多肽合成知识介绍
1．多肽合成的基本原理
多肽固相合成法是多肽合成化学的一个重大的突破。它的最大特点是不必纯化中间产物，合成过程可以连续进行，从而为多肽合成的自动化奠定了基础。目前全自动多肽的合成，基本都是固相合成。基本过程如下：
基于Fmoc化学合成，先将所要合成的目标多肽的C-端氨基酸的羧基以共价键形式与一个不溶性的高分子树脂相连，然后以这一氨基酸的氨基作为多肽合成的起点，同期它的氨基酸的羧基（已经活化）作用形成肽键，不断重复这一过程，即可得到目标多肽。根据多肽的氨基酸组成不同，多肽后处理方式不同，纯化方式也有差异。
2．关于Antigen Grade 多肽必须在在多肽的一端增加 Cysteine吗？
答：不一定，偶连的方式与偶连的活化剂和氨基酸组成有关。EDC: 通过C端 COOH连接，一般要求序列中无Glu (E), Asp (D),或an amidated C-terminus；Act. EDC Method: 通过 N端的氨基偶连，要求序列中无Lys (K) 或N端没有被乙酰化；MBS:通过Cys的基团载体中其他 SH连接形成 S-S. 如果序列中无Cys,就需要添加Cys基团，最好增加在N端。
3．制备多肽抗体，常用的载体有那些？如何选择？
答：多肽分子量很小，免疫应答效果差,需要与载体偶连以提高免疫源性。载体大多数为高分量的蛋白质，常用的载体有KLH (铜蓝蛋白)，BSA, OVA等。KLH为首选。 ELISA测定多肽抗体效价时，有些多肽直接包板有困难，需要与BSA等偶连后再包板。
4．做免疫用的多肽多长为合适？
答：10-15个氨基酸，当然长一些免疫效果好一些，不过合成费用会上去。10aa以下的多肽免疫效果比较差。
5．为什么多肽抗体有时不能用于Western Blot?
答：这比较常见，Elisa一般都没有什么问题。
6．免疫用多肽的纯度要很高吗？
答：纯度高当然好，但是代价也高。问题是如果纯度为90-95%的多肽能产生抗体，65-75%纯度的多肽，一般也不对失败。
7．我们合成的多肽溶解性如何？
答：很难准确预测一个多肽的溶解性及合适的溶剂是什么。如果多肽难以溶解就认为多肽合成有问题就大错特错了。那么如何判断多肽的溶解性？
8．多肽状态如何？如何保存储存？
答：我们提供的多肽是粉末状，一般为灰白色，组成不同，多肽粉末的颜色有差异。多肽一般需要避光保存。长期保存应保存在-20度，短期可以保存在4度。可以短时间室温运输。
9．多肽的量是怎么确定？
答：一般用天平直接称重。
10．如何溶解多肽？
答：溶解多肽是非常头痛的事情，一般很难一下子确定合适的溶剂。通常是先取一点试一试，在没有确定合适的溶剂前千万不要全部溶解。
下列方法有助于您选择合适的溶剂。
（1）判定多肽的电荷特定，设定酸性氨基酸Asp (D), Glu(E)和C端COOH为-1；碱性氨基酸Lys(K),Arg(R), His (H)及N端NH2为+1，其他氨基酸的电荷为0。计算出净电荷数。
（2）如果净电荷数>0,多肽为碱性，用水溶解；如果不溶解或溶解性不大，加入醋酸（10%以上）；如果多肽还不能溶解，加入少量 TFA(25ul)溶解，然后加入500ul水稀释。
（3）如果净电荷数<0,多肽为酸性，用水溶解；如果不溶解或溶解性不大，加入氨水(25ul)溶解，然后加入500ul水稀释。
（4）如果净电荷数＝0,多肽为中性，一般需要用有机溶剂如乙腈，甲醇或异丙醇，DMSO等溶解。还有人建议需要假如尿素等溶解疏水性很大的多肽。
11．不同纯度级别多肽的使用领域是什么？
答：不同纯度级别多肽的使用领域并不相同。
(1) 粗品和脱盐级别的纯度和多肽的长度有关，Fmoc固相多肽合成每个氨基酸的偶连效率在95%
以上，下表列出了每步合成的产率，可以帮助您判定粗品和脱盐级别是否适合您的用途，从而节省开支。
(2)多肽合成有一个重要的用途是用来免疫抗体，一般情况下免疫级65-75%左右纯度的多肽就达到免疫的要求。如果纯度为90-95%的多肽能产生抗体，65-75%纯度的多肽，一般也不会失败。纯度高当然好，但是代价高时间也相对较长。Elias 测定抗体效价时，同样70%左右的纯度就可以满足。（3）研究级80%以上纯度的多肽可以用于酶底物定性研究、体外生物活性分析，免疫封闭、磷酸化研究、亲和层析，单抗制备等研究
（4）90%以上的纯度可以用于包括细胞体内外活性分析，定量分析等大多数研究。 NMR研究的纯度需要达到95%以上。
12．非HPLC纯化的多肽中有那些杂质？
答：粗品和脱盐级别的多肽中多肽和非多肽类杂质：如非全长肽和多肽后处理的一些原料如DTT、TFA等。
13． HPLC纯化的多肽有那些杂质？
答：经过HPLC纯化的多肽，即使是简单的纯化，其中的杂质主要是短肽和微量 TFA.
