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第1篇一、实验目的枸杞作为我国传统的药食两用植物，具有很高的药用价值和营养价值。
本实验旨在研究枸杞果实的营养成分、药理作用及提取工艺，为枸杞果实的深加工和开发利用提供理论依据。
二、实验材料1. 枸杞果实：购自当地市场，新鲜、无病虫害。
2. 主要试剂：无水乙醇、石油醚、正己烷、甲醇、蒸馏水、磷酸盐缓冲溶液等。
3. 主要仪器：超声波提取仪、旋转蒸发仪、高效液相色谱仪、紫外可见分光光度计、电子天平等。
三、实验方法1. 枸杞果实的预处理：将枸杞果实洗净、晾干、去核、破碎，制成粗粉。
2. 枸杞果实的营养成分分析：（1）水分含量测定：采用常压烘干法。
（2）总糖含量测定：采用苯酚-硫酸法。
（3）总黄酮含量测定：采用铝-氯化铝比色法。
（4）总皂苷含量测定：采用紫外分光光度法。
3. 枸杞果实的药理作用研究：（1）抗氧化活性测定：采用DPPH自由基清除法。
（2）抗炎活性测定：采用醋酸致炎法。
（3）抗肿瘤活性测定：采用S180肿瘤细胞抑制法。
4. 枸杞果实的提取工艺研究：（1）溶剂选择：采用正交实验法，以提取率为指标，选择最佳提取溶剂。
（2）提取工艺优化：采用单因素实验法，优化提取时间、温度、料液比等参数。
四、实验结果与分析1. 枸杞果实的营养成分分析结果：（1）水分含量：约为10.5%。
（2）总糖含量：约为25.3%。
（3）总黄酮含量：约为2.34mg/g。
（4）总皂苷含量：约为1.58mg/g。
2. 枸杞果实的药理作用研究结果：（1）抗氧化活性：DPPH自由基清除率为84.5%。
（2）抗炎活性：醋酸致炎法检测，枸杞提取物对小鼠耳肿胀有显著的抑制作用。
（3）抗肿瘤活性：S180肿瘤细胞抑制率为63.2%。
3. 枸杞果实的提取工艺研究结果：（1）最佳提取溶剂：甲醇。
（2）最佳提取工艺：提取温度为60℃，提取时间为2h，料液比为1:20。
五、结论1. 枸杞果实具有较高的营养成分，如水分、总糖、总黄酮、总皂苷等。
2. 枸杞果实具有显著的抗氧化、抗炎、抗肿瘤等药理作用。
枸杞多糖的提取和人体免疫调控研究枸杞是一种传统的中药材，而枸杞多糖则是其主要成分之一，被广泛应用于中药制剂中。
近年来，随着免疫疗法的逐渐普及，枸杞多糖被认为是一种重要的免疫调节剂。
在此背景下，如何有效地提取枸杞多糖，并探索枸杞多糖对人体免疫调节的作用，成为了当前枸杞多糖研究的重要课题之一。
一、枸杞多糖的提取方法枸杞多糖是枸杞中的一种天然高分子化合物，其提取方法主要分为水提法、超声波提取法、微波提取法、酶解提取法、真空提取法等。
不同的提取方法对枸杞多糖的提取效率、产量、糖类组分等有着不同的影响。
因此，在提取枸杞多糖时，需要根据实验的具体目的和要求选择合适的提取方法。
水提法是常见的提取方法之一，其主要过程为将枸杞粉末与水混合，并进行适当的加热和搅拌，使枸杞多糖在水中溶解，并最终得到多糖粗提物。
这种提取方法简单易行，操作方便，但是相对于其他方法，其提取效率较低。
超声波提取法是利用超声波的物理效应进行提取的一种方法，其主要原理为利用超声波的震荡作用和旋转流体效应，使枸杞多糖从植物材料中脱离并汇集在液体中。
这种方法能够提高多糖的提取效率和产量，但是操作较为复杂。
微波提取法是一种利用微波的物理效应进行提取的方法，其主要原理为利用微波的电磁波能量对物质的温度进行提高，使多糖迅速溶解在液体中。
这种方法具有操作简单、提取效率高等优点，但是其技术要求较高，需要仔细控制微波功率、时间等参数。
酶解提取法是利用酶对纤维素等难以降解的物质进行分解，并将枸杞多糖提取出来的一种方法。
这种方法提取的多糖成分较为纯净，但是操作成本较高。
真空提取法是将枸杞粉末置于真空下，利用低压下的温度和压力变化，将多糖迅速从材料中挥发出来的一种方式。
这种方法能够提取多糖的同时保持原料的营养成分，但是提取效率较低。
二、枸杞多糖对人体免疫调节的作用枸杞多糖在免疫调节方面具有重要的作用。
研究表明，枸杞多糖能够诱导巨噬细胞、T淋巴细胞、自然杀伤细胞等免疫细胞的活化，增强机体的免疫功能，提高机体抗病能力。
