超氧化物歧化酶
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超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶,别名肝蛋白、奥谷蛋白,简称:SOD。
SOD是一种源于生命体的活性物质,能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。
对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。
超氧化物歧化酶是1938年Marn等人首次从牛红血球中分离得到超氧化物歧化酶开始算起,人们对SOD的研究己有七十多年的历史。
1969年McCord等重新发现这种蛋白,并且发现了它们的生物活性,弄清了它催化过氧阴离子发生歧化反应的性质,所以正式将其命名为超氧化物歧化酶。
SOD(超氧化物歧化酶)是国际上公认的具有人体垃圾“清道夫”、“抗衰王”、“美容骄子”之称,是对抗“百病之源”活性氧自由基最有力的物质,是近半个世纪以来社会科学界、医学界、生物界最举世瞩目的价值发现,它的研究与发展代表着生物医药的高科技技术发展的前沿,在科技成果及学术领域占据重要的国际地位。
SOD(超氧化物歧化酶)被国家列入生物医药“国家十一五规划”重点项目。
2011年是“国家十二五规划”的第一年,SOD行业将再次跻身国家当前优先发展的高科技产业化项目,标志着中国健康产业链SOD新兴行业的崛起, 使全人类迈入健康经济时代。
利用超氧化物歧化酶(SOD)产业化建设,一方面可架构生物医药、保健食品、日用美容化妆品、化工化学、农业五大版块经济支柱的绿色产业链循环经济圈发展。
另一方面打造SOD科技应用成果转化的孵化器平台引领生化医药美容化妆品食品等行业的新型健康原料的应用,有利于促进再生资源利用,产生巨大的社会效益和经济效益。
一、反应机理超氧化物岐化酶,它催化如下的反应:2O2-+2H+→H2O2+O2O2-称为超氧阴离子自由基,是生物体多种生理反应中自然生成的中间产物。
它是活性氧的一种,具有极强的氧化能力,是生物氧毒害的重要因素之一。
SOD是机体内天然存在的超氧自由基清除因子,它通过上述反应可以把有害的超氧自由基转化为过氧化氢。
尽管过氧化氢仍是对机体有害的活性氧,但体内的过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)会立即将其分解为完全无害的水。
超氧化物歧化酶(SOD)是一种重要的抗氧化酶,它能够将超氧自由基(O2•-)还原为氧(O2)和过氧化氢(H2O2)。
SOD的正常值因不同的检测方法和实验条件而有所差异,以下是一些常见的正常值范围:
1. 血清SOD活性:正常值范围为15-240 U/L。
2. 组织中SOD活性:正常值范围因组织类型而异,例如心肌中SOD活性的正常值为15-30 U/mg蛋白质。
需要注意的是,SOD的正常值范围可能因年龄、性别、疾病等因素而有所不同。
此外,不同的实验室和检测方法也可能会对正常值范围产生影响。
因此,如果需要进行SOD的检测,请咨询医生或专业实验室,以获取准确的正常值范围。
超氧化物歧化酶十大功效超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是一种重要的抗氧化酶,它能够将超氧自由基(superoxide anion, O2-)转化为氧气和过氧化氢,降低自由基反应对人体的损害,具有许多重要的生物学功能。
下面将会介绍超氧化物歧化酶的十大功效。
1. 抗氧化超氧化物歧化酶是细胞内最重要的抗氧化酶之一。
它能够将超氧自由基转化为更稳定的物质,降低自由基反应对细胞的损害,维护细胞内稳态。
2. 抗衰老超氧化物歧化酶能够减少自由基反应引起的细胞氧化损伤,从而减缓细胞老化过程。
3. 抗炎超氧化物歧化酶能够降解氧化还原复合物和过氧化氢,从而减少氧化损伤和炎症反应,并可以增强炎症反应的清除。
4. 抗肿瘤超氧化物歧化酶能够通过调节细胞生长、增殖和凋亡等途径,减少肿瘤细胞的生长和扩散,从而发挥抗肿瘤作用。
