多肽知识
- 格式:doc
- 大小:60.50 KB
- 文档页数:8
多肽是由氨基酸组成的短链蛋白质分子,其代谢产物的鉴定对于了解生物体的代谢过
程和相关疾病的发生机制具有重要意义。
下面是关于多肽代谢产物鉴定的一般步骤和
常用方法:
1. 样品准备:首先需要获取待鉴定的多肽代谢产物样品,可以是生物体组织、血液、
尿液等。
样品处理包括样品提取、纯化和浓缩等步骤,旨在去除干扰物质以获得更纯
净的多肽代谢产物。
2. 质谱分析:质谱技术是多肽代谢产物鉴定中常用的方法之一。
通过质谱仪器,可以
将待鉴定的多肽代谢产物进行离子化,然后根据不同的质荷比(m/z)进行分析和鉴定。
常用的质谱方法包括质谱-质谱(MS/MS)、飞行时间质谱(TOF-MS)和电喷雾质谱(ESI-MS)等。
3. 数据分析与解释:通过质谱分析,可以获得一系列的峰值或质谱图。
对这些数据进
行分析和解释,可以确定多肽代谢产物的分子式、结构和相对丰度等信息。
数据分析
常使用质谱数据库进行比对,以寻找与已知代谢产物的匹配。
4. 验证与定量:为了确保鉴定结果的准确性和可靠性,通常需要进行验证实验。
这可
以包括合成已鉴定的多肽代谢产物进行结构验证,或使用其他分析方法如高效液相色
谱(HPLC)进行定量分析。
需要注意的是,多肽代谢产物的鉴定是一个复杂的过程,需要结合多种技术手段和专
业知识。
此外,样品的选择和处理也对鉴定结果有重要影响。
因此,在进行多肽代谢
产物鉴定时,建议寻求专业的科研机构或实验室的帮助,以获得准确可靠的结果。
多肽与益生菌结合-概述说明以及解释1.引言1.1 概述多肽与益生菌结合是近年来备受关注的研究领域。
多肽是由多个氨基酸键结而成的小分子蛋白质,具有广泛的生物活性。
益生菌则是指对人体有益的菌种,常见的有乳酸菌、双歧杆菌等。
通过将多肽与益生菌结合起来,可以实现两者的相互促进和增强效果。
多肽具有抗菌、抗氧化、抗炎等多种生物活性,可以调节免疫系统、促进伤口愈合、抑制肿瘤生长等。
而益生菌则能够调节肠道菌群平衡、增强肠道黏膜屏障功能、促进食物消化吸收等。
两者结合后,多肽能够增强益生菌的生存能力和生物活性,同时益生菌也能够促进多肽的吸收和利用,实现双方的协同作用。
在食品工业和医药领域,多肽与益生菌的结合已经得到了广泛的应用。
例如,将多肽导入益生菌中,可以增强益生菌的功能,提高产品的附加值。
同时,多肽与益生菌的结合也为开发新型的功能食品、药物提供了新的思路与途径。
通过研究和应用多肽与益生菌的结合,可以为人类的健康问题提供更多解决方案。
综上所述,多肽与益生菌结合具有广阔的应用前景和重要的研究意义。
通过深入探究二者的相互作用机制,可以为相关领域的开发与创新提供理论指导和技术支持。
未来的研究方向可以包括多肽与益生菌的协同作用机制研究、新产品的开发与应用、对人类健康的影响评价等方面。
通过不断深入的研究,多肽与益生菌结合有望为人类健康事业做出更大的贡献。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以编写如下:1.2 文章结构本文分为三个主要部分:引言、正文和结论。
在引言部分,我们将首先对多肽与益生菌结合的概述进行介绍,说明其重要性和研究背景。
接着,我们将详细介绍本文的结构和内容安排,以便读者能够清晰了解全文的组织框架。
在正文部分,我们将分为四个小节来讨论多肽与益生菌的结合。
首先,我们将介绍多肽的作用,包括其在生物体内的功能和作用机制。
然后,我们将重点讨论益生菌的作用,包括益生菌对人体健康的积极影响和其在调节肠道菌群中的作用。
接下来,我们将重点探讨多肽与益生菌之间的相互作用,包括两者之间的协同作用和互补作用等方面。
关于肽的知识随着当今社会人们对健康的重视,以及肽概念的发现,大家对什么是“肽”都产生了浓厚的兴趣。
