微生物检测作业指导书

车间微生物检验作业指导书引言概述：车间微生物检验是工业生产中非常重要的环节，能够帮助企业及时发现和解决微生物污染问题，保障产品质量和生产安全。

本文将详细介绍车间微生物检验的作业指导书，帮助工作人员正确进行微生物检验工作。

一、准备工作1.1 准备检验设备和试剂：确保实验室内的显微镜、培养皿、培养基、试管等设备齐全，并且保持清洁。

1.2 检查试剂有效期：检查试剂的有效期，确保使用的试剂没有过期，以免影响检验结果。

1.3 检查实验室环境：确保实验室内的环境干净整洁，无污染源存在，保持空气流通。

二、取样和处理2.1 取样方法：根据检验要求选择合适的取样方法，避免外部污染。

2.2 取样器具消毒：使用取样器具前，必须进行消毒处理，避免外部微生物的干扰。

2.3 取样保存：取样后，必须妥善保存，避免样品变质或受到外部污染。

三、培养和观察3.1 培养基选择：根据待检微生物的特性选择适合的培养基，促进微生物生长。

3.2 培养条件控制：控制培养温度、湿度等条件，促进微生物的生长和观察。

3.3 观察方法：使用显微镜观察培养皿中的微生物形态和数量，根据特征判断微生物种类。

四、结果判读4.1 结果记录：将观察到的微生物形态和数量记录下来，便于后续分析和比对。

4.2 结果分析：根据观察结果和实验要求进行微生物种类的鉴定和分析。

4.3 结果判读：根据分析结果判断微生物检验是否合格，提出相应的处理建议。

五、清洁和消毒5.1 清洁工作：检验结束后，及时清洁实验室设备和工作台面，避免交叉污染。

5.2 消毒操作：对使用过的试剂瓶、培养皿等进行消毒处理，确保实验室环境的清洁卫生。

5.3 废弃物处理：将实验产生的废弃物分类处理，避免对环境造成污染。

结语：通过本文的介绍，希望能够帮助车间微生物检验工作人员正确进行检验作业，提高微生物检验的准确性和可靠性，保障产品质量和生产安全。

同时，建议定期对检验作业指导书进行更新和完善，以适应工作中的变化和需求。

车间微生物检验作业指导书标题：车间微生物检验作业指导书引言概述：车间微生物检验是生产过程中非常重要的环节，能够确保产品质量和生产安全。

本文将详细介绍车间微生物检验的作业指导书，匡助工作人员正确进行微生物检验，保障生产质量。

一、样品采集1.1 确定采集点：根据生产流程和检验要求，确定样品采集点，确保代表性和准确性。

1.2 采集工具准备：准备好消毒的采集容器、取样器具等工具，避免污染样品。

1.3 采集方法：按照标准操作规程进行采集，避免外界污染和误差。

二、样品处理2.1 样品保存：将采集的样品尽快送至实验室进行检验，避免样品变质。

2.2 样品处理：根据检验要求，进行样品的处理和预处理，确保检验结果准确。

2.3 样品分装：根据检验项目的不同，对样品进行分装处理，避免相互干扰。

三、实验室操作3.1 检验设备准备：检查实验室设备是否正常运转，准备好所需的试剂和培养基。

3.2 检验条件控制：控制实验室环境温度、湿度等条件，确保检验结果准确可靠。

3.3 检验操作规范：按照标准操作规程进行微生物检验，避免操作失误和污染。

四、结果分析4.1 结果记录：记录检验结果和相关数据，确保数据的完整性和可追溯性。

4.2 结果解读：根据检验结果进行分析和判断，确定产品是否符合要求。

4.3 异常处理：对于异常结果，及时进行处理和调查，找出问题原因并采取相应措施。

五、质量控制5.1 质量管理：建立健全的质量管理体系，确保微生物检验的准确性和可靠性。

5.2 员工培训：对检验人员进行培训和考核，提高其操作技能和质量意识。

5.3 持续改进：定期评估检验流程和结果，不断改进和优化微生物检验作业指导书，提高检验效率和准确性。

总结：车间微生物检验作业指导书是保障产品质量和生产安全的重要工具，正确操作和严格执行作业指导书能够有效提高微生物检验的准确性和可靠性。

希翼本文的介绍能够匡助工作人员更好地进行微生物检验，确保产品质量和消费者安全。

微生物检验作业作业指导书.1000字微生物检验作业作业指导书一、作业目的通过学生的自主调研，了解微生物检验的基本概念、方法、流程及其应用领域，在此基础上，学习相关实验技能，并在实践中提高学生的实验操作能力。

