SNP单核苷酸多态性分析
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SNP检测原理和应用SNP(单核苷酸多态性)是指在基因组中存在的单个核苷酸变异,也是造成个体之间遗传差异的主要形式之一、SNP检测原理是通过不同的技术手段检测基因组的SNP位点,并将不同个体之间的SNP变异与疾病、药物反应等进行关联分析,从而用于研究和预测人类复杂疾病的发生机制和个体化治疗。
SNP检测的主要技术包括基于凝胶电泳的限制片段长度多态性(RFLP)、聚合酶链反应(PCR)扩增测序、DNA芯片技术和基因测序等。
其中,RFLP是早期应用最广的技术,主要通过特定限制酶酶切目标DNA片段,然后通过凝胶电泳分离DNA片段,根据不同基因型的片段长度差异进行分型和分析。
PCR扩增测序技术则通过特定引物扩增目标DNA片段,再通过测序技术获得具体的SNP位点信息。
DNA芯片技术则通过固相杂交将DNA片段与特定的SNP探针结合,然后通过荧光标记的信号检测技术获得SNP位点信息。
而基因测序技术则是目前应用最广泛和高通量的SNP检测技术,通过测序获得整个基因组的SNP信息。
SNP检测的应用非常广泛。
首先,SNP检测可用于研究人类复杂疾病的发病机制。
复杂疾病的发生不仅受到环境因素的影响,还与多个基因的相互作用有关。
通过SNP检测,可以发现与复杂疾病相关的SNP位点,并进一步研究这些位点与疾病的关联关系以及其在疾病发生发展过程中的作用。
这为疾病预防、治疗和个体化医疗提供了重要的依据。
其次,SNP检测可用于预测个体对药物的反应和副作用。
由于个体对药物的反应存在巨大的差异,因此通过SNP检测可以发现与药物代谢、药物作用靶点相关的SNP位点,并据此预测个体对药物的反应。
这样可以实现个体化的用药方案,提高药物疗效,减少副作用。
此外,SNP检测还可以用于亲子鉴定、法医学鉴定、种群遗传学研究、植物和动物遗传改良等领域。
例如,通过SNP检测可以判断是否为亲生子女,鉴定遗传疾病的患者或罪犯,追溯人类的遗传演化历程,以及选择适应环境的作物和动物品种。
基因组snp遗传多样性分析流程英文回答:Genomic SNP (Single Nucleotide Polymorphism) analysisis a crucial technique used to study genetic diversity within a population. This analysis provides insights into the genetic variations that exist among individuals, which can be used to understand the evolutionary history, disease susceptibility, and population structure.The workflow for genomic SNP analysis involves several steps. Firstly, the DNA samples from individuals within the population of interest are collected. These samples can be obtained from blood, saliva, or other sources. Once the DNA is extracted, it is subjected to genotyping, where specific regions of the genome are examined for SNPs.Genotyping can be performed using various techniques, such as microarray-based genotyping or next-generation sequencing. Microarray-based genotyping involveshybridizing the DNA samples to a chip containing DNA probes specific to different SNP alleles. The intensity of the signal generated by the hybridization indicates the presence or absence of a particular allele. On the other hand, next-generation sequencing