今天,金矿力就为大家科普下“肽”知识。
在20世纪之前,肽基本上是以蛋白质的次级分解产物被认识的。
20世纪初,1901年诺贝尔化学奖获得者EmilFischer 首次人工合成了甘氨酸二肽,揭示肽的真实结构是由酰胺键构成的,一年后,他提出“Peptide”(肽)这个词,自此拉开了肽科学研究的序幕。
氨基酸曾被认为是人体对蛋白质类食物吸收的最小单位,而肽仅仅是以蛋白质的次级分解产物被认识的。
随着现代生物科学以及营养学等学科的飞速进步,科学家们发现蛋白质被消化分解后很多情况下是以2~3个氨基酸构成的小肽而被人体小肠专有通道直接吸收,且吸收效率较单个氨基酸更高。
人们逐渐认识到这种小肽是重要的生命物质基础之一,其作用涉及到生命过程的各个环节。
肽是构成人体内酶、激素、抗体、神经间质等活性物质不可替代的材料,是生命之源。
肽具有蛋白质和单体氨基酸不具备的独特的生理活性和医疗保健作用,具备激活、促进、修复、抑制四重功效。
什么是肽?肽是氨基酸的聚合物,是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物,由2个或2个以上的氨基酸通过肽链相互连接而成。
从另一角度讲,也可以认为是蛋白质的不完全分解产物。
根据现今接受的命名法则,分为寡肽(低聚肽)、多肽、蛋白质。
寡肽(低聚肽)是由2-9个氨基酸构成的。
多肽是由10-50个氨基酸构成的。
蛋白质是由50个以上氨基酸构成的肽衍生物。
肽的主要生理功能:1、激活——激活细胞活性,有效清除对人体有害的自由基。
2、促进——促进营养吸收,维持细胞正常的新陈代谢。
3、修复——修复受损变性细胞,维护细胞结构与功能正常。
4、抑制——抑制细胞变性,增强人体免疫力。
肽是怎么被人体利用吸收的?过去的观点认为,蛋白质进入机体后,在消化道一系列的消化酶作用下,一次被分解为多肽、寡肽,最终分解为游离的氨基酸,机体对蛋白质的吸收只能以游离的氨基酸的形式进行。
关于肽方面的知识在现代生物化学领域中,肽的研究已经引发了广泛的关注。
这些由氨基酸通过肽键连接而成的化合物,以其独特的生物活性和功能,为生命科学、医药、食品等多个领域带来了革命性的变革。
本文将深入探讨肽的基本知识、功能特性以及其在各领域的应用价值。
一、肽的基本概念与分类肽是两个或两个以上的氨基酸以肽键相连的化合物,是介于氨基酸和蛋白质之间的物质。
根据氨基酸数量的不同,肽可分为二肽、三肽、多肽等。
当肽链中的氨基酸数量超过一定数量时,它们便被称为蛋白质。
然而,尽管肽与蛋白质在结构上有所相似,但它们在功能、活性和吸收等方面却存在显著的差异。
二、肽的功能特性生物活性:许多肽具有独特的生物活性,能够调节生物体的生理功能。
例如,一些肽具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用,对于维护人体健康具有重要意义。
易于吸收:与蛋白质相比,肽的分子量较小,因此更容易被人体吸收。
这使得肽在营养补充、治疗疾病等方面具有独特的优势。
低毒性:大多数肽的毒性较低,因此在药物开发中具有较高的安全性。
此外,肽还具有较低的免疫原性,能够减少免疫反应的发生。
稳定性:许多肽在特定的环境条件下具有较好的稳定性,这为其在医药、食品等领域的应用提供了有力保障。
三、肽的应用领域医药领域:由于肽具有独特的生物活性和低毒性,因此在药物开发中具有重要的应用价值。
目前,已有许多基于肽的药物成功上市,用于治疗各种疾病,如肿瘤、糖尿病、心血管疾病等。
此外,肽还被广泛应用于疫苗研发、诊断试剂等领域。
食品领域:肽在食品工业中的应用也日益广泛。
一些具有特定功能的肽被添加到食品中,以提高食品的营养价值或赋予其特殊功能。
例如,抗氧化肽能够清除体内的自由基,延缓衰老;降血压肽能够抑制血管紧张素转换酶的活性,从而降低血压。
