采用MS为基本培养基,适宜的激素组合分别为NAA 0.1 mg,L+6-BA 1,0 mg/L、NAA 0.3 mg,IJ+6一BA 1.O~2.0 mg/L;试管苗生根培养以1/2 MS+NAA 0.5 mg/L为最佳,生根 率达92.5%,植株生长健壮,适于移栽。污染的试管苗在移栽前进行灭菌药剂浸根处理,也可达到 较高的成活率,可避免种苗的浪费。 关键词:菩提树;茎段;组织培养 中图分类号:¥722.37;Q949.737.4 文献标识码:A
Tissue Culture of Ficus religiosa WANG Ya-zhi ,SUNNing ’ 。 。”蛳 “所 ,ZHANGLei,CHENXiao—qiang ,xuYan-pinge
(1.Department ofAgronomy, Tianjin Agricultural University,Tianjin 300384,China;2.Tanjin Binhai New Ecological Agriculture Development CO.,LTD,Tianjin 300480,China)
Abstract:Selecting the stem segment with buds as explants.the tissue culture technologies 0f lfcUS religiosa were studied in the experiment.The results show that the optimum doused time was 8 to 10 rain in 0.1%HgC1,.MS+NAA O.1 mg/L+6一BA 1.O mg/L was the best medium for inducing axillary buds.the proliferation coefficient was 4.5 on the medium of MS+NAA O-3 mg/L+6一BA 1.0~2.0 megL,the suitable medium for rooting was 1/2 MS+NAA 0.5 mg/L,and the rate ofrooting was 92.5%. The higher surviva1 rate could be obtained.with the roots of contaminative plantlets being immersed in sterilized pharmaceutics before transplantation. Key words: IgS relig’iosa;stem segment:tissue culture
菩提树(Ficus religiosa L.),为桑科榕属植物。 菩提树的梵语原名为“毕钵罗树”(Pippala),因 佛教的创始人释迦牟尼在菩提树下悟道,才得名 为菩提树(梵bodhivrksa),“菩提”(梵bodhi)意 为“觉悟” 。作为佛教圣树,菩提树又有“身是 菩提树,心是明镜台。时时勤拂拭,勿使惹尘埃” 的文化意蕴,受到人们的尊崇和喜爱;其树形美 观,兼叶雅致,又宜做行道树、庭阴风景树及大 型室内观赏树种伫 ;其对sO 、cl 抗性中等,对HF 抗性强,宜作污染区的绿化树种。在北方较寒冷 地区,菩提树还可开发为大、中、小型盆栽,供 室内观赏或寺院及佛教人士供奉。菩提树枝干上 流出的乳状液汁,可提出硬性橡胶;枝叶可做象、 牛等牲畜的饲料;花供药用,可发汗镇痉,并有 解热之效;其木材适宜做砧板、包装箱板和纤维 板原料 。 菩提树目前的主要繁殖方法为种子实生繁殖 及扦插繁殖,繁殖速度慢、周期长 。为保持菩提 树优良的遗传特性及进行快速苗木繁殖,对菩提 树的组织培养研究正逐渐展开。邓正正等 用菩提 树叶片诱导愈伤组织并获得生根试管苗;亦有报 道陋 研究不同光质对菩提树组培苗生长发育的影 响,认为紫光和黄光可促进菩提树组培苗生物量 增重和不定芽分化,红光和橙光可提高组培苗株 高。此外,其它相关研究报道尚少。 本文以菩提树的带芽茎段为外植体,研究了 不同外植体消毒时间及外源激素水平在菩提树组 织培养过程中的影响,旨在为菩提树的组培快繁 生产和新品种培育等提供技术参考。