allows for the simultaneous sequencing of multiple DNA fragments, enabling the detection of SNPs across the entire genome.After genotyping, the data obtained needs to be processed and analyzed. This involves quality control measures, such as filtering out low-quality SNPs or samples with a low call rate. Statistical methods are then applied to assess the genetic diversity within the population. Measures such as allele frequency, heterozygosity, and genetic distance are calculated to quantify the level of genetic variation.Furthermore, population structure analysis can be performed to determine the genetic relationships and subpopulations within the population. This can be achieved using methods like principal component analysis (PCA) or model-based clustering algorithms. These analyses helpidentify genetic clusters or admixture patterns, which can provide insights into the population's historical migration patterns or admixture events.Finally, the results obtained from the SNP analysis can be interpreted and used for various purposes. For example,in evolutionary studies, the genetic diversity data can be used to infer the demographic history of a population or identify regions under positive selection. In medical genetics, SNP analysis can help identify genetic variants associated with disease susceptibility or drug response.中文回答:基因组SNP(单核苷酸多态性)分析是研究人群遗传多样性的重要技术。
人类基因组研究中的SNP分析随着现代科技的快速发展,人类已经进入了基因组时代。
在这个时代里,基因组研究是关键的一环,因此,人类基因组研究已成为当前热门科学研究领域。
SNP是人类基因组研究中非常重要的一种基因类型,其全称为“单核苷酸多态性”(Single nucleotide polymorphisms),是指基因组DNA序列上的单个核苷酸发生突变的现象。
这些突变可能会对个体的遗传特征、代谢和疾病易感性产生影响,因此,SNP分析被广泛应用于人类基因组的研究。
SNP分析的意义SNP分析作为一种高效而有效的基因分析方法,其应用范围非常广泛。
除了帮助人们更好地了解人类基因组的不同特征外,SNP分析也可以被应用于以下领域:1. 遗传病研究基因突变是遗传病发生的原因之一,而SNP的变异也可能引起明显的遗传病症状。
SNP分析可以帮助科学家更好地了解这些突变与遗传病之间的关系,从而提供更有效的治疗方法。
2. 药物研究SNP分析在药物研究过程中也可以发挥重要作用。
因为不同人群人体内的代谢和反应机制是不一样的,因此,在开发新药物的过程中,SNP分析可以提供更全面的信息,从而提高药物的效率和安全性。
3. 个性化医疗随着SNP分析的应用越来越广泛,越来越多的医疗机构开始使用它来提供更精准的治疗方案。
根据患者的基因信息,医生可以制定更适合个人的治疗方法,从而提高治疗效果和疗效持续时间。
