D二聚体检测胶乳凝集法-检验科免疫室作业指导书

说明书D二聚体Document serial number【NL89WT-NY98YT-NC8CB-NNUUT-NUT108】2010年4月（新版第1版）D-Dimer使用说明书【全体的注意事项】1.本品只限用于体外诊断。

2.诊断结果要结合其他相关检查结果或临床症状进行判断。

3.不能保证使用说明记载以外的使用方法。

4.仔细阅读检测装置的使用说明书后进行操作。

5.因本品含有防腐剂叠氮化钠(0.1%以下)，如果不慎吸入口中或与眼、皮肤和衣物接触,请立刻采取用大量清水冲洗等应急措施，必要时要到医院进行治疗。

【形状，构造等(试剂盒的构成)】1.反应缓冲液三(羟基甲基)氨基甲烷其他2.乳胶凝集试剂抗人D-二聚体单克隆抗体(鼠)胶乳颗粒1次检测使用量为0.02～0.15mL【使用目的】检测血浆或血清中的纤溶酶分解纤维蛋白的产物D-二聚体【检测原理】本品以乳胶凝集法为原理。

样本中的抗原，可与附着在乳胶颗粒上的抗体产生凝集反应，形成抗原抗体复合物，其浊度的变化通过测定特定波长的吸光度值，即可算出样本中D-二聚体的含量。

【操作上的注意事项】1.检测样本的性质,采集方法(1)血浆：静脉血与柠檬酸钠以体积比9比1混合后，离心（3,000rpm,10～30分钟）的上清血浆可作为样本使用。

(2)血清：使用添加血液凝固促进剂及抗纤溶酶的采血管分离的血清可作为样本使用。

2.干扰物质关于干扰物质，在不超过以下物质的记载的浓度范围时，对D-二聚体的检测不产生影响。

(1)游离胆红素18.40mg/dL(2)结合胆红素19.60mg/dL(3)血红蛋白460mg/dL(4)血清呈乳白色混浊2400FTU(5)类风湿因子500IU/mL【用法?用量（操作方法）】1.试剂及试液的制作方法(1)反应缓冲液:直接使用。

(2)乳胶凝集试剂:反复倒置混合均匀后直接使用。

2.操作方法自动分析装置所设定的检测操作方法（不同的装置有不同的操作方法）(1)校准曲线的绘制方法吸取各浓度的校准液（3μL）及反应缓冲液（150μL）分别注入到比色管中，然后加入乳胶凝集试剂（50μL），于波长600nm处测定吸光度，根据浓度和浊度变化的关系来绘制校准曲线。

D-二聚体（胶乳免疫比浊法）标准操作规程（SOP）【检验目的】用于体外定量测定人血浆中D-二聚体含量。

【检验摘要】D-Dimer含量增高：见于弥散性血管内凝血（DIC）、深静脉血栓形成（DVT）、肺栓塞（PE）、脑血管疾病、心肌梗死、重症肝炎等。

【检验方法】胶乳免疫比浊法【检验原理】采用胶乳免疫比浊法原理，样本中的D-Dimer与抗人D-Dimer单克隆抗体胶乳颗粒发生抗原抗体反应，产生凝集导致浊度增大。

通过检测浊度的变化量，求得样本中D-Dimer含量。

【检验试剂】●测定时的各组分上海太阳公司D-Dimer R1：三羟甲基氨基甲烷缓冲液、防腐剂等上海太阳公司D-Dimer R2：抗人D-Dimer单克隆抗体胶乳等上海太阳公司D-Dimer稀释液：氯化钠、防腐剂等上海太阳公司D-Dimer校准品：D-Dimer、稳定剂、防腐剂等●试剂稳定性与贮存试剂+2～+8℃保存，可稳定至标签所示失效日期。

