粗脂肪的提取和定量测定

饲料粗脂肪的测定方法饲料粗脂肪的测定方法可以采用经典的酶解-提取法和非酶解法两种方法。

一、酶解-提取法1. 样品准备：将饲料样品研磨成均匀细粉，尽量保持其原样水分含量。

2. 酶解：取一定量的饲料样品，加入适量有机溶剂（如正己烷、乙醚等）和酶解剂（如盐酸或硫酸），进行酶解。

酶解剂的浓度和酶解时间需要根据样品的特性来确定，一般在40-60分钟之间酶解。

3. 离心和分层：将酶解液进行离心，使有机相和水相分离。

将有机相收集到一个锥形瓶中，用氮气吹干以去除残留的有机溶剂。

4. 冷却和测定：将锥形瓶中的有机相浸入减压下的冷水浴中冷却，沉淀出的脂肪会形成一个明显分层。

然后，将上层的脂肪转移到一个干燥的烧杯中，并在55-60的热水浴中加热脱水。

最后，将烧杯放入一个烘箱中，在105下烘烤至恒定质量，称量质量差即为饲料样品中粗脂肪的含量。

二、非酶解法1. 样品准备：将饲料样品研磨成均匀细粉，尽量保持其原样水分含量。

2. 全脂提取：取一定量的饲料样品，加入适量有机溶剂（如正己烷、乙醚等），进行全脂提取。

提取时间和温度需要根据样品的特性来确定，一般在室温下搅拌提取6-8小时。

3. 过滤和洗涤：将提取液通过玻璃纤维滤纸过滤到一只干燥的烧杯中，将残渣用适量有机溶剂洗涤。

4. 烘干和测定：将烧杯放入一个烘箱中，在105下烘烤至恒定质量，称量质量差即为饲料样品中粗脂肪的含量。

三、常见误差和控制1. 水分的干燥：在测定过程中，水分的干燥程度会影响粗脂肪的测定结果。

因此，在样品准备和提取过程中，需要确保饲料样品中的水分含量没有显著变化。

2. 提取效率的控制：酶解-提取法中的酶解剂浓度和酶解时间，以及非酶解法中的提取剂用量和提取时间都会影响提取的效率。

需要进行试验确定最佳的条件，以确保提取的脂肪含量准确。

3. 溶剂残留的去除：在酶解-提取法中使用的有机溶剂需要彻底蒸发或用氮气吹干，以避免测定结果被样品中的有机溶剂影响。

总结：饲料粗脂肪的测定方法包括酶解-提取法和非酶解法两种。

饲料中粗脂肪的测定一、饲料中粗脂肪的定义和作用粗脂肪是指饲料中的脂肪总量，包括不溶于醇的脂肪和溶解于醇中的脂肪。

在饲料中，粗脂肪是能提供能量的重要成分之一，也是动物体内脂肪的来源之一。

粗脂肪的含量会直接影响到饲料的营养价值和动物的生长发育。

1. Soxhlet提取法Soxhlet提取法是目前应用较广泛的一种测定饲料中粗脂肪含量的方法。

该方法将饲料样品置于提取筒中，通过循环提取溶剂，将饲料中的脂肪提取出来。

然后，将提取得到的溶液蒸发至干燥，得到粗脂肪的质量。

这种方法操作简单、准确度高，被广泛应用于饲料行业。

2. 酸水解法酸水解法是利用酸对饲料中的脂肪进行水解，将水解得到的脂肪转化为游离脂肪酸，进而通过重量测定脂肪含量。

这种方法适用于粗脂肪含量较高的饲料，如油料等。

3. 催化水解法催化水解法是利用酶或催化剂对饲料中的脂肪进行水解，将水解得到的脂肪转化为游离脂肪酸。

然后，通过重量测定游离脂肪酸的含量，进而计算出粗脂肪的含量。

这种方法操作简便、快速，适用于不同类型的饲料。

三、粗脂肪测定的重要性1. 评估饲料的能量价值粗脂肪是饲料中的重要能量来源之一。

