大豆脂肪氧合酶的提取工艺
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大豆多肽制备的工艺流程大豆多肽是由大豆中提取得到的一种富含多肽的营养添加剂,具有丰富的氨基酸和生物活性肽链。
大豆多肽具有许多重要的生理功能,例如降低血脂、抗氧化、抗菌、免疫调节等,被广泛应用于食品、保健品和医药领域。
下面将介绍大豆多肽的制备工艺流程。
1. 原料准备:选择质量良好的大豆作为原料,清洗干净,并进行蒸煮处理以破坏大豆中的酶活性。
蒸煮可以使用高温高压灭菌锅或蒸汽炉进行,时间和温度要根据具体情况来确定。
2. 破碎和提取:将蒸煮后的大豆破碎成颗粒状,然后使用水或者酶法进行提取。
水提法是将破碎的大豆与适量的水混合浸泡一段时间,然后过滤得到悬浮液,再进行离心分离。
酶法是在破碎的大豆中加入适量的蛋白酶,使其作用一段时间,然后进行离心分离。
水提法相对简单,成本较低,但提取得到的大豆多肽含量相对较低。
酶法提取得到的大豆多肽含量较高,但提取过程更复杂。
3. 过滤和浓缩:将提取得到的大豆多肽悬浮液过滤去除杂质,然后使用浓缩设备将悬浮液进行浓缩。
浓缩可以使用真空浓缩器或者蒸发器进行,将水分蒸发掉,得到浓缩的大豆多肽溶液。
4. 杂质去除:通过沉淀法或者离心法去除大豆多肽溶液中的杂质。
沉淀法是向溶液中加入硫酸铵或者酒石酸钠等物质,使之沉淀,并通过离心分离得到清洁的大豆多肽溶液。
5. 分离和纯化:采用离子交换、凝胶渗透、亲和色谱等技术,对大豆多肽溶液进行分离和纯化。
离子交换是利用离子交换树脂的亲合作用,将大豆多肽从溶液中吸附到固相载体上,然后再用适当的溶液洗脱得到目标产物。
凝胶渗透是利用孔隙作用,根据分子大小将大豆多肽从溶液中分离出来。
亲和色谱是利用大豆多肽与特定配体的结合来实现分离和纯化,例如利用金属离子与亲和配体的结合作用。
6. 冷冻干燥:对分离纯化后的大豆多肽溶液进行冷冻干燥处理。
冷冻干燥是将溶液冷冻成固体,然后在真空环境下对冻结的固体进行干燥,将水分蒸发掉,得到干燥的大豆多肽粉末。
7. 成品包装:将干燥的大豆多肽粉末进行包装,通常采用铝箔袋或者塑料瓶进行包装。
大豆蛋白提取技术研究进展系别:食品工程系专业:食品科学与工程班级:食科13-2班学号:************姓名:***摘要大豆蛋白产品分为三类,即大豆蛋白粉、大豆浓缩蛋白和大豆分离蛋白。
大豆分离蛋白含有人体所必需的八种氨基酸,不含胆固醇,具有许多优良的食品性能,添加在食品中可以改善食品的品质和性能,提高食品营养价值。
是一种重要的植物蛋白,在食品工业中得到了广泛的应用,是近年来的研究重点。
其中,大豆浓缩蛋白的提取方法有稀酸浸提法、酒精浸提法和湿热浸提法。
大豆分离蛋白有碱溶酸沉法、离子交换法、超滤膜分离法等。
本文以研究方向和工艺改进方面为着力点解释大豆浓缩蛋白和分离蛋白这两种主要的提取方法的发展脉络。
关键词大豆浓缩蛋白;大豆分离蛋白;稀酸浸提法;酒精浸提法;碱溶酸沉法;离子交换法;超过滤法;湿热浸提法大豆分离蛋白(soy protein isolate,SPI )是把脱皮大豆中的除蛋白质以外的可能性物质和纤维素、半纤维素物质都除掉,得到的蛋白质含量不低于90% 的制品,又称等电点蛋白。
与大豆浓缩蛋白相比,生产大豆分离蛋白不仅要从低温脱溶豆粕中除去低分子可溶性糖等成分,而且还要去除不溶性纤维素、半纤维素等成分。
其生产方法主要有碱溶酸沉法、超过滤法和离子交换法。
一、碱溶酸沉法1. 提取原理低温豆粕中的蛋白质大部分能溶于稀碱溶液。
