抗链球菌溶血素OASO测定胶乳凝集法作业指导书

检验科生化链球菌溶血素“O”测定的标准操作规程【目的】体外检测血清抗链球菌溶血素“O”(AS0)含量。

【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。

对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理抗链球菌溶血素“O”试剂是大小均一的聚苯乙烯乳胶颗粒悬液，颗粒表面包被有链球菌溶血素“O”，当含有ASO的样品与之混合时，发生明显的凝聚反应，通过测定600nm处吸光度值的变化，即可计算出样本中抗链球菌溶血素“O”的浓度。

二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司ASO试剂盒，为液体双试剂，其各组分如下：试剂1（R1）叠氮化钠 0.1%磷酸盐缓冲液 13mmol/L试剂2（R2）抗链球菌溶血素“O ”致敏胶乳颗粒抗原2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准。

2.2校准间隔2.2.1试剂批号变更时，使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。

2.2.2 室内质量控制出现问题时使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准并确认问题得到解决后方可对临床病人样本进行测定。

1 性能指标2.1外观R1 试剂应为澄清透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物；R2 试剂应为白色混浊液体；校准品应为血清状液体，无沉淀、悬浮物和絮状物。

2.2净含量液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度试剂以水为空白在37℃±1℃，570 nm 波长条件下，吸光度应小于 2.0 A。

2.3.2试剂空白吸光度变化率试剂以水为空白在37℃±1℃，570 nm 波长条件下，吸光度变化率应小于0.0005 A/min。

2.4分析灵敏度当样本浓度为150 IU/mL 时，吸光度变化率应不小于0.003 A/min。

2.5线性范围试剂盒在（20.0~1000）IU/mL 范围内：a)线性相关系数r 应不小于0.9900；b)当样本浓度不大于360 IU/mL 时，线性绝对偏差应不大于±36.0 IU/mL；当样本浓度大于360 IU/mL 时，线性相对偏差应不大于±10.0%。

2.6测量精密度2.6.1重复性变异系数：CV 应不大于 6.0%。

2.6.2批间差相对偏差：R 应不大于8.0%。

2.7准确度测定校准品，测定结果与靶值的相对偏差应不大于±10.0%。

2.8分析特异性血红蛋白浓度在500 mg/dL 内、抗坏血酸浓度在30 mg/dL 内、内源性酯浓度在500 mg/dL 内、胆红素浓度在40 mg/dL 内，对试剂检测结果的偏差影响应在±10%以内。

2.9校准品均一性1试剂盒校准品的均一性：CV 应不大于 5.0%。

2.10生物安全性校准品的HBsAg、HIV 抗体、HCV 抗体、梅毒螺旋体TP 抗体检测应为阴性。

2。

抗链球菌溶血素“O”（ASO）测定试剂盒（胶乳凝集法）【产品名称】通用名称：抗链球菌溶血素“O”（ASO）测定试剂盒（胶乳凝集法）商品名称：抗链球菌溶血素“O”（ASO）测定试剂盒（胶乳凝集法）英文名称：Anti-streptomycin Reagent Kit（Slide Latex Agglutination Test）【包装规格】每包装盒为：胶乳液5ml；阳性对照0.5ml；阴性对照0.5ml【临床意义】对血清中ASO定性或半定量测定，做辅助诊断用。

【检验原理】本试剂胶乳液石油溶血素“O”和羧化聚苯乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳。

ASO胶乳的灵敏度调整到200IU/ml，超过上述滴度即出现肉眼可见凝集颗粒，试用本试剂血清标本不需要稀释即可直接测定。

【主要组成成份】胶乳液成份：抗链球菌溶血素“O”胶乳、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液阳性对照成份：羊抗SLO抗血清、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液阴性对照成份：牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液不同批号试剂盒中的乳胶液、阳性对照和阴性对照不能混用。

【储存条件及有效期】储藏温度2-10℃，切勿冷冻。

有效期一年。

【适用仪器】手工操作【样本要求】经离心获得新鲜血清样本，贮存于2-8℃，48小时内使用，时间过长须冰冻贮存。

【检验方法】定性实验：试剂使用前，预置达室温；轻轻混匀胶乳试剂；核对阴性和阳性对照；在反应板孔中加一滴未稀释血清（50μl）；然后加一滴胶乳试剂在血清中；搅匀、轻轻摇动使其充分混和，二分钟后观察结果。

阴性和阳性对照同上法操作。

半定量实验：血清以生理盐水（0.9g氯化钠溶解于蒸馏水中，稀释至100ml）倍比稀释，可参照下法操作。

稀释倍1：2 1：4 1：8血清100μl生理盐水100μl 100μl 100μl→100μl→100μl标本量50μl 50μl50μlIU/ml ＞400 ＞800 ＞1600【参考值(参考范围)】正常参考范围：0-200IU/ml【检验结果的解释】凝集出现可判断样本中ASO＞200IU/ml阳性；无凝集出现可判断样本中ASO＜200IU/ml阴性。

抗链球菌溶血素“O”试验【基本信息】[简要描述]·溶血素“O”(SLO)是A群溶血性链球菌产生的具有溶血活性的代谢产物，相应的抗体称抗链球菌溶血素“O”(Anti-streptolysin“O”, 抗O或ASO)。

·ASO试验是指通过测定血清中的ASO抗体效价，来判断患者有无A族溶血性链球菌感染。

·ASO试验可作为A族溶血性链球菌感染性疾病的辅助诊断方法之一，还对检测风湿病是否活动较有意义。

[其他名称]抗O、ASO【测定方法及参考值范围】·乳胶凝集法(LAT)：阴性或＜500U。

·溶血抑制法：儿童＜250Todd u；成人＜166Todd u。

(Todd单位为抗体效价稀释度，1932年Todd建立ASO测定法时用滴度表示沿用至今。

另外，U用于国际单位，等于IU，此处用u，意为非国际单位。

下同)·微量滴度法：儿童＜320Todd u；成人＜240Todd u。

·散射比浊法：＜200Todd u；或＜145u(Beckman Study)。

【结果及临床意义】[阳性或升高]◇疾病因素·活动性风湿热注释：感染后4-6周，80%的患者阳性，如果合并C反应蛋白升高，血沉加快，结合临床表现，可考虑风湿活动。

·风湿性关节炎·风湿性心肌炎·急性肾小球肾炎注释：溶血性链球菌感染症及其后续症ASO阳性率：60%-90%。

·急性上呼吸道感染·皮肤和软组织感染·感染性心内膜炎·急性扁桃体炎注释：溶血性链球菌感染症及其后续症ASO阳性率：50%-90%。

·猩红热注释：溶血性链球菌感染症及其后续症ASO阳性率：33%-89%。

·急性渗出性咽炎·过敏性紫癜·丹毒·其他A群链球菌感染·病毒性肝炎注释：非特异性升高。

·肾病综合征注释：非特异性升高。