5. 促进免疫超氧化物歧化酶能够清除自由基和其他有害物质,从而降低细胞的应激反应和细胞凋亡,同时促进人体自身的免疫作用。
6. 增强心脏功能超氧化物歧化酶能够减少心肌缺血和再灌注损伤,改善心肌代谢和功能,从而增强心脏功能。
7. 保护神经系统超氧化物歧化酶能够清除自由基和其他有害物质,减少氧化损伤对神经细胞的伤害,保护神经系统的结构和功能。
8. 促进消化9. 促进睡眠超氧化物歧化酶能够减少自由基反应引起的身体新陈代谢和应激反应,促进身体的放松和休息,从而促进睡眠。
10. 促进肌肉生长超氧化物歧化酶能够增强肌肉细胞代谢和功能,促进肌肉的生长和修复,同时也有助于降低运动后肌肉的损伤。
总之,超氧化物歧化酶是一种重要的抗氧化酶,具有许多重要的生物学功能,可以对人体起到多种作用,如抗衰老、抗炎、抗肿瘤等。
人体超氧化物歧化酶低
人体超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是一种重要的酶类抗氧化物质,它在细胞中起着保护作用,帮助中和有害的超氧阴离子(superoxide radicals)。
如果人体超氧化物歧化酶水平降低,可能会导致以下影响:
1.氧化应激:超氧阴离子是一种高度反应性的自由基,当其
积累而缺乏足够的SOD来中和时,可能会导致细胞和组织的氧化应激,使细胞受损。
这可能与一些疾病如癌症、心血管疾病、神经退行性疾病和炎症相关。
2.炎症反应:SOD对抗氧化应激并自然应答炎症反应。
低水
平的SOD可能导致炎症反应增强,使身体更容易受到炎症引起的损伤。
3.衰老:氧化应激与细胞衰老过程密切相关。
SOD的降低可
能加速细胞的衰老,导致身体组织和器官功能下降。
对于SOD低水平的情况,可以考虑以下措施:
1.饮食调整:增加摄入富含SOD协同物质的食物,如维生素
C、E、锌和铜等。
蔬菜、水果、坚果、谷物和海鲜等食物
中含有丰富的抗氧化剂,有助于提高抗氧化能力。
2.锻炼和减轻压力:适度的锻炼和压力管理可以提高体内的
SOD水平,减少氧化应激。
3.补充SOD:在一些情况下,可以考虑口服SOD补充剂,但
一定要在医生的指导下进行。
需要指出的是,如果有关于SOD水平的担忧,建议咨询医生以获取更准确的评估和建议。
医生可以根据的具体病情和身体状况,为提供更为个性化的治疗方案。
mn型超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,简称SOD)是一类专一催化超氧自由基(Superoxide,O2^-)转化成分子氧(O2)和过氧化氢(Hydrogen Peroxide,H2O2)的酶。
这一反应对维持细胞内氧化还原平衡以及保护细胞免受氧化损伤具有重要作用。
超氧自由基是含有未配对电子的高活性氧分子,即它们具有强氧化性。
在正常细胞代谢过程中,细胞产生一定量的超氧自由基,如果不能及时转化成分子氧和过氧化氢,将会对细胞结构和功能造成严重伤害。
而SOD则扮演着细胞防御系统的重要角色,促进超氧自由基的正常代谢。
根据金属离子辅助的催化反应机制,超氧化物歧化酶被分为三类:Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和Fe-SOD。
其中,Mn-SOD是一种金属离子为锰的超氧化物歧化酶。
它广泛存在于细菌、植物和动物的细胞内,起到了重要的保护作用。
Mn-SOD能够高效催化超氧自由基的歧化反应,将其转化为无害的氧分子和过氧化氢。
这一反应不仅减少了细胞内的有害氧化物,还提供了细胞活动所需的分子氧供给。
此外,经过丰富的研究表明,Mn-SOD还能够参与调节细胞的再生和凋亡过程。
由于Mn-SOD在维持细胞功能和健康方面的重要作用,其活性的变化会直接反映在机体的疾病发生和发展过程中。
例如,大量的研究表明,Mn-SOD活性的下降与多种疾病的发生相关,如神经系统疾病、心血管疾病和癌症等。
因此,科学家们通过对Mn-SOD的研究,解析其活性调控机制,有望为疾病的预防和治疗提供新的思路和方法。
