源基因稳定的整合到生殖细胞中。
但是通过精子载体方法得到的转基因动物中嵌合体的比例很高,其具体的机制尚不清楚。
精原干细胞转移方法的建立,使得人们在活体中可以对精原干细胞进行操作。
从理论上讲,通过这种方法得到的转基因动物应该是单倍体,且操作简单、效率高。
结合单精子受精技术,在子代中的转基因效率在理论上为100%。
作为遗传信息的传递载体,成熟的精子在成熟的过程中,通过各种手段最大限度的对其自身的遗传信息进行保护,所以直接对成熟的精子进行转染等操作效率极低,往往是外源DNA附着在精子上进入卵细胞,所以子代中嵌合体很高。
在精子成熟之前,对精原干细胞进行基因转染和筛选,从理论上应该比胚胎干细胞更容易、适用范围更广泛。
同时应该指出:目前背景清楚、稳定的胚胎干细胞系仅来自小鼠,相比之下精原干细胞途径更有应用前景。
尽管现在还没有通过这一途径建立转基因动物的报道,但是随着一些技术的应用,有理由相信,离实现这一目标已指日可待。
如在活体中通过电击可大幅的提高对精原干细胞的转染效率,通过脂质体亦能在离体和活体有效转染。
已经证明在体和离体情况下,反转录病毒可以有效感染精原干细胞,感染效率在2%～20%左右。
2001年,Nagano等用反转录病毒离体感染供体睾丸细胞,并将其移植入受体小鼠睾丸中,在子代中4.5%为稳定的转基因小鼠[13]。
我们也已开展这方面的工作:利用电击和脂质体均可在体内感染小鼠精原干细胞,并可在异体中移植。
5 精原干细胞在其他领域中的运用前景在医学、物种保护和畜牧领域具有广阔的应用前景,精原干细胞移植技术的建立使得对精原干细胞的操作成为可能,也为不孕症和珍稀动物物种的保存提供了可能。
对于一些不孕症患者,接受高计量放疗、化疗的癌症病人往往造成暂时或永久性的不孕症病人的传统对策是冻存精液,但实际上一般不易收集到大量的精液,必须借助于单精子受精等复杂手段。
由于精原干细胞也可以长期冷冻保存,因而利用这种方法自然分泌精子不大受时间限制。