超声波辅助提取枸杞多糖工艺优化摘要：为了探索优化超声波辅助提取格尔木产枸杞（Lycium barbarum L.）多糖的最佳工艺条件，以枸杞多糖得率为指标，用单因素试验和正交试验L9（34）对料液比、提取时间、提取温度和超声波功率4个因素进行考察，确定超声波辅助提取枸杞多糖的最佳工艺，并对结果进行验证。
结果表明，超声波辅助提取枸杞多糖的最佳工艺条件为提取温度50 ℃、提取时间10 min、料液比1∶20（m/V，g∶mL）、超声波功率50 W，在该条件下，格尔木产枸杞中多糖得率为3.006%。
关键词：枸杞（Lycium barbarum L.）多糖；超声波辅助提取法；得率枸杞（Lycium barbarum L.）作为一味传统常用的中药，临床使用历史久远。
枸杞的主要活性成分枸杞多糖日益得到重视[1，2]。
现代医学表明，枸杞多糖有较强的免疫活性，是有效的免疫增强剂，在细胞免疫和体液免疫中具有重要作用，并以此为基础发挥枸杞多糖的多种功能，对机体细胞起到保护作用[3，4]。
枸杞多糖的药理作用和无不良反应展示了其在新药及功能食品研究上具有广阔的前景[5]。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 原料与试剂枸杞产自青海省格尔木市大格勒乡，甲醇（分析纯）购自天津市大茂化学试剂厂，无水葡萄糖（分析纯）购自山东省莱阳市化工实验厂，无水乙醇（分析纯）和三氯甲烷（分析纯）购自天津市北联精细化学品开发有限公司，苯酚（分析纯）购自北京化工厂。
1.1.2 仪器与设备FA2104S型电子天平购自上海精密科学仪器有限公司，LG10-2.4A型高速离心机购自北京医用离心机厂，DZX-6090B型真空干燥箱购自上海福玛实验设备有限公司，DL201-2型电热恒温干燥箱购自天津市实验仪器厂，KH-250DB型数控超声波清洗仪购自昆山禾创超声仪器有限公司，RZ-3000型旋转蒸发仪购自上海亚荣生化仪器厂，722S型分光光度计购自上海分析仪器厂。
枸杞糖类研究进展报告枸杞糖类研究进展报告摘要：枸杞糖是一种以枸杞为原料提取制成的食品。
它具有丰富的营养成分和独特的功能，已经成为近年来食品研究领域的热点。
本报告总结了枸杞糖类研究的最新进展，包括枸杞糖的提取工艺、组成成分、营养价值和药用功能等方面的研究内容。
通过对近年来的研究成果进行梳理，我们可以看到枸杞糖类在食品和医疗保健领域的广阔应用前景。
1. 引言枸杞糖是以枸杞为原料制成的一种食品。
枸杞是一种具有丰富营养和药用价值的植物，以其高含量的多糖而著名。
枸杞糖作为枸杞多糖的一种提取制品，具有更便于保存、携带和食用的特点，成为人们日常生活中常见的保健品。
近年来，人们对枸杞糖的研究越来越深入，不仅在提取工艺上不断改进，还对其组成成分、营养价值和药用功能等方面展开了一系列研究。
本报告将对枸杞糖类的研究进展进行总结和归纳。
2. 提取工艺的改进传统的枸杞糖提取工艺存在一些问题，如提取率低、工艺复杂等。
为了改进这些问题，研究人员不断进行探索和改进。
目前已经发展出了新型的枸杞糖提取工艺，如超声波辅助提取、纳米技术提取等。
这些新型工艺不仅能够提高提取率，还能够保持枸杞糖的营养成分和药用活性。
3. 枸杞糖的组成成分枸杞糖主要由多糖、蛋白质、氨基酸、维生素等成分组成。
其中，多糖是枸杞糖的主要活性成分，具有降血糖、抗氧化、抗肿瘤等多种生物学活性。
另外，蛋白质和氨基酸是枸杞糖的主要营养成分，维生素也是枸杞糖的重要组成部分。
4. 枸杞糖的营养价值枸杞糖具有丰富的营养价值，包括增强免疫力、保护肝脏、延缓衰老、降低血糖等功效。
研究还发现，枸杞糖对于改善睡眠质量、提高性功能、预防心血管疾病等方面也有一定的作用。
这些研究结果为将枸杞糖应用于食品和医疗保健领域提供了科学依据。
5. 枸杞糖的药用功能枸杞糖在药用方面具有广泛的应用。
研究显示，枸杞糖能够抗氧化，抗肿瘤，降血脂，抗衰老，增强性功能等。
此外，枸杞糖还具有较好的抗炎、抗糖尿病和抗骨质疏松等药用功能。
枸杞多糖的结构与保健功能评价枸杞，被誉为“补肾佳品”，长久以来在中医药中扮演着重要的角色。
而枸杞多糖，作为枸杞的重要成分，近年来已引起广大科研工作者的浓厚兴趣。