14．多长的多肽为合适？
答：根据多肽合成需要多肽的长度，电荷，亲疏水性等因素。长度越长，合成粗品的纯度和产率都随着降低，纯化的难度和无法合成的几率就会大些。当然多肽功能区的序列是无法改变的，但是为了多肽的顺利合成，有时不得不在功能取的上下游增加一些辅助氨基酸，以改善多肽的溶解性和亲疏水性。如果多肽太短，合成也可能有问题，主要问题是合成的多肽在后处理过程中有一定的难度，5肽以下的多肽，一般要有疏水的氨基酸，否则后处理难度加大。15个氨基酸残基以下的多肽一般都可以得到满意的产率和得率。
15．如何从多肽序列中判定多肽的溶解性？
（1）多肽中如果含有高比例的疏水性很强的氨基酸如Leu, Val, Ile, Met, Phe 和 Trp，多肽很难溶解与水性溶液中或根本不可能溶解。这些氨基酸无论是纯化或合成，都有可能有问题。
（2）一般情况下疏水性氨基酸的比例<50%, 不能连续5个连续aa为疏水性，带电荷的氨基酸的（正电荷K, R, H, N-terminus，负电荷 D, E, C-terminus）的比例达到20%，在多肽的N或C短如果能增加极性氨基酸，也可以改善溶解性。
16．为什么含有Cys, Met, 或 Trp的多肽难合成？
答：含有Cys, Met, 或 Trp的多肽难以合成，同时难以获得高纯度的产品。主要因为这些基团不稳定，易氧化。这些多肽的使用和储存都需要特别注意，避免反复开启盖子。
17．为什么有些多肽的合成产率或纯度会比较低？
答：多肽合成与引物合成有比较大的区别，不能的引物合成很少，但是不能合成的多肽经常有。如Val, Ile, Tyr, Phe, Trp, Leu, Gln, 和Thr这些氨基酸比邻或重复时，多肽链在合成过程中不能完全舒展溶解，合成效率下降。下列几种情形，合成效率和产物的纯度都比较低：重复 PRO，Ser-Ser, 重复Asp, 4个连续 Gly 等。
18．多肽是如何纯化的？
答：多肽纯化一般使用反相柱（如C8, C18等），214nm。制备多肽时可以根据需要使用制备和半制备柱。缓冲体系通常为含TFA的溶剂，pH2. Buffer A为0.1% TFA 去离子水配制，Buffer B为.1% TFA /ACN /pH 2。纯化前用Buffer A溶解；如果溶解不好，用buffer B溶解后，然后用Buffer A稀释；对疏水性强的多肽，有时还需要加入少量的Formic Acid或醋酸。 HPLC分析多肽粗品，如果多肽不长（15aa以下），一般有主峰，主峰通常为全长产物；对于20 aa以上的长肽，如果没有主峰，HPLC和MS必须结合起来，判定分子量，从而确定哪个峰是目标多肽。
19．含 Cys的多肽如何处理？
答：含Cys 的多肽比较容易氧化。多肽纯化过程中一般都是在pH2的酸性条件性完成的，这种条件下Cys 的SH,基本保持还原状态，不需要特殊的后处理。当然含 Cys的多肽会慢慢的氧化，氧化的速度取决于保存条件和序列组成。如果是需要 cys形成S-S，纯化一般需要在碱性或中性条件下纯化。
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襄阳四中2012年物理热学试题精选 一、选择题 1．从微观的角度来看，一杯水是由大量水分子组成的，下列说法中正确的是( ) A ．当这杯水静止时，水分子也处于静止状态 B．水的温度越高，水分子的平均动能越大 C．每个水分子都在运动，且速度大小相等 D．这些水分子的动能总和就是这杯水的动能 答案：B 2．关于分子动理论的理解，下列说法正确的是( ) A．当分子间的距离增大时，分子间的引力和斥力均减小，但斥力减小得更快，所以分子间的作用力总表现为引力B．当分子力表现为斥力时，分子力和分子势能总是随分子间距离的减小而增大 C．布朗运动是固体分子的运动，它说明固体分子永不停息地做无规则运动 D．已知某种液体的密度为ρ，摩尔质量为M，阿伏加德罗常数为N A，则该液体分子间的平均距离可以表示为答案：BD 3．关于热力学定律，下列说法正确的是(B ) A．在一定条件下物体的温度可以降到0 K B．物体从单一热源吸收的热量可全部用于做功 C．吸收了热量的物体，其内能一定增加 D．压缩气体总能使气体的温度升高 4．下图为两分子系统的势能Ep与两分子间距离?Skip Record If...?的关系曲线。下列说法 正确的是(BC ) A．当?Skip Record If...?大于r1时，分子间的作用力表现为引力 B．当?Skip Record If...?小于r1时，分子间的作用力表现为斥力 C．当?Skip Record If...?等于r2时，分子间的作用力为零 D．当?Skip Record If...?由r1变到r2的过程中，分子间的作用力做负功 5．1859年麦克斯韦从理论上推导出了气体分子速率的分布规律，后来有许多实验验证了这一规律。若以横坐标?Skip Record If...?表示分子速率，纵坐标f(v)表示各速率区间的分子数占总分子数的百分比。下面四幅图中能正确表示某一温度下气体分子速率分布规律的是(D ) 6．气体内能是所有气体分子热运动动能和势能的总和，其大小与气体的状态有关，分子热运动的平均动能与分子间势能分别取决于气体的( A ) A．温度和体积B．体积和压强 C．温度和压强D．压强和温度 7．下列说法正确的是( ) A．区分晶体与非晶体的最有效方法是看有没有规则的几何外形 B．区分晶体与非晶体的最有效方法是看有没有一定的熔点 C．一定温度下，饱和汽的压强是一定的 D．空气的相对温度等于水蒸气的实际压强与同温下水的饱和汽压的比值
PUMA鞋类产品知识简介 PUMA鞋类产品知识简介 PUMA鞋类产品使用“产品线”的定义来区分不同系列鞋子的设计理念，设计灵感以及运动风格，而“产片线”又使用颜色来对其定义，红色产品线代表运动型的鞋类，蓝色产品线代表休闲型的鞋类。 红色产品线中代表的鞋类有： 完全跑步系列，蓝调跑步系列，白色跑步系列，全能训练系列，现代高尔夫系列，足球系列，瑜伽系列。 蓝色产品线中代表的鞋类有： 赛车运动系列，新兴运动系列，创意运动系列，新酷系列，篮球运动系列，原创系列，怀旧系列 红色产品线 完全跑步系列 这个系列的鞋子是改进性能、减少受伤的跑鞋，每款写都采用了共生技术，给予跑步者最佳性能的产品。 每双完全跑步系列的鞋子均包含多种不同的科技成份，例如：iCell，GoodYeare，Archtec……完全跑步系列又按照不同人对跑步这项运动的不同要求，细分为越野慢跑和公路慢跑两个子系列。 穿着越野慢跑的跑鞋可以在任何环境中进行跑步运动，比如：在偏僻遥远的森林公园，家里附近的小树林，或者极限运动中的穿越山区、峡谷、沙漠等等… 而公路慢跑是专为跑步爱好者以及竞赛型运动员设计的，更着重于舒适性和灵活性。 蓝调跑步系列 这个系列的鞋子是专为追求技术、时尚的消费者而创造，是运用最大胆的设计语言而开发的时尚产品。 蓝调跑步系列又细分为：冲击力、田径训练、海拔高度、都市运动和弹性力度5个子系列。冲击力：外观充满活力并富有创新精神的鞋款设计，能避免因跑步而带来的冲击力。这个子系列在鞋跟部往往采用了CELL（蜂窝避震系统）技术，给穿着者以良好的保护 田径训练：激动人心的改良田径鞋设计，将运动所需的功能性与休闲的生活态度巧妙的融合。