梅毒抗体检测中RPR和TPPA是什么区别是什么RPR滴度如何表达资料
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梅毒抗体检测中RPR和TPPA是什么区别是什么
RPR滴度如何表达
综述
螺旋体(spirochete)是一类界于细菌与原虫之间、细长、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。
螺旋体(Spirochaeta)细长、柔软、弯曲呈螺旋状的运动活泼的单细胞原核生物。
全长3~500微米,具有细菌细胞的所有内部结构。
在生物学上的位置介于细菌与原虫之间,螺旋体广泛分布在自然界和动物体内。
与细菌的区别在生物学上的位置介于细菌与原虫之间。
它与细菌的相似之处是:具有与细菌相似的细胞壁,内含脂多糖和胞壁酸,以二分裂方式繁殖,无定型核(属原核型细胞),对抗生素敏感;与原虫的相似之处有:体态柔软,胞壁与胞膜之间绕有弹性轴丝,借助它的屈曲和收缩能活泼运动,易被胆汁或胆盐溶解。
在分类学上由于更接近于细菌而归属在细菌的范畴。
当人体感染梅毒螺旋体后4~10 周左右,血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性反应素(主要是IgM、IgG)和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体(主要是IgM、IgG)。
这些抗体均可用免疫学方法进行检测。
血清学检查是辅助诊断梅毒的重要手段。
根据检测所用抗原不同,梅毒血清学试验分为两大类:一类为非梅毒螺旋体抗原血清试验,包括VDRL 玻片试验、USR 玻片试验、RPR 试验、TRUST 试验,这些试验主要应用于梅毒的筛查和疗效观察。
另一类为梅毒螺旋体抗原血清试验,包括TPHA 试验、TPPA 试验、FTA-ABS 试验、ELISA试验等。
这些试验主要用于梅素确诊试验,不用于疗效观察。
非梅毒螺旋体抗体主要是抗心磷脂抗体,其特点是出现相对较晚,一期梅毒早期常阴性。
通过检测非梅毒螺旋体抗体的非梅毒螺旋体抗原血清试验特点是敏感性强,但是特异性较差。
那理解成RPR敏感性强,但是特异性较差也无不可。
梅毒螺旋体抗体是抗螺旋体本身特异性蛋白的抗体,其特点是比心磷脂抗体出现早。
通过检测梅毒螺旋体抗体的梅毒螺旋体抗原血清试验特点是敏感性稍
差,但是特异性较强。
您理解成TPPA敏感性稍差,但特异性稍强也可以。
RPR还有一个特性,梅毒治愈后可以转阴,因此多利用RPR作为跟踪治疗效果的一种检查。
注意:梅毒治疗后一定要坚持复查3年的RPR结果,以作为梅毒是否治愈判断的依据。
TPPA也有了个特性,梅毒治愈后不会转阴,基本上跟着一辈子。
TPPA就像一个「疤」,不能够去除,表示以前很可能感染过梅毒。
因此TPPA不能作为梅毒疗效判定的一个标准。
RPR检测的范围要比真正的梅毒抗体广,因此,RPR可以作为筛查,这样如果是真正的梅毒,漏诊的机率就小很多。
但是,由于RPR敏感性强,有很多本身不是梅毒的RPR也可能包含进来了,因此「误诊」的机率也比较大。
TPPA 就相反,相对梅毒真正的抗体,检测的范围要小,但是只是TPPA阳性的,梅毒真实的抗体也很可能是阳性。
但是TPPA也有缺点,因为一部分真正梅毒抗体阳性的TPPA检测不出来
如何利用RPR和TPPA判断病情,首先是利用RPR作为筛查,只要是RPR 阳性的,就可能是梅毒。
但是本身不是梅毒的疾病也会出现RPR阳性。
如常见的结缔组织病,急性感染等。
再利用TPPA经过确证实验,如果RPR和TPPA 全部阳性的,结合临床表现、流行病学史就可以诊断为梅毒了。