D-Dimer R1、D-Dimer R2开启后+2～+8℃可保存12天，避免冷冻。

D-Dimer校准品开启后+2～+8℃可保存7天。

●注意事项D-Dimer校准品经HBsAg、HIV抗体、HCV抗体检测，结果为阴性，但仍需如病人标本一样小心处理。

用不同型号仪器测定时，各参数随仪器不同应作相应调整。

【所需仪器及材料】●仪器CA全自动血凝仪、台式离心机●材料上海太阳生物技术有限公司D-Dimer R1、D-Dimer R2、D-Dimer稀释液、D-Dimer校准品●D-Dimer质控品●试剂准备D-Dimer R1、D-Dimer R2为即用式。

D-Dimer校准品用规定体积的蒸馏水复溶。

D-Dimer稀释液为即用式。

【检验标本】●类型：血浆●稳定性：+2～+8℃保存，当日有效；-20℃可保存30天。

●注意：采血后应立即用0.109mol/L枸椽酸钠抗凝并混匀。

【检验步骤】打开CA全自动血凝仪，等候一定时间，使仪器达到分析温度。

D-二聚体测定试剂盒－D-dimer （胶乳免疫比浊法）说明书通用名称：D-二聚体测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）包装规格：a)试剂1：1×15mL 试剂2：1×5mL b)试剂1：2×45mL 试剂2：2×15mL c)试剂1：4×60mL 试剂2：4×20mL d)试剂1：2×60mL 试剂2：2×20mL预期用途用于体外定量测定人血浆中D-二聚体的含量。

D-二聚体主要反映纤维蛋白溶解功能。

只要机体血管内有活化的血栓形成及纤维溶解活动，D-二聚体就会升高；D-二聚体是深静脉血栓(DVT),肺栓塞(PE)，弥散性血管内凝血(DIC)的关键指标。

[1]测定D-二聚体常用于产科疾病、血管病变等疾病中的辅助诊断。

检验原理样本中D-二聚体与其相应胶乳抗体在液相中结合，形成抗原抗体复合物，产生浊度。

浊度的高低与样本中D-二聚体的含量成正比。

主要组成成份试剂1主要组份磷酸盐缓冲液30mmol/L表面活性剂及稳定剂试剂2主要组份磷酸盐缓冲液30mmol/L 抗体致敏胶乳 2.8mg/mL 表面活性剂及稳定剂注：不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。

储存条件及有效期试剂原包装：（2～8）℃储存，有效期为12个月。

开口后的试剂在仪器仓中可稳定30天。

适用仪器日立7020、7600-110，贝克曼AU5400，东芝TBA-120，迈瑞BS-400全自动生化分析仪。

样本要求新鲜不溶血血浆，2～8℃可稳定1天。

检验方法使用全自动生化分析仪时基本参数及操作：测定温度37℃吸光度范围0-2.5A 比色杯光径 1.0cm 波长600nm 测定模式终点法定标方式SPLINE 试剂1180μL试剂260μL样本15μL操作流程图：试剂1+样本试剂2600nm测定0秒300秒320秒600秒计算方法采用合适的非线性模式，如SPLINE 拟合多点定标的校准曲线；样品含量值通过校准曲线得出。

D二聚体检测试剂盒（乳胶免疫比浊法）说明书[产品名称]通用名称：D二聚体检测试剂盒（乳胶免疫比浊法）英文名称：Nanopia D dimer[包装规格][预期用途]本试剂盒用于定量检测血清或血浆中的D二聚体的浓度。

D 二聚体（D-D二聚体）是血液凝固·纤溶系统中，由于凝固第十三因子的作用，安定的交联纤维蛋白被纤溶酶分解的FDP 的一种，血液中存在YY/DXD、YD/DY、DD/E、DD复合体等各种分子类的D二聚体。

血液中的D二聚体的增加证明体内有血栓形成，启动纤溶系统，在恶性肿瘤，产科疾病，血管病变，DIC(弥漫性血管内凝血综合症)等疾病中显示高值。

[检测原理]标本中的D二聚体与鼠抗人D二聚体单克隆抗体致敏乳胶颗粒发生抗原抗体反应，产生凝集以致浊度上升。

通过分光光度计测定浊度的变化量，求出D二聚体的浓度。

[主要组成成分]D二聚体缓冲液①：三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH8. 5）30mmol/LD二聚体乳胶液②：鼠抗人D二聚体单克隆抗体乳胶增强颗粒 2. 8mg/ml*不同批号试剂盒中各组分可以互换使用。

