枸杞多糖的提取.

枸杞中枸杞多糖的提取及分离纯化工艺的研究石油化工与工艺 05160111 倪宜海指导教师：史高峰教授摘要本文主要对枸杞黄酮类化合物的微波辐射辅助提取取枸杞粉末和提取最佳工艺进行研究。

取得的主要研究成果如下：加入一定料液比(1：8、1：10、1：12)的水溶液，放入微波搅拌器中放置一定时间（40-100min)，温度70-100摄氏度之间，功率（300-600w）。

取出过滤，取其溶液放置旋转蒸发仪中进行蒸馏。

枸杞渣滓放回搅拌器中进行二次提取，提出多糖混合液醇沉冷冻干燥后，为褐色絮状粉末固体。

确定最佳工艺：提取温度90 ℃；料水比1∶10(W∶V)，提取时间2h，功率600。

得出多糖再进行Sevage法脱蛋白，冷冻干燥后，为乳白色絮状粉末固体粗多糖。

在最佳条件下枸杞粗多糖提取率可达12.23%。

枸杞粗蛋白含量6.98%关键词：微波搅拌，冷冻干燥，Sevage法脱蛋白，分离纯化AbstractIn this paper, the main flavonoids of Lycium barbarum's the microwave-assisted extraction of radiation from wolfberry extract powder and the best technology for research. The main research results obtained are as follows: by adding some liquid ratio (1:8,1:10,1:12) aqueous solution into the microwave stirrer placed a period of time (40-100min), the temperature between 70-100 degrees Celsius , power (300-600w). Remove the filter, select the solution placed in Rotary Evaporator distillation. Barbarum waste back into the blender in the second extract, the polysaccharide mixture of freeze-drying alcohol, in order to brown flocculent solid powder. To determine the optimum process: extraction temperature 90 ℃; feed water ratio 1:10 (W: V), extraction time 2h, Power 600. Polysaccharide derived from another protein Sevage law, after freeze-drying for white flocculent powder Polysaccharide solid. Under the best conditions in barbarum Polysaccharide extraction rate of 12.23%. Barbarum 6.98% crude protein content.KEY WORDS: microwave mixing, freeze-drying, Sevage method of removing protein, purification 1.前言枸杞中的化学成分比较复杂，主要包括蛋白质、氨基酸、微量元素、糖类、脂肪、脂肪酸、菇类、甾醇类、维生素、色素类、生物碱类。

枸杞多糖的不同提取分离方法比较2.1 枸杞多糖的提取方法2.1.1 溶剂提取法因为多糖在水溶液中的溶解度较高，所以可以用水、酸、碱等极性溶剂或者甲醇、乙醇等质子型溶剂溶解。

研究证明了碱性条件下会通过破坏植物细胞壁及细胞膜，从而增加了细胞内多糖的溶出度，以此枸杞多糖的提取量就提高了。

但是酸碱提取法并不常使用，原因是其法会破坏糖苷键，使多糖的构型发生改变等，并且提取过程提取的物质在酸碱条件下，会发生特殊反应，产生干扰最终结果的副反应产物，提取后液体需要中和PH，其后期处理较为繁琐[3]，所以在溶剂提取法中最适宜和应用最广泛的是热水提取法，热水有成本低、来源广等优势，所以作为最优的溶媒介质。

下文的溶剂提取法主要探究热水提取法的有关事项。

热水提取法因为其简单的操作和实验设备简易的优点，是国内外提取多糖最常用的方法，但提取效率和纯度偏低。

在这个方法中，研究表明提取温度是影响提取率的最大因素，其中影响程度大小排列为提取温度>提取时间>提取次数>料液比[4]，根据查阅资料整理如下探究不同条件下热水回流法对提取率的影响，从而发现热水回流法提取枸杞多糖最适条件为下文序号1的条件。

详见表2-1。

表2-1 热水回流法提取枸杞中多糖的提取参数对比分分析图序号提取方法优化方法提取参数提取率/％10.33[5]1热水回流法单因素，正交温度为90℃，时间为2.5h，料液比为1：25，提取3次5.4[6]2热水回流法正交实验PH为1.5，温度为80℃，提取1.5h，提取2次，料液比为1：605.53[7]3热水回流法单因素，正交温度100℃，浸提4次，时间5h，料液比1：404热水回流法提取两次，每次3h 5.17[8]3.04[9]5热水回流法提取温度为80℃，提取时间为2h 6热水回流法单因素，正交提取温度为90℃，2.96[10]提取时间为4h，料液比为1：10，提取3次2.1.2 酶解提取法酶解法提取是在溶剂提取法之上加入合适的酶，利用酶的高度专一和高效的特点，分解或降解组成细胞壁的纤维素，果胶，蛋白质等物质，破坏枸杞细胞的细胞壁，这样，细胞里的多糖就会被释放，这样多糖提取量也就得到了增加，提取率也会升高。