这些功能性肽的开发与应用为食品工业的发展注入了新的活力。
化妆品领域:近年来,肽在化妆品领域的应用也逐渐受到关注。
一些具有抗衰老、美白等功效的肽被添加到化妆品中,以改善皮肤状况、延缓衰老。
十全小分子复合多肽的作用
十全小分子复合多肽具有多种作用,包括但不限于以下几点:
1. 抗氧化:小分子多肽具有较强的抗氧化作用,能清除体内自由基,减少自由基造成的氧化损伤。
2. 延缓衰老:小分子多肽能迅速被人体吸收,加快表皮细胞的生长速度及新陈代谢,有利于胶原蛋白和胶原纤维合成,为皮肤提供充足的营养元素,从而延缓衰老,减少皱纹。
3. 促进伤口愈合:小分子多肽可以促进胶原蛋白合成,增强胶原蛋白分子的稳定性,改善皮肤的抗拉能力,促进伤口的愈合。
4. 调节体内水分和电解质平衡:小分子复合肽可以有效的调节体内的水分,以及调理电解质平衡。
5. 提高免疫力:小分子复合肽能为免疫系统制造对抗细菌和感染的抗体,从而提高患者的免疫力。
6. 改善疾病症状:小分子复合肽可以改善糖尿病、风湿病、类风湿等一些疾病的症状。
7. 造血功能:小分子复合肽还具有造血的功能,能够改善贫血。
请注意,这些信息是基于一般的知识和小分子复合多肽的常见作用。
具体的效果可能因个体差异而有所不同,使用前应详细咨询专业医生或药师。
多肽的分子量计算是一个涉及化学键和蛋白质合成规则的问题。
在计算多肽的分子量时,需要考虑到氨基酸的数量、每种氨基酸的分子量以及氨基酸之间形成的肽键的数量。
首先,一个氨基酸的分子量大约为130,这是由于每个氨基酸都含有碳、氢、氧和氮等元素,这些元素在氨基酸中的比例是固定的。
此外,多肽链中的二硫键(即-S-S-)也会对总分子量产生影响,其相对分子质量约为32,但通常在计算时可以忽略不计。
接下来,我们需要考虑的是肽键的数量。
肽键是氨基酸通过脱水缩合形成的,每个肽键的相对分子质量约为1。
因此,如果已知有多少个氨基酸参与了多肽链的形成,那么就可以通过氨基酸数量减去1(对于每个肽键来说),来计算出肽键的数量。
最后,将氨基酸分子量、肽键数量以及可能存在的二硫键考虑在内,就可以计算出多肽链的总分子量。
在实际操作中,可以通过将上述计算步骤整合到一个简单的数学公式中来完成多肽的分子量计算。
具体的数学公式可能会因不同的化学计算系统而有所不同,但基本的思路和步骤是相同的。
总之,多肽的分子量计算涉及到化学键、蛋白质合成规则以及数学公式等多个方面的知识,需要具备一定的化学和数学基础。
通过理解和掌握这些知识,我们可以更好地了解多肽的性质和功能,并为相关研究和应用提供有力的支持。
在未来的研究中,我们还可以进一步探索多肽的分子量和功能之间的关系,以及如何通过改变多肽的分子结构来优化其性能。
这些研究将有助于推动多肽在医药、食品、环保等领域的应用发展,为人类健康和可持续发展做出更大的贡献。
多肽合成注意事项
多肽合成是一项涉及化学合成、生物学和医药学等多个领域的综合
性研究,需要注意以下几点:
1. 基础知识
多肽合成需要掌握一定的化学和生物学基础知识,包括有机合成反应、保护基原理、衍生化修饰、分离技术、质谱分析等。
2. 设计合成方案
合成多肽需要设计合适的方案,包括选择合适的保护基和反应条件、
确定肽链序列和长度、选定合适的合成策略等。
3. 材料准备和仪器设备
多肽合成需要准备合适的试剂和溶剂,选用合适的合成装置和仪器检
测多肽纯度和质量。
4. 合成反应
多肽合成的关键是反应条件的选择和控制,需要正确控制各个反应步
骤的反应时间、温度和反应试剂的用量。
5. 活化剂和缩合试剂
多肽合成需要选择合适的活化剂和缩合试剂,如HOBt、DIC等,保证正常的缩合反应,同时减少杂质的产生。
6. HPLC纯化
合成多肽后,需要通过HPLC纯化,获取高纯度的多肽产物,确保后续实验的正常进行。
