一、名词解释
1、基因治疗：是将目的基因放进特定载体中导入靶细胞或组织，通过替换或补偿引起疾病的基因，或者关闭或抑
制异常表达的基因来克服疾病的治疗方法。
2、反义核酸：是指能与特定mRNA精确互补、特异阻断其翻译的RNA或DNA分子。
3、反义DNA：也称反义寡核苷酸或反义脱氧寡核苷酸，是一种人工合成的、能与mRNA互补的、用于抑制翻译的
短小反义核酸分子。
4、同尾酶：指切割DNA可产生相同的黏性末端的限制酶
5、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得
细胞DNA的过程。
6、ａ-互补：指半乳糖苷酶的两个无活性片段组合而成为功能完整的酶的过程。
7、转化：指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主细胞，并使其获得新的表型的过程。
8、基因克隆：通过体外重组技术，将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量
子代分子的过程。
9、核酶：是一类具有催化活性的RNA分子，具有核苷酸水解活性，可特异性剪切RNA分子，相当于RNA酶。
10、位点偏爱：某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一识别序列表现出不同的切割效率，这种现象称作为位点偏爱。
二、选择
1.在( B )诱导下，目的蛋白与lacZ就会以融合蛋白的形式表达出来。
A. dNTP C. DMSO
2.（A ）可使表达蛋白避免被细胞内蛋白降解，或使表达的蛋白正确折叠，从而达到维护目的蛋白的目的。
A.分泌表达载体融合表达载体C.组氨酸标签表达载体D.内含肽表达载体
的琼脂糖凝胶电泳方向为（ B ）
A.正极向负极
B.负极向正极C浓度高向浓度低. D.浓度低向浓度高
4.影响脉冲场凝胶电泳电泳分辨率的最关键因素是（D ）
A.电场强度
B.缓冲液浓度
C.温度
D.脉冲时间
5.控制潜在RNA酶活性最重要的是（C）
A.使用R N A酶抑制剂
B.实验用具
C.细致谨慎的操作
D.温度控制
6.酵母基因表达系统的宿主不具有以下哪一条件(B )
A.安全无毒
B.载体D N A转化频率低
C.发酵周期短
D.蛋白质分泌能力好
7. 酿酒酵母的附加体形表达载体有（D）的缺点
A.蛋白分泌能力差
B.无终止子
C.不能独立复制
D.无选择压力时不稳定
8.（C）不能用大肠杆菌表达系统来生产。
A.胰岛素
B. 干扰素 D.赛若金
9.中国学者从人脐血白细胞中获得的（B）基因已用于我国第一个基因工程干扰素的生产。
A.胰岛素
B. 干扰素ａ-1b
10.下列哪项不属于反义核酸药物(D )
A.反义DNA
B. 核酶
C.肽核酸
答案：BABDC BDCBD
型限制与修饰系统的酶分子是（B）
A.内切酶与甲基化酶分子在一起
B.三亚基双功能酶
C .二亚基双功能酶 D.四亚基双功能酶
12.限制性内切酶的命名遵循的一定原则（D）
A．种名 B. 菌株号 C . 属名 D.种名，菌株号或生物型
13.大肠杆菌DNA聚合酶I 型5’→3’外切核酸酶活性的反应底物是（C）
A.单链DNA及引物’突出的双链DNA
C.双链DNA或DNA:RNA杂交体
D.带3’—OH的双链DNA或单链DNA
14．提高酶连接效率的方法（C）
A.加大酶量20倍
B.降低温度
C.加大平头末端的底物浓度
D.降低平头末端的底物浓度
15.碱性磷酸酶CIAP指（D）
A.细菌和虾的细菌碱性磷酸酶
B.虾碱性磷酸酶
C.细菌碱性磷酸酶
D.牛小肠碱性磷酸酶
16.为了突出3’末端可采用的方法（A）
A．T4—DNAPOL切平，然后平头连接补平，然后平头连接
C．S1核酸酶切平，然后平头连接补平，或S1核酸酶切平
17.能使X—gal变蓝的条件是（C）
A.有α—片段
B. α—受体片段
C.同时具有α—片段和α—受体片段
D.同时具有β—片段和β受体片段
18.当基因组DNA长度为野生型入噬菌体基因组多少时，不会明显影响存活能力（C）
％~90％％~78％％~105％％以上
19质粒PSC101带有何种抗性基因（B）
A.卡那霉素抗性基因
B.四环素抗性基因
C.青霉素抗性基因
D.链霉素抗性基因
20.宿主为rec+，可在噬菌体溶源性细菌中鉴别重组合非重组入噬菌体的条件为（C）
game 基因存在game 基因缺失，无chi位点
game 基因缺失或替换，且有chi位点game基因存在且无chi位点
三、判断
1.酶切反应的反应温度大多数为37℃对
连接酶只连接双链DNA分子，不需要ATP。错
3.同一质粒尽管分子量不同，不同的构型电泳迁移率不同，其中ocDNA最快，scDNA最慢。错
4．酵母DNA的原生质体转化法操作简便，容易掌握，但转化率不稳定，成本较高。错
5.同尾酶的黏性末端互相结合后形成的新位点，一般不能再被原来的酶识别。对
6.在蓝白斑筛选中，只有同时存在α—片段和α—受体片段才能使X—gal变蓝。对
7.基因组大小分左臂，中段，右臂三部分。对
基因的表达抑制λ噬菌体进入溶源状态。错
位点是一段与重组事件相关联的10bpDNA序列，它激活以rec为媒介的交换反应。错的琼脂糖凝胶电泳实验中，RNA 分析是在变性的条件下进行的，常用的变性剂为乙醛。错
四、简答
一简述载体应具备的特征P39
1在宿主细胞内必须能够自主复制（具备复制原点）；
2必须具备合适的酶切位点，供外源DNA片段插入，同时不影响其复制；
3有一定的选择标记，用于筛选；
4最好有较高的拷贝数，便于载体的制备。
二简述构建质粒载体的基本策略和构建过程P43
（一）基本策略
1能在受体细胞内有效的复制；
2必须含有允许外源DNA片段克隆的位点，切尽可能的多；
3含有供选择克隆子的标记基因；
4载体DNA分子尽可能小。
（二）构建过程
1选择合适的出发质粒（亲本质粒）；
2正确获得构建质粒克隆载体的元件；
3选择合适的选择标记基因；
4在能达到预期目的的前提下，过程力求简单。
三大肠杆菌表达载体的表达形式和优缺点P87
1包涵体蛋白，没有生物学活性、易于分离纯化、不会被细胞内蛋白的降解作用、不会伤害宿主细胞；
2融合蛋白，稳定性大大增加、较高效率、易于分离纯化、一般受体蛋白位于N端外源蛋白位于表面；
3分泌型外源蛋白，更易于分离纯化、需在N端加入信号肽序列、减少外源蛋白在细胞内被蛋白酶降解的概率。
四简述能够发展成基因表达系统的宿主应具备的条件P279
1安全无毒，不致病；
2遗传背景清楚，容易进行遗传操作；
3构建的载体DNA容易进入，转化频率较高；
4发酵周期短，培养条件简单，容易进行高密度发酵；
5蛋白质分泌能力良好；
6有类似高等真核生物的蛋白质翻译后的修饰功能。
五酵母基因工程的优点（至少5点）P275
1酵母是真核生物，大多具有较高的安全性，如酿酒酵母可作为单细胞蛋白直接添加于饲料中;
2酵母繁殖速度快，能够向细菌一样在廉价的培养基上高密度培养，因此能大规模生产，具有降低基因工程产品成本的潜力；
3将原核生物中已知的分子和基因操作技术与真核生物中复杂的转译后修饰能力相结合，能方便的用于外源基因的操作；
4作为真核生物，提供了翻译后加工和分泌的环境，使得产物与天然蛋白一样或类似；
5不会形成不溶性的重组蛋白包涵体易于进行分离提纯。
五、论述
裂解提取法大肠杆菌质粒DNA的过程和几种纯化质粒的方法P101
过程：