这个子系列将田径赛场中使用的专业鞋进行了创造性的改良，即贴合了田径专用鞋的功能特点名，又将休闲的生活态度融入其中，每款鞋都有独特的设计和精巧的外形，比如：在鞋底处会出现仿鞋钉或者增强抓地力的设计。 海拔高度：通过真正的性能解决方案与前卫的设计的结合，可以抵御因天气及不同海拔高度的地形带来影响的鞋款。这个子系列能给人以全方位安全的保证，加厚的中底对及特殊花纹的鞋底都能给穿着者在不同海拔的地方带来舒适的感觉，圆形特制鞋带与可快捷抽拉的鞋环搭配使用，极大的方便了穿着者可根据不同环境而迅速调节系带系统的松紧度，促进了足部的血液循环。而金属感的合成皮鞋面更能给人以坚固耐磨的质感 弹性力度：为那些寻求简单与传统泡沫气垫感觉的跑步者设计。这个子系列鞋类的中底往往采用了CM-EVA的材料，鞋底均采用了流线型的设计，而且弹性力度的鞋很少采用系带性装置 都市运动：设计精巧的鞋款，更适合时尚都市一族，为他们在每日的行走中提供保护。这个子系列均采用真皮鞋面，在运动中又不失其高贵的特征，鞋型简洁大方，CM-EVA和CELL 的使用，更加强了对穿着者的保护作用。 白色跑步系列 为爱好运动的消费者提供的入门跑鞋，他的设计注重于价值和细节。所以这个系列鞋的科技
氨基酸、多肽及蛋白质类药物 山东药品食品职业学院张慧婧 第一部分氨基酸、多肽及蛋白质基本知识 一、蛋白质基本知识 蛋白质是一切生命的物质基础，是生物体的重要组成成分之一。无论是病毒、细菌、寄生虫等简单的低等生物，还是植物、动物等复杂的高等生物，均含有蛋白质。蛋白质占人体重量的16%～20%，约达人体固体总量的45%，肌肉、血液、毛发、韧带和内脏等都以蛋白质为主要成分的形式存在；植物体内蛋白质含量较动物偏低，但在植物细胞的原生质和种子中蛋白质含量较高，如大豆中蛋白含量约为38%，而黄豆中高达40%；微生物中蛋白质含量也很高，细菌中的蛋白质含量一般为50%～80%，干酵母中蛋白质含量也高达46．6%，病毒除少量核酸外几乎都由蛋白质组成，疯牛病的病原体——朊病毒仅由蛋白质组成。 这些不同种类的蛋白质，具有独特的生物学功能，几乎参与了所有的生命现象和生理过程，可以说一切生命现象都是蛋白质功能的体现。 1．生物催化作用 作为生命体新陈代谢的催化剂——酶，是被认识最早和研究最多的一大类蛋白质，它的特点是催化生物体内的几乎所有的化学反应。生物催化作用是蛋白质最重要的生物功能之一。正是这些酶类决定了生物的代谢类型，从而才有可能表现出不同的各种生命现象。 2．结构功能 第二大类蛋白质是结构蛋白，它们构成动、植物机体的组织和细胞。在高等动物中，纤维状胶原蛋白是结缔组织及骨骼的结构蛋白，α-角蛋白是组成毛发、羽毛、角质、皮肤的结构蛋白。丝心蛋白是蚕丝纤维和蜘蛛网的主要组成成分。膜蛋白是细胞各种生物膜的重要成分，它与带极性的脂类组成膜结构。 3.运动收缩功能 另一类蛋白质在生物的运动和收缩系统中执行重要功能。肌动蛋白和肌球蛋白是肌肉收缩系统的两种主要成分。细菌的鞭毛或纤毛蛋白同样可以驱动细胞作相应的运动。 4.运输功能 有些蛋白质具有运输功能，属于运载蛋白，它们能够结合并且运输特殊的分子。如脊椎动物红细胞中的血红蛋白和无脊椎动物的血蓝蛋白起运输氧的功能，血液中的血清蛋白运输脂肪酸，β-脂蛋白运输脂类。许多营养物质（如葡萄糖、氨基酸等）的跨膜输送需要载体蛋白的协助，细胞色素类蛋白在线粒体和叶绿体中担负传递电子的功能。 5.代谢调节功能 执行该功能的主要是激素类蛋白质，如胰岛素可以调节糖代谢。细胞对许多激素信号的响应通常由GTP结合蛋白（G蛋白）介导。 6.保护防御功能 细胞因子、补体和抗体等是参与机体免疫防御和免疫保护最为直接和最为有效的功能分子，其化学本质大都为蛋白质，免疫细胞因子、补体和抗体等目前也已用于免疫性疾病和一些非免疫性疾病的预防和治疗。
热学 第一部分、分子热运动 1、分子运动理论的初步认识 (1)物质由分子、原子组成的。 (2)一切物质的分子都在不停地做无规则的运动——扩散现象。 (3)分子之间有相互作用的引力和斥力。 2、(1)分子运动理论的基本内容：物质是由分子组成的；分子不停地做无规则运动；分子间存在相互作用的引力和斥力。 (2)扩散现象：不同物质在相互接触时，彼此进入对方的现象叫扩散。气体、液体、固体均能发生扩散现象。扩散的快慢与温度有关。扩散现象表明：一切物质的分子都在永不停息地做无规则运动，并且间接证明了分子间存在间隙。 (3)分子间的相互作用力既有引力又有斥力，引力和斥力是同时存在的。当两分子间的距离等于10-10 米时，分子间引力和斥力相等，合力为零,叫做平衡位置；当两分子间的距离小于10-10米时，分子间斥力大于引力，合力表现为斥力；当两分子间的距离大于10-10米时，分子间引力大于斥力，合力表现为引力；当分子间的距离很大(大于分子直径的10倍以上)时，分子间的相互作用力变得十分微弱，可近似认为分子间无相互作用力。 第二部分、内能 1、内能 (1)概念：物体内部所有分子做无规则热运动的动能和分子势能的总和，叫物体的内能。 ①内能是指物体内部所有分子做无规则热运动的动能和分子势能的总和，不是指少数分子或单个分子所具有的能。 ②内能与温度有关，但不仅仅与温度有关，从微观角度来说，内能与物体内部分子的热运动和分子间的相互作用力有关。从宏观的角度来说，内能与物体的质量、温度、体积都有关。 ③一切物体在任何情况下都具有内能，物体的内能与温度有关，同一个物体，温度升高，它的内能增加，温度降低，内能减少。 (2)影响内能的主要因素：物体的质量、温度、状态及体积等。 (3)热运动：物体内部大量分子的无规则运动叫做热运动。分子无规则运动的速度与温度有关，温度越高，分子无规则运动的速度就越快，物体的温度越低，分子无规则运动的速度就越慢。内能也常叫做热能。 (4)内能与机械能的区别 ①物体的内能的多少与物体的温度、体积、质量和物体状态有关；而机械能与物体的质量、速度、高度、形变有关。它们是两种不同形式的能。 ②一切物体都具有内能，但有些物体可以说没有机械能，比如静止在地面土的物体。 ③内能和机械能可以通过做功相互转化。 ④内能的单位与机械能的单位是一样的，国际单位制都是焦耳，简称焦。用J表示。 2、改变物体内能的两种方法：做功与热传递 (1)做功： ①对物体做功，物体内能增加；物体对外做功，物体的内能减少。 ②做功改变物体的内能实质是内能与其他形式的能相互转化的过程。 (2)热传递： ①热传递的条件：物体之间(或同一物体不同部分)存在温度差。 ②物体吸收热量，物体内能增加；物体放出热量，物体的内能减少。 ③用热传递的方法改变物体的内能实质是内能从一个物体转移到另一个物体或从物体的一部分转移到另一部分。 3、做功与热传递改变物体的内能是等效的。 4、热量 (1)概念：物体通过热传递的方式所改变的内能叫热量。 (2)热量是一个过程量。热量反映了热传递过程中，内能转移的多少，是一个过程量。所以在热量前面只能用“放出”或“吸收”，绝对不能说某物体含有多少热量，也不能说某物体的热量是多少。 (3)热量的国际单位制单位：焦耳(J)。 第三部分、比热容 1、比热容的概念：单位质量的某种物质温度升高(或者降低)1℃吸收(或者放出)的热量叫做这种物质的比热容，简称比热。用符号c表示比热容。 2、比热容的单位：在国际单位制中，比热容的单位是焦每千克摄氏度，符号是J/(kg·℃)。 3、比热容的物理意义 (1)比热容是通过比较单位质量的某种物质温度升高1℃时吸收的热量，用来表示各种物质的不同性质。 (2)水的比热容是4.2×103J/(kg·℃)。它的物理意义是：1千克水温度升高(或降低)1℃，吸收(或放出)的热量是4.2×103J。 4、比热容表 (1)比热容是物质的一种特性，各种物质都有自己的比热。 (2)从比热表中还可以看出，各物质中，水的比热容最大。这就意味着，在同样受热或冷却的情况下，水的温度变化要小些。水的这个特征对气候的影响，很大。在受太阳照射条件相同时，白天沿海地区比内陆地区温度升高的慢，夜晚沿海地区温度降低也少。所以一天之中，沿海地区温度变化小，内陆地区温度变化大。在一年之中，夏季内陆比沿海炎热，冬季内陆比沿海寒冷。 (3)水比热容大的特点，在生产、生活中也经常利用。如汽车发动机、发电机等机器，在工作时要发热，通常要用循环流动的水来冷却。冬季也常用热水取暖。 5、说明 (1)比热容是物质的特性之一，所以某种物质的比热不会因为物质吸收或放出热量的多少而改变，也不