7. 质谱分析
多肽合成完成后,需要对产物进行质谱分析,确认其质量和结构,并对纯度进行检测。
在多肽合成过程中,以上七点是非常重要的,需要认真掌握和操作,以取得最好的合成效果。
什么是肽肽(peptide)是α-氨基酸以肽链连接在一起而形成的化合物,它也是蛋白质水解的中间产物。
一般肽中含有的氨基酸的数目为二到九,根据肽中氨基酸的数量的不同,肽有多种不同的称呼:由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等,一直到九肽。
通常由10~100氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽,它们的分子量低于10,000Da(Dalton,道尔顿),能透过半透膜,不被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。
也有文献把由2~10个氨基酸组成的肽称为寡肽(小分子肽);10~50个氨基酸组成的肽称为多肽;由50个以上的氨基酸组成的肽就称为蛋白质,换言之,蛋白质有时也被称为多肽。
由多个分子α-氨基酸的-NH2与-COOH互相缩合失水后形成10个肽键(-CONH-)以上的长链化合物。
它包括多种在人的机体中具一定生理活性的化合物,可以从动物组织中提取,也可能人工合成。
蛋白质即是以各种氨基酸按一定顺序以肽键形成的长链肽,通过多种次级键交联结合而成的高分子化合物,蛋白质具有复杂的四级结构,通过不同程度的水解,破析结构可得包括多肽等的产物:蛋白质→蛋白脉(proteose) →蛋白胨(pe ptone) →多肽→寡肽(oligopeptide,2~10个肽键的长链肽) →氨基酸。
这同时也表明了蛋白质的合成途径。
因此,借人工合成多肽,不仅可用于生化制药工业,还可用来研究阐明蛋白质的合成途径及其结构。
人体很多活性物质都是以肽的形式存在的,没有肽,就没有活性,就没有生命。
肽涉及人体的激素、神经、细胞生长和生殖各领域,其重要性在于调节体内各个系统和细胞的生理功能,激活体内有关酶系,促进中间代谢膜的通透性,或通过控制DNA转录或影响特异的蛋白合成,最终产生特定的生理效应。
肽是涉及人体内多种细胞功能的重要物质。
肽可以合成细胞,并调节细胞的功能活动。
肽在人体作为神经递质,传递信息。
肽可在人体作为运输工具,将人体所食的各种营养物质与各种维生素、生物素、钙及对人体有益的微量元素输送到人体各细胞、器官和组织。
肽是人体重要的生理调节物,它可全面调节人体生理功能,增强和发挥人体生理活性,它具有重要的生物学功能。
肽对人的细胞活性、功能活动、生命存在太重要了。
但现代人因各种因素使人体中的肽流失、损失,合成肽的能力大大减弱,因此现代人体缺乏肽,必须补充人工合成肽,补肽就是补活性,补肽就是补活力,补肽就是补生命。
(摘自酶法多肽专家邹远东教授《酶法多肽论》)多肽使用知识1.多肽的长期保存方法:大多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前,冷冻干燥多肽可以放于室温。
这将使湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。
对于含Cys, Met or TrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽易被空气氧化,在封瓶前,慢慢流过多肽的氮气或氩气也会降低氧化作用。
含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有这些肽与不含这些有问题解苷的那些肽相比,生命期有限。