将低温豆粕用稀碱溶液浸提后,用离心分离法除去原料中的不溶性物质,然后用酸把浸出物的PH调至4.5左右,蛋白质由于处于等电点状态而凝聚沉淀,经分离可得到蛋白质沉淀,再经洗涤、中和、干燥得到大豆分离蛋白。
2. 提取工艺豆粕的质量直接影响大豆分离蛋白的功能特性和提取率,只有高质量的豆粕才能获得高质量和高得率的大豆分离。
要求原料无霉变,豆皮含量低,残留溶剂少,蛋白质含量高(45沖上),脂肪含量低,NSI高(不低于80%。
豆粕粉碎后过40-60目筛。
首先利用弱碱溶液浸泡低温豆粕,使可溶性蛋白质、糖类等溶解出来,利用离心机除去溶液中不溶性的纤维素和残渣。
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大豆多肽的制备工艺探究大豆多肽是一种重要的生物活性肽,在医药、保健品、化妆品等领域具有广泛的应用前景。
为了实现大豆多肽的商业化生产,需要开发和优化其制备工艺。
本文将探讨大豆多肽的制备工艺,包括原料准备、提取纯化、酶解及多肽纯化等环节。
一、原料准备大豆是制备大豆多肽的主要原料。
在大豆中,多肽主要存在于蛋豆蛋白中,因此需要先从大豆中提取蛋白质。
大豆蛋白主要包括大豆分离蛋白和大豆食品蛋白两种,可以根据需求选择合适的原料进行制备。
二、提取纯化大豆蛋白的提取可以采用代用水、酸或盐溶液等方法。
其中,代用水法是最常用的提取方法之一、具体操作步骤包括:将大豆粉加入适量的水中,与水搅拌均匀,过滤离心,得到大豆蛋白液。
为了提高大豆蛋白的纯度,可以采用脱色、去脂肪等方法进行进一步的纯化处理。
三、酶解酶解是将大豆蛋白中的多肽进行降解的过程。
常用的酶包括胰蛋白酶、链霉亲子酶、狄普西酶等。
酶解条件包括酶解剂质量浓度、反应时间、反应温度等。
一般来说,酶解剂质量浓度和反应时间较高,反应温度较低,可以得到较高的酶解率和多肽产率。
四、多肽纯化多肽纯化是将酶解产物中的多肽纯化为目标产物的过程。
常用的多肽纯化方法包括超滤、透析、离子交换色谱、凝胶渗透色谱等。
其中,超滤是最常见和简便的纯化方法。
超滤膜的孔径选择根据多肽分子量的大小,通常为1kDa左右。
在多肽纯化过程中,还可以通过中性洗脱、梯度洗脱等方法进一步提高纯化效果。
此外,还可以使用逆向高效液相色谱、薄层色谱等方法进行目标多肽的分离纯化。
综上所述,大豆多肽的制备工艺包括原料准备、提取纯化、酶解和多肽纯化等环节。
通过合理选择原料、优化工艺参数和选择合适的纯化方法,可以获得高纯度的大豆多肽产品。
对于大豆多肽的制备工艺的探究,有助于推动大豆多肽的商业化生产,并满足不同领域对大豆多肽的需求。
三大豆粉的制取工艺〔一〕全脂大豆粉全脂大豆粉是用大豆为原料直接加工成的一种粉状产品,分为酶活性全脂豆粉和热处理全脂豆粉两种产品。
全脂大豆粉目前尚无统一的质量标准。
1、酶活性全脂豆粉酶活性全脂豆粉的生产过程中不经过任何湿热处理,因此大豆粉中蛋白质根本不变性。
水溶蛋白的保存率达70%以上,并具有大豆的全部酶活性,富含淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶、脂肪氧化酶和尿素酶等。
酶活性全脂豆粉对烘烤行业很重要,可用来改善面包和其他发酵产品的品质。
1〕生产工艺大豆→清理→烘干→破碎脱皮→粉碎→筛分→酶活性全脂豆粉大豆先经过干法清选除杂后,用原料大豆与烘炒砂混合倒入回转式烘烤机,在22021温度下烘烤30分钟左右,使大豆水分燃干至8-10%,然后强制冷却2021,可采用冷风冷却,使大豆含水量降至3-4%,将整粒大豆进行破碎脱皮,脱皮率要求到达90%以上,然后用高速粉碎机或磨粉机进行粉碎,粉碎后过筛、分级,过筛得到的即是酶活性全脂豆粉。