枸杞多糖的提取及其组成的气相色谱
分析
枸杞多糖是枸杞中的一种多糖类物质，具有多种生物活性，如抗氧化、促进免疫、抗疲劳等作用。

它的提取主要采用溶剂萃取法，通常使用乙醇或乙醚作为溶剂。

步骤如下：
1.将枸杞子放入搅拌机内，加入适量的溶剂，打成浆状。

2.将浆状物置于蒸馏器内，加热蒸馏，使溶剂与枸杞多糖分离。

3.过滤掉残留的枸杞粉，再将溶剂进行浓缩。

4.在浓缩后的溶剂中加入适量的水，使枸杞多糖沉淀。

5.用纸巾过滤掉水，并将枸杞多糖置于干燥箱内干燥，即可得到枸杞多糖。

枸杞多糖的组成可以通过气相色谱分析来确定。

气相色谱分析是一种常用的化学分析技术，可以用来研究物质中不同成分的组成。

在进行气相色谱分析时，需要使用一种叫做色谱柱的装置，将样品加入其中，并加热蒸发。

样品中的不同成分会在色谱柱中分离，并通过检测器检测得到光谱图，从而确定样品中各成成分。

枸杞的功效十分强大，《神农本草经》中记载，枸杞能补气益血，清肝明目。

在1981—2010年，一系列与枸杞和枸杞多糖相关的中成药和制剂也是层出不穷，据统计已经达到876种。

对于天然产物的分析检测而言，得率和纯度至关重要，因此在多糖成分的分离和提取技术研究中必须在优化条件的同时，确保多糖的生物活性不会因提取工艺受到影响。

现阶段，碱溶液、酸溶液、水溶液都常被用于多糖的提取。

其中，热水凭借着易于获取、溶解度强等显著优势成为了提取多糖时首选的溶剂。

然而，多糖中含有醛基等官能团，所以碱性溶液也常被用于多糖的提取。

随着科学技术的不断进步，超声波技术、超临界萃取等技术也被广泛用于枸杞中多糖成分的分离[1]。

1　枸杞多糖的结构和理化性质随着科技的进步，人们发现枸杞中的生物活性成分较为复杂，既包括氨基酸、生物碱、脂肪酸、色素类物质，也含有离子盐等无机元素。

其中，枸杞多糖因为抗癌、抗氧化、免疫调节等作用受到广泛关注。

然而，枸杞多糖多与蛋白质相结合，这给枸杞中多糖成分的提取和分离带来了一定的难度。

研究表明，枸杞多糖成分较为复杂，多由葡萄糖、甘露糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖等己碳糖组成侧链（简单结构见图1），并与由氨基酸组成的多肽链紧密结合。

图1　简单多糖结构示意图2　多糖的提取分离方法2.1　多糖的提取方法枸杞中的多糖以不同形式存在，对于每种形式的多糖都需要采用针对性的预处理方法。

现阶段，在天然产物分离与提纯中常用的分析检测方法包括脱色处理、粉碎成末、清洗脱脂等。

其中，粉碎是为了促进枸杞中物质的溶解，最大限度的获取枸杞中的有效物质。

脱色处理主要是为了除去枸杞中的显色物质，避免对后续处理工艺的干扰。

脱脂是避免多余的脂质对后续结果的影响。

2.1.1　溶剂浸提法因为多糖在水溶液中的溶解度较高，故而可以用水、酸、碱等极性溶剂或者甲醇、乙醇等质子型溶剂溶解。

其中，热水因成本低、来源广等优势常用作溶媒介质。

虽然多糖在酸、碱性溶液中也存在一定的溶解度，但是酸碱会影响多糖成分的活性，例如，溶解糖苷键，破坏多糖的三维立体结构等，故而此类方法常被用于对生物活性要求不高的成分的提取。