二、作业要求1.选择一个与微生物检验相关的主题进行调研（如细菌检验、真菌检验、病毒检验等），深入了解其基本特征、检验方法、检验流程及其应用领域。

2.结合所学相关知识，了解微生物检验实验室的基本设备和实验条件，掌握相应的消毒、无菌操作和物品清洗等实验技能。

3.利用自己的调研和实验经验，撰写完成一份微生物检验实验报告。

三、作业步骤1.主题选择。

选择一个与微生物检验相关的主题或者问题，如“医院细菌检验方法研究”、“河水中大肠杆菌检测技术分析”等。

需要注重主题的实际可行性，避免选择过于宏大或难以完成的主题。

2.调研文献。

利用图书馆、网络等资源，收集与选定主题相关的文献资料，包括学术期刊论文、专业书籍、技术资料等。

建议访问一些专业网站，如中国微生物学会、中国食品科学技术学会等网站，获取最新的学术信息。

3.实验学习。

根据选定的主题和文献资料，了解相关的实验方法和流程，并在实验室中学习相关的实验技能。

了解实验室的基本设备和实验条件，掌握相应的消毒、无菌操作和物品清洗等实验技能。

需要注意实验过程中的安全问题，确保实验过程的有效性和安全性。

4.撰写实验报告。

根据实验结果，撰写一份完整的实验报告。

报告内容应包括所选主题的研究背景、研究目的、实验方法和流程、实验结果和分析、结论和建议等。

需要注意报告的逻辑性和系统性，确保表述准确、规范、清晰。

报告中需要注重科学方法和实验数据的稳定性和可重复性。

四、注意事项1.作业选题要求实际可行性和可完成性，避免选择过于宏大或难以完成的主题。

2.调研过程中要注意文献来源的可靠性和权威性，并及时更新最新的学术信息。

3.实验过程中要注意安全问题，严格遵守各项实验操作规程和安全操作程序。

1 目的通过对微生物检测流程的规范确保检验工作有序进行.2 范围适用于微生物检测的全过程。

3 职责3.1 检验人员严格按检测流程做好各项工作。

3.2 检测主管做好监督检查工作.4 内容4.1 准备工作4。

1.1 卫生清洁整理普通检验室内的各类检验物品，检查工作台面和地面卫生。

4.1.2样品收集登记4。

1.2。

1与收样员沟通，确定检样品种、数量（如仓库到货的茶原料、内包膜，车间生产的半成品、成品，研发样品,采购样品，稳定性试验的样品、定期跟踪检测的样品）。

4.1.2。

2与质保员沟通，确定检样品种、数量（如自来水、纯水、一楼生产过程跟踪的各阶段液体)。

4.1。

2。

3 按检测计划自行确定的检样品种、数量(如工作间空气、设备内表面、员工手部)。

4.1。

2.4各项确定后,收集并登记样品。

4。

1.3检测方法的确定4.1.3。

1样品收集后进行分类，确定样品的检测方法，若无方法的要尽快上报或查找相关方法。

4.1。

3.2微生物各项目所采用的检测方法（见附表1）4.2 试剂配制、物品包扎4。

2。

1玻璃容器的包扎：灭菌前器皿应包扎紧密完整后才进行灭菌,以防止灭菌后器皿受到污染。

4。

2。

2平皿、吸管按量分成若干单元用牛皮纸、报纸包扎；4.2.3试管及三角瓶应塞硅胶塞，在瓶口再用报纸包扎；4.2.4其它玻璃或金属取样工具也要用报纸包扎;4。

2。

5生理盐水按氯化钠加水比例0.84％配制；平板计数琼脂（PCA）、孟加拉红、月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）、煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）则以标签上规定的比例进行配制。

