HPLC法测定桂枝中桂皮醛和肉桂酸的含量

２００９年第２６卷第４期　Ｖｏ１．２６，Ｎｏ．４，２００９　中　医　药　信　息　Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｎ　Ｉ’ｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　·１９·　

表２不同测定方法下颠茄流浸膏中生物碱和阿托品含量的比较　

由表可见二种方法的测定结果呈现出一定的相关　

性，但一批原料的含量特别低，即可能由于原料质量问　

题间接造成制剂中的阿托品含量过低。　

为此，拟规定本品含颠茄流浸膏按阿托品计，每片　

不得少于９．７　ｇ，即每２０片含量不得少于０．１９ｍｇ。　

依据为按理论值每片为２．６×０．７％／１０００＝１８　ｇ，扣　

除回收率，再下折６０％得９．７　ｇ（考虑到本品含量极　

低，并实际６０％×８８．８％＝５３．３％）。同时建议生产　

厂家在投料前对使用的颠茄流浸膏严把质量关，并采　

用本方法测定阿托品的含量（颠茄流浸膏标准中规定　的含量测定方法为容量法，某些含有相同基团的托烷　

生物碱类物质的存在会造成结果偏高，而采用色谱法　

则降低了这种可能性的存在），用以决定是否符合投　

料要求。此外，本品种各企业间的处方存在较大差异，　

是否个别企业处方不合理造成了被测成分的快速降　

解，需要在执行标准过程中进一步验证。　

３讨论　

３．１方法的选择　

由于复方氢氧化铝片所含莨菪碱甚微，取样量大，　

前处理复杂，同时考虑到检测灵敏度，用ＨＰＬＣ方法不　

合适，故选择ＧＣ方法测定。　

３．２色谱柱的选择　

色谱柱的柱效与涂布技术和填柱技术有关。我们　

涂布填充了６根色谱柱，仅成功一半，柱效高的理论板　

数可达１５００，低的仅为５００。当柱效在５００以上时能　

够满足本品种的阿托品的含量测定。　

ＨＰＬＣ法测定桂枝中桂皮醛和肉桂酸的含量　

王连芝，蒋维谦　

（黑龙江中医药大学中医药研究院，黑龙江哈尔滨１５００４０）　

摘要：目的：建立ＨＰＬＣ法测定桂枝中桂皮醛和肉桂酸含量。方法：采用Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ１８（２５０ｍｍ×　

４．６ｍｍ，５　ｍ）色谱柱，以乙腈一０．１％磷酸溶液（３８：６２）为流动相，流速为１．０ｍｌ·ｍｉｎ～，检测波长为　

２７６ｎｍ和２８９ｎｍ双波长扫描。结果：样品中桂皮醛的平均回收率为９９．４８％，ＲＳＤ为１．２１％；肉桂酸的　

平均回收率为９８．７６％，ＲＳＤ为１．２９％；桂皮醛在０．０１～Ｏ．０３之间峰面积与浓度线性关系良好（ｒ＝　

０．９９９８）；肉桂酸在０．００２～０．０１　ｇ之间峰面积与浓度线性关系良好（ｒ＝０．９９９７）。结论：该实验方法简　

便，重现性好，回收率高，可作为同时测定桂枝中桂皮醛和肉桂酸含量的方法。　

关键词：桂皮醛；肉桂酸；高效液相色谱法；桂枝　

中图分类号：Ｒ９２７．２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００２—２４０６（２００９）０４—００１９—０２　

桂枝为樟科植物肉桂（Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ　ｃａｓｓｉａ　Ｐｒｅｓ１）　

的干燥嫩枝，具有发汗解肌、温通经脉、助阳化气、平冲　降气之功效…。桂枝中含有的主要成分桂皮醛（Ｃｉｎ—　

ｎａｍａｌｄｅｈｙｄｅ）和肉桂酸（Ｃｉｎｎａｍｉｃ　ａｃｉｄ）的药理研究表　明：桂皮酸具有抗菌、消炎作用　２　；桂皮醛具有镇静、　

镇痛和解热作用　Ｊ。本文建立了同时测定桂枝中两　

基金项目：黑龙江中医药大学科研基金项目（２００７４５）　

作者简介：王连芝（１９７３一），女，助理研究员，主要从事中药药效物质基　础及其质量标准的研究。　收稿日期：２００８—１２—０８　修回日期：２００９—０ｌ一１５　种有效成分含量的方法，该方法简便、准确，可为桂枝　

的质量控制研究提供依据。　

１仪器与试药　

１．１仪器Ｗａｔｅｒｓ２６９５—２９９８型高效液相色谱仪；　

ＫＱ一３００ＶＤ型双频数控超声清洗器；ＦＡ１１０４电子分　

析天平。　

１．２试药桂皮醛和肉桂酸对照品（中国药品生物　

制品检定所，批号分别为ｌｌ１７１０—２００５１３、１１０７８６—　

２００５０３）；乙腈（色谱纯）；其余试剂为分析纯；桂枝饮　

片（广东）。　

２方法和结果　２．１色谱条件色谱柱：Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　

Ｃ１８（２５０ｍｍ×４．６　２Ｏ·　中　医　药　信　息　ＩｎｆｏｒｍａｌＯｌｌ　Ｏｉｌ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　２００９年第２６卷第４期　Ｖｏ１．２６，Ｎｏ．４，２００９　