通过测定饲料中的粗脂肪含量，可以评估饲料的能量价值，为合理配制饲料提供依据。

同时，粗脂肪含量的高低还可以影响动物的采食量和生长发育。

2. 判断饲料质量粗脂肪含量是评估饲料质量的重要指标之一。

合格的饲料应当具有适宜的粗脂肪含量，过高或过低都会影响动物的营养摄入和消化吸收。

3. 为饲料配方提供依据根据各类动物的需要，合理配制饲料是提高养殖效益的重要环节。

粗脂肪的测定结果可以为饲料配方提供重要依据，确保饲料中的粗脂肪含量符合动物的营养需求。

四、结语饲料中粗脂肪的测定是饲料行业中非常重要的一项分析方法。

通过合适的测定方法，可以准确评估饲料的能量价值和质量，为合理配制饲料提供科学依据。

因此，提高粗脂肪测定的准确性和操作的简便性，对于饲料行业的发展和动物生产的提高具有重要意义。

实验三粗脂肪的提取和定量测定—索氏提取法一、实验目的1、掌握粗脂肪的提取方法，熟悉索氏提取法的操作。

2、学习如何测定样品的粗脂肪含量。

3、加深对生物大分子的认识，了解脂肪在生物体中的重要性。

二、实验原理1、粗脂肪提取脂肪具有亲油性，可以被有机溶剂提取。

索氏提取法是一种常用的粗脂肪提取方法。

在索氏提取法中，采用乙醚/醋酸乙酯（1：1）的溶液作为提取剂。

样品加入一定量提取剂中，经过适当的震荡、离心、蒸发浓缩和干燥等步骤，得到脂肪提取物。

将脂肪提取物加入硫酸中，经过酸解、加热、冷却和干燥等步骤后，得到脂肪酸甲酯。

通过气相色谱仪测定脂肪酸甲酯的含量，进而计算出样品中粗脂肪的含量。

三、实验操作（1）取适量已干燥样品，称重，记录质量。

（2）将样品放入索氏提取器的提取篮中，加入10mL乙醚/醋酸乙酯（1：1）溶液。

（3）起动提取器，以回流的方式进行提取，搅拌速度要适中，避免溅出溶液。

（4）提取30分钟后关闭提取器，将提取篮取出，用5mL提取液将其冲洗，并将提取篮放置于洗涤瓶上，使其流干。

（5）将提取篮置于已预热至100℃的蒸发皿内，用热风器将乙醚/醋酸乙酯挥发干燥。

（6）将蒸发皿置于70℃恒温箱中干燥至常重，取出，并记录质量。

（2）将粗脂肪提取物转移到20mL玻璃瓶中，加入2mL浓硫酸。

（3）在冷水浴上，加热约2小时，待样品变成棕色液体后取出，冷却。

（4）加入1mL冰醋酸冷却，混匀。

（5）加入0.2g氯化钠，混匀。

（6）转移待测样品到10mL移液管中。

（7）在10mL皮囊中，加入4mL正己烷，混匀。

（8）离心5分钟，取上层正己烷，并转移到气相色谱管中。

（9）气相色谱条件：柱：DB-23；FID检测器；柱温：120℃；检测器温：250℃。

（10）记录脂肪酸甲酯的含量，并计算出样品中粗脂肪的含量。

四、实验注意事项1、进行实验前，将索氏提取器和蒸发皿等器皿用乙醚或甲醇洗涤，并在烘箱中干燥。

2、在进行气相色谱柱装载前，必须将固定相和管柱内壁进行彻底清洗，以免污染样品。

粗脂肪的提取和定量测定的对比研究作者：毛一博吴怡昌来源：《新课程·下旬》2017年第10期摘要：脂肪组织中，测定脂肪所占比例的实验方法有很多种，结合现有实验条件，尝试使用三种沸点石油醚，采用索氏提取法对肥肉中的粗脂肪进行提取，从而分析出猪肉组织中粗脂肪的含量。