进一步研究Mn-SOD的结构和功能,不仅有助于揭示其催化反应的分子机制,也可以为开发针对其活性调控的药物提供基础。
通过人工合成活性类似物和调控剂,或通过基因工程改良同源蛋白的催化性能,对调节细胞内的氧化还原平衡,改善机体的整体健康具有重要意义。
总之,Mn-SOD作为一种重要的超氧化物歧化酶,在维持细胞内氧化还原平衡方面起到至关重要的作用。
超氧化物歧化酶245原因
超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是一种重要的
抗氧化酶,它在细胞内起着重要的保护作用。
SOD245是指SOD家族
中的一种特定类型的超氧化物歧化酶。
关于SOD245的研究还比较有限,但是有一些可能的原因可以解释SOD245的重要性和功能。
首先,SOD245可能在细胞内起着特定的调节作用。
SOD家族中
的不同类型的超氧化物歧化酶可能在不同的细胞类型或生理状态下
发挥特定的功能,包括对抗氧化应激、细胞信号传导等方面。
因此,SOD245可能在特定的细胞环境中扮演着重要的角色。
其次,SOD245可能与一些疾病或生理过程相关联。
研究表明,
超氧化物歧化酶在神经退行性疾病、炎症性疾病等方面可能发挥着
重要的作用。
因此,SOD245的异常表达或功能可能与某些疾病的发
生和发展有关。
此外,SOD245的结构和功能也是研究的重要方向。
科学家们对SOD245的结构和催化机制进行研究,以揭示其在抗氧化过程中的作
用机制,这些研究有助于我们更好地理解SOD245的生物学意义。
总的来说,SOD245作为超氧化物歧化酶家族中的一员,可能在细胞内起着重要的调节作用,与疾病发生发展相关,并且其结构和功能也是科学家们关注的焦点。
希望未来能够有更多的研究揭示SOD245的生物学功能和临床意义。
植物超氧化物歧化酶的性质和功能植物是地球上最主要的生物,是氧气和有机物的主要生产者。
然而,自由基反应和氧化损伤在植物生长发育过程中也起着重要作用,因此植物必须拥有一定的自我保护机制,以对抗氧化损伤。
超氧化物歧化酶(SOD)是一种重要的抗氧化酶,存在于植物细胞中。
SOD能够催化超氧阴离子的歧化反应,将其转化为氧气和过氧化氢,从而保护细胞免受氧化损伤。
植物SOD主要分为三种类型:铜锌SOD(Cu/ZnSOD)、铁SOD(FeSOD)和钴SOD(CoSOD)。
这些不同类型的SOD有不同的催化活性的中心,表现出各自独特的性质和功能。
1. 铜锌SOD铜锌SOD是植物中最广泛分布的一种SOD。
它包含有两个金属中心:一个铜离子和一个锌离子。
铜锌SOD能够在抗氧化过程中发挥重要的作用。
铜离子主要用来催化超氧歧化反应,而锌离子则有助于保持蛋白质的结构和稳定性。
铜锌SOD通常存在于细胞质和叶绿体中,对于维护细胞的抗氧化平衡和保护光合作用的正常进行至关重要。
2. 铁SOD铁SOD是一种具有极高抗氧化活性的SOD。
它被认为是各种组织和器官中最有效的抗氧化酶之一,具有重要的生物学功能。
铁离子是铁SOD催化活性中心的组成部分。
它能在反应中起到催化作用,同时也会引入自由基产生氢氧化物。
尽管如此,铁SOD仍然是一种非常重要的抗氧化酶,可用于保护细胞免受自由基损伤。
3. 钴SOD钴SOD是一种广泛分布于植物玄武岩和钴矿物质富集区的SOD。
这种SOD的活性中心包含有一个钴离子。
它能够催化超氧阴离子的歧化反应,从而产生氧和过氧化氢,保护细胞免受氧化损伤。
总的来说,植物SOD酶能够对抗氧化损伤,保护植物免受自由基和其他氧化物质的伤害。
铜锌SOD、铁SOD和钴SOD分别有不同的催化活性主要用于不同的生物学系统。
这些酶在植物生长发育和抗病性上发挥着重要的作用,是植物生理学研究领域中一个重要的分支。
植物超氧化物歧化酶
植物超氧化物歧化酶是一种重要的酶类,它能够将超氧自由基转化成较为稳定的氧气和过氧化氢。
超氧自由基是一种高度活性的氧化物质,会对细胞产生损伤,而植物超氧化物歧化酶的存在能够帮助植物应对各种环境压力,如病毒感染、氧气浓度变化等。
植物超氧化物歧化酶的基因在不同的植物中具有差异,但它们的结构和功能基本相似。