收稿日期:2012—05—08 基金项目:天津市科技支撑计划项目“非洲紫罗兰新品种的引进及培育技术的研究”(09ZCKFNC01600);天津市滨海新区科技计 划项目“名贵花卉、苗木新品种引进、快繁及设施栽培技术的研究”(2010一BK130049);天津农学院大学生科技创新 活动项目“菩提树组织培养无性快速繁殖技术的研究”(无编号) 作者简介:王雅稚(1990一),女,天津市人,本科在读,主要从事种子科学与工程方面的研究。联系电话:(022)23781298。 通信作者:孙宁(1979一),女,河北承德人,高级实验师,硕士,主要从事植物细胞工程方面的研究工作。E—mail:sning79@sina.com。 第2期 王雅稚,等:菩提树组织培养技术研究 1材料及方法 1.1 实验材料 试材为由广州引进的菩提树3 a生种苗。 1.2实验方法 1.2.1外植体表面消毒处理 取菩提树当年嫩枝,剪切成1.5~2.0 em带腋 芽茎段,置烧杯中加人少许洗衣粉,以流水冲洗 干净。在超净工作台中用70%酒精浸洗3O s后,于 0.1%氯化汞(HgC1 )溶液中分别消毒5、8、10、 15、2O、25 min,无菌水冲洗3~5次。表面消毒后, 接种于无激素MS培养基中。培养条件温度为 (25±2)℃,光照12 h/d,培养基pH值为5.8"-"6.0 (以下培养条件相同)。 1.2.2初代培养 将表面消毒后成活的茎段接入含6-BA和 NAA不同浓度配比的培养基中,以MS为基本培养 基,添加蔗糖3%、琼脂0.63%。 1.2-3继代增殖培养 将初代培养诱导分化的侧芽切成1.5~2.0 cm 左右的茎段,接种至含有6一BA和NAA不同浓度配 比的继代增殖培养基中。以MS为基本培养基,添 加蔗糖3%、琼脂0.63%。 1.2.4壮苗生根培养 将生长旺盛、生长势均一的试管苗从基部切 下2~3 cm的带顶芽茎段接种于生根培养基中。培 养基以1/2 MS为基本培养基,添加蔗糖2%、琼脂 0.63%,附 ̄JIINAA 4个浓度处理。 1.2.5驯化移栽 当试管苗长出4~6片成熟叶片,有4~6条 (>1 em)根时进行驯化移栽培养。选用蛭石作 为基质,使用前用湿热法灭菌。 2结果与分析 2.1菩提树无菌株系的建立 2.1.1表面消毒时间对外植体灭菌效果和成活的 影响 观察0.1%HgC12 ̄液消毒5、8、10、15、20、 25 min对污染率及外植体污染、成活情况的影响。 结果见表1。
表1 0.1%HgC12不同消毒时间对外植体培养的影响 编号 消毒时问/min 污染率/% 成活率/% 5 8 10 15 20 25 75 38 22 18 16 l1 20 54 67 36 28 13 用0.1%HgCI 处理不同外植体,在5~25 min 内,随着消毒时间的延长,茎段污染率呈下降趋 势,成活率先上升、后下降,而褐化死亡率呈上 升趋势,说明随着消毒时间的延长,对菌类的杀 伤力越来越强,而对茎段的伤害也越来越高。当 消毒时间为10 min时,带节茎段成活率达到最高值 67%。因此,对带节茎段的消毒时间以10 min为好。 2.1.2外源激素对外植体侧芽萌发分化的影响 将未褐化成活的茎段接人初代培养基中,培 养8~9 d后,腋芽开始萌动,逐渐出现生长点,12 d后便长出幼芽,25 d后,侧芽长至2~3 cm。从表 2中可以看出,各处理间外植体的诱导效果有较大 差异。相同NAA浓度下,6-BA各处理诱导率的变 化无明显规律;而随着NAA浓度的升高,侧芽的 萌发率有下降趋势。其中,处理组4和6诱导侧芽 萌发率最高,且以NAA 0.1 mg/L+6一BA 1.0 mg/L 的激素组合处理产生的不定芽较为健壮。
表2不同激素浓度对菩提树外植体诱导效果 齄旦 激素浓度/mg・L 幛 舯,爪 拈 船,爪 拈 , 、 Ⅷ ; 州— NAA 6-BA 。 从 。 从千 “ 上 、V 1 0.05 0.5 15 6 40.0 愈伤组织少,芽较细弱 2 0.05 1.0 15 8 53_3 愈伤组织少,芽较细弱 3 0.05 1.5 15 9 60.0 愈伤组织少,芽较细弱 4 0.05 2.0 15 12 80.0 愈伤组织少,芽较细弱 5 0.10 0.5 15 10 66.7 愈伤组织较少,芽较健壮 6 0.10 1.0 15 12 80.0 愈伤组织较少,芽健壮 7 0.10 1.5 15 7 46.7 愈伤组织较多,芽健壮 8 0.10 2.0 15 6 40.0 愈伤组织较多,芽较健壮 9 0.15 0.5 15 5 33-3 愈伤组织较多,芽较弱 10 0.15 1.0 15 5 33-3 愈伤组织较多,芽较弱 11 0.15 1.5 15 4 26.7 愈伤组织较多,芽较弱 12 0.15 2.0 15 8 53-3 愈伤组织较多,芽较弱