SNP分析的方法SNP分析的方法有很多,其中最常见的两种方法是Sanger测序和芯片技术。
1. Sanger测序Sanger测序是SNP分析的传统方法,之所以广泛应用,是因为它是一种基于荧光技术的自动测序方法。
Sanger测序的具体原理如下:首先,将DNA样本与引物一起反应,通过PCR技术扩增目标基因区域。
然后,将PCR产物分离并富集,通过荧光标记的引物在ABI 3730 DNA自动测序仪上进行自动测序。
最后,通过电脑软件将测序结果转化为DNA碱基序列。
SNP分析原理方法及其应用SNP(Single Nucleotide Polymorphism,单核苷酸多态性)是指在基因组中的一些位置上,不同个体之间存在的碱基差异,是常见的遗传变异形式之一、SNP分析是研究SNP在基因与表型之间关联性的方法,用于揭示SNP与遗传疾病、药物反应性等的关系。
本文将介绍SNP分析的原理、方法以及其应用。
一、SNP分析原理1.SNP检测技术:SNP检测技术包括基于DNA芯片的方法、测序技术、实时荧光PCR等。
其中,高通量测序技术是最常用的SNP检测方法,可以同时检测数千个SNP位点。
2.数据分析与统计学方法:通过SNP检测技术获得的数据可以分为基因型数据(AA、AB、BB等)和等位基因频率数据(A频率、B频率等)。
统计学方法常用的有卡方检验、线性回归、逻辑回归等,用于研究SNP与表型之间的关联性。
二、SNP分析方法1.关联分析:关联分析是研究SNP与表型之间关联性的基本方法。
常用的关联分析方法包括单基因型分析、单SNP分析、基因组关联分析(GWAS)等。
单基因型分析主要是比较单个SNP的基因型在表型不同组之间的差异;单SNP分析是研究单个SNP是否与表型相关;GWAS是通过分析数万个SNP与表型之间的关系来找到与表型相关的SNP。
2. 基因型预测:基因型预测是根据已有的SNP数据,通过统计模型来预测个体的基因型。
常用的基因型预测方法有HapMap、PLINK等。
3. 功能注释:功能注释是研究SNP位点的生物学功能,揭示SNP与基因功能、表达水平之间的关系。
常用的功能注释工具有Ensembl、RegulomeDB等。
三、SNP分析应用1.遗传疾病研究:SNP与遗传疾病之间存在着密切的关系。
通过SNP分析可以发现与遗传疾病相关的SNP位点,进一步揭示疾病发生的机制,为疾病的诊断、治疗提供依据。
2.药物反应性研究:个体对药物的反应性往往存在较大差异,这与个体的遗传背景密切相关。
SNP(单核苷酸多态性)鉴定是研究基因变异和关联分析的重要方法。
SNP鉴定流程主要包括以下几个步骤:
1. 样本收集与DNA提取:从生物体(如血液、组织、细胞等)中提取DNA。
2. 基因组DNA定量:使用spectrophotometer(分光光度计)或其他相关设备,对提取的DNA进行定量,确保实验过程中的DNA浓度一致。
3. 基因组DNA酶切:根据实验需求,选择合适的酶切酶,对DNA进行酶切。
酶切后的DNA片段长度分布均匀,便于后续实验操作。
4. 连接酶切片段与荧光标记的适配子:将酶切后的DNA片段与荧光标记的适配子连接,形成复合物。
该步骤为后续杂交和检测打下基础。
5. 杂交与洗涤:将制备好的复合物在特定设备(如杂交箱)中进行杂交,然后洗涤去除未结合的荧光标记适配子。
6. 荧光检测与数据分析:将洗涤后的样本置于荧光检测设备中,检测荧光信号。
根据荧光信号的强弱,分析样本中的SNP位点。
7. 结果验证与分析:对检测结果进行验证,如PCR扩增、测序等。
进一步分析SNP位点的分布、频率等,探讨其与疾病、表型等因素之间的关系。
单核苷酸多态性(SNP)实验SNP (Single Nucleotide Polymorphism)即单核苷酸多态性,是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态性(Polymorphism)。
据估计,在人类基因组中,大约每千个碱基中有一个SNP,无论是比较于度多态性(RFLP)分析还是微卫星标记(STR),都要广泛得多。
实验方法原理:SNP (Single Nucleotide Polymorphism)即单核苷酸多态性,是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态性(Polymorphism)。
据估计,在人类基因组中,大约每千个碱基中有一个SNP,无论是比较于限制性片段长度多态性(RFLP)分析还是微卫星标记(STR),都要广泛得多。
SNP是我们考察遗传变异的最小单位,据估计,人类的所有群体中大约存在一千万个SNP位点。
一般认为,相邻的SNPs倾向于一起遗传给后代。