1用溶液Ⅰ将细胞悬浮50mmol/L的葡萄糖具有维持渗透压的作用，悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管底；
2加入2倍于溶液Ⅰ体积的溶液Ⅱ，该溶液含有NaOH /SDS，能够使细胞迅速破裂溶解，使悬浮液变成完全完全澄清的液体。到染色体DNA和蛋白质变性，溶液中形成的大型复合物被SDS包被；
3加入倍于溶液Ⅰ体积的溶液Ⅲ，溶液含有醋酸钾缓冲液，中和NaOH，防止长时间碱性条件会打断DNA，使复合物PDS从溶液中沉淀下来。
4取上清液离心制取粗产品(质粒DNA),再用2倍体积的乙醇沉淀，获得质粒DNA样品（可用RNase A去除RNA，用苯酚/氯仿抽离蛋白）。
方法：
1、PEG纯化质粒
2、氯化铯----溴化乙锭梯度平衡
基因工程及其应用文件管理序列号：[K8UY-K9IO69-O6M243-OL889-F88688]
第2节基因工程及其应用（第1课时）知识链接及考试地位 本知识与“DNA分子的结构与复制”、“基因突变和基因重组”、“DNA 重组技术的基本工具”、“基因工程的基本操作程序”等内容相联系，考试过程中常设计基因工程的原理、基本工具等基础知识，多以个别填空或选择题的形式呈现。 知识回顾 1、DNA分子的结构特点是什么？ 2、什么是基因重组？ 学习目标 1、简述基因工程的诞生。 2、简述基因工程的原理及技术。要明确基因工程操作的基本步骤和最基本的工具。 重难点 1．教学重点 基因工程的基本原理。 2．教学难点 基因工程的基本原理 新知探究
传统育种的方法一般只能在生物中进行，很难将一种生物的优良性状移植到生物身上。基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿地改变生物，培育出。 一、基因工程的原理 基因工程又叫做或。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以，然后放到另一种生物细胞里，地改造生物的遗传性状。基因工程是在DNA上进行的 水平的设计施工，基因的剪刀是指，简称限制酶。其作用特点是一种限制酶只能识别一种序列。基因的针线是 指。目前常用的运载体有、和等。质粒存在于许多以及等生物中，是细胞染色体外能够自主复制的小型分子。 基因工程的操作步骤是：、目的基因与运载体结合，目的基因导入受体细胞、目的基因的和。 二、基因工程的原理、操作对象各是什么？ 三、限制性内切酶的分布、特点、作用部位和作用结果如何？ 四、作为基因的运载体，需具备哪些条件？ 五、DNA连接酶的作用对象、位置和结果如何？ 六、基因工程的优点是什么？ 七、基因重组与基因工程比较
5 高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级 （时间：90分钟分数：100分） 一．选择题（本大题包括25题，每题2分，共50分。每题只有一个选项符合题意。） 1．以下说法正确的是（） A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B．质粒是基因工程中惟一的运载体 C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不．相符的是（） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 3．有关基因工程的叙述正确的是（） A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4．能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是（） A.基因工程 B.组织培养 C.诱变育种 D.杂交育种 5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养人的B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 6．PCR技术扩增DNA,需要的条件是( ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体 A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥ 7．以下对DNA的描述，错误的是（） A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息 B.同种生物个体间DNA完全相同 C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达 D.一个DNA分子可以控制多个性状 8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（） A.氨基酸结构 B.蛋白质空间结构 C.肽链结构 D.基因结构 9．细胞工程的发展所依赖的理论基础是（） A.DNA双螺旋结构模型的建立 B.遗传密码的确立及其通用性的发现 C.生物体细胞全能性的证明 D.遗传信息传递的“中心法则”的发现 10．下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是：（） A.分子杂交技术 B.抗原—抗体杂交 C.抗虫或抗病的接种 D.基因枪法 11．在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（） A.植物组织培养 B. 单克隆抗体 C. 植物体细胞杂交 D.细胞核移植 12．动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是（） A.基本原理相同 B.诱导融合的方法类 C.原生质体融合 D.可用灭活的病毒作诱导剂 13．下列哪一项属于克隆（） A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞
1．3 基因工程的应用 1．举例说出基因工程的应用及取得的丰硕成果。(重点) 2.了解基因工程的进展。3．了解基因工程在农业和医疗等方面的应用。(难点)
一、植物基因工程的成果(阅读教材P17～P20) 植物基因工程技术主要用于提高农作物的抗逆能力，以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。 1.抗虫和抗病转基因植物 2. (1)抗逆基因：调节细胞渗透压的基因使作物抗盐碱、抗干旱；鱼的抗冻蛋白基因使作物耐寒；抗除草剂基因使作物抗除草剂。 (2)成果：烟草、大豆、番茄、玉米等。 3．利用转基因改良植物的品质
植物基因工程成果表现 “三抗一优良”，三抗是指“抗虫”“抗病”和“抗逆”，一优良是指转入的优良基因表达的性状表现优良。 二、动物基因工程的前景(阅读教材P20～P21)
三、基因工程药物(阅读教材P21～P23) 1.药物来源：转基因的“工程菌”。 2.成果：重组人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、激素等。 四、基因治疗(阅读教材P23～P24) 1.概念：把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。 2．成果：将腺苷酸脱氨酶基因转入患者淋巴细胞中，治疗复合型免疫缺陷症。 3．方法 (1)体外基因治疗：先从病人体内获得某种细胞，如T淋巴细胞，进行培养。然后，在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内。 (2)体内基因治疗：直接向人体组织细胞中转移基因的治病方法。 连一连 判一判