2〕质量指标酶活性全脂豆粉呈乳白色或淡黄色粉末状,具有大豆粉固有的气味,无异味。
理化指标和卫生标准见表4-2和表4-3。
表4-2 酶活性全脂豆粉的理化指标指标名称指标水分/%≦7灰分/%≦6蛋白质〔N×6.25,干基〕/%≧40氮溶解指数〔NSI〕/%≧70细度100%通过150目/25.4mm筛粗纤维/%≦3脂肪/%18左右表4-3 酶活性全脂豆粉的卫生要求指标名称指标细菌总数/〔个/g〕≦5万大肠杆菌群近似值/〔个/100g〕≦70致病菌不得检出砷〔以As计〕/〔mg/kg〕<0.5铅〔以Pb计〕/〔mg/kg〕<1.0铜〔以Cu计〕/〔mg/kg〕<10.0黄曲霉毒素B1/〔ug/kg〕<5.01、热处理全脂豆粉为了克服酶活性全脂豆粉存在的缺乏,并扩大全脂豆粉的食品用途,在高温、高压、短时间或高温、瞬时的干热处理条件下,使大豆中所含的胰蛋白酶抑制剂、血细胞凝集素等抗营养因子钝化,并使脂肪氧化酶失去活性,从而使全脂豆粉的营养价值有所提高,产品豆腥味有所改善,产品中水溶性蛋白得以适度保持。
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目录摘要 (2)关键词 (2)Abstract (3)Key words (3)前言 (4)1材料与方法 (5)1.1 试验材料 (5)1.1.1主要仪器及耗材 (5)1.1.2主要试剂 (5)1.1.3原材料 (5)1.2 实验内容 (5)1.2.1过氧化物酶的提取工艺流程 (5)1.2.2 酶活测定 (5)1.2.3 放置时间对酶活影响 (6)1.2.4 单因素试验 (6)1.2.5 正交试验 (7)2结果与分析 (7)2.1酶活测定 (7)2.2放置时间对酶活影响 (9)2.3 单因素试验 (9)2.3.1液料比对酶活的影响 (9)2.3.2提取时间对酶活的影响 (10)2.3.3提取液浓度对酶活的影响 (11)2.3.4提取温度对酶活的影响 (11)2.3.5提取次数对酶活的影响 (12)3讨论 (14)3.1 关于酶活测定方法的思考 (14)3.2 关于酶液稀释方法的思考 (14)3.3 关于单因素试验及正交试验优化的思考 (14)3.4 实验操作注意事项 (15)3.5 本实验的存在的问题及改进 (15)参考文献 (15)致谢 (16)大豆皮中过氧化物酶的提取摘要过氧化物酶[Peroxidase, POD,ECl.11.1.7(x)]是一类以血红素为辅基的酶,在生物中广泛存在,具有多种不同的生物功能,主要催化H2O2和有机过氧化物对多种有机物和无机物的氧化作用。
它在蛋白质、多肽、激素、病毒、寄生虫、生物降解及神经系统等方面都有应用,具有特异性强,灵敏度高等优点。
本课题以大豆皮为原料,对大豆皮中提取过氧化物酶的工艺进行研究。
通过单因素试验考察不同液料比、提取时间、提取温度、提取次数、提取液体积等对酶活的影响,并选取单因素试验中影响最明显的3个因素进行正交试验。
结果显示,液料比、提取时间、提取温度这三个因素对提取效果明显。
然后对此三因素进行正交试验结果显示:液料比20ml/g,提取时间5h,提取温度40℃下,提取效果很好。
大豆异黄酮的提取与分离工艺研究随着人们对健康意识的提高,越来越多的人开始关注大豆及其制品。
大豆中含有丰富的营养成分,其中的异黄酮具有多种保健功效,如抗氧化、抗肿瘤、抗菌等。