[储存条件及有效期]（开封后保存于2～10℃，其稳定性为30天。

）[适用仪器]日立7020型，7060型，7080型，7170型，7180型，7600型（罗氏模块），奥林巴斯AU400，AU640，AU2700，AU5400，东芝TBA20(雅培ARCHTECTC8000)，东芝TBA200(雅培AEROSET),日本电子（西门子）BM1650,BM2250,BM9030型自动分析仪。

[标本要求]1.请使用血清或血浆（柠檬酸血浆）标本。

另，请使用含有凝血酶·抑肽酶的FDP专用采血管。

2.血清（浆）分离后，请于当日测定。

标本应在采血后立即离心分离，并在当日测定。

如当日不能测定，冷藏（2～10℃）可保存一日，冷冻（-80℃）可保存一个月。

解冻后的标本只能使用一次。

3.干扰物质游离型胆红素17mg/dl为止，结核性胆红素21mg/dl为止，血红蛋白500mg/dl为止，乳糜（福尔马肼）1960浊度为止，类风湿因子500IU/dl为止，对测定值无影响。

D二聚体检测（胶乳凝集法）作业指导书1.原理用D-二聚体的单克隆抗体致敏胶乳颗粒，当血浆中D-二聚体浓度升高，胶乳颗粒将发生凝集。

2. 标本采集：2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。

2.2 标本种类：血浆2.3标本要求：采集静脉血2ml，枸橼酸钠抗凝(蓝色盖子的抗凝管)，分离血浆备用。

3. 标本储存：待测血浆室温下储存不超过4小时，4℃不超过8小时，-20℃不超过一个月。

4. 标本运输：室温运输。

5. 标本拒收标准：凝集、溶血、脂血和细菌污染标本不能作测定。

6. 试剂6.1 试剂名称：D二聚体检测试剂盒6.2 试剂生产厂家：美国Fisher科技有限公司6.3 包装规格：80 Test/kit6.4 试剂组成：6.4.1 致敏胶乳试剂---Latex Reagent6.4.2 阳性对照---Positive Control6.4.3 阴性对照---Negative Control6.4.4 样品稀释液---Saline Solution6.4.5 实验板6.4.6 搅棒6.5 试剂储存条件及有效期：保存于2～8℃，有效期1年。

7. 操作步骤：7.1 定性检测：7.1.1 用前将所有试剂回复至室温。

7.1.2 按下表在实验板#1，#2，#3区域滴加试剂。

7.2.1 用前将所有试剂恢复至室温。

7.2.2 用样品稀释液稀释标本：阴性：呈现圆滑均匀的乳状悬液。

阳性：呈现凝集颗粒。

半定量测定：浓度为出现阳性结果的最高稀释度×0.25µg/ml9. 参考范围：阴性或<0.25µg/ml10. 质量控制：每次试验均应设阴性和阳性对照，其结果应与预期相符。

11. 临床意义：11.1 高凝状态，血栓性疾病和DIC时，血浆D-二聚体明显升高，是诊断DIC的重要依据。

11.2 D-二聚体在继发性纤溶症时升高，而在原发性纤溶症时正常，这是鉴别两者的重要依据。

12. 操作性能：快捷简便、灵敏度0.225µg/ml，重复性好，特异性高。

D二聚体检测作业指导书1.原理D-二聚体单一试剂盒应用免疫渗滤法原理进行检测将血浆加入反应板孔内，样品被吸收，D-Dimer分子由包被D-Dimer单克隆抗体的膜捕获，然后加入D-Dimer单克隆抗体与胶体金的缀合物溶液，膜中D-Dimer将与胶体金抗体发生结合反应，形成三明治嵌合体，过剩金标抗体用洗涤液洗去，用NycoCardREADERII金标定量仪检测膜是哪个红色强度，色泽强度也可用比色卡进行评价，红色强度与D-Dimer得浓度成正比例。