(1)转基因抗虫棉的Bt毒蛋白基因能抗病毒、细菌、真菌。(×) (2)“转基因植物”是指植物体细胞中出现了新基因的植物。(×) 分析：转基因植物是指细胞中被转入了外源基因的植物，并非出现新基因。 (3)(2018·宿迁高二检测)基因工程中，要培育转基因植物和动物，选用的受体细胞都是受精卵。(×) (4)利用工程菌可生产人的胰岛素等某些激素。(√) (5)(2018·绵阳高二期末)直接在患者组织细胞中，进行改造致病基因的方法为体内基因治疗。(×) (6)基因治疗又叫基因诊断。(×) 三种转基因生物的生产过程
基因工程试题及答案 【篇一：基因工程题库以及答案】 因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2．基因工程的两个基本特点是： (1)____________， (2)___________。 3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和 __________。 4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。 5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自_______，第二、三两个字母取自_________，第四个字母则用___________表示。 6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。 7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。 8．限制性内切核酸酶bsuri和haeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。 9．dna聚合酶i的klenow大片段是用_____________切割dna聚合酶i得到的分子量为76kda的大片段，具有两种酶活性： (1)____________； (2)________________的活性。 10．为了防止dna的自身环化，可用_____________去双链 dna__________________。 11．egta是____________离子螯合剂。 12．测序酶是修饰了的t7 dna聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。 13．切口移位(nick translation)法标记dna的基本原理在于利用 _________的_______和______的作用。 14．欲将某一具有突出单链末端的双链dna分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。 15．反转录酶除了催化dna的合成外，还具有____________的作用，可以将dna- rna杂种双链中的___________水解掉。
第二章 1. 名词解释：核酸内切酶、核酸内切限制酶、同裂酶、同尾酶、核酸外切酶、末端脱氧核苷酸转移酶 答： 核酸内切酶：是一类从多核苷酸链的内部催化磷酸二酯键断裂的酶。 核酸内切限制酶：是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列（4—8bp），并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。 同裂酶：识别位点的序列相同的限制性内切酶。 同尾酶：识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端。 核酸外切酶：是一类从多核苷酸链的一头开始催化降解核苷酸的酶。 末端脱氧核苷酸转移酶：可以不需要模板，在单链DNA或突出的双链DNA 3’-OH端随机 添加dNTPs的酶 2. 限制性内切核酸酶的命名原则是什么？ 答：限制性内切核酸酶按属名和种名相结合的原则命名的，即：属名+种名+株名+序号； 首字母：取属名的第一个字母，且斜体大写； 第二字母：取种名的第一个字母，斜体小写； 第三字母：(1)取种名的第二个字母，斜体小写； (2)若种名有词头，且已命名过限制酶，则取词头后的第一字母代替。 第四字母：若有株名，株名则作为第四字母，是否大小写，根据原来的情况而定，但用正体。 顺序号：若在同一菌株中分离了几种限制酶，则按先后顺序冠以I、Ⅱ、Ⅲ、…等，用正体。 3．部分酶切可采取的措施有哪些？ 答：1）缩短保温时间 2）降低反应温度 3）减少酶的用量 4. 在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'中含有一个6bp 的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么? 答：回文序列是：5'-CATA TG-3， 5．什么是限制性内切核酸酶的星号活性? 受哪些因素影响? 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松 动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因 条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示，因此第二活性又称为星 活性。 概括起来，诱发星活性的因素有如下几种：(1)高甘油含量(>5％, v／v)；(2)限制性 内切核酸酶用量过高(>100U／ugDNA)；(3)低离子强度(<25 mmol／L)；(4)高pH(8．0 以上)；(5)含有有机溶剂，如DMSO，乙醇等；(6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如 Mn2+，Cu2+，C02+，Zn2+等)。 第三章 1．如何将野生型的λ噬菌体改造成为一个理想的载体? 答：①删除λ噬菌体的非必需区，留出插入空间；并在余下的非必须区内制造限制酶切点 ②引进某些突变表型，作为选择标记 ③突变某些基因，使它成为安全载体 ④删除λDNA必须区段上常用的限制酶切点