按需要量分装成于不同规格的容器中。

4。

3 高压灭菌4。

3。

1培养基及器皿的灭菌：4.3.1.1高压蒸汽灭菌：金属器具、玻璃器皿、基础培养基及其它耐热物品均放入锅内灭菌。

4。

3。

1.2灭菌参数：121℃（0。

1034MPa)，15～20min;4.3.2染菌培养物：121℃（0.1034MPa),30min；4.3.3含糖类不耐热培养基（按试剂要求)：115℃（0。

车间微生物检验作业指导书一、引言车间微生物检验是指对生产过程中的原料、半成品和成品进行微生物指标检验的一项重要工作。

本作业指导书旨在规范车间微生物检验的操作流程，确保检验结果准确可靠，保证产品质量和食品安全。

二、检验目的车间微生物检验的目的是评估产品的微生物污染程度，判断产品是否符合卫生标准要求。

通过检验结果，可以及时采取控制措施，避免微生物污染对产品质量和消费者健康的影响。

三、检验范围本作业指导书适合于车间内所有原料、半成品和成品的微生物检验。

四、检验设备和试剂1. 基本设备：- 微生物平台- 显微镜- 微量移液器- 培养皿、试管、离心管等常用实验器具2. 试剂：- 洗涤剂- 生理盐水- 培养基- 染色剂等五、检验流程1. 样品采集：- 根据检验要求，选择合适的采样方法和采样点，确保样品的代表性。