选修3-3热学知识点归纳 一、分子运动论 1. 物质是由大量分子组成的 （1）分子体积 分子体积很小，它的直径数量级是 （2）分子质量 分子质量很小，一般分子质量的数量级是 （3）阿伏伽德罗常数（宏观世界与微观世界的桥梁） 1摩尔的任何物质含有的微粒数相同，这个数的测量值： 设微观量为：分子体积V 0、分子直径d 、分子质量m ； 宏观量为：物质体积V 、摩尔体积V 1、物质质量M 、摩尔质量μ、物质密度ρ． 分子质量： 分子体积: （对气体，V 0应为气体分子平均占据的空间大小） 分子直径: 球体模型: V d N =3A )2(34π 303 A 6=6=ππV N V d （固体、液体一般用此模型） 立方体模型:30=V d （气体一般用此模型）（对气体，d 理解为相邻分子间的平均距离） 分子的数量．A 1 A 1A A N V V N V M N V N M n ====ρμρμ 2. 分子永不停息地做无规则热运动 （1）分子永不停息做无规则热运动的实验事实：扩散现象和布郎运动。 （2）布朗运动 布朗运动是悬浮在液体（或气体）中的固体微粒的无规则运动。布朗运动不是分子本身的 运动，但它间接地反映了液体（气体）分子的无规则运动。 （3）实验中画出的布朗运动路线的折线，不是微粒运动的真实轨迹。 因为图中的每一段折线，是每隔30s 时间观察到的微粒位置的连线，就是在这短短的30s 内，小颗粒的运动也是极不规则的。 （4）布朗运动产生的原因 大量液体分子（或气体）永不停息地做无规则运动时，对悬浮在其中的微粒撞击作用的不平衡性是产生布朗运动的原因。简言之：液体（或气体）分子永不停息的无规则运动是产生布朗运动的原因。 （5）影响布朗运动激烈程度的因素
AVL培训第一讲（上） 目录 前言 一 AVL台架设备介绍 1 测功机 2 油耗仪 3 水温油温控制 4 油门执行器 5 中冷器 6 烟度计 7 颗粒采样计 8 漏气量仪 二 PUMA结构 1 主机(window xp+Intime) 2 扩展箱(PCI Interface box) 3 U口转串口(edge port) 4 前端模块(F-FEM) 5 压力前端模块（F-FEM-P） 6 测功机变频柜Djno cabinet 7 鼠标键盘等 8 不间断电源（UPS） 二电路图纸的应用 附表：AVL各模块代码表 附图1:PUMA结构实物图 附图2:PUMA结构连接图 前言 一 AVL台架设备介绍 1 测功机dyno Dyno分为主动式和被动式，主要区别在于主动式测功机可以倒托发动机；被动式测功机分为电涡流式和水力式；AVL主动式测功机包含AFA（定子固定式，利用扭矩法兰测扭矩，无线发送到PUMA）和APA（定子摆动式，利用拉压传感器测扭矩，信号传输到PUMA）两种，其中实验室采用AFA形式。
2 油耗仪 AVL油耗仪有三种形式：735（质量流量）、733、KMA4000/6000（体积流量式）。实验室采用735，三者精度差不多，主要是原理不一样。 735：采用U型管，利用克利奥原理，测量摆动频率和相位差。 733：称重式；采用位置传感器，油罐内有上下液位，在下液位时打开油口，到上液位停止进油。 KMA4000/6000：利用啮合的两个齿轮，其进油口和出油口压力分别为P1,P2，利用设备保证P1=P2，其中每对齿轮排出的油量一定，以此计算油耗。 3 水温油温控制 代号553为水温控制，554为机油温控。 4 油门执行器 油门执行器有THA100和FVG9400，为两个公司生产。 5 中冷器 Bancon中冷器 6 烟度计 有两种，分别为439（不透光式，实验室用）和415（纸带式）。 7 颗粒采样计 代号472颗粒采集，采用部分分流稀释；整车实验必须用全分流稀释。 8 漏气量仪 代号442，计算曲轴窜气。 二 PUMA结构 1 主机(window xp+Intime) Intime用于处理实时事件，，window xp用于参数设定或者后处理等。
多肽合成基础知识汇编 Document number：WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT
----------------------------------------------------------------------------------------- 多肽合成 基础知识汇编 编制: 合成部 ----------------------------------------------------------------------------------------- 一、多肽合成概论 1．多肽化学合成概述： 1963年，［1］创立了将氨基酸的C末端固定在不溶性树脂上，然后在此树脂上依次缩合氨基酸，延长肽链、合成蛋白质的固相合成法，在固相法中，每步反应后只需简单地洗涤树脂，便可达到纯化目的.克服了经典液相合成法中的每一步产物都需纯化的困难，为自动化合成肽奠定了基础.为此，Merrifield获得1984年诺贝尔化学奖. 今天，固相法得到了很大发展.除了Merrifield所建立的Boc法(Boc:叔丁氧羰基)之外，又发展了Fmoc 固相法(Fmoc:9-芴甲氧羰基).以这两种方法为基础的各种肽自动合成仪也相继出现和发展，并仍在不断得到改造和完善. Merrifield所建立的Boc合成法［2］是采用TFA(三氟乙酸)可脱除的Boc为α-氨基保护基，侧链保护采用苄醇类.合成时将一个Boc－氨基酸衍生物共价交联到树脂上，用TFA脱除Boc，用三乙胺中和游离的氨基末端，然后通过Dcc活化、耦联下一个氨基酸，最终脱保护多采用HF法或TFMSA(三氟甲磺酸)法.用Boc法已成功地合成了许多生物大分子，如活性酶、生长因子、人工蛋白等. 多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质。它是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物,由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成。到现在，人们已发现和分离出一百多种存在于人体的肽，对于多肽的研究和利用，出现了一个空前的繁荣景象。多肽的全合成不仅具有很重要的理论意义，而且具有重要
热力学的基础知识