作业一： 一、名词解释： 1、基因：是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有 遗传信息的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。 2、基因组该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部 DNA分子 3、操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转 录生成一个mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。 4、启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至 少一个转录起始点。在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。 5、增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV4 0病毒中发现的长约200bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。 增强子通常占100～200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。 6、基因表达：是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信 息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。
二、简答题 1、说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。 答：限制性内切核酸酶采用三字母的命名原则,即属名+种名+株名的各一个首字母,再加上序号. 基本原则: 3-4个字母组成,方式是:属名+种名+株名+序号; 首字母: 取属名的第一个字母,且斜体大写;第二字母: 取种名的第一个字母,斜体小写;第三字母: (1)取种名的第二个字母,斜体小写;(2)若种名有词头,且已命名过限制酶,则取词头后的第一字母代替.第四字母: 若有株名,株名则作为第四字母,是否大小写,根据原来的情况而定,但用正体. 顺序号: 若在同一菌株中分离了几种限制酶,则按先后顺序冠以I,Ⅱ,Ⅲ,…等,用正体. 2、什么是限制性内切核酸酶的星号活性？受哪些因素影向？ 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示，因此第二活性又称为星号活性。 概括起来，诱发星活性的因素有如下几种： (1)高甘油含量(>5％, v／v)； (2)限制性内切核酸酶用量过高(>100U／ugDNA)； (3)低离子强度(<25 mmol／L)； (4)高pH(8.0以上)；(5)含有有机溶剂，如DMSO，乙醇等； (6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如Mn2+，Cu2+，C02+，Zn2+等)。3、影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些？
1.1 DNA重组技术的基本工具 （一）思考与探究（P7） 1．限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段：（略）你是否能用DNA连接酶将它们连接起来？ 答： 2和7；4和8 ；3和6；1 和 5； 2.联系你已有的知识，想一想，为什么细菌中限制酶不剪切细菌本身的DNA？ 提示：迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的，它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列。细菌中限制酶之所以不切断自身DNA，是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，可以将外源入侵的DNA降解掉。生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。这样，尽管细菌中含有某种限制酶，也不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵。 3.天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？为什么？ 提示：基因工程中作为载体使用的DNA分子很多都是质粒，即独立于细菌拟核DNA之外的一种可以自我复制、双链闭环的裸露DNA分子。是否任何质粒都可以作为基因工程载体使用呢？其实不然，作为基因工程使用的载体必需满足以下条件：（1）载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。这些供目的基因插入的限制酶的切点，还必需是在质粒本身需要的基因片段之外，这样才不至于因目的基因的插入而失活。（2）载体DNA必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA 的复制而同步复制。（3）载体DNA必需带有标记基因，以便重组后进行重组子的筛选。（4）载体DNA必需是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去。（5）载体DNA分子大小应适合，以便提取和在体外进行操作，太大就不便操作。实际上自然存在的质粒DNA分子并不完全具备上述条件，都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。
基因工程测练题 1、将人的抗病毒干扰基因“嫁接”到烟草的DNA分子中，可使烟草获得抗病毒的能力，形成转基 因产品。试分析回答： (1) 人的基因工程之所以能接到植物体中去，原因是：。(4)不同生物间基因移植成功，说明生物共有一套，从进化的角度看，这些生物具 有。 (3) 烟草具有抗病毒能力，说明烟草体内产生：。 (4) 烟草DNA分子被“嫁接”上或“切割”掉某个基因，实际并不影响遗传信息的表达功能。这说 明。 (5) 有人认为，转基因新产品也是一把双刃剑，有如船能载舟也能覆舟，甚至可能带来灾难性的 后果，你是否支持这一观点？如果支持，请你举出一个可能出现的灾难性后果的实例： 。 2、1990年对一位缺乏腺苷脱氨酶基因，而患先天性体液兔疫缺陷病的美国女孩进行基因治疗， 其方法是首先将患者的白细胞取出作体外培养，然后用逆转录病毒将正常腺苷脱氨酶基因转入人工培养的白细胞中，再将这些转基因白细胞回输到患者的体内，经过多次治疗，患者的免疫功能趋于正常。 （1）在基因治疗过程中，逆转录病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中的，此基因工程中的目的基因是，目的基因的受体细胞是。 （2）将转基因白细胞多次回输到患者体内后，兔疫能力趋于正常是由于产生了，产生这种物质的两个基本步骤是、。 3、在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体，把目的基因重组入Ti质粒上的 T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。 （1）科学家在进行上述基因操作时，要用同一种分别切割质粒和目的基因，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过而黏合。 （2）将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F1代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的，原因。（3）种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”。如果把目的基因导入叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是: 。