于是,我们把位于染色体上某一区域的一组相关联的SNP等位位点称作单体型(haplotype)。
大多数染色体区域只有少数几个常见的单体型(每个具有至少5%的频率),它们代表了一个群体中人与人之间的大部分多态性。
一个染色体区域可以有很多SNP位点,但是我们一旦掌握了这个区域的单体型,就可以只使用少数几个标签SNPs(tagSNP)来进行基因分型,获取大部分的遗传多态模式。
实验材料:组织样品试剂、试剂盒:液氮、PBS、GA缓冲液、GB缓冲液、蛋白酶K、无水乙醇、蛋白液、漂洗液等仪器、耗材:离心管、离心机、废液收集管、吸附柱、水浴锅、分光光度计、低温冰箱等实验步骤:一、DNA抽提1. 取新鲜肌肉组织约100 mg,PBS漂洗干净,置于1.5 ml离心管中,加入液氮,迅速磨碎。
2. 加200 μl 缓冲液GA,震荡至彻底悬浮。
加入20 μl 蛋白酶K(20 mg/ml)溶液,混匀。
3. 加220 μl 缓冲液GB,充分混匀,37℃消化过夜,溶液变清亮。
SNP位点数据分析和人类遗传学研究SNP (Single Nucleotide Polymorphism) 位点数据分析和人类遗传学研究随着现代技术的快速发展,生物信息学领域的研究变得越来越重要。
其中,单核苷酸多态性(SNP)位点数据分析在人类遗传学研究中起着关键作用。
本文将讨论SNP位点的概念、分析方法以及其在人类遗传学研究中的应用。
首先,SNP位点是人类基因组中最常见的突变形式。
它是DNA序列中的单个核苷酸发生变异的地方,包括碱基的替换、插入和删除。
SNP位点通常在基因和表达调控区域中,对个体间的遗传差异和基因功能起着重要作用。
因此,研究SNP位点对于理解人类遗传学和疾病的发生机制至关重要。
在SNP位点数据的分析中,最常见的方法是基因型和等位基因频率分析。
基因型分析涉及确定每个个体的等位基因组合,包括纯合子(两个等位基因相同)和杂合子(两个等位基因不同)。
等位基因频率分析则是研究一个等位基因在某个群体中的频率。
通过这些分析方法,我们可以了解SNP位点的遗传多样性及其在人群间的分布情况。
此外,SNP位点数据还可以通过关联分析来研究基因与特定性状或疾病之间的联系。
关联分析(Association Analysis)是将SNP位点与某个性状或疾病之间的关联关系联系起来。
这种方法被广泛应用于复杂性疾病的研究,如肿瘤、心血管疾病和神经退行性疾病等。
通过关联分析,我们可以发现与某个特定性状或疾病相关的SNP位点,进一步了解其遗传机制,发现相关基因以及相关通路,为疾病的预测、诊断和治疗提供重要的线索。
SNP位点数据的分析离不开高通量测序技术的支持,如基因芯片和下一代测序。
这些技术的发展使得大规模SNP位点分析成为可能,相对应的数据处理和分析方法也在不断更新和改进。
然而,SNP位点数据分析中也存在一些挑战和限制,如缺乏样本数量和SNP位点的不均匀分布,这些问题需要继续研究和解决。
总结起来,SNP位点数据分析在人类遗传学研究中具有重要作用。
单核苷酸多态性在恶性肿瘤精准医学研究中的意义单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)是指基因组中,在大量人群中出现的单个核苷酸的变异,这种变异通常不会对基因本身的功能造成影响,但可能会对基因的表达及蛋白质的结构与功能造成影响。
在恶性肿瘤精准医学研究中,SNP 作为一种非常重要的分子标记,其研究意义十分显著。
首先,SNP 作为一种常见的表型异常序列变异,在肿瘤发病和预后预测上具有重要意义。
比如,5,10-甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因的c.677C>T多态性,如果携带了CT型/TT型,与结直肠癌发生的风险明显增高;而细胞色素P450 2E1(CYP2E1)基因c.7635A>G多态性则与乳腺癌的发生风险相关。
因此,对不同癌种患者的 SNP 分析结果,可以为临床治疗提供有力支持。
其次,基于 SNP 分析的癌症风险模型可为肿瘤筛查和诊断提供新手段。
研究发现,SNP 基因多态性可以作为癌症风险评估模型的重要因素。
通过与生物体遗传信息相互作用,可以使癌症风险预测更加准确,为筛查和诊断肿瘤提供更加敏感和特异的工具。
另外,SNP 对于个体化治疗也有着重要的作用。
不同肿瘤患者对相同的化疗药物可能存在不同的耐受性和反应,这与SNPs 相关。
例如,鞘氨醇药物代谢在 CYP2C9 基因上存在SNPs 变异,CYP2D6 基因代谢也会影响纳洛酮等药的治疗效果。
因此,肿瘤患者 SNP 分型的研究不仅可以用于制定更个体化的化疗方案,还可以减少化疗相关副作用的风险等。
总之, SNP 作为一种生物标记序列变异,对于恶性肿瘤精准医学的研究非常重要。