该酶的基本结构由两个相同的亚基组成,每个亚基中含有一个金属离子中心,可以接受并转移电子。
在植物超氧化物歧化酶的催化过程中,超氧自由基首先结合到酶的活性中心上,接着被还原成过氧化氢和氧气。
这个过程中需要用到一些辅助因子,如还原型谷胱甘肽等。
植物超氧化物歧化酶在植物的生长和发育过程中发挥着重要的作用,它不仅可以帮助植物抵御各种环境压力,还可以调节植物的细胞分化和组织发生等过程。
因此,研究植物超氧化物歧化酶的结构和功能对于揭示植物生物学的重要机制具有重要的意义。
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超氧化物歧化酶的研究进展一、本文概述超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)是一类重要的抗氧化酶,它在生物体内发挥着至关重要的角色,负责清除由氧代谢产生的活性氧自由基——超氧阴离子。
由于其在抗氧化防御系统中的重要地位,超氧化物歧化酶的研究一直是生物学、医学和农业科学等多个领域的热点。
本文旨在综述近年来超氧化物歧化酶的研究进展,包括其分子结构、生物学功能、表达调控机制、活性检测方法以及在疾病治疗和农业生物技术中的应用等方面。
通过深入了解和探讨超氧化物歧化酶的研究现状和未来趋势,以期为相关领域的研究提供有价值的参考和启示。
二、SOD的结构与功能超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,简称SOD)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,具有抗氧化和清除自由基的重要作用。
SOD的分子量因其来源和类型的不同而有所差异,但其基本结构都包含有一个或多个金属离子(如铜、锌、锰或铁)以及与之结合的氨基酸残基。
在结构上,SOD通常以同源或异源二聚体的形式存在,其活性中心包含有一个或多个金属离子,这些金属离子通过配位键与蛋白质中的氨基酸残基相连。
SOD的活性中心结构使其具有高效的催化活性,能够迅速将超氧阴离子自由基(O2-•)歧化为过氧化氢(H2O2)和氧气(O2)。
在功能上,SOD的主要作用是清除生物体内产生的超氧阴离子自由基。
超氧阴离子自由基是一种高度活性的自由基,可以引发一系列的氧化反应,导致生物大分子的损伤和细胞死亡。
SOD通过将其歧化为过氧化氢和氧气,从而有效地清除了超氧阴离子自由基,保护了生物体免受氧化应激的损害。
SOD还具有调节细胞信号转导、维持细胞稳态和增强免疫力等多种功能。
研究表明,SOD在抗氧化防御系统中起着关键作用,能够抵抗外源性和内源性氧化应激的影响,维护细胞的正常功能和生命活动的进行。
随着对SOD结构与功能的深入研究,人们发现不同来源和类型的SOD具有不同的催化特性、底物亲和力和组织特异性。
总超氧化物歧化酶和超氧化物歧化酶说到总超氧化物歧化酶和超氧化物歧化酶,很多朋友可能一听就头大。
到底是啥玩意儿?怎么这么复杂?其实呢,这些东西就在我们体内,平时我们根本不觉得它们存在,但是它们一旦出问题,后果可是大大的严重,咱们身体的“小卫士”可不是浪得虚名。
别看它们名字一长一短,其实作用是超级重要的。
说白了,它们都是帮忙清理身体垃圾的,特别是清除那些让你衰老、得病的小颗粒——超氧化物。
你问我它们是怎么做到的?很简单,它们有点像是细胞里的垃圾清道夫,拿着“歧化”这种技能,把超氧化物从“有害”转变成“无害”的东西,然后丢掉。
超氧化物歧化酶是什么呢?一开始它其实是帮助我们清除超氧化物的,但它又不是随随便便就能做这个活的,得通过一个叫做“催化”的过程。
就像是超级英雄变身之前要先有个准备过程,超氧化物歧化酶也是一样,只有经过正确的准备,它才能快速、有效地完成任务。
这一点,很多人可能没意识到。
你想想,一个没有超氧化物歧化酶的细胞,里面积累的超氧化物越多,那就相当于细胞的“健康警报”响个不停,时间一长,身体老化、免疫力下降,各种问题就接踵而来。
而“总超氧化物歧化酶”是什么呢?其实它就是一个集大成者,拥有几种超氧化物歧化酶的总合体,能在不同的环境中变换角色。