- 使用无菌器具采集样品，并避免外界污染。

2. 样品处理：- 根据样品特性，选择合适的处理方法，如稀释、过滤等。

- 严格控制样品处理过程中的污染，避免误差。

3. 培养基制备：- 根据检验要求，选择适宜的培养基，并按照说明书准确配制。

- 确保培养基的无菌性，避免培养基本身的污染对结果的影响。

4. 培养：- 将样品接种于培养基上，根据不同的微生物指标选择相应的培养条件，如温度、湿度等。

- 避免交叉污染，保持培养过程的无菌性。

5. 检测和计数：- 根据培养基的特性，选择适宜的检测方法，如菌落计数、显微镜观察等。

- 严格按照检测方法操作，确保结果的准确性和可靠性。

6. 结果分析：- 根据检测结果，对样品进行微生物指标评估，判断是否符合卫生标准要求。

- 如有异常结果，及时采取控制措施，防止微生物污染扩散。

六、质量控制1. 内部质控：- 定期进行内部质控，包括对培养基、试剂和设备的验证和检验。

- 记录质控结果，及时纠正和改进不合格项。

2. 外部质控：- 参加相关的外部质控活动，如实验室间比对、参比物质使用等。

- 定期评估外部质控结果，及时纠正和改进不合格项。

车间微生物检验作业指导书引言概述：车间微生物检验是指对车间环境和产品进行微生物学检验，以确保生产过程的卫生安全和产品质量。

本文将详细介绍车间微生物检验的操作指导，包括样品采集、培养方法、检测技术、结果解读和记录等方面。

一、样品采集1.1 采样点选择：根据车间布局和生产工艺，选择代表性的采样点，涵盖不同区域、设备和工序，以确保全面检测车间微生物污染情况。

1.2 采样器具准备：准备无菌的采样器具，如无菌棉签、无菌采样袋等。

在采样前进行灭菌处理，避免样品污染。

1.3 采样操作：在采样前，工作人员应佩戴无菌手套和口罩，以防止人员对样品的污染。

根据采样点特点，选择适当的采样方法，如直接接触采样、表面刮取采样等。

采样时要注意避免交叉污染，避免样品受到外界环境的污染。

二、培养方法2.1 培养基选择：根据不同微生物的生长特性和检测要求，选择适当的培养基。

常用的培养基有营养琼脂、大肠杆菌选择性琼脂、霍乱弧菌选择性琼脂等。

2.2 培养条件：根据不同微生物的要求，设置适当的培养条件，如温度、湿度、气氛等。

培养温度普通为37摄氏度，但也需要根据具体情况进行调整。

2.3 培养时间：根据微生物的生长速度和检测要求，确定培养时间。

普通情况下，培养时间为24-48小时，但对于某些微生物，如真菌，可能需要更长的培养时间。

三、检测技术3.1 基本技术：车间微生物检验常用的基本技术包括菌落计数法、涂布法、过滤法等。

根据检测要求和实际情况，选择适当的技术进行检测。

3.2 PCR技术：PCR技术可以对微生物进行快速检测和鉴定，具有高灵敏度和高特异性。

在车间微生物检验中，可以应用PCR技术进行快速筛查和定性分析。

3.3 生物传感技术：生物传感技术结合微生物学和传感器技术，可以实现对微生物的实时监测和定量分析。

在车间微生物检验中，可以应用生物传感技术进行实时监测，提高检测效率和准确性。

四、结果解读4.1 判断标准：根据相关标准和法规，对微生物检测结果进行判断。

1目的规范微生物检测操作，确保检测结果有效。

2适用范围适用于公司产品微生物的测定。

3定义：3.1菌落总数：食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度、培养时间等）培养后，所得每g（ml）检样中形成的微生物菌落总数。

3.2大肠菌群：在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌4职责化验员负责按本作业指导书方法检测。

5内容5.1检测环境：无菌室在无人条件下应打开紫外消毒灯作用≥30min，检验员在紫外灯关闭≥30min后方可入内。

紫外灯消毒情况每月不少于2次检验，检验不合格不得使用无菌室检测。

5.2检测设备：电子天平、电热炉、高压灭菌器、电热恒温干燥箱；检测工具：锥形瓶、试管、移液管、酒精灯、脱脂棉；试剂：75%酒精、氯化钠、平板计数琼脂（检测菌落总数）、结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)（检测大肠菌群）、煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)（检测大肠菌群）、孟加拉红琼脂（检测霉菌）、蒸馏水。

5.3准备：5.3.1培养基：以培养基包装标识用法为准，按比例取检测需要量制备。

用锥形瓶煮培养基时，注意搅拌，防止琼脂糊底，接近沸腾时注意及时取下，防止溢出。

5.3.2无菌生理盐水（0.85﹪）：称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，每300ml的锥形瓶内分装225mL的生理盐水。

每管9ml分装适量试管。

121℃高压灭菌15min。

备用。

5.3.3消毒酒精：取适量撕碎的脱脂棉，用75%酒精浸泡。

5.3.4培养皿、移液管和试管可选用干热灭菌（采用电热恒温干燥箱灭菌，160℃灭菌2h或180℃灭菌1h）或湿热灭菌（使用高压灭菌器，121℃高压灭菌15min），冷却后备用。