肿瘤患者 SNP 基因分析可为个体化治疗提供重要信息,对于肿瘤的筛查、诊断和治疗等多个方面,SNP 都具有广泛的应用前景。
生物大数据分析中的遗传多态性检测方法与技巧遗传多态性是生物学研究中非常重要的一个概念,它指的是个体或群体基因组中存在的多个变异形式或等位基因。
遗传多态性不仅与个体间的差异有关,还与个体在适应环境和抵抗疾病方面的差异密切相关。
因此,在生物大数据分析中,准确检测和分析遗传多态性至关重要。
本文将介绍一些常用的遗传多态性检测方法与技巧。
1. 单核苷酸多态性(SNP)的检测方法:SNP是最为常见的遗传多态性形式之一,它是DNA中单个核苷酸(A、T、C或G)的变异。
SNP的检测可通过基于测序技术的方法,如Sanger测序、测序用探针芯片和下一代测序技术等。
这些方法可以快速、准确地检测出SNP位点上的碱基变异情况。
此外,还可以利用聚合酶链式反应(PCR)结合限制性内切酶(RFLP)方法,通过分析产生的DNA片段长度差异来检测SNP位点。
2. 微卫星序列的分析方法:微卫星序列是在基因组中广泛分布的、重复的DNA序列,由于个体间的插入、缺失或重复次数的差异,微卫星序列具有高度多态性。
检测微卫星序列的多态性可以通过PCR扩增方法,使用特异性引物扩增目标微卫星位点,然后通过电泳检测扩增片段的长度差异。
此外,还可以利用基于测序的方法来检测微卫星序列的变异情况。
3. 多态性标记的选择与筛选:在生物大数据分析中,选择适当的多态性标记对于准确检测遗传多样性至关重要。
一种常用的多态性标记是限制性片段长度多态性(RFLP),其基本原理是利用限制性内切酶切割DNA产生的不同长度的片段。
此外,还有单序列重复多态性(SSR)和随机扩增多态性(RAPD)等多态性标记可以选择。
在筛选多态性标记时,通常考虑标记的多态性、位点的连锁关系、扩增效果等因素。
4. 基于群体遗传学的分析方法:群体遗传学是研究个体在群体中遗传结构和动态变化的学科。
在生物大数据分析中,利用群体遗传学的方法可以检测遗传多样性和演化过程。
例如,可以通过计算群体间的遗传距离和群体结构来判断不同种群间的基因流程度。
细菌snp分型方法原理
细菌SNP(单核苷酸多态性)分型方法是一种基于基因组学的高分辨率技术,用于鉴别细菌种群中的遗传变异。
其原理主要基于PCR(聚合酶链式反应)扩增含有SNP的基因片段,然后通过序列特异性引物实现单碱基延伸。
随后,将样品分析物与芯片基质共结晶,在真空管中受瞬时纳秒(10-9s)强激光激发,核酸分子因此解吸附成为单电荷离子。
由于电场中离子飞行时间与离子质量成反比,通过检测核酸分子在真空管中的飞行时间,可以获得样品分析物的精确分子量,从而检测出SNP位点信息。
细菌SNP分型方法的主要特点在于其高分辨率和准确性。
通过对细菌基因组的SNP位点进行精确分析,可以准确地区分不同细菌种群之间的遗传差异,甚至能够鉴别同一细菌种群中的不同菌株。
此外,该方法还具有较高的灵敏度和特异性,能够在复杂的微生物群落中准确地检测出目标细菌的存在和遗传特征。
细菌SNP分型方法在医学、环境科学、食品安全等领域具有广泛的应用价值。
例如,在医学领域,该方法可以用于鉴定病原体、研究抗生素耐药性机制、监测医院感染等方面。
在环境科学领域,该方法可以用于评估环境污染程度、监测微生物群落变化等方面。
在食品安全领域,该方法可以用于检测食品中的致病菌、评估食品安全风险等方面。
总之,细菌SNP分型方法是一种基于基因组学的高分辨率技术,通过精确分析细菌基因组的SNP位点,能够准确地鉴别不同细菌种群之间的遗传差异,具有广泛的应用价值。
SNPSNP,念法为〔snIp〕,全称Single Nucleotide Polymorphisms,是指在基因组上单个核苷酸的变异,包括转换、颠换、缺失和插入,形成的遗传标记,其数量很多,多态性丰富。
从理论上来看每一个SNP 位点都可以有4 种不同的变异形式,但实际上发生的只有两种,即转换和颠换,二者之比为2:1[1] 。
SNP 在CG 序列上出现最为频繁,而且多是C转换为T ,原因是CG中的C 常为甲基化的,自发地脱氨后即成为胸腺嘧啶。
一般而言,SNP 是指变异频率大于 1 %的单核苷酸变异。
在人类基因组中大概每1000 个碱基就有一个SNP ,人类基因组上的SNP 总量大概是3 ×10E6 个。
因此,SNP成为第三代遗传标志,人体许多表型差异、对药物或疾病的易感性等等都可能与SNP有关。
单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。
它是人类可遗传的变异中最常见的一种。
占所有已知多态性的90%以上。