本文将深入探讨枸杞多糖的结构、保健功能及其在未来中的应用。
枸杞多糖是一种结构复杂、不同于简单糖类的植物多糖。
它由多个枸杞糖单元组成，呈现出一种杂多糖的结构。
其中主要含有鼠李糖、半乳糖、木糖、葡萄糖、阿拉伯糖等，这些糖单元通过特定的排列方式和链接方式形成复杂的结构。
随着枸杞原料的成熟度提高，枸杞多糖的含量也有所增加，通常在枸杞的籽、花、叶、果等部位中均含有丰富的多糖。
提高免疫力：枸杞多糖能够显著提高人体的免疫力，增强体质。
它能够刺激免疫系统的活性，增强吞噬细胞的吞噬能力，从而提升人体的抗病能力。
抗氧化：枸杞多糖具有显著的抗氧化作用，能够延缓细胞的衰老，对抗自由基的损伤，从而减缓机体的老化过程。
预防慢性病：枸杞多糖对预防癌症、心脑血管疾病、肝病等疾病具有重要作用。
它能够调节人体的血脂、血糖水平，降低慢性病发生的风险。
改善睡眠：枸杞多糖对睡眠有显著的改善作用，它能够调节人体的神经内分泌系统，缓解疲劳，提高睡眠质量。
缓解视疲劳：枸杞多糖对缓解视疲劳也有很好的效果，它能够改善眼底血管的微循环，增加视网膜的供血供氧，对保护视力和预防眼部疾病有积极的作用。
随着人们对枸杞多糖的认识越来越深入，对它的应用也越来越广泛。
在未来，我们可以预期以下几个枸杞多糖的主要应用方向：健康食品和补充剂：由于枸杞多糖具有多种保健功能，因此被广泛应用于健康食品和补充剂中。
例如，枸杞茶、枸杞胶囊、枸杞粉等产品，都已成为许多人日常生活中的必备品。
医学和药物：由于枸杞多糖具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等活性，因此在医学和药物领域也有广泛的应用。
例如，它被用于制备药物，辅助治疗各种慢性疾病，如糖尿病、高血压、肝病等。
化妆品：近年来，越来越多的研究表明枸杞多糖具有护肤和美容的效果，因此也被广泛应用于化妆品中。
枸杞多糖的药理作用概况分析枸杞多糖的生物活性主要有降血糖，止血，降血脂，抗菌，调节免疫，抗氧化，利尿等作用，其中对于降血脂的作用机制有了详细具体的研究。
通过对枸杞多糖的结构特征和降血脂作用的探索可知，枸杞多糖主要由以下多糖构成，D-木糖、D-半乳糖醛酸、D-甘露糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖等，枸杞多糖主要通过(1→6)和(1→3)键结合，各种单糖均匀分布在主链和侧链中。
而且，枸杞多糖既没有三螺旋结构，也没有分子聚集。
重要的是，枸杞多糖能有效地结合体外胆汁酸，可以显著降低胆固醇水平。
多糖类化合物在枸杞干重中占重要比例，枸杞多糖的组成种类有葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、木糖、鼠李糖、果糖和来苏糖，所有组分表现出不同的物理性质，如分子量、特性粘度、粒径和微观结构，此外，每种糖具有的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性也不同。
其中多糖中含量较高的为葡萄糖和半乳糖。
糖尿病的蔓延给社会和公共卫生部门带来了沉重负担。
查阅资料发现大约有800种植物可用作降糖药的有效成分。
例如，仙人掌的树皮提取物、鹅掌、枸杞优于抗链脲佐菌素诱导的糖尿病糖尿病对大鼠有影响。
玉米须是一种著名的传统草药，它可以用于制造保健食品和药品。
多糖是非常重要的生化成分，在生物体的生长发育中起着重要作用。
由于具有多种生物学功能，例如抑制肿瘤生长和抗糖尿病能力。
因此，研究玉米须的多糖活性具有重要意义。
众所周知，许多目前正在使用的降糖药物，大部分是通过抑制α-葡萄糖苷酶发挥其抗糖尿病作用，如阿卡波糖、脱氧诺吉霉素和福格列波糖。
然而，由于这些目前使用的抗糖尿病药物的潜在副作用，如胃肠道不适，寻找低或无毒副作用的替代品是可取的。
所以，从植物中提取天然多糖成为越来越多人的研究方向。
现有的可用于癌症治疗的化学治疗剂都有很多的副作用，例如脱发，贫血，免疫缺陷，疲劳，周围神经病，生育力问题和神经系统问题等，严重的甚至威胁生命而且病人也会异常痛苦。