枸杞多糖的提取和人体免疫调控研究枸杞是一种传统的中药材，而枸杞多糖则是其主要成分之一，被广泛应用于中药制剂中。

近年来，随着免疫疗法的逐渐普及，枸杞多糖被认为是一种重要的免疫调节剂。

在此背景下，如何有效地提取枸杞多糖，并探索枸杞多糖对人体免疫调节的作用，成为了当前枸杞多糖研究的重要课题之一。

一、枸杞多糖的提取方法枸杞多糖是枸杞中的一种天然高分子化合物，其提取方法主要分为水提法、超声波提取法、微波提取法、酶解提取法、真空提取法等。

不同的提取方法对枸杞多糖的提取效率、产量、糖类组分等有着不同的影响。

因此，在提取枸杞多糖时，需要根据实验的具体目的和要求选择合适的提取方法。

水提法是常见的提取方法之一，其主要过程为将枸杞粉末与水混合，并进行适当的加热和搅拌，使枸杞多糖在水中溶解，并最终得到多糖粗提物。

这种提取方法简单易行，操作方便，但是相对于其他方法，其提取效率较低。

超声波提取法是利用超声波的物理效应进行提取的一种方法，其主要原理为利用超声波的震荡作用和旋转流体效应，使枸杞多糖从植物材料中脱离并汇集在液体中。

这种方法能够提高多糖的提取效率和产量，但是操作较为复杂。

微波提取法是一种利用微波的物理效应进行提取的方法，其主要原理为利用微波的电磁波能量对物质的温度进行提高，使多糖迅速溶解在液体中。

这种方法具有操作简单、提取效率高等优点，但是其技术要求较高，需要仔细控制微波功率、时间等参数。

酶解提取法是利用酶对纤维素等难以降解的物质进行分解，并将枸杞多糖提取出来的一种方法。

这种方法提取的多糖成分较为纯净，但是操作成本较高。

真空提取法是将枸杞粉末置于真空下，利用低压下的温度和压力变化，将多糖迅速从材料中挥发出来的一种方式。

这种方法能够提取多糖的同时保持原料的营养成分，但是提取效率较低。

二、枸杞多糖对人体免疫调节的作用枸杞多糖在免疫调节方面具有重要的作用。

研究表明，枸杞多糖能够诱导巨噬细胞、T淋巴细胞、自然杀伤细胞等免疫细胞的活化，增强机体的免疫功能，提高机体抗病能力。

目录摘要 (1)英文摘要 (2)1 引言 (3)2 材料与方法 (4)2.1 实验材料与仪器设备 (4)2.2.1 葡萄糖标准溶液的配制与曲线的绘制 (4)2.2.2 枸杞多糖溶液的提取方法 (5)2.2.3 苯酚-硫酸法测定多糖含量 (6)3 实验结果与分析 (6)3.1 单因素选择试验 (6)3.2提取率与浸提温度之间的关系 (6)3.3 提取率与料水比之间的关系 (7)3.4 提取率与浸提时间之间的关系 (8)3.5 正交试验优化工艺条件 (9)4 结论 (10)参考文献 (11)致谢 (12)枸杞子多糖提取工艺的探索化学化工学院应用化学专业摘要：利用正交分析法对枸杞多糖的提取工艺进行优化。

以枸杞为主要原料，先采用单因素试验法分别对影响枸杞多糖提取率的主要因素进行分析研究，最后再利用正交试验法优化选取一个最佳的工艺条件。

试验结果表明，枸杞多糖的热水浸提法最佳工艺条件为浸提温度90℃，料水比1:20，浸提时间2h。

关键词:枸杞多糖;水浸提取;单因素试验；正交试验Exploration of Lycium Barbarum Polysaccharides Extraction Technology College of Chemistry and Chemical EngineeringApplied Chemistry SpecialtyChen Fei (20907031003)Director: Xu Han (Lecture) Abstract: To optizime the extraction technology of lycium barbarum polysaccharides by orthogonal methodoloy. The main factors were studied effecting the extraction of lycium barbarum polysaccharides by single factor experiments. And then, the optimum extraction conditions of lycium barbarum polysaccharides was studied by orthogonal experiment. The optimized conditions for the extraction of polysaccharides was obtained as follows: extraction temperature 90℃, material to water1∶35(W∶V) , extraction time 2 h.Keywords:lycium barbarum polysaccharides; flooding extraction; single factor experiments; orthogonal experiment1引言“上品功能甘露味，还知一勺可延龄。

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浸泡提取法、超声波提取法、微波提取法提取枸杞粗多糖:超声波提取多糖:用电子天平称取经预处理后的枸杞，置超声波清洗仪中，4 0 ℃恒温超声波提取1 h ，脱脂棉过滤，重复提取3 次，弃去残渣，合并滤液，浓缩，离心(3000r/min，3 0 m i n ) ，弃去残渣，上清液为多糖溶液。