理论上讲,SNP既可能是二等位多态性,也可能是3个或4个等位多态性,但实际上,后两者非常少见,几乎可以忽略。
因此,通常所说的SNP都是二等位多态性的。
这种变异可能是转换(C T,在其互补链上则为G A),也可能是颠换(C A,G T,C G,A T)。
转换的发生率总是明显高于其它几种变异,具有转换型变异的SNP约占2/3,其它几种变异的发生几率相似。
Wang等的研究也证明了这一点。
转换的几率之所以高,可能是因为CpG二核苷酸上的胞嘧啶残基是人类基因组中最易发生突变的位点,其中大多数是甲基化的,可自发地脱去氨基而形成胸腺嘧啶。
在基因组DNA中,任何碱基均有可能发生变异,因此SNP既有可能在基因序列内,也有可能在基因以外的非编码序列上。
总的来说,位于编码区内的SNP(coding SNP,cSNP)比较少,因为在外显子内,其变异率仅及周围序列的1/5。
SNP分析及其在遗传学中应用情况简介单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)是人类基因组中最常见的遗传变异形式之一。
SNP分析是研究个体之间以及不同种群之间遗传差异的有力工具。
随着高通量测序技术和生物信息学的发展,SNP分析已经成为遗传学研究中的一个重要领域,为我们理解基因变异与疾病风险、药物反应以及个体差异等提供了深入的了解。
SNP分析技术SNP分析的主要技术包括SNP芯片和基于测序的方法。
SNP芯片利用微阵列技术在一块芯片上同时检测大量的SNP位点。
而基于测序的方法则通过对个体基因组的全面测序来获取SNP信息。
两种方法各有优劣势,选择合适的方法应根据研究目的和预算来决定。
SNP在人类遗传学中的应用1. 疾病风险预测SNP与疾病之间存在密切的关联。
通过大规模SNP关联研究(Genome-wide Association Study,GWAS),研究人员已经发现了大量与疾病相关的SNP位点。
这些位点可以用来预测个体患病的风险,对疾病的早期筛查以及制定个性化的治疗方案具有重要意义。
2. 遗传进化研究SNP分析可以帮助我们了解人类和其他物种的遗传演化历程。
通过比较不同种群之间的SNP差异,研究人员可以揭示人类迁徙历史、种群形成以及适应性进化等重要信息。
此外,SNP还能用于研究个体之间的近交程度以及人类的远亲关系。
3. 药物反应预测个体对药物的反应存在很大的差异,这主要受遗传变异的影响。
SNP分析可以帮助我们预测个体对特定药物的反应情况,从而指导临床用药。
例如,根据某些特定的SNP位点,可以预测患者是否对某种药物具有耐药性,以及药物代谢速度的快慢。
4. 父权鉴定和犯罪侦查SNP分析可以利用个体之间的基因型差异来进行父权鉴定和犯罪侦查。
通过比较孩子和母亲、孩子和潜在父亲之间的SNP位点,可以确定孩子的生物学父亲。
此外,对犯罪现场的DNA样本与嫌疑人DNA样本进行SNP分析,还可以帮助警方追踪犯罪嫌疑人。
SNP定位单核苷酸多态性标记遗传相关性的分析方法摘要:SNP(Single nucleotide polymorphisms),即单核苷酸多态性标记,是常见的基因组变异形式之一。
研究SNP在不同基因型间的遗传相关性,对于揭示遗传病理机制、发现新的治疗方法具有重要意义。
本文将介绍SNP定位单核苷酸多态性标记遗传相关性的分析方法,包括SNP定位、组合方案设计、相关性检验等。
1. 引言SNP是在人类基因组中最常见的遗传变异形式,它们以单个核苷酸的替代形式出现,例如碱基A替代为碱基T。
SNP在基因型间的遗传相关性研究,在了解遗传病理机制、发现新的治疗方法等方面具有重要意义。
因此,开展SNP定位单核苷酸多态性标记遗传相关性的分析方法对于科学研究至关重要。
2. SNP定位SNP的定位是研究SNP在基因组中的具体位置,它们可以分布在基因的编码区、调控区、非编码区等。
在SNP定位时,常用的方法是基于高通量测序技术进行SNP筛选和标记定位。
例如,通过整个基因组测序、基因组中的特定区域测序或基因组表达研究中发现的SNP,可以进行SNP标记定位。
3. 组合方案设计为了研究SNP在基因型间的遗传相关性,需要设计合理的组合方案。
组合方案的设计可以基于SNP的相对位置、频率、功能等多个因素进行考虑。
常见的组合方案设计方法包括单SNP分析、多SNP分析和基因组关联分析。
单SNP分析是独立地研究每个SNP和表型之间的关联性。
多SNP分析是同时研究多个SNP和表型之间的关联性,通过考察SNP之间的相互作用来揭示潜在的遗传效应。
基因组关联分析是根据基因组中的SNP分析遗传病理机制和表型之间的关联性。
4. 相关性检验为了确定SNP之间的遗传相关性,需要进行相关性检验。
常用的相关性检验方法包括卡方检验、Fisher精确检验、Pearson相关系数、Spearman秩相关系数等。