山西农业科学 2023，51（9）：1060-1068Journal of Shanxi Agricultural Sciences枸杞叶多酚的超声辅助酶法提取工艺优化及抗氧化活性分析闫帅帅，晋程妮，武颖，徐建国，张亮亮（山西师范大学 食品科学学院，山西 太原 030031）摘要：对枸杞叶中具有生物活性的化合物进行提取是提升枸杞资源利用效率的前提。
为了提高枸杞叶中多酚物质的提取效率及探究其生物活性功能，以枸杞叶为试验原料，基于超声波辅助酶法探究乙醇体积分数、料液比、超声时间和纤维素酶添加量等4个单因素对枸杞叶多酚提取效率的影响，通过响应面分析优化枸杞叶多酚的提取工艺，并探究枸杞叶多酚提取物对DPPH 和ABTS 自由基的清除能力。
结果表明，4个单因素对枸杞叶多酚提取效率均具有一定影响，枸杞叶多酚提取效率均呈先升高后降低的趋势；经过拟合优化取得最优的提取条件为：乙醇体积分数68%、料液比1∶89（g/mL ）、超声时间39 min 、纤维素酶添加量2 mg/g ，在此条件下，枸杞叶提取液中多酚含量为5.09 mg/g ，与预测值（5.21 mg/g ）的相对误差仅为2.3%。
抗氧化试验表明，枸杞叶多酚提取物对DPPH 和ABTS 自由基的清除率随着溶液多酚质量浓度的增加而升高，半数抑制浓度IC 50值分别为27.28、190.00 μg/mL ，表明具有较好的抗氧化能力。
综上，超声辅助酶法可提高枸杞叶多酚的提取效率，所提取的枸杞叶中多酚具有明显的体外抗氧化活性。
关键词：枸杞叶多酚；超声辅助酶法；响应面分析法；抗氧化活性中图分类号：TS209 文献标识码：A 文章编号：1002‒2481（2023）09‒1060‒09Optimization of Ultrasound-Assisted Enzymatic Extraction Technology andAntioxidant Activity of Polyphenols from Lycium barbarum LeavesYAN Shuaishuai ，JIN Chengni ，WU Ying ，XU Jianguo ，ZHANG Liangliang （College of Food Science ，Shanxi Normal University ，Taiyuan 030031，China ）Abstract ：The extraction of bioactive compounds from Lycium barbarum leaves is the premise to improve the utilization efficiency of Lycium barbarum resources. In order to improve the extraction efficiency and explore biological activity of polyphenols from Lycium barbarum leaves, in this study, taking Lycium barbarum leaves as the test material, the effects of four single factors including ethanol volume fraction, solid -liquid ratio, ultrasonic time, and the amount of cellulase added on the extraction efficiency of polyphenols from Lycium barbarum leaves were investigated using the ultrasonic -assisted enzymatic extraction. The response surface analysis was used to optimize the extraction technology of polyphenols from Lycium barbarum leaves and the scavenging ability of polyphenol extracts from Lycium