热力学的基础知识 1、水和水蒸汽有哪些基本性质？ 答：水和水蒸汽的基本物理性质有：比重、比容、汽化潜热、比热、粘度、温度、压力、焓、熵等。水的比重约等于1（t/m3、kg/dm3、g/cm3）蒸汽比容是比重的倒数，由压力与温度所决定。水的汽化潜热是指在一定压力或温度的饱和状态下，水转变成蒸汽所吸收的热量，或者蒸汽转化成水所放出的热量，单位是： KJ/Kg。水的比热是指单位质量的水每升高1℃所吸收的热量，单位是KJ/ Kg·℃，通常取4.18KJ。水蒸汽的比热概念与水相同,但不是常数，与温度、压力有关。 2、热水锅炉的出力如何表达？ 答：热水锅炉的出力有三种表达方式，即大卡/小时（Kcal/h）、吨/小时(t/h)、兆瓦（MW）。 （1）大卡/小时是公制单位中的表达方式，它表示热水锅炉每小时供出的热量。 （2）"吨"或"蒸吨"是借用蒸汽锅炉的通
俗说法，它表示热水锅炉每小时供出的热量相当于把一定质量（通常以吨表示）的水从20℃加热并全部汽化成蒸汽所吸收的热量。 （3）兆瓦(MW)是国际单位制中功率的单位，基本单位为W （1MW=106W）。正式文件中应采用这种表达方式。 三种表达方式换算关系如下： 60万大卡/小时（60×104Kcal/h）≈1蒸吨/小时〔1t/h〕≈0.7MW 3、什么是热耗指标？如何规定？ 答：一般称单位建筑面积的耗热量为热耗指标，简称热指标，单位w/m2,一般用qn表示，指每平方米供暖面积所需消耗的热量。黄河流域各种建筑物采暖热指标可参照表2-1
上表数据只是近似值，对不同建筑结构，材料、朝向、漏风量和地理位置均有不同，纬度越高的地区，热耗指标越高。 4、如何确定循环水量？如何定蒸汽量、热量和面积的关系？ 答：对于热水供热系统，循环水流量由下式计算： G=[Q/c(tg-th)]× 3600=0.86Q/(tg-th)式中：G - 计算水流量，kg/h
德国著名品牌彪马发展历史 提出全新品牌口号ForeverFaster的德国运动品牌PUMA(彪马)，与顶尖运动员紧密合作，设计提供专业运动装备，产品涉及跑步， 足球，高尔夫乃至赛车领域。 品牌历史 1948年成立 PUMA于1948年成立于德国荷索金米兰，PUMA中文作彪马，意为美洲狮，德国一家以生产鞋与运动服为主的大型跨国公司。创始人：鲁道夫·达斯勒(RudolfDassler)。 鲁道夫·达斯勒于1924年加入了弟弟阿道夫·达斯勒(昵称阿迪Adi)位于赫若拉赫的达斯勒公司，并即将公司更名为达斯勒兄弟公司。1930年代中期，达斯勒兄弟公司成长为具有近百名员工、有三 十余种款式的全球运动鞋领导品牌。第二次世界大战后，达斯勒兄 弟公司复业，有47名员工，并以帆布与美军燃油槽提炼出橡胶，制 成战后第一款运动鞋。 1948年阿道夫·达斯勒以其自身姓名的组合Adi与das将达斯 勒兄弟公司更名为adidas，两兄弟从此分道扬镳，哥哥鲁道夫·达 斯勒另成立了PUMA公司，与adidas的方向相同，都以体育用品生 产为主，两人从此成为竞争对手。 彪马(Puma)是全球著名的运动品牌。彪马(Puma)的鞋与服饰在嘻哈涂鸦文化中受到全球各地年轻人的极度欢迎。同时彪马(Puma)与 阿迪达斯(Adidas)更是1970与1980年代嘻哈文化的代表。 1986年加入慕尼黑与法兰克福的证券交易所 1986年PUMA加入慕尼黑与法兰克福的证券交易所。今日，PUMA 有3，200名员工，并贩卖产品至超过80个国家。2003年公司的资 产达到12亿欧元。PUMA的鞋与服饰在嘻哈涂鸦文化中，无论是美
氨基酸、多肽及蛋白质类药物 氨基酸、多肽及蛋白质类药物 山东药品食品职业学院张慧婧 第一部分氨基酸、多肽及蛋白质基本知识 一、蛋白质基本知识 蛋白质是一切生命的物质基础，是生物体的重要组成成分之一。无论是病毒、细菌、寄生虫等简单的低等生物，还是植物、动物等复杂的高等生物，均含有蛋白质。蛋白质占人体重量的16%-20%约达人体固体总量的45%肌肉、血液、毛发、韧带和内脏等都以蛋白质为主要成分的形式存在；植物体内蛋白质含量较动物偏低，但在植物细胞的原生质和种子中蛋白质含量较咼，如大豆中蛋白含量约为38%而黄豆中咼达40%微生物中蛋白质含量也很高，细菌中的蛋白质含量一般为50%-80%干酵母中蛋白质含量也高达46. 6%病毒除少量核酸外几乎都由蛋白质组成，疯牛病的病原体——朊病毒仅由蛋白质组成。 这些不同种类的蛋白质，具有独特的生物学功能，几乎参与了所有的生命现象和生理过程，可以说一切生命现象都是蛋白质功能的体现。 1?生物催化作用 作为生命体新陈代谢的催化剂一一酶，是被认识最早和研究最多的一大类蛋白质，它的特点是催化生物体内的几乎所有的化学反应。生物催化作用是蛋白质最重要的生物功能之一。正是这些酶类决定了生物的代谢类型，从而才有可能表现出不同的各种生命现象。 2?结构功能 第二大类蛋白质是结构蛋白，它们构成动、植物机体的组织和细胞。在高等动物中，纤维状胶原蛋白是结缔组织及骨骼的结构蛋白， a -角蛋白是组成毛发、羽毛、角质、皮肤的结 构蛋白。丝心蛋白是蚕丝纤维和蜘蛛网的主要组成成分。膜蛋白是细胞各种生物膜的重要成分，它与带极性的脂类组成膜结构。 3.运动收缩功能 另一类蛋白质在生物的运动和收缩系统中执行重要功能。肌动蛋白和肌球蛋白是肌肉收缩系统的
物理选修3—3模块必背知识点 考点一 分子动理论和内能的基本概念 1．分子动理论 （1）物体是由大量分子组成的： ①多数分子大小的数量级为10－10 m. ②阿伏加德罗常数N A ＝6.02×1023 mol －1. （2）分子在永不停息地做无规则热运动： 实验依据：布朗运动、扩散现象． ①扩散现象 由于物质分子的无规则运动而产生的物质迁移现象．温度越高，扩散得越快． ②布朗运动 现象：悬浮在液体（或气体）中的固体微粒的永不停息的无规则运动． 本质：布朗运动间接反映．．．． 了液体（或气体）分子的无规则运动． 特点：温度越高，微粒越小，布朗运动越剧烈． （3）分子间存在相互作用力． （4）气体分子运动速率的统计分布 氧气分子速率分布呈现中间多、两头少的特点． 2．温度是分子平均动能的标志、内能 （1）温度：一切达到热平衡的系统都具有相同的温度． （2）两种温标：摄氏温标和热力学温标的关系：T ＝t ＋273.15 K. （3）温度是分子热运动平均动能的标志． （4）分子的势能： ①意义：由于分子间存在着引力和斥力，所以分子具有由它们的相对位置决定的能． ②分子势能的决定因素： 微观上——决定于分子间距． 宏观上——决定于体积和状态． （5）物体的内能： ①物体中所有分子热运动的动能与分子势能的总和． ②物体的内能大小由物体的温度、体积、物质的量决定．（气体由于分子间距太大，往往不考虑其分子势能，即理想气体的内能由它的温度和物质的量决定） ③物体的内能与物体的位置高低、运动速度大小无关． ④改变物体内能有两种方式：做功和热传递． 考点二 微观量的估算 1．微观量：分子体积V 0、分子直径d 、分子质量m 0. 2．宏观量：物体的体积V 、摩尔体积V mol 、物体的质量m 、摩尔质量M 、物体的密度ρ. 3．关系 （1）分子的质量：m 0＝M N A ＝ρV mol N A . （2）分子的体积：V 0＝V mol N A ＝M ρN A .（对于固体和液体是分子的体积，对于气体是分子所占据空间的体积） （3）物体所含的分子数：N ＝V V mol ·N A ＝m ρV mol ·N A 或N ＝m M ·N A ＝ρV M ·N A .