这就像你看一场电影,有不同的演员轮番登场,有主角,也有配角。
总超氧化物歧化酶就像是这种大合演,能够根据身体需要“调配”这些超氧化物歧化酶的“演员”,一旦细胞出问题,它们就会立马上场。
换句话说,总超氧化物歧化酶能够让每个“歧化酶”发挥最大的效力,确保身体健康不会出差错。
这时候你可能会好奇了,既然它们这么厉害,那它们会自己不小心“死机”吗?其实是有可能的。
比如,如果你老是熬夜,暴饮暴食,或者压力大到不行,总超氧化物歧化酶的数量可能会下降,那时候你就容易出现身体代谢不顺畅、抗氧化能力下降的情况,甚至很容易生病。
你看,超氧化物歧化酶就是这么个讲究平衡的“高手”,只要你给它环境,它就能在细胞里发挥最大效用。
超氧化物歧化酶的生产技术概述超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,缩写为SOD)是一种广泛存在于生物体中的酶,具有重要的生理功能。
它通过将超氧阴离子(O2-)转化为氧分子(O2)和氢氧离子(H2O2),起到抗氧化和抗炎作用。
在工业应用和科学研究中,人们对SOD的生产技术进行了深入研究和开发。
本文将介绍超氧化物歧化酶的生产技术,主要包括酶源的选择、发酵条件的优化以及酶的提取和纯化过程。
酶源的选择超氧化物歧化酶广泛存在于动、植物以及微生物等生物体中。
不同生物体中的SOD具有不同的特点和催化活性,因此在生产过程中需要根据需求选择合适的酶源。
常用的酶源包括黄豆、大豆、绿豆等植物,以及人体组织中的淋巴细胞、红细胞和肝细胞等。
此外,一些微生物如大肠杆菌、酵母等也可以作为SOD的酶源。
在选择酶源时,需要考虑生产成本、酶的活性以及生物安全性等因素,综合评估选择合适的酶源。
发酵条件的优化超氧化物歧化酶的生产通常借助于发酵技术,通过培养和扩增酶源生物体,使其表达和产生更多的SOD。
为了提高酶的产量和活性,需要对发酵条件进行优化。
1.培养基选择:根据酶源的不同,选择适宜的培养基组分和配方。
常用的培养基包含碳源、氮源、矿质盐和缓冲剂等。
其中,添加适量的辅助因子如镁离子、重金属离子等可提高发酵效果。
2.发酵温度和pH值:适宜的发酵温度和pH值能够促进酶的生长和表达。
常见的发酵温度为25°C-37°C,pH值为6.0-8.0。
需要根据酶源的特性进行调节。
3.氧气供应:超氧化物歧化酶是一种依赖氧气的酶,因此需要提供足够的氧气供应。
常用的发酵方式包括摇瓶培养和槽式发酵,通过控制搅拌速率和通气速率等参数来满足氧气需求。
4.发酵时间:合理控制发酵时间有助于提高SOD的产量和活性。
通常情况下,发酵时间在24-72小时之间。
酶的提取和纯化在获得发酵液后,需要对中含有SOD的细胞或液体进行酶的提取和纯化,以提高酶的纯度和活性。
超氧化物歧化酶(SOD)
的生产工艺研究
摘要
本文主要介绍SOD的作用和两种不同的生产工艺。通过一种
传统的SOD生产工艺和一种利用选择性热变性的方法的牛血
SOD提取生产工艺的对比研究从而反应出,由如今对SOD的需
求而需要一种较新的生产工艺来取代传统工艺。讨论如何保证质
量,提高酶的回收率和降低成本。
前言
在人体的正常新陈代谢就会产生自由基、是人体活动所需要
的,但在某些特殊的情况下,体内会产生过量的自由基。如辐射、
电磁波、汽车尾气、工业废气、废水的污染均会让体内产生过量
的自由基。而自由基不到会引起人体衰老,还会让人体产生各种
疾病如风湿性关节炎、癌症、高血压、肾脏病、白内障等等。SOD
是生物体内重要的抗氧化酶,广泛分布于各种生物体内,如动物,
植物,微生物等。SOD具有特殊的生理活性,是生物体内清除
自由基的首要物质。SOD在生物体内的水平高低意味着衰老与
死亡的直观指标;现已证实,由氧自由基引发的疾病多达60多
种。它可对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害,并及时修复
受损细胞,复原因自由基造成的对细胞伤害。由于现代生活压力,
环境污染,各种辐射和超量运动都会造成氧自由基大量形成;因
此,生物抗氧化机制中SOD的地位越来越重要!