同时，将采用气相色谱分析法得到的数据与三种沸点石油醚得到的数据及提取速度做了比对，得出相应的结论，为类似的课题实验提供了具有一定参考价值的实验数据。

关键词：粗脂肪;提取;定量测定;对比研究据人民网等媒体报道，一项研究报告称，中国目前肥胖人口达3.25亿人，增幅超过美国、英国和澳大利亚。

这个数字在未来20年还可能增加一倍，并有加速提高的趋势。

肥胖症常常会伴发多种慢性疾病，是严重影响人们健康和生活质量的疾病之一，已成为世界各国面临的严重公共健康问题。

专家指出，肥胖症、艾滋病、吸毒和酗酒共同组成了新的四大社会医学难题。

开展与肥胖相关的课题研究是当前很多学者义不容辞的任务。

本文通过运用索氏提取法、气相色谱法来探究粗脂肪的提取和含量测定，从而为研究肥胖相关的课题提供参考。

一、实验过程（一）索氏提取法1.实验方法索氏提取法：以索氏提取器为提取仪器，一般采用低沸点有机溶剂（石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。

由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂肪物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。

2.实验仪器和设备索氏抽提器、水浴锅、铁架台、分析天平、滤纸、研钵、培养皿、搅拌机、干燥箱、蒸馏仪器、试管、烧杯、玻璃棒、铁架台、50 ml烧杯、250 ml烧杯、500 ml烧杯、酒精灯、药匙、镊子、胶头滴管、10 ml量筒、小漏斗、架盘天平、表面皿、pH试纸、温度计。

3.材料和试剂新鲜猪肥肉末40 g、Na2SO4溶液、石油醚（沸点为30℃～60℃、60℃～90℃和90℃～120℃）等。

食品中粗脂肪含量的测定——碱性乙醚法实验报告实验目的：采用碱性乙醚法测定食品中粗脂肪的含量。

实验原理：粗脂肪的提取是通过将食品样品中的脂肪溶解至有机相中，然后通过蒸发溶剂，得到一个带有脂肪的溶解物。

样品中的粗脂肪含量可以通过脂肪溶解物的重量和样品的质量之比来计算获得。

碱性乙醚法是目前常用的粗脂肪测定方法。

实验仪器和药品：1. 精密天平2. 恒温水浴器3. 碱性乙醚试剂：无水乙醚和1% NaOH溶液实验步骤：1. 准备样品：将待测样品称取适量（一般为粉碎、均匀的样品），记下质量。