barbarum leaves on DPPH and ABTS free radicals was studied. The results showed that the four single factors had the same trend that increased first and then decreased on the extraction efficiency of polyphenols from Lycium barbarum leaves. After design optimization, the optimal extraction conditions were defined with: 68% of ethanol volume fraction, 1∶89(g/mL) of solid -liquid ratio, 39 min of ultrasonic time, and 2 mg/g of cellulase, while the content of polyphenols from Lycium barbarum leaves obtained under this condition was 5.09 mg/g, which had a relative error with the predicted value(5.21 mg/g) was 2.3%. The results of antioxidant activities showed that the removal rate of the polyphenols from Lycium barbarum leaves on DPPH and ABTS increased with increasing mass concentration of polyphenols. The IC 50 values of half inhibitory concentration were 27.28 μg/mL and 190 μg/mL, respectively, which indicated that Lycium barbarum leaves had excellent antioxidant capacity. In conclusion, the extraction efficiency of polyphenols from Lycium barbarum leaves could be improved by ultrasonic -assisted enzymatic extraction, and the polyphenols extracted from Lycium barbarum leaves had significant antioxidant activity in vitro .Key words ：polyphenols from Lycium barbarum leaves; ultrasound -assisted enzymatic extraction technology; response sur⁃face methodology; antioxidant activitydoidoi:10.3969/j.issn.1002-2481.2023.09.11收稿日期：2023-01-06基金项目：山西省自然科学基金项目（202103021223247）；山西师范大学自然科学基金基础研究项目（02080183）作者简介：闫帅帅（1994-），男，山西晋城人，讲师，博士，主要从事食品营养与安全研究工作。
枸杞多糖提取工艺优化及药理作用研究进展作者：杨冬萍俞洋来源：《中国民族民间医药·下半月》2016年第06期【摘要】枸杞多糖作为枸杞子的主要活性成分，具有抗氧化、免疫调节、降血糖、降血脂、抗肿瘤、保护生殖系统等多种药理学作用。
笔者就枸杞多糖的提取工艺及药理学研究作一综述。