2. 标本采集：2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。

2.2 标本种类：血浆2.3标本要求：使用0.11或者0.13M的柠檬酸钠抗凝剂与静脉血1：9进行抗凝。

2000g离心标本15分钟。

3. 标本储存：待测血浆室温下储存不超过4小时，4℃不超过8小时，-20℃不超过一个月。

4. 标本运输：室温运输。

5. 标本拒收标准：凝集、溶血、脂血和细菌污染标本不能作测定。

6. 试剂6.1 试剂名称：D二聚体检测试剂盒6.2 试剂生产厂家：武汉生泰祥科贸有限公司6.3 包装规格：24人份6.4 试剂组成：6.4.1 反应板（TD）：1*24块6.4.2 胶体金缀合物（R1）：1*2.0ml6.4.3 洗涤液（R2）：1*0.7ml6.4.4 阳性指控品：1*1.0ml6.5 试剂储存条件及有效期：保存于2～8℃，保存到有效期。

7. 操作步骤：7.1 预洗涤：吸取50ul洗涤液R2加入反应板内，使洗涤液侵润反应板。

7.2 加样：向反应孔加入50ul未稀释的柠檬酸盐抗凝的无血小板血浆标本或指控品，样品应在50秒内吸入膜内。

7.3 加金标抗体：向反应孔加入50ul金标抗体R1,加入前须将此瓶颠倒两次使其混匀，应在50秒内吸入膜内。

7.4 洗涤：用加样器吸取50ul洗涤液R2加入反应孔中。

9. 参考范围：正常值小于0.3mg/l 临界值为0.3mg/l10. 质量控制：每次试验均应设阴性和阳性对照，其结果应与预期相符。

贝克曼d-二聚体说明书贝克曼 D二聚体说明书一、产品概述贝克曼 D二聚体检测试剂是一种用于定量检测人体血浆中 D二聚体含量的诊断试剂。

D二聚体是纤维蛋白降解产物中的一个特异性片段，其水平升高通常提示体内存在着凝血和纤溶系统的激活。

二、检测原理本试剂采用免疫比浊法进行检测。

其原理是利用特异性抗体与血浆中的 D二聚体结合，形成免疫复合物。

这些复合物会导致溶液的浊度发生变化，通过检测浊度的变化程度，并与标准曲线进行对比，从而计算出血浆中 D二聚体的含量。

三、适用范围1、用于深静脉血栓（DVT）和肺栓塞（PE）的辅助诊断。

当患者出现下肢肿胀、疼痛、呼吸困难等症状时，检测 D二聚体水平有助于判断是否存在血栓形成。

2、评估弥散性血管内凝血（DIC）的病情。

DIC 患者体内凝血和纤溶系统失衡，D二聚体水平通常显著升高。

3、监测溶栓治疗的效果。

在溶栓治疗过程中，D二聚体水平会先升高后降低，通过动态监测其变化，可以评估溶栓治疗是否有效。

四、试剂盒组成1、试剂 1：包含抗体、缓冲液等成分。

2、试剂 2：含有标记抗体等物质。

3、标准品：用于绘制标准曲线，确定检测结果的准确性。

五、样本要求1、采集静脉血，使用含有抗凝剂（如枸橼酸钠）的真空管。

2、采集的血液应尽快离心分离血浆，避免长时间放置导致 D二聚体水平发生变化。

3、样本应无溶血、脂血和黄疸等情况，否则可能影响检测结果的准确性。

六、操作步骤1、准备工作将试剂盒从冷藏环境中取出，平衡至室温。

检查仪器设备是否正常运行，如全自动生化分析仪。

2、样本处理离心分离采集的血液样本，获取血浆。

3、加样按照仪器操作说明，将标准品、质控品和待测样本分别加入相应的反应孔中。

4、检测启动仪器进行检测，仪器会自动读取反应孔的浊度变化，并计算出D二聚体的含量。

七、结果解读1、正常参考值不同实验室和检测方法可能会有所差异，一般来说，D二聚体的正常参考值在 05mg/L 以下。

2、结果分析当检测结果低于正常参考值时，通常提示体内不存在明显的血栓形成或纤溶亢进。

Triage ® D-Dimer 测试板采用免疫荧光检测法, 在EDTA 抗凝的全血或血浆中, 定量测定不相连纤维蛋白降解产物中D 二聚体的含量。

这种检测用于对怀疑血管内有散在的凝血块或者是栓塞病人的协助诊断和评估，包括肺栓塞的病人。