5.4检测：5.4.1用消毒酒精擦拭手部和样品外包装袋。

点燃酒精灯，后续检测操作在酒精灯附近进行。

5.4.2称取25g样品置于盛有225mL无菌生理盐水的锥形瓶内，经充分振摇制成1：10的样品匀液。

取1：10样品匀液1mL，沿管壁缓缓注入含有9mL无菌生理盐水的试管内，振摇试管使其混合均匀，制成1：100的样品匀液。

车间微生物检验作业指导书引言概述：车间微生物检验是指对车间环境、设备、产品等进行微生物检测的一项重要工作。

通过对微生物的定性和定量检测，可以评估车间的卫生状况，控制微生物污染，确保产品质量和生产环境的安全。

本文将从五个大点出发，详细阐述车间微生物检验作业的指导原则和方法。

正文内容：1. 检验项目1.1 空气微生物检验1.1.1 采样点的选择：根据车间的特点和布局，合理选择采样点，包括生产区域、通风设备、空调系统等。

1.1.2 采样方法：采用空气采样器进行采样，根据需要选择不同的采样器和采样时间，保证采样的准确性和代表性。

1.1.3 检测方法：采用培养基培养法或者快速检测方法进行空气微生物的检测和计数。

1.2 表面微生物检验1.2.1 采样点的选择：根据车间的设备和工艺流程，选择表面采样点，包括生产设备、操作台面、管道等。

1.2.2 采样方法：采用无菌棉签、刷子或者拭子进行表面采样，保证采样的准确性和代表性。

1.2.3 检测方法：采用培养基培养法或者快速检测方法进行表面微生物的检测和计数。

2. 检验标准2.1 国家标准：根据国家相关标准，制定车间微生物检验的标准，包括空气微生物和表面微生物的限值要求。

2.2 行业标准：根据所属行业的相关标准，制定车间微生物检验的标准，包括产品微生物限值、生产环境要求等。

2.3 内部标准：根据企业的实际情况和需求，制定车间微生物检验的内部标准，包括采样方法、检测方法、评估标准等。

3. 检验频率3.1 定期检验：根据车间的特点和生产情况，制定定期的微生物检验计划，包括空气微生物和表面微生物的检验频率。

3.2 不定期检验：根据生产环境的变化和特殊情况，进行不定期的微生物检验，及时评估车间的微生物状况。

4. 结果评估4.1 检测结果的解读：根据检测结果，对微生物的种类和数量进行解读，评估车间的微生物状况。

4.2 异常结果的处理：对于异常结果，及时采取相应的措施，进行问题分析和处理，防止微生物污染的扩散和影响产品质量。

微生物学作业指导书第一部分：引言微生物学是研究微生物的科学，包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等微小生物的研究。

本指导书旨在帮助读者更好地完成微生物学的作业任务。

通过本指导书，读者将了解微生物学的基本概念、方法和实验技巧，以及如何分析和解释实验结果。

第二部分：基础知识2.1 微生物的定义和分类- 定义：微生物是一类在肉眼下不可见的微小生物，包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等。

- 分类：微生物可以根据形态、生态特征、生物化学特性等进行分类。

2.2 微生物在生态系统中的作用- 微生物在生态系统中扮演着重要角色，如分解有机物、维持生态平衡和参与营养循环等。

2.3 微生物的生长与繁殖- 微生物的生长受到温度、pH值、营养物质和氧气等环境因素的影响。

- 微生物的繁殖方式包括二分裂、芽孢形成和性繁殖等。

第三部分：实验方法与技巧3.1 微生物培养方法- 常用培养基：如营养琼脂、血琼脂和选择性培养基等。

- 培养技巧：包括无菌操作、接种方法和培养条件的控制等。

3.2 微生物染色技术- 常用染色方法：如革兰氏染色和抗酸染色等。

- 染色技巧：包括染色时间、染色剂的选择和染色结果的观察与解读等。

3.3 微生物鉴定方法- 形态学鉴定：通过观察微生物的形态、大小、颜色等特征进行鉴定。

- 生理生化鉴定：通过检测微生物的代谢产物、酶活性等生理生化特征进行鉴定。

- 分子鉴定：通过PCR等分子生物学方法检测微生物的特定基因序列进行鉴定。

第四部分：数据分析与结果解释4.1 统计学方法在微生物学中的应用- 常用统计学方法：如t检验、方差分析和相关性分析等。

- 数据处理与结果解释：包括数据整理、图表绘制和结果分析等。

4.2 实验结果的科学解释- 根据实验数据进行结果分析，探讨可能的原因和机制。

- 结果的合理解释：结合已有的研究成果和理论知识，对实验结果进行解释。

第五部分：常见问题与解答5.1 常见微生物实验中的问题及解决方法- 如何处理实验中的污染问题？- 如何控制微生物培养条件的稳定性？5.2 微生物鉴定中的技巧与注意事项- 鉴定微生物时如何减少误差？- 如何选择合适的鉴定方法？第六部分：参考资料- 提供相关微生物学领域的专业书籍、期刊论文和在线资源等参考资料。

1.目的规范微生物实验室内部质量控制，确保临床报告的质量。

2.适用范围微生物实验室的所有检验项目。

3.职责实验室检验人员均需熟知并遵守本程序。

4.程序4.1分析前质量控制4.1.1检验申请单：临床医生应按照《微生物检验项目申请程序》申请临床微生物检测口头申请追加样本检验项目，必须在样本有效期内申请.并补正式的检验申请单。

4.1.2生成微生物检验标本标签：护士应在核对医嘱患者信息和检验申请信息后，按照《微生物检验标本条形码程序》生成申请单和微生物检验项目标签，并将微生物检验项目标签正确张贴于标本容器上。

4.1.3样本采集手册：实验室应制订样本采集手册，指导正确采集和处理样本。

4.1.4样本采集和运输：样本采集人员应按照《采样前患者识别程序》确认患者，按照《标本采集、运送、保存程序》采集样本，并在规定的时间和温度范围内，使用指定的运输培养基，安全运送到微生物室。