基因工程试题与答案 1 、转基因动物的安全性问题 正面观点： （1）转基因工程是不可阻挡的. 基因工程将影响当代重大的环境问题:人口过剩/污染/ 生物多样性急剧减退等等. 保护土壤/ 水/ 能源成为发展可持续农业的目标。 （2）转基因食品的功效: 改良植物的食用品质；增加果蔬贮藏、保鲜性能；生产特殊食品——食品疫苗。 （3）迄今为止并没有发现转基因食品危害人体健康和环境的确切证据。如果转基因生物技术得不到社会支持，这一研究将被扼杀。 反面观点： 转基因的潜在危害：转基因动植物安全性评价主要集中在环境安全性，食品安全性以及对人动物健康的影响三方面。 环境安全性分析包括： （1）生存竞争性：转基因植物在生存竞争方面具有的优势可能导致生物多样性的减少，影响了生物多样性； （2）生殖隔离距离: 基因不可控制的水平转移的可能性；与近缘野生种的可交配性：外源基因是否会漂流扩散至亲缘野生种中，从而破坏自然生态平衡； （3）对非靶生物的影响：转基因植物花粉通过风，雨，鸟，昆虫，真菌，细菌以至 个生物链传播使外源基因逃逸，从而造成基因污染
（4）病毒发生异缘重组或异缘包装的可能性：自然界中存在着植物病毒之间的异缘重 组。 （5）对农业和生态环境的影响，生态平衡. 如产生超级杂草的可能性；种植抗虫转基 因作物后可能使害虫产生免疫并遗传、从而产生更加难以消灭的“超级害虫”； 食品安全性： （1）转基因毒性. 如英国发现转基因马铃薯会减弱老鼠免疫系统功能，美国发现转基因 玉米会危害蝴蝶幼虫及其相关生态环境； （2）人的毒理反应或过敏反应. 大肠杆菌细胞膜间隙中含有大量的内毒素，痕量的内 毒素即可导致人体热原反应。 （3）实质等同性的原则，即某一种生物技术产品或其成分能够与市场上现有的对应产 品进行比较。如果一种转基因产品能够与现存的一种产品进行比较，并且发现具有实质同等性，便能用现产品安全性同种方法对待它。转基因植物所引入的蛋白对人体可能是异性蛋白质，在部分人中可能发生食物过敏，特别是幼儿和某些过敏体质的人。 对人动物健康的影响：转入传统食品或作物中的基因可能来自各种物种，有些是人们不 能或者极少食用的，是否会对人体造成危害；转基因植物食品中的新基因会不会传递给人畜的肠道微生物，插入表达，然后危害健康。 动物：1. 外源基因在动物基因组中的随机整合，可能会引起宿主细胞基因的插入突变、 缺失突变及宿主基因的扩增重排和移位，也可能激活正常状态下处于关闭状态的基因，从而导致动物表型的改变甚至造成动物不育或死亡； 2. 插入的外源基因是否会影响宿主动物自身的基因表达及表达水平； 3. 转基因动物是否可能会把外源基因传递给生活在其周围的其它种群及环境，造成基因 污染； 4. 在病毒等致病基因的转基因研究中，不可避免地会产生一些有害的转基因动物，是否 可能因为使用转基因动物制品而将一些动物性疾病传递给人类。 5. 未知的. 总的来说：就目前而言，还没有发现转基因食品对人类有害，但同时也缺乏证据证明它的无
基因工程技术的应用和前景 【摘要】基因工程问世以来短短的二十年，显示出了巨大的活力，今后基因工程将重点开展基因组学、基因工程药物、动植物生物反应器和环保等方面的研究，展望未来，基因工程的前景将是更加灿烂辉煌。基因工程研究和应用范围涉及农业、工业、医药、能源、环保等许多领域。【关键词】基因工程技术前景现状 随着基因工程技术的迅速发展，通过克隆或筛选出来的富基因，转到作物中进行表达，已取得很大的进展。由于基因工程运用DNA分子重组技术，能够按照人们预先的设计创造出许多新的遗传结合体，具有新奇遗传性状的新型产物，增强了人们改造动植物的主观能动性、预见性。而且在人类疾病的诊断、治疗等方面具有革命性的推动作用，对人口素质、环境保护等作出具大贡献。所以，各国政府及一些大公司都十分重视基因工程技术的研究与开发应用，抢夺这一高科技制高点。其应用前景十分广阔。我国基因工程技术尚落后于发达国家，更应当加速发展，切不可坐失良机。 但是，任何科学技术都是一把“双刃剑”，在给人类带来利益的同时，也会给人类带来一定的灾难。比如基因药物，它不仅能根治遗传性疾病、恶性肿瘤、心脑血管疾病等，甚至人的智力、体魄、性格、外表等亦可随意加以改造；还有，克隆技术如果不加限制，任其自由发展，最终有可能导致人类的毁灭。还有，尽管目前的转基因动植物还未发现对人类有什么危害，但不等于说转基因动植物就是十分安全的，毕竟这些东西还是新生事物，需要实践慢慢地检验。转基因生物和常规繁殖生长的品种一样，是在原有品种的基础上对其部分性状进行修饰或增加新性状，或消除原来的不利性状，但常规育种是通过自然选择，而且是近缘杂交，适者生存下来，不适者被淘汰掉。而转基因生物远远超出了近缘的范围，人们对可能出现的新组合、新性状会不会影响人类健康和环境，还缺乏知识和经验，按目前的科学水平还不能完全精确地预测。所以，我们要在抓住机遇，大力 1、植物基因工程成果丰硕 自1983年首次获得转基因烟草、马铃薯以来，短短十余年间，植物基因工程的研究和开发进展十分迅速。国际上获得转基因植株的植物已达100种以上，包括水稻、玉米、马铃薯等作物;棉花、大豆、油菜、亚麻、向日葵等经济作物;番茄、黄瓜、芥菜、甘蓝、花椰菜、胡萝卜、茄子、生菜、芹菜等蔬菜作物;首楷、白三叶草等牧草;苹果、核桃、李、木瓜、甜瓜、草荀等瓜果;短牵牛、菊花、香石竹、伽蓝菜等花卉以及杨树造林树种。转基因植物研究取得了令人鼓舞的突破性发展。十
按住Ctrl键单击鼠标打开教学视频动画全册播放 第三次生物练考题 命题人： 选择题答案： 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 答案 一、选择题（每小题5分，共计70分） 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 2、下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是（） ①② ③④A．①②B．②③C．③④D．②④ 3、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因必须用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶 D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 4、下列有关基因工程的叙述，正确的是：（） A．DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来 B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变 C．目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外 D．常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等 5、下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是（） A. DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键 B. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖 C. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖 D. 同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端 6、实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。从大肠杆菌中提取的一种限制性内切酶EcorI，能识别DNA分子中的GAATTC序列，切点在G与A 之间。这是应用了酶的（） A.高效性 B.专一性 C.多样性 D.催化活性受外界条件影响 7、下列有关质粒的叙述，正确的是（） A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子 C．质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制 T A G G C C A T T A C C G G T A 1