ｍｍ，５　ｍ）；柱温：２５ｏＣ；流动相：乙腈一０．１％磷酸溶液　

（３８：６２）；检测波长：２７６ｎｍ和２８９ｎｍ双波长扫描；流　

速：１．０ｍｌ·ｍｉｎ～；进样量：１０ｔｄ。　

２．２供试品溶液制备取本品中粉约１．０ｇ，精密称　

定，置１００ｍｌ锥形瓶中，加甲醇５０ｍｌ，超声处理（功率　

２４０Ｗ，频率４５ｋＨｚ）３０ｍｉｎ，放冷，补足减失的重量，摇　

匀，滤过，取续滤液５ｍｌ，置２５ｍｌ量瓶中，加甲醇定容　

至刻度，即得。按２．１项下色谱条件进行测定，色谱图　

见图１　３。　

图１　桂皮醛对照品溶液色谱图　

图２　肉桂酸对照品溶液色谱图　

图３桂枝药材溶液色谱　２．３线性关系考察精密吸取桂皮醛对照品适量，加　甲醇制成每ｌｍｌ含０．０５ｔｘｌ的溶液，即得桂皮醛对照品　

储备液。分别精密吸取上述储备液２ｍｌ、３ｍｌ、４ｍｌ、　

５ｍｌ、６ｍｌ，置于１０ｌｌｌｌ容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，制　

成不同浓度的桂皮醛对照品溶液。精密称取肉桂酸对　

照品适量，加甲醇制成每１ｍｌ含１／ｘｇ的溶液，即得肉桂　

酸对照品储备液。分别精密吸取肉桂酸储备液２ｍｌ、　

４ｍｌ、６ｍｌ、８ｍｌ、１０ｍｌ，置于１０ｍｌ容量瓶中，用甲醇稀释　

至刻度，制成不同浓度的肉桂酸对照品溶液。分别取　

以上各对照品溶液进样ｌＯＩｘｌ，按上述色谱条件测定峰　

面积，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标绘制标准曲　

线，桂皮醛和肉桂酸的回归方程和相关系数（ｎ＝５）分　另０为：Ｙ＝一８．８２７×１０５＋１．８１９×１０７Ｘ，ｒ＝０．９９９８；Ｙ　

８．３１５×１０３＋５．８６８×１０７Ｘ，ｒ＝０．９９９７，线性范围分　

别为０．０１—０．０３ｎｌ和０．００２～Ｏ．０１　ｇ之间。　

２．４精密度试验取桂皮醛和肉桂酸对照品混合溶　

液（浓度分别为０．０２５ｔｘｌ·ｍｌ　和０．５　ｇ·ｍｌ　），进样　

体积１０　ｌ，连续进样５次，测定其峰面积积分值，其　

ＲＳＤ分别为０．９９％和０．５９％，表明仪器的精密度良　

好。　２．５重现性试验精密称取药材粉末５份，依２．２项　

下方法制备并测定桂皮醛和肉桂酸的含量，ＲＳＤ分别　

为０．３２％和０．６９％，表明该实验方法重现性良好。　

２．６稳定性试验精密称取药材粉末１ｇ，依２．２项　

下方法制备供试品溶液，每隔２ｈ进样１次，共进样５　

次，测定结果ＲＳＤ分别为０．７８％和０．７２％，表明该样　

品溶液在８ｈ内稳定。　

２．７回收率试验精密称取桂枝药材粉末５份，每份　

０．５ｇ，分别精密加人桂皮醛对照品２　和肉桂酸对照　

品０．０６ｍｇ，按２．２项下方法进行样品处理，计算回收　

率，桂皮醛的平均回收率为９９．４８％，ＲＳＤ为１．２１％，　

肉桂酸的平均回收率为９８．７６％，ＲＳＤ为１．２９％，表明　

该实验方法的回收率较高。　

２．８样品测定精密称取药材粉末１．０ｇ，按２．２项　

下方法处理，并进行高效液相分析，计算样品中桂皮醛　

和肉桂酸的含量分别为５．２ｔｄ·ｇ　和０．１４　ｍｇ·ｇ～。　

３讨论　

３．１本实验通过高效液相色谱的方法，同时测定了桂　

枝中主要成分桂皮醛和肉桂酸的含量，通过全波长扫　

描，桂皮醛和肉桂酸分别在２７６ｎｍ和２８８ｎｍ处有最大　

吸收，因此选择双波长扫描同时测定桂枝药材中桂皮　

醛和肉桂酸的含量。　

３．２本实验考察了索式回流提取，水浴回流提取，超　

声提取，冷浸四种提取方法的提取效果，结果以超声提　

取方法进行提取的样品含量高。　

３．３在以超声提取为提取方法的基础上，考察了提取　

溶剂和提取时间，结果以甲醇为溶剂，超声提取３０ｍｉｎ　

为最佳提取条件。　

３．４在桂枝药材的含量测定过程中，试用了乙腈一　

０．１磷酸水溶液不同比例为流动相系统，结果以乙腈　

０．１磷酸水溶液（３８：６２）系统分离效果好，具有出峰　

快，分析时间短的特点。　

参考文献：　［１］　国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［ｓ］．北京：化学　工业出版社，２００５：２２４—２２５．　［２］Ｗｅｎ—ｓｈｅｎｇ　Ｃｈａｎ，Ｐｏ—ｃｈｉｎ　Ｗｅｎ，Ｈｓｕｉｃｈ—ｃｈｉｎｇ　Ｃｈｉａｎｇ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｏｆ　ｃａｆｆｅｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎａｌｏｇｕｅｓ　ｏｎ　ｘａｎｔｈｉｎｅ　ｏｘｉｄａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９５（１５）：７０３—７０５．　［３］　肖培根．新编中药志（第三卷）［Ｍ］．北京：化学工业出版社，　２００２：８１４．