4.1.5样本的接收：样本接收人员应严格按照《标本接收、标识及信息录人程序》《标本拒收程序》对样本接收或拒收，并记录。

4.1.6微生物检验标本信息输人：微生物实验室接种岗位检验人员严格按照相关的微生物标本检验信息输，人程序录人，核对患者信息和标本信息等资料。

4.1.7样本储存：微生物实验室接种岗位检验人员按照相关的微生物标本检验前储存程序正确铺存未能及时处理的标本，已经检验的样本应在保证其性质稳定的条件下，将样本以适当的方式保留到规定时间内，以便能在出具结果报告后可以复查，成做补无检食。

4.2分析中质量控制4.2.1试剂的质量控制4.2.1.1所有试剂用于检测标本前，必须做质控以验证试剂性能并记录质控结果，只有质控合格才可使用（表2-1-1）。

质控应遵循以下原则。

4.2.1.1.1使用中的染色剂（革兰染色、特殊染色和荧光染色），至少每周（若检测频率小于每周1次,则实验当日）用已知阳性和阴性（适用时）的质控菌株检测。

4.2.1.2平行试验：新批号试剂使用前须用老试利或参考材料平行试验。

车间微生物检验作业指导书一、背景介绍微生物检验是车间生产过程中的重要环节，通过对产品和环境中的微生物进行检测，可以及时发现和控制潜在的微生物污染问题，保证产品的质量和安全。

本作业指导书旨在提供车间微生物检验的操作流程、样品采集和处理方法、检验方法以及结果分析等详细指导，以确保检验工作的准确性和可靠性。

二、操作流程1. 准备工作a. 确保操作场所的清洁和无菌，避免外界微生物的干扰。

b. 检查所需的试剂、培养基、仪器设备等是否齐全并符合要求。

c. 确保操作人员已经接受过相关的培训，熟悉操作流程和注意事项。

2. 样品采集和处理a. 根据检验要求，选择合适的采样器具和方法，采集样品。

b. 在采样过程中，避免污染和样品交叉污染。

c. 对于不同类型的样品，采取相应的处理方法，如稀释、搅拌等。

3. 微生物检验方法a. 培养基制备：根据需要选择合适的培养基，按照标准方法制备。

b. 培养条件设置：根据所检测的微生物种类和要求，设置合适的培养条件，包括温度、湿度、气氛等。

c. 培养方法：将样品接种到培养基上，按照标准方法进行培养。

d. 培养时间：根据微生物种类和要求，确定合适的培养时间，确保充分生长。

e. 结果读取和记录：根据培养后的菌落形态、颜色等特征，进行结果的读取和记录。

4. 结果分析和判定a. 根据检验要求，对检测结果进行分析和判定。

b. 判断是否符合标准要求，如菌落总数、特定菌种的存在与否等。

c. 结果分析应准确、客观，避免主观因素的干扰。

5. 结果报告和记录a. 根据检验结果，编制检验报告，详细记录检验过程和结果。

b. 检验报告应包括样品信息、检验方法、结果分析和判定等内容。

c. 检验报告应及时、准确地提交给相关部门和管理人员。

三、注意事项1. 操作人员应佩戴合适的防护装备，如实验服、手套、口罩等。

2. 操作过程中应注意无菌操作，避免污染和样品交叉污染。

3. 仪器设备应经常进行维护和清洁，保证其正常运行和准确性。

微生物的测定作业指导书1 设备和材料1.1 恒温培养箱（36 ℃±1 ℃、28 ℃±1 ℃）、冰箱（2 ℃～5 ℃）、天平（感量为0.1 g）、无菌移液管（1 mL、10 mL、吸头）无菌锥形瓶（容量100 mL、250 mL）、无菌培养皿（直径90 mm）、放大镜1.2 平板计数琼脂培养基（PCA）：见附录A中A.1、无菌生理盐水（试管）：见附录A中A.2、孟加拉红培养基：见附录A中A.3、月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤：见附录A中A.4、煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤：见附录A中A.5、90mL无菌水2 步骤2.1 样品的稀释2.1.1 固体和半固体样品：称取10 g样品置盛有90mL无菌水的锥形瓶中，用手进行拍打混匀，制成1:10的样品匀液。