基因工程习题及参考答案01 绪论部分 一、填空题 1．基因工程是年代发展起来的遗传学的一个分支学科。基因工程技术的诞生，使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代，走向的时代。 2．随着基因工程技术的诞生和发展，人类可以通过、和等三种主要生产方式，大量取得过去只能从组织中提取的珍稀蛋白，用于研究或治病。3．Cohen 等在年构建了第一个有功能的重组DNA 分子。 4．基因工程的两个基本特点是：(1) ，(2) 。 5．基因克隆中三个基本要点是：；和。6．年，美国斯坦福大学等在上发表了题为：“将新的遗传信息插入SV40 病毒DNA 的生物化学方法：含有λ噬菌体基因和E．coli 半乳糖操纵子的环状SV40 DNA”的论文，标志着基因工程技术的诞生。这一工作具有划时代的意义，但是他们并没有。 7．克隆基因的主要目的有四：(1) ；(2)； (3) ；(4) 。 二、选择题(单选或多选) ( )1．因研究重组DNA 技术而获得诺贝尔奖的科学家是 (a)A．Komberg (b)W．Gilbert (c) P．Berg (d)B．McClintock ( )2．第一个作为重组DNA 载体的质粒是( ) （a）pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8 ( )3．第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是( ) (a)EcoRI (b)EcoB (c)EcoC (d)EcoRⅡ ( )4．P Berg 构建SV40 二聚体时用了几种不同的酶，其中( )的作用是制造隐蔽的5’端。 (a)末端转移酶(b)λ外切核酸酶(c)外切酶Ⅲ(d)DNA 连接酶 三、简答题 1．为什么说基因工程技术是60 年代末70 年代初发展起来的? 2．重组DNA 的含义是什么? 3．如何理解基因工程的两个特点? 4．在Cohen 构建有生物功能重组体的第一步实验中，用EcoRI 切割了R6-5 质粒，然后转化E．coli C600，在卡那霉素抗性子板上筛选到了pSCl02，它是由R6-5 的三个EcoRI 片段组成，请推测这个质粒具有什么遗传特性? 5．什么是动物乳腺生物反应器? 四、问答题 1．S．N Cohen 于1973 年构建了三个重组体，pSCl02，pSCl05，pSCl09 请说明这三个重组体是如何获得的?各说明了什么? 2．基因克隆是如何使含有单个基因的DNA 片段得到纯化的? 五、概念题 1．遗传工程2．生物技术3．基因工程4．细胞工程5．细胞分泌工程 6．酶工程7．蛋白质工程8．发酵工程9．移动基因10．断裂基因 11．重叠基因12．假基因
基因工程试题与答案 1、转基因动物的安全性问题 正面观点： （1）转基因工程是不可阻挡的. 基因工程将影响当代重大的环境问题:人口过剩/污染/生 物多样性急剧减退等等. 保护土壤/水/能源成为发展可持续农业的目标。 （2) 转基因食品的功效: 改良植物的食用品质；增加果蔬贮藏、保鲜性能；生产特殊食 品——食品疫苗。 （3）迄今为止并没有发现转基因食品危害人体健康和环境的确切证据。如果转基因生 物技术得不到社会支持，这一研究将被扼杀。 反面观点： 转基因的潜在危害：转基因动植物安全性评价主要集中在环境安全性，食品安全性以及对人 动物健康的影响三方面。 环境安全性分析包括： （1）生存竞争性：转基因植物在生存竞争方面具有的优势可能导致生物多样性的减少， 影响了生物多样性； （2）生殖隔离距离:基因不可控制的水平转移的可能性；与近缘野生种的可交配性：外 源基因是否会漂流扩散至亲缘野生种中，从而破坏自然生态平衡； （3）对非靶生物的影响：转基因植物花粉通过风，雨，鸟，昆虫，真菌，细菌以至整 个生物链传播使外源基因逃逸，从而造成基因污染。
（4）病毒发生异缘重组或异缘包装的可能性：自然界中存在着植物病毒之间的异缘 重 组。 （5）对农业和生态环境的影响，生态平衡. 如产生超级杂草的可能性；种植抗虫转 基 因作物后可能使害虫产生免疫并遗传、从而产生更加难以消灭的“超级害虫”； 食品安全性： （1）转基因毒性. 如英国发现转基因马铃薯会减弱老鼠免疫系统功能，美国发现转 基因 玉米会危害蝴蝶幼虫及其相关生态环境； （2）人的毒理反应或过敏反应. 大肠杆菌细胞膜间隙中含有大量的内毒素，痕量的 内 毒素即可导致人体热原反应。 （3）实质等同性的原则，即某一种生物技术产品或其成分能够与市场上现有的对应 产 品进行比较。如果一种转基因产品能够与现存的一种产品进行比较，并且发现具有实 质同等 性，便能用现产品安全性同种方法对待它。转基因植物所引入的蛋白对人体可能是异 性蛋白 质，在部分人中可能发生食物过敏，特别是幼儿和某些过敏体质的人。 对人动物健康的影响：转入传统食品或作物中的基因可能来自各种物种，有些是人们 不 能或者极少食用的，是否会对人体造成危害；转基因植物食品中的新基因会不会传递 给人畜 的肠道微生物，插入表达，然后危害健康。 动物：1. 外源基因在动物基因组中的随机整合，可能会引起宿主细胞基因的插入突变、 缺失突变及宿主基因的扩增重排和移位，也可能激活正常状态下处于关闭状态的基因，从而