关键字: SOD 猪血 分离纯化 鉴定
材料:牛血、猪血、0.9%NaCl、95%乙醇、氯仿、丙酮、去离子
方法一:
工艺流程图
工艺要点: ⑴收集、浮洗 新鲜猪血经离心去除黄色血浆,红细胞
用0.9%NaCl溶液离心浮洗3次,收集红细胞。
⑵溶血、去血红蛋白 收集洗净的红细胞,加去离子水,在5℃
下搅拌30min,然后加入0.25倍体积的95%乙醇和0.15倍体积的
氯仿,搅拌15min;离心去血红蛋白,收集上清液。
⑶沉淀、热处理 将上清液加入1.2~1.5倍体积的丙酮,产生絮
状沉淀;离心去上清液,得沉淀物,操作要在0℃左右进行;沉
淀物加适量蒸馏水使其溶解,离心除去不溶性蛋白;上清液于
55~65℃热处理10~15min,离心除去热变性蛋白,收集黄绿色澄清
液。⑷沉淀、去不溶蛋白 0℃条件下,在澄清液中加入适量丙
酮,使其产生大量絮状沉淀;离心弃去上清液,沉淀用去离子水
溶解;离心除不溶性蛋白;上清液置透析袋中,得透析液。
⑸吸附、洗脱 将透析液加到用2.5mmol/L、PH7.6的磷酸缓冲
液平衡好的DEAE Sephadex A50柱上吸附,用2.5~5mmol/L、
PH7.6磷酸钾缓冲液梯度洗脱,收集SOD活性洗脱液。猪血SOD
的吸收峰为250nm
⑹超滤、冻干 将SOD活性洗脱液超滤浓缩后,冷冻干燥,即
可得外观带线蓝色的Cu/Zn-SOD成品。
方法二:
工艺流程图
⑴溶血液制备:新鲜牛血以3.8%柠檬酸钠抗凝血球分离机分离红
细胞,加2倍无离子水搅拌溶血30min。
⑵选择性热变性:溶血液泵入夹层反应釜,搅拌、蒸汽加热至
68℃,加入适量蛋白质沉淀剂使血红蛋白变性后,将反应液泵入
冷却罐,搅拌机搅拌,迅速冷却至15℃,按反应液总体积补加
适量蛋白质沉淀剂,搅拌1h,甩干过滤去除变性血红蛋白,过
滤液3000rpm20min低速离心,去除颗粒沉淀物。
⑶超滤浓缩:上清液经微孔过滤去除细微颗粒,经超滤器超滤浓
缩至总体积的1/200,收集浓缩液。
⑷丙酮沉淀:超滤浓缩液预冷至4℃,加入等体积预冷的工业丙
酮,放置1h,4000rpm30min冷冻离心,沉淀用少量无离子水回
溶,对无离子水透析12h,4000rpm30min冷冻离心,收集上清液。
柱层析:经处理的DEAE-52装柱,用25mM/Lph7.8PB缓冲液,
缓慢上样,用ph7。8PBS 25-200mM/L梯度洗脱,收集SOD部
分,对无离子水透析12h。
⑸冷冻干燥:透析后的酶液经浓缩,置冻干机内冷冻干燥,升温
速率控制在5℃/h
鉴定方法
SOD酶活力测定:采用邻苯三酚自氧化法,25℃自氧化速率0.07,
PH8 2,50mM Tris-Hcl缓冲液
蛋白质浓度测定:采用Lowry法,以250ug/ml BSA作标准曲线
分子量测定:采用SDS-PAGE电泳法,浓缩胶3.5%分离胶10%
紫外吸收光谱检测:扫描波长发威230~300nm。
结果与讨论
血SOD的制备从实验室走向规模工业化生产,关键问题在于
保证质量,提高酶的回收率和降低成本,通过多次重复实验与研
究,建立了红细胞连续分离技术,并证明冷冻血球和新鲜血球制
备的SOD在收率、纯度、比活等发面无明显差别;。两种方法的
工艺流程做比较,方法二的稍微要简单一点,虽然两个流程均是
用分离纯化的方法来提取SOD但是,方法二利用了热变性来去
除血红蛋白,与方法一做比较中省去了传统工艺中所用的大量氯
仿和乙醇;利用超滤技术浓缩提取液可大幅度度减少丙酮用量;
应用SOD重组技术,对SOD生产中丢失铜锌离子的酶蛋白恢复
酶的催化活性,方法二的工艺在保证SOD质量和收率的前提下
有效降低成本。牛血SOD的制备从实验室走向规模工业化生产,
关键问题在于保证质量,提高酶的回收率和降低生产成本。