2.1.2 液体样品：以无菌移液管吸取10 mL样品置盛有90 mL无菌水的锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。

2.1.3 用1 mL无菌移液管吸取1:10样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL无菌生理盐水试管中（注意吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。

用另一支干净的1mL无菌移液管吸取1:100样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL无菌生理盐水试管中（注意吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管使其混合均匀，制成1:1000的样品匀液，不换移液管继续吸1mL1:100样品匀液于无菌培养皿中（做4个培养皿），继续吸1mL 1:100样品匀液于LST肉汤中（做3支管），记10-2。

更换一支干净的1mL 无菌移液管吸取1:1000样品匀液 1 mL于无菌培养皿中（做4个），继续吸1mL1:1000样品匀液于LST肉汤中（做3支管），记10-3。

用另一支干净的1mL无菌移液管吸取1:1000样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL无菌生理盐水试管中（注意吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管使其混合均匀，制成1:10000的样品匀液，更换一支干净的1mL 无菌移液管吸取1:10000样品匀液1 mL于LST肉汤中（做3支管），记10-4。

目的：建立微生物限度检查的标准操作规程，为微生物检验人员提供正确的操作方法。

范围：适用于辅料、内包材料和所有产品的微生物限度检查。

职责：检验人员对本规程的实施负责。

参照标准：GB/T4789.3-2003,GB/T4789.15-2003,GB/T4789.2-2003内容：1概述微生物限度检查法系指非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法，包括染菌量及控制菌的检查。

供试品一般按批号随机抽样；抽样量应为检验用量（2个以上最小包装单位）的3倍量（以备复检）。

检验的全过程，均应严格遵守无菌操作，严防再污染。

2仪器与用具恒温恒湿培养箱、生化培养箱、恒温水浴、高压蒸汽消毒锅、电热恒温干燥箱；试管、锥形瓶、量筒、培养皿（Φ90mm）、刻度吸管、研钵；托盘天平或电子天平、镊子、剪刀、酒精灯、打火机、编号笔、75%酒精棉球；拖鞋、无菌衣、裤、帽、口罩。

以上玻璃器皿、镊子、剪刀等洗净、晾干，160～170℃干烤2h，备用。

所有灭菌物品存放于第一缓冲间，不应超过2周即用毕。

否则，应重新灭菌。

3培养基、试液配制营养琼脂培养基（细菌用）、孟加拉红培养基（虎红琼脂培养基，霉菌用），胆盐乳糖培养基（即BL，用于大肠杆菌增菌培养）、4—甲基伞形酮葡糖苷酸（MUG）培养基（用于大肠杆菌快速检查）、麦康凯琼脂培养基（即MacC，用于肠道菌分离培养）、蛋白胨水培养基（供靛基质试验用）、磷酸盐葡萄糖胨水培养基（供甲基红及VP试验用）、枸橼酸盐培养基（供枸橼酸盐利用试验用）；营养肉汤培养基、四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB，沙门菌增菌用）、胆盐硫乳琼脂（DHL）或沙门、志贺菌属琼脂（SS）培养基（用于沙门菌分离培养）、麦康凯琼脂或曙红亚甲蓝琼脂培养基（大肠杆菌及沙门菌分离培养用）、三糖铁琼脂（TSI）斜面培养基（肠道菌初步鉴别用）的配制及灭菌方法参见中国药典2000年版一部附录ⅩⅢC。

0.1%2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）溶液（供制备培养基用）、氢氧化钾试液（供作V–P反应试剂）、α–萘酚乙醇溶液（供作V―P试剂）、靛基质试液。

一．目的：为确保产品质量得到控制，依据GB15979及《消毒技术规范》规范制定微生物检测方法。

二．范围：适用于原料、包材、产品微生物检测（细菌/霉菌和真菌总数）。

三．职责：由研发部/实验室负责执行实施。

四．内容4.1检测前准备：4.1.1将检测用的试管、刻度吸管等洗净后置于干燥箱内干燥后备用。

4.1.2将使用过的培养皿连同培养基煮沸15-30分钟后，用清洁液洗净晾干备用。

4.1.3 0.9%生理盐水配制：准确称取9g氯化钠，加入1000ml去离子水。

4.1.4 中和剂配方1) 磷酸盐缓冲液（PBS，0.03mol/L，pH7.2）无水磷酸氢二钠 2.84g磷酸二氢钾 1.36g 蒸馏水加至 1000ml将各成分加入到1000ml 蒸馏水中，待完全溶解后，调 pH 至7.2～7.4，于121℃压力蒸气灭菌20min备用。