基因工程的基本工具 1．基因工程突破了 ，实现了不同种生物间的 。 2．不同生物基因能拼接在一起的理论基础是DNA 分子都是由 构成的 ， 并且都遵循 。 3．外源DNA 能在受体细胞表达的理论基础是 。 4．DNA 重组技术的基本工具有 、 和使基因进入受体细胞的 。 5．DNA 连接酶根据来源不同可分为 和 。 只能连接黏性末端，而 既能连接黏性末端也能连接平末端。 6．在基因工程中使用的载体 、 、 。 7．基因工程的概念：基因工程的别名： ；操作环境： ；操作对象： ；操作水平： ；结果： ；优点： 、 、 。 8．基因工程的诞生和发展(1)基础理论的重大突破：① 是遗传物质的证明；②DNA 双螺旋结构和 的确立；③ 的破译。(2)技术发明使基因工程的实施成为可能：①基因转移载体和 相继发现； ② 技术的发明；③DNA 体外重组得到实现， 获得成功。(3)基因工程的发展与完善： ①1980年，科学家首次培育出世界上第一个转基因小鼠。1983年，世界第一例 培育成功，基因工程进入迅速发展阶段。②1988年 的发明，使基因工程进一步发展和完善。 9．基因重组的三种主要类型(1) ：减数第一次分裂 时期，同源染色体上的 间的交叉互换。(2) ：减数第一次分裂 ，非同源染色体上的 的自由组合而组合。(3) ：转基因生物因外源基因导入而获得的新性状是可以遗传的。 10．限制性核酸内切酶(又称限制酶)(1)来源：主要是从 中分离纯化出来的。(2)功能：能够识别 的某种 ， 并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开。(3)结果：经限制酶切割产生的DNA 片段末端通常有两种形式： 和 11．DNA 连接酶作用：将 “缝合”起来，恢复被 切开的两个核苷酸之间的 。 12．运载体(1)作用：将 送入细胞中。（2）作为载体具备的条件：①具有一至多个 ，供 ；②携带外源DNA 片段的质粒进入受体细胞后， ，或 。 ③具有 ，如： ，供重组DNA 的 和 。另外，对受体细胞 ；载体DNA 分子大小应 ，以便提取和在体外进行操作，太大就不便操作。 13、质粒是一种裸露的、 、独立于 之外，并具有 能力的双链 DNA 分子。含有质粒的生物有 和 。 14．结合DNA 复制的过程分析，限制酶和DNA 解旋酶的作用部位分别为 、 15．下图所示过程是 酶作用的结果，该酶识别的碱基序列 及切点 是 ，这体现了该类酶具有 特性。 16．DNA 连接酶与DNA 聚合酶的比较 17．酶的作用部位图解： (1)作用于a(磷酸二酯键)的酶有： (2)作用于b(氢键)的酶： 18.不同DNA 分子用同一种限制酶切割形成的黏性末端都 ；同一个DNA 分子用不同限制酶切割，产 生的黏性末端 ；不同限制酶切割形成的黏性末端，如果 则可以相互重新配对连接。 19．细胞膜上的载体与基因工程中的载体的区别：(1)化学本质不同：细胞膜上的载体化学成分是 ； 基因工程中的载体可能是物质，如 ，也可能是生物，如 等。(2)功能不同：细胞膜上的载体功能是 ；基因工程中的载体是 。
基因工程原理复习题思考题 1、基因工程的定义与特征。 2、试述基因工程的主要研究内容。 3、基因工程在食品工业上有何应用发展？ 4、转基因是一把双刃剑，请客观谈谈对转基因及转基因食品安全性的认识。 1、原核生物和真核生物的基因表达调控有何差别？ 2、什么是基因？根据基因的产物，基因可分为哪三类？ 3、引起核酸变性的因素主要有哪些？核酸变性后性质有何变化？ 4、DNA复性及其影响因素。 1，DNA凝胶电泳中核酸分子分离的机理。 2，DNA凝胶电泳中影响电泳迁移率的因素主要有哪些？ 3，PCR的原理和主要反应过程，并分析影响PCR扩增的影响因素。 4，PCR引物设计的原则，若给一指定DNA序列并需要通过PCR扩增此序列，如何设计扩增引物？ 5，定量PCR的原理？Ct值的含义。 6，分子杂交的类型主要有哪些？探针的标记方法与标记类型？常用的双链DNA的标记方法是哪两种？ 7，Southern杂交一般过程及影响杂交因素。 8，基因组文库的构建过程？如何确定文库的大小？ 9，基因文库的类型包括哪两种？各有什么特点？ 10，一般质粒DNA的构型有哪几种？在琼脂糖凝胶电泳中的有何特点？ 11，碱裂解法提取质粒DNA的原理，分析影响试验结果的各种可能因素。 12，电泳缓冲液使用一定时间后出现DNA在凝胶中跑不动现象的原因，有何解决办法？ 13，电泳的指示剂和染色剂有何区别，各自的作用是什么？ 1限制性核酸内切酶的类型，基因工程常用的是哪种限制性核酸内切酶？ 2什么是星活性，产生星活性的因素可能有哪些？ 3结合已做的实验，分析影响酶切的因素。 4限制性核酸内切酶命名规则及各字母代表的含义。 5简单叙述同尾酶和同裂酶的差别。 6连接酶主要有哪些类型？有何异同点？影响连接酶连接效果的因素主要有哪些？ 7试分析提高平端DNA连接效率的可能方法。 8基因工程中常用的DNA聚合酶主要有哪些？ 1、作为基因工程载体，其应具备哪些条件？ 2、质粒的不相容性及其分子机理。 3、载体的类型主要有哪些？在基因工程操作中如何选择载体？ 4、质粒转化原理，影响转化率的因素有哪些？ 5重组体分子的选择方法主要有哪些？并简单阐述其原理 1、基因的克隆方法主要有哪些？并阐述其克隆原理（至少3种，都是书上找的， 自选哈，建议必选DD RT-PCR和SSH，原因请看下题） 2、简单阐述差异显示PCR克隆基因的原理及其优缺点，有何应用？ 3抑制性差减杂交的原理与应用。
第Ⅱ卷非选择题 三．非选择题： 29．（7分）SARS 病毒能引起非典型肺炎，医生在治疗实践中发现，非典病人治愈后，其血清可用于治疗其他非典病人。有三位科学家分别从三个不同的方面进行了研究，其研究的方向如下图所示。请根据下图回答： SARS 病毒 [丙的研究] 抽取血清 蛋白质X [乙的研究] 注射 注射 灭活或 培养 非典病人B 治愈的病人B 非典病人D 减毒处理 动物实验 健康人C 健康人C 健康人C 治愈的病人D （1）从免疫学的角度看，SARS 病毒对于人来讲属于 ，治愈的病人A 的血清中因为含有 ，所以可用来治疗“非典”病人B 。 （2）甲的研究中，所合成或生产的蛋白质X 是 ，它可以通过化学的方法合成，也可以通过生物学方法—— 技术生产。 （3）乙的研究目的主要是制造出 以保护易感人群。图中使健康人C 获得抵抗“非典”病毒能力的过程，属于免疫学应用中的 免疫。 （4）图中丙主要研究不同国家和地区SARS 病毒的异同，再按照免疫学原理，为研究一种或多种 提供科学依据。 30．（8分）聚合酶链式反应(PCR 技术)是在实验室中以少量样品DNA 制备大量DNA 的生化技术，反应系统中包括微量样品DNA 、DNA 聚合酶、引物、足量的4种脱氧核苷酸及ATP 等。反应中新合成的DNA 又可以作为下一轮反应的模板，故DNA 数以指数方式扩增，其简要过程如右图所示。 （1）某个DNA 样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR 仪五次循环后，将产生 个DNA 分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是 个。 （2）分别以不同生物的DNA 样品为模板合成的各个新DNA 之间存在差异，这些差异是 。 （3）请指出PCR 技术与转录过程的三个不同之处： ① 。 ② 。 循环重复 [甲的研究] 用激素等治疗 非典病人A 治愈的病人A 健康人合成或生产 其他辅助治疗 接种 提纯、