【关键词】枸杞多糖；提取工艺；药理作用；抗氧化；降血糖【中图分类号】R284.2 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）12-0019-03Abstract：Lycium barbarum polysaccharides （LBP），as the main active ingredient of Lycium barbarum，which have many harmacological actions， such as anti-oxidation，immunomodulatory， hypoglycemic， hypolipidemic，antitumor，protect the reproductive system and so on.This article reviews on extraction technology and pharmacology studies of LBP.Keywords：Lycium barbarum polysaccharides （LBP）； extraction process；pharmacological effects；anti-oxidation；hypoglycemic枸杞子为茄科灌木植物宁夏枸杞的成熟果实，属传统的名贵中药材，早在《本草纲目》中记载：“枸杞，补肾生精，养肝，明目，坚精骨，去疲劳，易颜色，变白，明目安神，令人长寿”。
中医认为它有补肾、明目、润肺的功效，用于肝肾不足所致的头晕目眩、视力减退、消渴等证，且疗效确切显著，故有“红宝”之称。
不同工艺的枸杞多糖提取率比较及其体外抗氧化性研究 枸杞多糖是一种优质的水溶性植物多糖，提取自宁夏枸杞的果实。现代药理研究已表明，枸杞多糖能够改善老年人易疲劳、食欲不振、视力模糊等症状，同时还是枸杞子中调节人体免疫、延缓衰老的主要活性成分。 枸杞多糖作为西安源森生物公司的主打产品，已被广泛应用于食品饮料以及保健品领域。为向客户提供更高品质的产品，日前，西安源森生物实验室就枸杞多糖的不同提取工艺进行对比研究，并对枸杞多糖体外抗氧化性进行了测定。 实验概述: 1. 西安源森生物实验室分别用三种提取方法：浸泡提取法、超声波提取法
和微波提取法提取枸杞多糖；然后采用硫酸 - 苯酚法对多糖含量进行定性定量分析，得出不同提取方法所得的枸杞多糖含量及提取率； 2. 根据枸杞粗多糖对自由基的清除率以及对超氧阴离子的清除作用的测定，比较同浓度条件下的 VC 与枸杞多糖对抗氧化活性。枸杞多糖体外抗氧化性结论。
一、三种提取方法提取枸杞多糖的提取率研究 （一）实验材料与试剂 1. 材料 宁夏枸杞 西安源森生物实验室自产地直接采购； 2. 试剂 （1）5% 苯酚； （2）8mmol/L HCl；25mmol/L 邻苯三酚溶液； （3）0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH8.2)；10%三氯乙酸； （4）邻苯三酚(焦性没食子酸，分析纯)； （5）三羟基甲基氨基甲烷(Tris)(分析纯)； （6）1,1-二苯基-2-苦基苯肼(1,1-dipheny1-2-picryl-hydrazyl, DPPH)。 （二）仪器与设备 （1）索氏提取装置，HH-S 数显恒温水浴锅； （2）YHW-102 型远红外干燥箱； （3）KQ3200 型超声波清洗仪； （4）WFJ-7200 型可见光分光光度计； （5）LDZ5-2 低速自动平衡离心机； （6）WP700 型微波炉； （7）TU-1900 双光束紫外可见分光光度计； （8）DL-1 万用电炉规格(单联电压220V，功率：LX/KW)； （9）ZDHW 型调温电热套(规格 250ml，功率 150W)； （10）JA2003 型电子天平。 （三）实验步骤 1.枸杞预处理 将宁夏枸杞放于60℃恒温箱中恒温干燥24h→称量→剪碎→回流脱脂（回流两次，每次3 h）→弃去溶剂，残渣风干，残渣即为经过预处理的枸杞。 2. 利用三种方法进行枸杞多糖的提取 （1）浸泡法提枸杞多糖 用电子天平称取等量经预处理后的枸杞，浸泡3h，然后用90℃的水浴提取1.5h，用脱脂棉过滤，重复提取3 次，弃去残渣，合并滤液，浓缩，离心(3000r/min，30min)，弃去残渣，上清液为多糖溶液。 （2）超声波法提取枸杞多糖 用电子天平称取等量经预处理后的枸杞，置超声波清洗仪中，40℃恒温超声波提取 1h，脱脂棉过滤，重复提取3 次，弃去残渣，合并滤液，浓缩，离心(3000r/min，30min)，弃去残渣，上清液为多糖溶液。 （3）微波法提取枸杞多糖 用电子天平称取等量经预处理后的枸杞，置于微波炉中加热提取2 0 m i n ，脱脂棉过滤，重复提取3 次，弃去残渣，合并滤液，浓缩，离心(3000r/min，30min)，弃去残渣，上清液为多糖溶液。 3. 三氯乙酸法去除蛋白质 在枸杞多糖水溶液中加入 10% 三氯乙酸，调节 pH 至3，在 10℃条件下放置过夜，离心(3000r/min，30min)，弃去沉淀，即得无蛋白质的多糖溶液（待测样品溶液）。 4. 枸杞多糖沉淀 向除去蛋白质的枸杞多糖溶液中加入4 倍体积的95%乙醇沉淀，静置24h，离心(3000r/min，30min)，弃去上清夜，固态物用 9 5 %乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚依次进行洗涤，颜色分别由黄色洗至近无色，后置于 6 0 ℃恒温干燥2 4 h ，即为枸杞多糖粗品。 5. 多糖再沉淀 将枸杞多糖粗品溶于热水中使其完全溶解，过滤弃去沉淀，浓缩溶液，向枸杞多糖溶液中加入4 倍体积的95%乙醇沉淀，静置24h。离心(3000r/min，30min)，弃去上清液，固态物用9 5 %乙醇、无水乙醇、丙酮和乙醚依次进行洗涤，颜色洗至近无色，于 6 0 ℃恒温干燥2 4 h ，即为枸杞多糖。 （四） 标准曲线的绘制 1. 葡萄糖标准溶液配制 2. 标准曲线绘制 编号为 1、2、3 、4 、5 、6的具塞试管中为精确量取的标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml。其中，1 号试管为空白对照溶液。 试管中分别加水至2.0ml，分别精确加入5% 苯酚溶液1.0ml（摇匀）→迅速加入浓硫酸 5.0ml（摇匀）→放置 10min→置 40℃水浴中保温15min→取出后迅速冷却至室温。 用紫外-可见分光光度法在 490nm 的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，葡萄糖的浓度为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程：y=0.107x+0.1202，r=0.9992(n=5)(图1)。 可以看出，吸光度随着葡萄糖溶液浓度的变化而呈线性变化。用测定得到的吸光度，根据线性回归方程 y=0.107x+0.1202 计算多糖溶液中葡萄糖的浓度。 3. 换算因子的测定 精确称取于60℃恒温箱干燥至恒重的、经过再沉淀的枸杞多糖20mg，置于 100ml 容量瓶中，用适量蒸馏水水溶解后，定容至刻度线，摇匀，作为枸杞多糖储备液。 精确量取枸杞多糖储备液1.0ml加水至2.0ml，按照标准曲线的绘制方法测定其吸光度。按照下式计算换算因子F 测得 F=1.67。
其中，D 为多糖的稀释因素；C 为多糖稀释液中葡萄糖的浓度(mg/ml)；W 为枸杞多糖的质量(mg)。 4. 样品溶液的制备 用电子天平称取经预处理后的枸杞，于回流装置中回流脱脂（两次，每次3 h）→弃去溶剂，残渣风干→以 80%乙醇300ml 回流脱单糖两次，每次 3h→回收乙醇。 向残渣中加入450ml 蒸馏水，在不同的条件下(浸泡提取、超声波提取、微波提取) 提取( 三次) →过滤→合并滤液→浓缩，离心(3000r/min，30min)→弃去残渣，上清液为多糖水溶液。 再向枸杞多糖水溶液中加入10%三氯乙酸→调节pH至3→静置24h，离心(3000r/min，10min)→弃去沉淀，即为无蛋白质的待测多糖溶液。 （五）枸杞多糖含量测定 精确吸取样品溶液1.0ml→加蒸馏水至2.0ml→再加入1.0ml 5% 苯酚溶液（摇匀）→迅速加入浓硫酸5.0ml（摇匀）→放置 10min→置 40℃水浴保温 15min→迅速冷却至室温。 在紫外-可见分光光度 490nm 处测吸光度，按以下公式计算样品溶液中多糖的含量。 其中，W 为供试样品重量(mg)；F 为换算因子；D为供试溶液的稀释倍数；C 为供试溶液中葡萄糖的浓度(mg/ml)。 （六）三种枸杞多糖提取提取率实验结果分析 1. 标准曲线（图1） 根据（四）.2中线性回归方程 y=0.107x+0.1202 计算多糖溶液中葡萄糖的浓度。然后根据公式(2)计算枸杞多糖(LBP)的含量。 2. 三种提取方法：浸泡提取法、超声波提取法和微波提取法提取枸杞多糖的比较结果 实验中分别采用浸泡提取法、超声波提取法、微波提取法来提取枸杞多糖，并用硫酸 - 苯酚法测定多糖含量(表1)。