卡方检验和Fisher精确检验通常用于研究SNP的分布是否符合预期的基因型频率,以及SNP与表型之间的关联性。
SNP/单核苷酸多态性分析
背景介绍
SNP(single nucleotide polymorphism),即单核苷酸多态性,是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态。
一般来说,一个SNP位点只有两种等位基因,因此又叫双等位基因。
SNP在人类基因组中的发生频率比较高,大约平均每1000个碱基中就有一个多态位点。
有些SNP位点还会影响基因的功能,导致生物性状改变甚至致病。
单核苷酸多态性是研究人类家族和动植物品系遗传变异的重要依据,因此被广泛用于群体遗传学研究(如生物的起源、进化及迁移等方面)和疾病相关基因的研究,在药物基因组学、诊断学和生物医学研究中起重要作用。
服务项目
1.TaqMan探针法
针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增。
探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。
当溶液中存在PCR产物时,该探针与模板退火,即产生了适合于核酸外切酶活性的底物,从而将探针5’-端连接的荧光分子从探针上切割下来,破坏两荧光分子间的PRET,发出荧光。
通常用于少量SNP位点分析(见图1)。
图1.某SNP位点分析结果 A.纯合(G/G) B.杂合(G/T)
2.SNaPshot法
该技术由美国应用生物公司(ABI)开发,是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术,也称小测序,主要针对中等通量的SNP分型项目。
在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中,引物延伸一个碱基即终止,经ABI测序仪检测后,根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点,根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类,从而确定该样本的基因型。
对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。
通常用于10-30个SNP位点分析(见图2)。
图2.人线粒体22个SNP位点的SNaPshot实验结果
3.HRM法
高分辨率熔解曲线分析(HRM)是近几年兴起的SNP研究工具,它通过实时监测升温过程中双链DNA荧光染料与PCR扩增产物的结合情况,来判断是否存在SNP,而且不同SNP位点、是否是杂合子等都会影响熔解曲线的峰形,因此HRM分析能够有效区分不同SNP位点与不同基因型。
这种检测方法不受突变碱基位点与类型的局限,无需序列特异性探针,在PCR结束后直接运行高分辨率熔解,即可完成对样品基因型的分析。
该方法无需设计探针,操作简便、快
速,成本低,结果准确,并且实现了真正的闭管操作(图3)。
图3.某基因的SNP(G>A)进行HRM分析的结果。
A图为熔解曲线,B图为差异图
4.Mass Array法
MassARRAY分子量阵列技术是Sequenom公司推出的世界上领先的基因分析工具,通过引物延伸或切割反应与灵敏、可靠的MALDI-TOF-MS技术相结合,实现基因分型检测。
基于MassARRAY平台的iPLEX GOLD技术可以设计最高达40重的PCR反应和基因型检测,实验设计灵活,分型结果准确性高。
根据应用需要,对数十到数百个SNP位点进行数百至数千份样本检测时,MassARRAY 具有最佳的性价比,特别适合于对全基因组研究发现的结果进行验证,或者是有限数量的研究位点已经确定的情况。
5.Illumina BeadXpress法
采用Illumina公司的BeadXpress系统进行批量SNP位点检测,可以同时检测1-384个SNP位点,往往用于基因组芯片结果确认,适合高通量检测。
微珠芯片具有高密度、高重复性、高灵敏度、低上样量、定制灵活等特点,极高的集成密度,从而获得极高的检测筛选速度,在高通量筛选时可显著降低成本。
送样要求
细胞(≥106)、组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、基因组DNA(≥20μl,浓度≥50ng/μl)。
提供结果
检测SNP的原始数据、数据分析结果及书面报告。
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