第三次生物练考题 命题人：王娜 选择题答案： 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 答案 一、选择题（每小题5分，共计70分） 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 2、下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是（） ①② ③④ A．①②B．②③C．③④D．②④ 3、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因必须用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶 D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 4、下列有关基因工程的叙述，正确的是：（） A．DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来 B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变 C．目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外 D．常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等5、下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是（） A. DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键 B. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖 C. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖 D. 同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端 6、实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。从大肠杆菌中提取的一种限制性内切酶EcorI，能识别DNA分子中的GAATTC序列，切点在G与A之间。这是应用了酶的（） A.高效性 B.专一性 C.多样性 D.催化活性受外界条件影响 7、下列有关质粒的叙述，正确的是（） A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子 C．质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制 D．细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的 8、右图所示为限制酶切割某DNA分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是 A.CTTAAG，切点在C和T之间 B.CTTAAG，切点在G和A之间 C.GAATTC，切点在G和A之间 D.GAATTC，切点在C和T之间 9、关于右图DNA分子片段的说法正确的是（） A．限制性内切酶可作用于①部位，解旋酶作用于③部位 B．②处的碱基缺失导致染色体结构的变异 C．把此DNA放在含15N的培养液中复 制2代，子代中含15N的DNA占3/4 D．该DNA的特异性表现在碱基种类和（A+T）/（G+C） 的比例上 10、基因治疗是指：（） A．运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变而恢复正常 B．运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的 T A G G C C A T T A C C G G T A ① G A T A T G C A T A T 15N 14N ② ③ … … …
基因工程试题及答案
《基因工程》 一、选择题（每小题1.5分，共15分） 1．基因工程的创始人是 ( )。 A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen 2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。 A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成 B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰 D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是 ( ) A ATG（或GTG） B AGT C TAG D TGA 4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别 ( )。 A 双链DNA的特定碱基对 B 双链DNA的特定碱基序列 C 特定的三联密码 D 以上都正确 5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。 A 3’→5’DNA聚合酶 B 5’→3’DNA聚合酶 C 5’→3’DNA内切酶 D 5’→3’DNA外切酶 6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。 A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。 B 可以在氯霉素作用下进行扩增。 C 通常带有抗药性标记。 D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。 7．关于cDNA的最正确的说法是( )。 A 同mRNA互补的单链DNA B 同mRNA互补的双链DNA C 以mRNA为模板合成的双链DNA D 以上都正确 8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确? ( ) A 是最常用的DNA连接酶。 B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。 C 不但能连接粘性末端。 D 最适温度37 ℃。 9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的? A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNA B 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA C 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA D 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞 10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。 A Southem blot B Northem blot C Western印迹 D 原位菌落杂交 二、填空题（每空1分，共25分） 1．限制性内切核酸酶分为三类，基因工程中应用的是____________ _。 2．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。 3．切口平移(nick translation)法标记DNA探针时应用的酶是_____ ___ __。 4．基因工程中的3种主要类型的载体是_______________、_____________、__________。 5．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是、和。 6．黏粒(cosmid)是杂合载体。 7．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2) 、 (3) (4) 。