可以看出，在浸泡提取、超声波提取和微波提取三种提取方法中： 微波炉提取法的多糖含量最高—— 22.62%； 超声波法提取的多糖含量——19.45%； 浸泡提取法的多糖含量最小—— 16.90%。 造成枸杞多糖这种提取效率差异的主要原因是由于提取的原理不同，因此可见微波提取枸杞多糖的方法最佳。
二、枸杞多糖体外抗氧活性的测定实验 在正常的代谢过程或不利的外界环境影响下，细胞都会产生自由基，而过量的自由基会对人体内的糖类、蛋白质、核酸和脂质等生命分子造成很大的损害，进而引起中风、癌症等疾病。 此部分实验，就是针对枸杞多糖的清除自由基能力及体外抗氧化性进行研究： （一）DPPH 自由基体系 精确称取经再沉淀的枸杞多糖，用适量蒸馏水充分溶解，制成浓度为 1.0mg/ml 的母液 A。取母液A 稀释至浓度分别为0.8、0.6、0.4、0.2mg/ml，分别编号①～⑤。 精确称取抗坏血酸定容，制成浓度为1.0mg/ml VC母液B。取母液B稀释至浓度分别为 0.8、0.6、0.4、0.2mg/ml，分别编号⑥～⑩。 （1）分别精确量取2ml浓度为2.0×10-4mol/L的DPPH溶液与蒸馏水混合，以相对应的溶剂为对照，用紫外可见分光光度计分别测定上述溶液在波长为 517nm 处的吸光度(Ac)。 （2） 分别精确量取不同浓度枸杞多糖溶液、抗坏血酸溶液各 2ml，将其分别与2 ml相对应的溶剂混合均匀后，以溶剂为对照，用紫外可见分光光度计分别测定上述溶液在波长为 517nm 处的吸光度(Aj)，分别得到10 个Aj值。 （3） 分别精确量取不同浓度枸杞多糖溶液、抗坏血酸溶液各2ml，并将其分别与2ml 浓度为2.0 ×10-4mol/L 的DPPH溶液混合，摇匀后放置30min，以相对应的溶剂为对照，用紫外可见分光光度计分别测定上述溶液在波长为 517nm处的吸光度(Ai)，分别得到10个Ai值。 枸杞多糖、抗坏血酸的抑制率计算公式为：
（二） 超氧阴离子自由基体系 按照“DPPH 自由基体系”中的方法配制枸杞多糖和抗坏血酸溶液分别编号①～⑩。 取0.05mol/L的三羟基甲基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液(pH8.2)4.5ml→置25℃水浴中预热20min→分别加入1ml试样溶液和0.4ml 25mmol/L邻苯三酚溶液（混匀）→于 25℃水浴中反应 5min→加入 8mmol/L HCl 1ml终止反应。 之后在TU-1900 型双光束紫外-可见分光光度计下299nm 处测定溶液的吸光度(Ai)，空白对照组以相同体积的蒸馏水代替样品溶液，在紫外可见分光光度计下299nm 处测定溶液的吸光度(A0)，每个试样作三个平行样，取其平均值。 将测得的数据代入下列公式计算清除率(P)。
（三） 枸杞多糖的稳定性实验 取待测样品溶液，照样品溶液测定方法操作，在紫外-可见光分光光度计下测定其吸光度，所测定时间间隔为 0 、1 、3 、5 、7 、9 h 。以所得的吸光度作为考察因素，以此衡量枸杞多糖的稳定性。 （四）枸杞多糖体外抗氧活性的测定实验结果与分析 1. 枸杞多糖对 DPPH 自由基的清除作用
根据公式(3)计算枸杞多糖与VC溶液对DPPH 自由基的清除率。 计算结果表明，枸杞多糖和V C对DPPH自由基均有清除作用。 表2显示，V C 溶液在该浓度范围内对 D P P H 自由基的抑制率基本没有变化，且均大于92%；而浓度为0.2～1.0mg/ml的枸杞多糖对 DPPH 自由基的清除率在43.09%～76.21%，并