如果是RPR阳性,TPPA阴性
1、RPR滴度是多少,如果RPR滴度达到1:32以上,很可能是梅毒,建议要进行正规的治疗,并且随访3年。
2、RPR滴度比较低,那近期有没有过婚外性接触,如果有,可以每月复查一次,也可以进行正规的驱梅治疗。
3、RPR满意度比较低,近期也无婚外性接触史,那是否近期有过其它感染史,或者其它疾病,如怀孕、SLE等,如果有建议随访。
如果是RPR阳性,TPPA阴性
1、如果以前感染过梅毒但是没有治疗过,此时可能已转为潜伏梅毒,建议要进行正规的治疗,并且随访3年。
2、如果以前感染过梅毒并且正规治疗过,但是没有经过正规的3年复查,建
议复查随访一段时间。
3、如果以前感染过虽然治疗过,但是不正规,建议进行正规的驱梅治疗,并且随访3年。
4、不知道以前是否感染过梅毒,建议最好进行正规的驱梅毒治疗,并且随访3年。
如果是RPR阴性,TPPA阳性结合临床:可能是梅毒治愈,可能是潜伏期梅毒,随访。
图中红色的部分代表实际的梅毒疾病的全部患者,明显少于蓝色的范围,它不能够被蓝色的范围全部包含,而且蓝色的范围有相当一部分不在红色的范围。
黑色部分明显小于红色部分说明不是梅毒全部患者TPPA都呈阳性反应,相反有一
小部分不在红色范围。
这些现象是因为实验室医学决定水平、疾病发生的不同阶
段等原因。
在与受检者沟通时,要结合临床表现、流行病学史、治疗史等因素综
合判断,不能够片面的去解读检验结果。
不确定时随访复查。
在国家艾梅乙母婴传播重大公共卫生项目实施要求下:一旦发现RPR、TPPA某一项阳性时,必须立即加做另外一项,不论是一项还是两项阳性,都要立即与临床
医生沟通,如果两项阳性,并且立即加做RPR滴度,为临床有效阻断提供依据。
其他方法学讨论
蛋白印迹试验(WB)确证方法
免疫印迹法检测梅毒特异性抗体敏感度等于或高于其它同类方法
特异性与ELISA和TPPA两种方法相同
免疫印迹法敏感度高,特异性好,操作简单,不需特殊仪器设备,阴阳性结果界线分明,易于判断,适应于临床广泛开展,但成本比较高。
关于稀释度,滴度和效价的正确认识稀释度(dilution)是溶液被冲淡的程度。
例如,1ml 血清加179ml 的生理盐水,则稀释度为1:180。
滴度(titer)是稀释度的倒数。
例如上例中的1 :180 的稀释度,其滴度就是180。
效价是滴度的同义词。
效价即滴度,两者通用。
当前虽然专业的化学和免疫学词典和专著中对这些词的使用已规范化,但在不少书刊的文章中常见误用,如称效价1:40 之类。
RPR滴度操作步骤
TPPA基本原理:用超声裂解梅毒螺旋体制备抗原,致敏明胶颗粒,其致敏粒子与待检血清中的抗梅毒螺旋体特异性抗体结合,产生肉眼可见的凝集。
操作步骤
1. 试剂准备:试验前将试剂和待检标本恢复到室温。
2. 加稀释液:每份样本做4孔,加标本稀释液加至微量反应板孔内,
第1孔100微升,第2~4孔各25微升。
3. 样本稀释:取血清25微升加至第1孔,混匀后取25微升至第2孔,
混匀后取25微升至第3孔,混匀后取25微升至第4孔,混匀后弃
去25微升。
4. 加对照液:第3孔加未致敏颗粒25微升,第4孔加致敏颗粒25微升。
5. 混合:将反应板置振荡器振荡30秒。
6.反应:置有盖湿盒,孵育2 h,或放4℃冰箱过夜观察结果。
结果判断
1.观察加未致敏颗粒的第3孔,不出现凝集为有效试验。
2. 观察凝集反应强度:分级如下。
4+:颗粒光滑覆盖整个孔底,有时边缘有折叠。
3+:颗粒光滑覆盖大部分孔底。
2+:颗粒光滑集聚覆盖孔底,周围有一颗粒环。
1+:颗粒光滑集聚覆盖孔底,周围有一明显颗粒环。
±:颗粒沉集孔底,中央形成一小点。
-:颗粒紧密沉积孔底中央。