微波提取枸杞多糖:用电子天平称取经预处理后的枸杞，置于微波炉中加热提取2 0 m i n ，脱脂棉过滤，重复提取3 次，弃去残渣，合并滤液，浓缩，离心(3000r/min，30min)，弃去残渣，上清液为多糖溶液。

浸泡提多糖:用电子天平称取经预处理后的枸杞，浸泡3 h ，然后用90℃的水浴提取1.5h，用脱脂棉过滤，重复提取3 次，弃去残渣，合并滤液，浓缩，离心(3000r/min，3 0 m i n ) ，弃去残渣，上清液为多糖溶液。

西南科技大学: 严成严夏超声波辅助复合酶法提取枸杞多糖工艺研究枸杞多糖提取工艺流程:枸杞粉末→乙醇脱脂→超声波辅助复合酶浸提→沸水浴灭酶→离心→Sevage法除蛋白→浓缩→冷冻干燥→枸杞多糖粗品黄河三角洲京博化工研究院有限公司山东京博控股股份有限公司王杉杉马韵升姚刚刘圣鹏虞凤慧魏征枸杞多糖提取工艺优化研究枸杞多糖热水浸提法工艺流程:枸杞→烘干、粉碎→氯仿- 甲醇回流脱脂→热水浸提→抽滤→减压浓缩→无水乙醇沉淀4h→95%乙醇洗涤→丙酮洗涤→干燥→粗多糖枸杞多糖热水浸提法最佳工艺研究:用L9(34)正交试验研究温度、浸提次数( 每次4h)和料液比对枸杞多糖纯度与得率的影响, 以确定热水浸提法的最佳工艺 , 每个试验重复三次。

对正交试验所得的最佳提取工艺进行验证性试验。

四川理工学院酿酒生物技术及应用四川省重点实验室熊俐黄治国罗惠波卫春会微波辅助提取枸杞中总多糖的工艺研究提取枸杞多糖工艺流程：枸杞真空冷冻干燥→粉碎→超声波耦合（石油醚+氯仿）提取色素→提取液浓缩→残渣→乙醇提取黄酮（微波）→提取黄酮后的残渣→微波水（提）→真空浓缩提取液→醇沉（80%工业乙醇和5%氯化钠水溶液）→真空干燥→Sevage 法脱蛋白→真空干燥→枸杞总多糖兰州理工大学石油化工学院史高峰李娜陈学福李刚刚响应曲面法优化黑果枸杞多糖的超声提取工艺工艺流程预处理：取适量干燥至恒重的黑果枸杞样品，粉碎过60目筛备用→粗多糖的提取：准确称取样品3.0 g，按不同的液固比加入蒸馏水搅拌均匀，设定超声参数，离心、抽滤得到滤液，提取2次，合并提取液→脱蛋白：提取液经减压浓缩后，采用合理的方法脱除蛋白质→醇沉：缓慢加入5倍体积的95%乙醇，冷藏过夜，抽滤后得到沉淀。

枸杞多糖提取工艺的研究
枸杞多糖是一种天然的多糖物质，具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等。

因此，枸杞多糖的提取工艺研究备受关注。

首先，枸杞多糖的提取方法有很多种，如水提法、酸提法、碱提法、超声波提法等。

其中，水提法是最常用的方法之一。

其具体流程为：将枸杞浸泡在水中，然后将其加热至一定温度，过滤后得到浸提液，再用醇沉、离子交换层析等方法纯化得到枸杞多糖。

其次，影响枸杞多糖提取的因素有很多，如浸提温度、浸提时间、浸提液比、pH值等。

其中，浸提温度是影响提取率的关键因素之一。

一般来说，温度越高，提取率越高。

但是，过高的温度会导致多糖分解，从而影响其生物活性。

因此，在选择浸提温度时需要权衡提取率和生物活性。

最后，枸杞多糖的应用前景非常广阔。

它可以用于保健品、医药、食品等领域。

例如，在保健品中，枸杞多糖可以作为一种天然的抗氧化剂，对人体具有很好的保健作用。

在医药领域，枸杞多糖可以用于治疗肿瘤、心血管疾病等。

在食品领域，枸杞多糖可以作为一种天然的添加剂，增强食品的营养价值。

综上所述，枸杞多糖的提取工艺研究对于发掘其生物活性、拓展其应用领域具有重要意义。

未来，我们还需要进一步深入研究其提取工艺和生物活性，并探索其在更广泛领域的应用前景。