因此,研究大豆异黄酮的提取与分离工艺对于深入了解其作用机制、发挥其保健功效具有重要意义。
在大豆中,异黄酮以苷形式存在,主要有乙酰基大豆苷和大豆苷。
目前,提取和分离大豆异黄酮的工艺主要包括溶剂萃取、超声波辅助提取、微波辅助提取、酶法提取等方法。
溶剂萃取是一种常用的提取工艺。
通过选择适当的溶剂,如乙醇、甲醇、醋酸等,将大豆中的异黄酮溶解出来,然后通过浓缩、结晶等步骤进行分离。
其中,乙醇提取得到的产物含量最高,但其安全性需要引起关注。
近年来,超声波辅助提取被广泛应用于大豆异黄酮的提取。
超声波具有分散悬浮、破碎细胞和增加物质传输速率等作用。
在超声波辅助提取过程中,通过超声波的作用,可提高提取效率和产物得率。
然而,超声波处理过程中对样品的温度和pH值也有一定影响,研究人员需要根据实际情况选择合适的操作条件。
微波辅助提取是利用微波加热作用提高异黄酮的溶解度和提取效果。
微波可以穿透样品,使得样品内部迅速升温,从而加速溶剂中异黄酮的溶解。
与传统提取方法相比,微波辅助提取具有快速、高效、节能的特点。
但是,微波处理过程中需要注意溶剂的选择和反应压力的控制,以免对样品产生不良影响。
酶法提取是利用酶的特异性催化作用,将大豆中的异黄酮水解为游离态。
通过酶解,不仅可以提高提取效果,还能改变异黄酮的结构和性质。
然而,酶法提取工艺相对复杂,需要对酶的选择、酶的浓度、反应温度和反应时间等进行合理设定。
除了提取工艺的研究外,还需要对大豆异黄酮的分离工艺进行研究。
目前,常见的分离方法有硅胶柱层析、高效液相色谱、超滤等。
这些方法可以根据异黄酮在不同介质中的亲疏水性、相对分子质量等特性进行选择。
大豆异黄酮的提取与分离工艺研究不仅有助于开发大豆功能性制品,也能为人们提供更多的保健选择。
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大豆脂肪氧合酶的提取工艺
脂肪氧合酶对食品质量的影响有利与弊两个方面。脂肪氧合酶是食品原料 中固
有的一种酶,它的作用对食品质量的影响既有助于提高某些质量指标如颜 色、质构、
风味等,又可能对某些质量指标如营养成分含量、食品颜色等有不 利影响。
脂肪氧合酶属氧化还原酶。脂肪氧合酶中含有非血红素铁,专一催化具有 顺,
顺 -1,4-戊二烯结构的多元不饱和脂肪酸,通过对其分子加氧,形成过氧化 氢衍生
物。脂肪氧合酶广泛存在于植物界中,特别是从人类大量食用的大豆中 提取的脂肪氧
合酶活性高于其它植物来源。大豆中蛋白含量为 40%左右,脂肪
氧合酶是大豆中活性最高的酶。
许多研究结果认为脂肪氧合酶在植物生理,如植物萌发、生长、发育、衰 老、
抗性等物质转化中起某种重要调节作用,会影响植物脂肪在萌发期的氧 化,脂肪过氧
化形成乙烯影响植物叶片衰老,脂肪氧化影响种子的衰老、死 亡、果蔬催熟和脱落,
可以运用于植物抗病、抗虫和伤害反应中。
一、试验目的
了解大豆脂肪氧合酶的提取工艺
了解哪个工艺对脂肪氧合酶酶活影响最小
二、试验原理
以低温脱脂大豆粉为原料,采用水浸提、二次盐析、聚乙二醇 (PEG共沉淀
等方法提取脂肪氧合酶,并对 LOX活性进行测定和比较,以便综合评价提取方 法的
优劣。同时研究了影响脂肪氧合酶活性的因素和化学微环境影响,为保存 和合理利用
LOX提供理论基础。
三、试验材料
原料:大豆;
试剂: Tween 20(化学纯);亚油酸;其它化学试剂或溶剂均为分析纯。
设备:752型紫外光栅分光光度计,PHS-3B精密pH计,LD4-2型离心机,