长期保存(3个月到5年):冻干粉,在-20℃下冷冻干燥保存;中期保存(0-3个月):-20℃冷冻液体或冻干粉冷藏;短期保存(<1周):冷藏的液体或冻干粉。
2.溶液多肽的保存方法:溶液多肽远比冻干形式不稳定,溶液应为中性pH(pH5-7), -20℃保存的,为避免样品的反复冻融,最好分成小样存放。
一份样品融冻后未用完,应扔掉,细菌降解有时会成为溶液肽的麻烦,为克服此,肽应溶于无菌水,或肽溶液用0.2μ M滤膜过滤。
3.多肽的重建和操作多数肽可溶于无菌蒸溜水。
初次溶解时,要注意使初始浓度比要求浓度大,如果多肽溶解性有限,可以加入其它溶解剂或缓冲盐。
如果多肽在蒸溜水中的溶解性有限,有几种选择可帮助溶解:对碱性肽用稀乙酸(含Arg , Lys , His)酸性肽用稀氨水(含Asp, Glu)对极疏水的肽用10%有机修饰物(Acetonitnile , Methanol)极不溶的肽用DMs0或DMFguanicline hydrochloride或脲对浓溶液也很有用,与上述方法合用,超声处理也是溶解多肽的有效手段。
4.多肽净含量包装的说明包装1mg或更少的多肽时按净重包装,声明的小瓶重不含相关抗离子和水。
例如,氨基酸分析决定的肽含量是80%,在1mg样品中,那么瓶中毛重是1.25mg。
大量的多肽以毛重计算。
标出的重量含相关抗离子和水,例如,25mg样品中肽百分比为90%,那么,实际肽量为25mg 90%=22.5mg不要把肽含量和纯度搞混了。
多肽纯度可能达100%,但合成样品中多肽含量由氨基酸组成,疏水性,和多肽对溶剂和离子的暴露决定,特别是在纯化过程中,无论多肽如何纯,冻干粉多肽含量一般为70-85%。
剩余15-30%由其它基本非肽成份构成。
5.多肽纯度的选择多肽的纯度是很重要的指标,纯度的选择取决于实验的目的。
对不太灵敏的筛选实验,建议使用粗品或>75%,对免疫级别,建议选用>85%。
对于受体与LIGAND相互作用的研究,生物ASSAY研究,或细胞水平的研究,建议>95%,对于结构研究,建议>98%。
溶解性大多肽的道选溶剂是超纯抽气水。
稀乙酸或氨水分别对于碱性或酸性多肽的溶解很重要。
这些方法不溶的多肽,需要DMF、脲、guanidiniam chloride或acetonitnle来溶解,这些溶剂可能某些实验有副作用。
所以我们建议设计多肽时要加注意。
残基Ala, Cys , Ile, Leu, Met, Phe和Val将全增加多肽的溶解难度。
您需要特殊的多肽或任何技术帮助,请随时与我们联系。
我们包你完全满意,对于我们不能适当合成的顺序,我们不收费。
多肽的保存和操做包装1mg或更少的多肽按净重包装,声明的小瓶重不含相关抗离子和水。
例如,氨基酸分析决定的肽含量是80%,在1mg样品中,那么瓶中毛重是1.25mg。
大量的多肽以毛重算。
标出的重量含相关抗离子和水,例如,25mg样品中肽百分比为90%,那么,实际肽量为25mg 90%=22.5mg不要把肽含量和纯度搞混了。
肽的纯度可能是100%,而肽含量相关带电基团(如Arg, Lys )的抗离子量和肽新水性决定。
这是合成肽的本身特性。
冻干肽的保存所有产品应存于冰箱,最好为-20℃。
多数肽以此方法可以存放几年不变。
肽溶液的保存溶液肽远比冻干形式不稳定,溶液应为中性pH(pH5-7), -20℃保存的,为避免样品的反复冻融,最好分成小样存放。
一份样品融冻后未用完,应扔掉,细菌降解有时会成为溶液肽的麻烦,为克服此,肽应溶于无菌水,或肽溶液用0.2μ M滤膜过滤。
多肽的重建和操作多数肽溶于无菌蒸溜水。
初次溶解时,要注意使初始浓度比要求浓度大,如果多肽仅有限溶解性,这便允许加入其它溶解剂或缓冲盐。