2. 提取脂肪：将样品放入玻璃烧杯中，加入足够量的碱性乙醚试剂，使样品完全浸泡。

放入恒温水浴器中，恒温为70°C，浸泡30分钟。

期间需要定时摇晃烧杯，以保证样品和试剂充分接触。

3. 萃取脂肪：将浸泡好的样品倒入个别的提取漏斗中，漏斗底部放置一个容量瓶以收集提取液。

加入适量乙醚，再用少量的乙醚洗涤提取漏斗壁，以将提取物完全转移至容量瓶中。

4. 蒸发乙醚：将提取液放置在蒸发皿中，放入通风橱中蒸发乙醚，直至残留物完全干燥。

5. 测定重量：将蒸发皿和容量瓶分别称重，分别记录其重量。

计算粗脂肪含量：粗脂肪含量（%）=（蒸发皿+粗脂肪溶解物重量 - 空蒸发皿重量）/ 样品质量 × 100%。

实验注意事项：1. 实验过程中应注意操作规范，避免试剂接触皮肤和吸入蒸气，保持实验环境通风良好。

2. 注意蒸发乙醚的过程中要远离火源，防止发生火灾事故。

3. 每个步骤中的容器和仪器应事先清洗干净，并干燥。

实验结果示例：样品的质量为1.2g，蒸发皿的质量为12.5g，加入样品后的质量为16.8g，经蒸发后的质量为14.3g。

则根据计算公式，粗脂肪含量为：粗脂肪含量（%）=（14.3g - 12.5g）/ 1.2g × 100% = 150%。

实验结论：本实验通过碱性乙醚法测定了食品中的粗脂肪含量为150%。

此数据仅为示例，实际结果需要根据实验操作和样品特性进行具体分析和判断。

实验二粗脂肪的定量测定—索氏抽提法一、实验目的1.学习和掌握粗脂肪提取的原理和测定方法。

2.熟悉和掌握重量分析的基本操作。

二、实验原理脂肪不溶于水，易溶于乙醚、石油醚和氯仿等有机溶剂。

根据这一特性，选用低沸点的乙醚(沸点35℃)作溶剂，用索氏提取器可对样品中的脂肪进行提取。

索氏抽提器由浸提管、抽提瓶和冷凝管三部分连接而成，如图3—6。

浸提管两侧有虹吸管及通气管，装有样品的滤纸包放在浸提管内，溶剂加入抽提瓶中。

当加热时，溶剂蒸气经通气管至冷凝管，冷凝后的溶剂滴入浸提管对样品进行浸提。

当浸提管中溶剂高度超过虹吸管高度时，浸提管内溶有脂肪的溶剂即从虹吸管流入抽提瓶。

如此经过多次反复抽提，样品中脂肪逐渐全部浓集在抽提瓶中。

抽提完毕，利用样品滤纸包脱脂前后减少的重量来计算样品的脂肪含量。

由于有机溶剂从样品中抽提出的不单纯为脂肪，还含有其他脂溶性成分，因此本实验测定的结果应为粗脂肪的含量。

三、仪器、原料和试剂仪器索氏提取器、恒温水浴锅、烘箱、脱脂滤纸、脱脂棉、脱脂线等。

原料谷物油料种籽或其他样品试剂无水乙醚四、操作步骤(一)样品预处理称取2g左右的样品原料，用滤纸包好(不可扎得太紧，以样品不散漏为宜)，在烘箱100~105℃条件下烘干至恒重，准确称重。

（今天我们实验的材料由于时间问题不再进行干燥处理，称取2g左右材料放入研钵中研碎后尽量不损失的转入滤纸中包好或扎好）(二)抽提将烘干称重的滤纸包放入干燥的浸提管内，滤纸的高度不能超过虹吸管顶部。

浸提管上部连接冷凝管，并用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口；浸提管下部连接抽提瓶，抽提瓶中加入约瓶体1/2的无水乙醚，连接好后用铁架台和烧瓶夹将装置固定好。

并置于恒温水浴锅中。

冷凝管的进水和出水要用水管连接好，打开冷却水，开始加热抽提。

加热的水浴锅温度控制在55℃左右。

抽提时间为6~10小时（由于时间问题我们抽提时间为2小时左右），以浸提管内乙醚滴在滤纸上不显油迹为止。

抽提完毕，移去上部冷凝管，取出滤纸包。

粗脂肪的测定方法（索氏抽提法）一、原理将样品包浸入脂肪溶剂（乙醚）中，借助索氏抽提器进行循环抽提，样品包在抽提前后的重量差即为样品的粗脂肪含量值。

二、试剂与仪器（1）乙醚（2）索氏抽提器（3）脱脂滤纸（4）恒温水槽（5）冷凝管三、操作规程1、样品预处理：将待测物质烘至恒温（70℃条件下）、磨碎均匀，再烘至恒重制成样品装人广口瓶保存于干燥器中以备测定。

2、取样：（1）将脱脂滤纸折包放入称量瓶中（纸包和量瓶上标上同样的编号），烘干至恒重（70℃条件下10小时）。

冷却、称量滤纸包重量。

（2）准确称取样品2克放入脱脂滤纸包内，放入称量瓶中，再将样品包连同称量瓶仪器烘至恒重（70℃条件下约2小时），记下重量值。

3、抽提：（1）将索氏抽提器，冷凝管洗净、烘干至无水，不必称重。

（2）将已烘至恒重的样品包放入抽提器的提取管中，注意样品包的高度不得高于虹吸管的高度。

（3）在提取瓶中加入无水乙醚至提取瓶容积的2/3-3/4处。

（4）将提取瓶、提取管、冷凝管组装为抽提装置。

（5）将索氏抽提器的提取管置于电热恒温水浴中（温度约55-60℃）进行抽提。

抽提约进行8小时。

（6）抽提结束后，将样品滤纸包取出，放入原用称量瓶中置于烘箱至恒重（70℃条件下约10小时），记下重量值。

（7）乙醚的回收：抽提结束后，取出样品包。

用索氏抽提器将乙醚蒸馏出，保存以备下一次使用。

四、结果计算公式：粗脂肪的重量（M）=A-B粗脂肪的百分含量（%）=M/（A-C）*100%A：加样滤包重，B：抽提后滤纸包的重量，C：空滤纸包重脂肪含量测定记录表。