高中物理知识点总结热 力学基础 IMB standardization office【IMB 5AB- IMBK 08- IMB 2C】
一.教学内容：热力学基础（一）改变物体内能的两种方式：做功和热传递 1. 做功：其他形式的能与内能之间相互转化的过程，内能改变了多少用做功的数值来量度，外力对物体做功，内能增加，物体克服外力做功，内能减少。 2. 热传递：它是物体间内能转移的过程，内能改变了多少用传递的热量的数值来量度，物体吸收热量，物体的内能增加，放出热量，物体的内能减少，热传递的方式有：传导、对流、辐射，热传递的条件是物体间有温度差。 （二）热力学第一定律 1. 内容：物体内能的增量等于外界对物体做的功W和物体吸收的热量Q 的总和。 2. 表达式：。 3. 符号法则：外界对物体做功，W取正值，物体对外界做功，W取负值，吸收热量Q 取正值，物体放出热量Q取负值；物体内能增加取正值，物体内能减少取负值。 （三）能的转化和守恒定律 能量既不能凭空产生，也不能凭空消失，它只能从一种形式转化为另一种形式或从一个物体转移到另一个物体。在转化和转移的过程中，能的总量不变，这就是能量守恒定律。 （四）热力学第二定律 两种表述：（1）不可能使热量由低温物体传递到高温物体，而不引起其他变化。 （2）不可能从单一热源吸收热量，并把它全部用来做功，而不引起其他变化。
热力学第二定律揭示了涉及热现象的宏观过程都有方向性。 （3）热力学第二定律的微观实质是：与热现象有关的自发的宏观过程，总是朝着分子热运动状态无序性增加的方向进行的。 （4）熵是用来描述物体的无序程度的物理量。物体内部分子热运动无序程度越高，物体的熵就越大。 （五）说明的问题 1. 第一类永动机是永远无法实现的，它违背了能的转化和守恒定律。 2. 第二类永动机也是无法实现的，它虽然不违背能的转化和守恒定律，但却违背了热力学第二定律。 （六）能源和可持续发展 1. 能量与环境 （1）温室效应：化石燃料燃烧放出的大量二氧化碳，使大气中二氧化碳的含量大量提高，导致“温室效应”，使得地面温度上升，两极的冰雪融化，海平面上升，淹没沿海地区等不良影响。 （2）酸雨污染：排放到大气中的大量二氧化硫和氮氧化物等在降水过程中溶入雨水，使其形成酸雨，酸雨进入地表、江河、破坏土壤，影响农作物生长，使生物死亡，破坏生态平衡，同时腐蚀建筑结构、工业装备、动力和通讯设备等，还直接危害人类健康。 2. 能量耗散和能量降退 （1）能量耗散：在能量转化过程中，一部分机械能转变成内能，而这些内能最终流散到周围的环境中，我们没有办法把这些流散的内能重新收集起来加以利用，这种现象叫做能量的耗散。
德国彪马公司战略分析 姓名张芬 学号2006125814 班级06国际商务 课程企业战略管理 教师王琴
目录 一、公司简介 (3) 二、关键战略四要素分析 (3) 三、运动品牌产业环境分析 (5) （一）现有企业竞争分析 (5) （二）潜在进入者分析 (6) （三）供应商分析 (6) （四）买方分析 (6) （五）替代产品分析 (7) 四、彪马企业远景分析 (7) 五、彪马企业使命分析 (8) 六、运动品牌外部环境分析 (9) 七、运动品牌内部环境分析 (10) 八、SWOT综合分析 (15) （一）优势分析 (15) （二）劣势分析 (16) （三）机遇分析 (16) （四）威胁分析 (17) 九、彪马业务组合分析 (17) 十、公司战略选择 (18) （一）集中战略 (19) （二）合资战略 (20) （三）国际化战略 (21) 十一、差别化战略 (21) 十二、人力资源战略 (22)
一、公司简介 PUMA（彪马）是一间源自德国，以生产鞋与运动服为主的大型跨国公司。 鲁多夫?达斯勒于1924年加入了弟弟阿道夫?达斯勒（昵称阿迪Adi）位于赫佐格奥拉赫的达斯勒公司，并即将公司更名为达斯勒兄弟公司。1930年代中期，达勒斯兄弟公司成长为具有近百名员工、有三十余种款式的全球运动鞋领导品牌。第二次世界大战后，达勒斯兄弟公司复业，有四十七名员工，并以帆布与美军燃油槽提炼出橡胶，制成战后第一款运动鞋。 1948年阿道夫·达斯勒以其自身姓名的组合Adi与das将达斯勒兄弟公司更名为Adidas，两兄弟从此分道扬镳，哥哥鲁多夫·达斯勒另成立了彪马公司，与Adidas的方向相同，都以体育用品生产为主，两人从此成为竞争对手。 1986年彪马加入慕尼黑与法兰克福的证券交易所。至2007年底，彪马有9,204名员工，并贩卖产品至超过80个国家。2007年销售额23.7亿欧元，2006年公司利润2.63亿欧元。2003年公司的资产达到12亿欧元。 彪马的鞋与服饰在嘻哈涂鸦文化中，无论是美国内外，都受到极度欢迎。彪马也与Adidas同为1970与1980年代嘻哈文化代表物之一。 中国市场在彪马全球市场中具有举足轻重的地位。彪马首席执行官兼主席塞特兹(JochenZeitz)2006年在上海表示，彪马很重视中国市场，“我们目标是使其成为彪马在国外的第三大市场。” 二、关键战略四要素分析 （一）业务组合 在产品方面，以“运动生活”为宗旨，将体育运动、生活潮流和时尚元素融入产品系列中。目前，除足球运动用品、跑道用品、瘦身运动用品等核心产品线外，还开发了高尔夫系列、摩托车系列、泳装系列、帆船运动系列、城市活力系列等新产品线。在产品结构上，已形成鞋类、服装、饰品三大类，2006年它们分别占彪马公司总销售额的59.9％、33.6％、6.5％。 （二）资源配置 彪马现在全球已建立了德国、美国波士顿和中国香港三个区域总部。约亨·塞