在凝结过程中，凝血酶原的凝结受到纤维蛋白A 和纤维蛋白原B 溶解的影响。

可溶的纤维蛋白本能地聚合，相交联的D 片段被凝血因子XIIIa 催化。

交联的纤维蛋白最终被纤维蛋白所降解。

血纤维蛋白溶酶与相交联的纤维蛋白黏附并最终被降解纤维蛋白降解产物（FDPs），包括200,000道尔顿（20 kDa）的相交联的两个D 片段分子（D-dimer）。

如果外周血当中的D-dimer （D 二聚体）升高，对于静脉栓塞的病人，包括肺栓塞（PE）病人和深静脉栓塞（DVT）病人有非常好的诊断意义（请参看Goldhaber, S.Z. (1998) New Engl. J. Med. 339; 93-104）。

Triage® D-Dimer 测试板是采用免疫荧光检测法, 在EDTA 抗凝的全血或血浆中, 定量测定不相连纤维蛋白降解产物中D 二聚体的含量。

将全血或血浆加入加样孔后，血浆通过滤膜到达反应池，大的细胞和杂质因为具有较大的直径，不能通过滤膜而不能到达反应池。

血浆中一定量的抗原（D-dimer）用途和反应池中的荧光标记抗体（D-dimer -Ab）相结合。

经过充分的反应后，反应池破裂，抗原抗体复合物因为渗透压随着血浆通过纤维膜沿着测试轨道向废液池方向渗透，在检测带被固相萃取并进行第二次的抗原抗体（针对第一次反应后抗原抗体复合物的Ab）反应，荧光标记物脱落，仪器通过检测荧光标记物的荧光强度来计算抗原（D-dimer）含量。

Triage ® D-Dimer 测试板包含有所有在血浆或全血中定量检测不相连纤维蛋白降解产物中D 二聚体含量的所有试剂。

测试板条包含物：z 被荧光染色并固定于固相的D-dimer（D 二聚体）鼠类单克隆抗体，以及稳定剂。

D-二聚体测定（分析仪器法）1实验原理：免疫比浊法当混合标本中含有D-二聚体时，聚苯乙烯颗粒包被到单克隆抗体（DD5），与交联纤维蛋白降解产物（D-二聚体）的交联区域结合。

交联区域呈立体结构，有两个单克隆抗体表位。

总之，一个单克隆抗体就能触发凝集反应，随后检测浊度的增加。

仪器在575nm处通过对浊度改变的监测，将吸光度转换成浓度值，由此获得样本中D-二聚体的量。

2标本采集2.1早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。

2.23.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。

3标本存放1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月）,只能冻融1次，在37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。

4标本运输：低温条件下运输。

5标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。

6. 实验材料:6.1 德国Dade Behring Marburg 公司D-Dimer PLUS乳胶试剂,用4mlD-二聚体PLUS复溶液溶解一瓶D二聚体PLUS试剂，室温（15℃~25℃）放置约5分钟，并不时混匀。

将试剂放于仪器相应的试剂位置上。

未开封试剂2～8℃贮存到说明书上有效期，复溶试剂2～8℃保存不超过2天，室温保存不超过5天。

6.2 D-Dimer PLUS加速剂：用5ml蒸馏水溶解，室温（15℃~25℃）放置约15分钟，并不时混匀。

将试剂放于仪器相应的试剂位置上。

使用前，轻轻振荡试剂。

未开封试剂2～8℃贮存到说明书上有效期，复溶试剂2～8℃保存不超过5天。

6.3D-Dimer PLUS复溶液：液体。

用于溶解D-二聚体PLUS 乳胶试剂。

未开封试剂2～8℃贮存到说明书上有效期，开瓶后试剂2～8℃保存不超过12周。

6.4 Dade D-二聚体质控血浆I/II.用蒸镏水1ml溶解后放置30分钟,才能使用或分装。