2) 硫代硫酸钠中和剂（0.1%） pH7.2-7.40.03mol/L磷酸盐缓冲液 100 ml硫代硫酸钠0.1g于121℃压力蒸气灭菌15min备用。

3) 0.3%（W/V）吐温80和0.3%卵磷脂 pH7.2-7.40.03mol/L磷酸盐缓冲液 100 ml吐温80 0.3g+0.3g卵磷脂于121℃压力蒸气灭菌15min备用。

4) 0.3%甘氨酸 pH7.2-7.40.03mol/L磷酸盐缓冲液 100 ml甘氨酸 0.3g于121℃压力蒸气灭菌15min备用。

5) 对于复方或特殊消毒剂的中和剂，根据厂家提供的资料选用合适的中和剂或用以下中和剂:4.2灭菌：4.2.1干热灭菌法(160℃-170℃，2小时):适用于培养皿、取样用称量瓶、刻度吸管的灭菌。

4.2.2湿热灭菌法(121℃，0.1Mpa，15-30min)：适用于培养基溶液、生理盐水、培养皿、吸管、取样棉球等的灭菌。

4.3原料、产品微生物检测：4.3.1抽样a固体样品用消毒取样器于同一个批次三个大包装（三个以上员工的产品）中至少随机抽取90g或抽取12个最小销售包。

微生物检验作业指导书1、目的：明确工作职责，严格按照作业规范操作,掌握工作重点,提高工作效率，提升工作质量，养成良好的工作习惯,为产品品质提供可靠的数据保障。

2.适用范围所有需要作微生物的公司产品，原物料。

3.工作程序3.1 微生物检验前准备a. 平皿、吸管及取样所用锥形瓶的干热灭菌，温度160-170℃，时间2小时。

b. 培养基、生理盐水及滤杯的湿热灭菌，温度121℃，时间15-30分钟。

c. 无菌室的紫外杀菌，75%酒精喷洒消毒。

d. 取样所用篮筐300ppmCLO2消毒、手部用75%酒精消毒，药匙、镊子用酒精灯的火焰灼烧。

3.2样品的留样及取样a.成品按规定取样，规定执行。

b. 原物料的微生物取样按《微生物检验作业规范》执行。

c.水处理各环节水样取样前取样阀先用300ppmCLO2擦拭消毒，然后排水20-30分钟，取样时再用300ppmCLO2消毒。

d. 除成品外，检样一经取回，放置时间不宜过长，以免微生物滋长；需稀释样品按不同稀释倍数稀释后检验；检样与平皿做好相应标记。

e. 空瓶、瓶盖、洗瓶水等的取样按规定频率执行，具体操作如下：空瓶取样：带上洒精喷壶去净化间，请操作工暂停机器，用双手喷洒75%洒精，在进瓶前取3个空瓶，戴上鞋套，无菌帽和口罩，用75%洒精喷洒双手，进入净化间，在冲瓶后迅速取3个空瓶，离开净化间，同时记录线别、空瓶容量、生产状态等，将取好后的样品带回放入无菌室，待检。

瓶盖取样：将灭菌已冷却的三角烧瓶做好标识,连同镊子放入75%酒精喷洒的拖盘中,同时带上洒精喷壶和酒精灯,取样前, 用75%酒精喷洒双手,拿起镊子,迅速剥去牛皮纸,经酒精灯火焰灭菌后,立即向正在运转的每台机取5个瓶盖,放入三角烧瓶中,盖上胶塞,包上牛皮纸。

将取好后的样品带回化验室放入无菌间，待检。

洗瓶水取样：将灭菌已冷却的三角烧瓶做好标识,带上洒精喷壶，取样前, 用75%酒精喷洒双手,尽可能在余氯均匀处快速取样，然后取洗瓶水用比色法检测余氯浓度，同时记录检测结果，将取好后的样品放入无菌间，待检。