81-2 型恒温磁力搅拌器。
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四、试验方法
1. 脂肪氧合酶的提取
大豆经粉碎后再经石油醚多次浸提得到脱脂大豆粉。每批次 10 g脱脂大豆
粉为原料 ,
料液比为 1 : 10(质量:体积 ),按下述 5 方法提取脂肪氧合酶:
(A) 水浸提法:加水搅拌50 min, 4 000 r/ min条件下离心20 min,上清液即 为
粗酶液。
(B) 酸提-盐析法:加水并用1 mol/ L盐酸调pH值至4. 5,搅拌50min,过 滤;
滤液中加入固体硫酸铵至 40 %饱和,离心分离20 min,弃去残渣;上清液 中加入固
体硫酸铵至60 %饱和,离心分离20 min,沉淀用pH值9. 0的0. 2 mol/ L 的硼酸盐
缓冲液溶解得到酶液。
(C缓冲液提-盐析法:加pH值4.5的乙酸-乙酸盐缓冲液,搅拌50 min,其余
步骤同 (B)。
(D) 碱溶-酸提-盐析法:加水并用1mol/L氢氧化钠调pH值至9.0,搅拌
30min,离心20min,弃去沉淀;上清液用1mol/L盐酸调pH值至4.5,继续搅 拌,
其余步骤同 (B)。
(E) 聚乙二醇共沉淀法:加水并用 1mol/L盐酸调pH值至4.5,搅拌50min, 过
滤;滤液中加入50%的 PEG-6000至 PEG浓度达30%,继续搅拌40min,离心 分
离20min,用pH值9.0的0.2 mol/ L的硼酸盐缓冲液溶解沉淀,滤去不溶物 得到酶
液。
2. 酶活测定
25C、pH值9.0下,以亚油酸为底物的3 mL反应体系在234 nm处每分钟 增加
0.001吸光度值定义为一个酶活单位。将 0. 25 mL Tween 20分散于 10 mL pH值
9.0的0.2 mol/L的硼酸盐缓冲液中,摇动下逐滴加入 0.27 mL亚油酸,充 分混合,
加入 1 mol/ L 氢氧化钠溶液使体系澄清,调 pH 值至 9. 0 ,然后用上述缓 冲液稀释
到500 mL作为底物。取0. 2mL酶液(已稀释一定倍数)移入1.5mL的底 物溶液中,
混匀后于25C水浴中恒温3min,用5mL无水乙醇终止反应,然后加 入5mL蒸馏
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水,混匀后测定反应液在 234nm处的吸光度。空白样为0. 2 mL酶 液中加5 mL无
水乙醇,再加1.5 mL底物溶液,于25C恒温3 min,然后加入5 mL蒸馏水。
五、试验结果与分析
结果记录:
提取方法
(A) 水浸提
(B) 酸提-盐析物态总酶活酶比活/(Ug-1)或-1
(UmL) (C缓冲液提-盐
析
(D) 碱溶-酸提-盐
析
(E) PEG共 沉淀
分析:
盐析法是比较古老的方案,但目前仍广泛采用,它根据酶和杂蛋白在高浓 度盐溶
液中的溶解度差别进行分离纯化。最常用的盐是硫酸铵。二次盐析法是 用较低盐浓度
除去杂蛋白,再用较高盐浓度进行分离纯化。盐析法的优点是简 便、安全、重现性好,
缺点是分辨率低、纯度提高不显著。共沉淀法利用离子 型表面活性剂如十二烷基硫酸
钠、非离子型聚合物如 PEG等,在一定条件下能
与蛋白质直接或间接地形成络合物。使蛋白质沉淀析出;然后再用适当方法使 需要的
酶溶解出来,除去杂蛋白和沉淀剂,从而达到纯化目的。 PEG无毒、溶
解时散热低、形成沉淀的平衡时间短,一般当 PEG的浓度达到30%时,就可以
使大部分蛋白质沉淀出来