2.多肽的类别及其分类原则, 大小 9肽以下 寡肽 15肽以下 小肽 结构 同聚肽: 15-50肽 多于50肽 线性肽，环肽 中肽 大肽 来源 抗菌肽，激素肽，毒肽 液相合成法 固相合成法 多肽合成思考/练习题 1. 目前多肽的常见定义？多肽的结构单元? a —氨基酸以肽链连接在一起而形成的化合物，其分子量不超过10, 000 ,并且不存在三级以上结构。 结 构单元是氨基酸 多肽同相合成法、液相合成法的对应英文？ Fmoc Chemistry 固相合成单循环包括 几个步骤？对应名称? 柴聚肽：色素肽，糖肽，脂肽，缩酯肽 Liquid phase peptide synthesis, LPPS Solid phase peptide synthesis,SPPS Fmoc Chemistry 固相合成单?循环：缩合，洗涤，去保护，中和及洗涤，下一轮 缩合 5.多肽合成中常见副产物有哪些？多肽偶联反应的最高追求？多肽裂解中常常加入俘获剂(Scavengers)0 Scavengers 的主要作用是啥？常见俘获剂有哪些？各|'|特点？ 副产物：形成天冬酰亚胺，或发生差向异构化作用 8. 多股合成中如何检查偶联反应的完成程度、树脂替代度和Fmoc 脱除程度? 9. 解决困难肽序合成的常见方法？各自特点? 10. 请比较经Boc-、Fmoc-. Z-三种保护基保护的氛基酸的特点。 11. 多肽固相合成中产生二酮哌嗪(diketopiperazine, DKP)是一常见副反应。请给出产生二酮哌嗪的主要原因以 及减 少DKP 形成的常见方法。 减少DKP 形成的常见方法:使用与叔丁基等效的大基团来以位阻阻止DKP 的形成。 12. 请给出多肽消旋的主要原因以及目前公认的2种机理P157。 多股合成过程中，部分氨基酸在活化的过程中会导致不同程度的消旋，特别容易消旋的氛基酸有：Cys, His, Phe,当然这些消旋化还和溶剂，温度以及合成中的有机碱等因素有关。对于这些敏基酸，可以通过采用高效 缩合试剂，减少反应时间，可以减少消旋的比例
鞋类产品知识简介 鞋类产品知识简介 鞋类产品使用“产品线”的定义来区分不同系列鞋子的设计理念，设计灵感以与运动风格，而“产片线”又使用颜色来对其定义，红色产品线代表运动型的鞋类，蓝色产品线代表休闲型的鞋类。 红色产品线中代表的鞋类有： 完全跑步系列，蓝调跑步系列，白色跑步系列，全能训练系列，现代高尔夫系列，足球系列，瑜伽系列。 蓝色产品线中代表的鞋类有： 赛车运动系列，新兴运动系列，创意运动系列，新酷系列，篮球运动 系列，原创系列，怀旧系列 红色产品线 完全跑步系列 这个系列的鞋子是改进性能、减少受伤的跑鞋，每款写都采用了共生技术，给予跑步者最佳性能的产品。 每双完全跑步系列的鞋子均包含多种不同的科技成份，例如：，，……完全跑步系列又按照不同人对跑步这项运动的不同要求，细分为越野 慢跑和公路慢跑两个子系列。 穿着越野慢跑的跑鞋可以在任何环境中进行跑步运动，比如：在偏僻遥远的森林公园，家里附近的小树林，或者极限运动中的穿越山区、 峡谷、沙漠等等… 而公路慢跑是专为跑步爱好者以与竞赛型运动员设计的，更着重于舒
适性和灵活性。 蓝调跑步系列 这个系列的鞋子是专为追求技术、时尚的消费者而创造，是运用最大胆的设计语言而开发的时尚产品。 蓝调跑步系列又细分为：冲击力、田径训练、海拔高度、都市运动和 弹性力度5个子系列。 冲击力：外观充满活力并富有创新精神的鞋款设计，能避免因跑步而带来的冲击力。这个子系列在鞋跟部往往采用了（蜂窝避震系统）技 术，给穿着者以良好的保护 田径训练：激动人心的改良田径鞋设计，将运动所需的功能性与休闲的生活态度巧妙的融合。这个子系列将田径赛场中使用的专业鞋进行了创造性的改良，即贴合了田径专用鞋的功能特点名，又将休闲的生活态度融入其中，每款鞋都有独特的设计和精巧的外形，比如：在鞋底处会出现仿鞋钉或者增强抓地力的设计。 海拔高度：通过真正的性能解决方案与前卫的设计的结合，可以抵御因天气与不同海拔高度的地形带来影响的鞋款。这个子系列能给人以全方位安全的保证，加厚的中底对与特殊花纹的鞋底都能给穿着者在不同海拔的地方带来舒适的感觉，圆形特制鞋带与可快捷抽拉的鞋环搭配使用，极大的方便了穿着者可根据不同环境而迅速调节系带系统的松紧度，促进了足部的血液循环。而金属感的合成皮鞋面更能给人 以坚固耐磨的质感 弹性力度：为那些寻求简单与传统泡沫气垫感觉的跑步者设计。这个
多肽合成技术 多肽化学已经走过了一百多年的光辉历程，1902年，Emil Fischer首先开始关注多肽合成，由于当时在多肽合成方面的知识太少，进展也相当缓慢，当时合成采用了苯甲酰，乙酰保护，脱去相当困难，而且容易导致肽链断裂。直到1932年，Max Bergmann等人开始使用苄氧羰基（Z）来保护α-氨基，该保护基可以在催化氢化或氢溴酸的条件下定量脱除，多肽合成才开始有了一定的发展。到了20世纪50年代，随着越来越多的生物活性多肽的发现，大大推动了有机化学家们对多肽合成方法以及保护基的研究，因此这一阶段的研究成果也非常丰富，人们合成了大量的生物活性多肽，包括催产素（oxytocin），胰岛素等，同时在多肽合成方法以及氨基酸保护基上面也取得了不少成绩，这为后来的固相合成方法的出现也提供了实验和理论基础。也就是这个阶段，Fred Sanger发明了氨基酸序列测定方法，并为此获得了1958年的Nobel 化学奖。还是他后来发明了DNA序列检测方法，并于1980年再次获得了Nobel化学奖，成为到目前为止唯一获得两次Nobel化学奖的科学家。1963年，Merrifield提出了固相多肽合成方法（SPPS），这个在多肽化学上具有里程碑意义的合成方法，一出来，就由于其合成方便，迅速，现在已经成为多肽合成的首选方法，随后的发展也证明了该方法不仅仅是一种合成方法，而且也带来了有机合成上的一次革命，并成为了一支独立的学科，固相有机合成（SPOS）。当然，Merrifield也因此荣获了1984年的Nobel化学奖。也正是Merrifield，他经过了反复的筛选，最终屏弃了苄氧羰基（Z）在固相上的使用，首先将叔丁氧羰基（BOC）用于保护α-氨基并在固相多肽合成上使用，其可以在酸性条件下定量的脱除，反应也非常迅速，在30min就可以反应完全。由于叔丁氧羰基（BOC）方法中，氨基酸侧链的保护基团大多基于苄基（Bzl），因此也称为BOC-Bzl策略。同时，Merrifield在20世纪60年代末发明了第一台全自动多肽合成仪，并首次合成生物蛋白酶，核糖核酸酶（124个氨基酸）。随后的多肽化学研究主要集中在固相合成树脂，多肽缩合试剂，氨基酸保护基的研究。1972，Lou Carpino 首先将9-芴甲氧羰基（FMOC）用于保护α-氨基，其在碱性条件下可以迅速脱除，10min就可以反应完全，而且由于其反应条件温和，迅速得到广泛使用，到了20世纪80年代取代了叔丁氧羰基（BOC），成为了固相多肽合成中的首选合成方法。该方法中氨基酸的侧链大多基于叔丁基（But），因此，也称为FMOC-But策略。同时，在多肽合成树脂，缩合试剂以及氨基酸保护，包括合成环肽的氨基酸正交保护上也取得了丰硕的成果。 