如果多肽在水中的溶解性有限,有几种选择可帮助溶解:对碱性肽用稀乙酸(含Arg , Lys , His)酸性肽用稀氨水(含Asp, Glu)对极疏水的肽用10%有机修饰物(Acetonitnile , Methanol)极不溶的肽用DM50或DMFguanicline hydrochloride或脲的浓溶液也很有用,与上述方法合用,声处理也是溶解多肽的有效手段固相多肽合成Fmoc方法任何多肽链的关键连接为肽键,由一个氨基酸的氨基与另氨基酸的缩合形成。
通常一个氨基酸由一个中心碳原子组成,它由四个基它基团包围:氨基、羰基、基和侧链。
侧链,称为R,区别不同氨基酸的结构。
某些侧链含有干扰肽键形成的功能团。
因此侧链功能团的封闭很重要。
图工显示了Fmoc合成的一般流程,首先第一个Fmoc氨基酸通过一个酸性接头接到不溶载体树脂上,Fmoc去保护通过用碱处理树脂来完成,一般是Poperidine。
用预先激活或原位激活连接第二个Fmoc氨基酸。
要求总多肽合成后,通过TFA分离来除去树脂和去保护。
Fmoc分离固相多肽合成中多肽分离主要用酸解Fmoc法用弱酸,比如TFA或TMSBr。
各种添加剂,一般为thiol compound , 水和酚,用来保护多肽的免分离中Carbocation的破坏。
下列保护基与TFA和TMSBr分离相合:(略)基于保护基团的类别,必须使用去保护剂的组合。
例如,当Boc和tButyl存在时,它们的Carbocation对应物能与Trp, Tyr和Met反应形成tbutyl产物。
EDT是极有效的t-butyl trifluoroacetate清除剂,但它不保护Trp。
因此,必须加水以控制烷基化。
Trp的吲哚环和Tyr的OH极易与Pmc反应。
水再次表现出对此反应的抑制。
Trt和Mtr基团也有相似情形。
较此适当组合清除剂将极大降低副反应。
tBoc和CBZ多肽合成tBoc合成法见图3tBoc法的分离法Boc使用强酸,比如HF,TFMSA或TFMoTf。
分离加入各种添加剂,一般为thiol化合物以保护多肽免受carbocation破坏。
HF分离法(如下)略TFMSOTf分离TMSOTf分离SPPS的一般连接方法适于固相多肽合成的连接反应要求酰化反应,对同源多肽最有效。
Fmoc SPPS连接方法FmocSPPS最常用的连接法是活性酯,要么原位,要预先激活。
起初P-nitrophenyl和N-hydnxysuccinimide激活酰是常用形式。
甚至,有HOBt时,连接反应也很慢,此外,Fmoc氨基酸ONSu、酯与succinimido-carbonyl-β-alanine -N-Hydroxysuccinidide酯副产物的形成相关。
今天最常用的激活酯是Opfp和Odhbt。
有HoBt 时反应速度极快,副产物少。
另一方面,使用象DCC,HBTU,BOP,BOP-Ce,或TBTU活化剂时,能原位进行许多连接反应。
Carbondiimide的直接添加是最佳选择。
然而,TBTU和HBTU第二个出现,接着BoP, 最后是BoP-CE。
再者,酯连接发现BoP/HoBt>Carbodiimido/HoBt> Carbodiimido/ODHbT> Carbodiimide/Opfp。
最近以来,HOAt和其对应Uronium盐同类物HA TU的发展,发现此HoBt和HBTU具更强催化活性,结果是增加连接产出,缩短连接时间,消旋降低。
故此,更适合阻位氨基酸的连接,使得难合成肽的合成更成功。
tBoc SPPS的普通连接法Carbodiimides, 主要是DCC是使用多年的连接试剂,主要的问题是激活和酰化过程中dicyclohexylurea的沉淀。
并且伴有许多副反应,已有几种产生可溶脲的Carbodiimide,例如DIC, t-butylmethyl-和t-tatyllethyl-carbodiimide, 但是这些试剂未解决副反应的问题。