进入21世纪，随着蛋白质组学的研究深入，对于多肽化学的要求不仅仅是合成方法，而更多的集中在多肽标记与修饰方法，以及蛋白结构与功能模拟多肽的合成以及长肽或蛋白合成。 多肽化学合成的基本介绍 多肽化学合成方法，包括液相和固相两种方法。液相合成方法现在主要采用BOC和Z两种保护方法，现在主要应用在短肽合成，如阿斯巴甜，力肽，催产素等，其相对与固相合成，具有保护基选择多，成本低廉，合成规模容易放大的许多优点。与固相合成比较，液相合成主要缺点是，合成范围小，一般都集中在10个氨基酸以内的多肽合成，还有合成中需要对中间体进行提纯，时间长，工作量大。固相合成方法现在主要采用FMOC和BOC两种方法，它具有合成方便，迅速，容易实现自动化，而且可以比较容易的合成到30个氨基酸左右多肽。 1.1．氨基酸保护基 20种常见氨基酸，根据侧链可以分为几类：脂肪族氨基酸（Ala，Gly，Val，Leu，Ile，），芳香族氨基酸（Phe，Tyr，Trp，His），酰胺或羧基侧链氨基酸（Asp，Glu，Asn，Gln），碱性侧链氨基酸（Lys，Arg），含硫氨基酸（Cys，Met），含醇氨基酸（Ser，Thr），亚氨型基酸（Pro）。多肽化学合成中氨基酸的保护非常关键，直接决定了合成能够成功的关键。因为常见的20中氨基酸中有很多都是带有活性侧链的，需要进行保护，一般要求，这些保护基在合成过程中稳定，无副反应，合成结束后可以完全定量的脱除。合成中需要进行保护的氨基酸包括：Cys，Asp，Glu，His，Lys，Asn，Gln，Arg，Ser，Thr，Trp，Tyr。需要进行保护的基团：羟基，羧基，巯基，氨基，酰胺基，胍基，吲哚，咪唑等。其中Trp也可以不保护，因
精心整理 多肽合成技术多肽化学已经走过了一百多年的光辉历程，1902年，EmilFischer首先开始关注多肽合成，由于当时在多肽合成方面的知识太少，进展也相当缓慢当时合成采用了苯甲酰，乙酰保护，脱去相当困难，而且容易导致肽链断裂。直到1932年，MaxBergmann等人开始使用苄氧羰基（Z）来保护α-氨基，该保护基可以在催化氢化或氢溴酸的条件下定量脱除，多肽合成才开始有了一定的发展。到了20世纪50年代，随着越来越多的生物活性多肽的发现，大大推动了有机化学家们对多肽合成方法以及保护基的研究，因此这一阶段的研究成果也非常丰富，人们合成了大量的生物活性多肽，包括催产素（oxytocin），胰岛素等，同时在多肽合成方法以及氨基酸保护基上面也取得了不少成绩，这为后来的固相合成方法的出现也提供了实验和理论基础。也就是这个阶段，FredSanger 发明了氨基酸序列测定方法，并为此获得了1958年的Nobel化学奖。还是他后来发明了DNA序列检测方法，并于1980年再次获得了Nobel化学奖，成为到目前为止唯一获得两次Nobel化学奖的科学家。1963年，Merrifield 提出了固相多肽合成方法（SPPS），这个在多肽化学上具有里程碑意义的合成方法，一出来，就由于其合成方便，迅速，现在已经成为多肽合成的首选方法，随后的发展也证明了该方法不仅仅是一种合成方法，而且也带来了有机合成上的一次革命，并成为了一支独立的学科，固相有机合成（SPOS）。当然，Merrifield也因此荣获了1984年的Nobel化学奖。也正是Merrifield，他经过了反复的筛选，最终屏弃了苄氧羰基（Z）在固相上的使用，首先将叔丁氧羰基（BOC）用于保护α-氨基并在固相多肽合成上使用，其可以在酸性条件下定量的脱除，反应也非常迅速，在30min就可以反应完全。由于叔丁氧羰基（BOC）方法中，氨基酸侧链的保护基团大多基于苄基（Bzl），因此也称为BOC-Bzl策略。同时，Merrifield在20世纪60年代末发明了第一台全自动多肽合成仪，并首次合成生物蛋白酶，核糖核酸酶（124个氨基酸）。随后的多肽化学研究主要集中在固相合成树脂，多肽缩合试剂，氨基酸保护基的研究。1972，LouCarpino首先将9-芴甲氧羰基（FMOC）用于保护α-氨基，其在碱性条件下可以迅速脱除，10min就可以反应完全，而且由于其反应条件温和，迅速得到广泛使用，到了20世纪80年代取代了叔丁氧羰基（BOC），成为了固相多肽合成中的首选合成方法。该方法中氨基酸的侧链大多基于叔丁基（But），因此，也称为FMOC-But策略。同时，在多肽合成树脂，缩合试剂以及氨基酸保护，包括合成环肽的氨基酸正交保护上也取得了丰硕的成果。 进入21世纪，随着蛋白质组学的研究深入，对于多肽化学的要求不仅仅是合成方法，而更多的集中在多肽标记与修饰方法，以及蛋白结构与功能模拟多肽的合成以及长肽或蛋白合成。 多肽化学合成的基本介绍 多肽化学合成方法，包括液相和固相两种方法。液相合成方法现在主要采用BOC和Z两种保护方法，现在主要应用在短肽合成，如阿斯巴甜，力肽，催产素等，其相对与固相合成，具有保护基选择多，成本低廉，合成规模容易放大的许多优点。与固相合成比较，液相合成主要缺点是，合成范围小，一般都集中在10个氨基酸以内的多肽合成，还有合成中需要对中间体进行提纯，时间长，工作量大。固相合成方法现在主要采用FMOC和BOC两种方法，它具有合成方便，迅速，容易实现自动化，而且可以比较容易的合成到30个氨基酸左右多肽。 1.1．氨基酸保护基 20种常见氨基酸，根据侧链可以分为几类：脂肪族氨基酸（Ala，Gly，Val，Leu，Ile，），芳香族氨基酸（Phe，Tyr，Trp，His），酰胺或羧基侧链氨基酸（Asp，Glu，Asn，Gln），碱性侧链氨基酸（Lys，Arg），含硫氨基酸（Cys，Met），含醇氨基酸（Ser，Thr），亚氨型基酸（Pro）。多肽化学合成中氨基酸的保护非常关键，直接决定了合成能够成功的关键。因为常见的20中氨基酸中有很多都是带有活性侧链的，需要进行保护，一般要求，这些保护基在合成过程中稳定，无副反应，合成结束后可以完全定量的脱除。合成中需要进行保护的氨基酸包括：Cys，Asp，Glu，His，Lys，Asn，Gln，Arg，Ser，Thr，Trp，Tyr。需要进行保护的基团：羟基，羧基，巯基，氨基，酰胺基，胍基，吲哚，咪唑等。其中Trp也可以不保护，因为吲哚性质比较稳定。当然在特殊的情况下，有些氨基酸也可以不保护，象，Asn，Gln，Thr，Tyr。