定量工作曲线

在做红外光谱（IR）测试时，科学指南针检测平台工作人员在与很多同学沟通中了解到，好多同学对IR不太了解，针对此，科学指南针检测平台团队组织相关同事对网上海量知识进行整理，希望可以帮助到科研圈的伙伴们；

定量分析

红外光谱定量分析法的依据是朗伯——比尔定律。红外光谱定量分析法与其它定量分析方法相比，存在一些缺点，因此只在特殊的情况下使用。它要求所选择的定量分析峰应有足够的强度，即摩尔吸光系数大的峰，且不与其它峰相重叠。红外光谱的定量方法主要有直接计算法、工作曲线法、吸收度比法和内标法等，常常用于异构体的分析。

随着化学计量学以及计算机技术等的发展，利用各种方法对红外光谱进行定量分析也取得了较好的结果，如最小二乘回归，相关分析，因子分析，遗传算法，人工神经网络等的引入，使得红外光谱对于复杂多组分体系的定量分析成为可能。

量子力学研究表明，分子振动和转动的能量不是连续的，而是量子化的；

即限定在一些分立的、特定的能量状态或能级上。以最简单的双原子为例，如果认为原子间振动符合简谐振动规律，则其振动能量Ev可近似地表示为：

式中h为普朗克常数；v为振动量子数（取正整数）；v0为简谐振动频率。当v=0时，分子的能量最低，称为基态。处于基态的分子受到频率为v0的红外射线照射时，分子吸收了能量为hv0的光量子，跃迁到第一激发态，得到了频率为v0的红外吸收带。反之，处于该激发态的分子也可发射频率为v0的红外射线而恢复到基态。v0的数值决定于分子的约化质量μ和力常数k。k决定于原子的核间距离、原子在周期表中的位置和化学键的键级等。

分子越大，红外谱带也越多，例如含12个原子的分子，它的简正振动应有30种，它的基频也应有30条谱带，还可能有强度较弱的倍频、合频、差频谱带以及振动能级间的微扰作用，使相应的红外光谱更为复杂。如果假定分子为刚性转子，则其转动能量Er为：式中j为转动量子数（取正整数）；i为刚性转子的转动惯量。在某些转动能级间也可以发生跃迁，产生转动光谱。在分子的振动跃迁过程中也常常伴随转动跃迁，使振动光谱呈带状。

２００７年第３期　四川工程职业技术学院学报　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＳＩＣＨＵＡＮ　ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ　ＴＥＣＨＮＩＣＡＬ　ＣＯＬＬＥＧＥ　２００７年５月　Ｍａｙ　２００７　

●工程技术研究与应用　

Ｅｘｃｅｌ绘制仪器分析工作曲线　

翟开华　肖方志　

（１．ｔ￣Ｊ　Ｊ１．Ｉ程职业技术学院，四川德阳６１８０００）　

［摘要］针对目前质检专业《仪器分析》课程教学中绘制工作曲线所存在的问题，介绍了如何使用　

Ｅｘｃｅｌ绘制工作曲线，希望对相关课程和师生的教学有所帮助。　［关键词］Ｅｘｃｅｌ；工作曲线；仪器分析　［中图分类号］ＴＰ３９１．１３　［文献标识码］Ａ　［文章编号］ＣＫＮ字０７—００５（２００７）０３—００５１—０５　

Ｄｅｓｃｒｉｂｉｎｇ　Ｗｏｒｋｉｎｇ　Ｃｕｒｖｅｓ　ｏｆ　

Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｉｎ　Ｅｘｃｅｌ　

Ｚｈａｉ　Ｋａｉｈｕａ　Ｘｉａｏ　Ｆａｎｇｚｈｉ　

（Ｉ．Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｄｅｙａｎｇ　Ｓｉｃｈｕａｎ　６１８０００）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓ　ｅｓｓａｙ　ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｓ　ｗａｙｓ　ｔｏ　ｄｅｓｃｒｉｂｅ　ｗｏｒｋｉｎｇ　ｃｕｒｖｅｓ　ｗｉｔｈ　Ｅｘｃｅｌ　ｔｏｗａｒｄｓ　Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｃｏｕｒｓｅ　ｉｎ　

ｗｈｉｃｈ　ｄｅｓｃｒｉｂｉｎｇ　ｗｏｒｋｉｎｇ　ｃｌ／ｒｖｅｓ　ｉｓ　ｄｅｍａｎｄｅｄ　ｉｎ　ｔｅａｃｈｉｎｇ　ａｎｄ　ｌｅａｒｎｉｎｇ．Ｔｈｅ　ｅｓｓａｙ　ｐｒｏｖｉｄｅｓ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｔｏ　ｓｉｍｉｌａｒ　ｏｏｌｌｒ－　

ｓｅｓ，ｔｅａｃｈｅｒｓ　ａｎｄ　ｓｔｕｄｅｎｔｓ　ｃｏｎｃｅｍｅｄ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｅｘｃｅｌ；Ｗｏｒｋｉｎｇ　Ｃｕｒｖｅｓ；ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ　

仪器分析通常是借助精密的分析仪器，根据物质的物　

理性质或物理化学性质来确定物质的组成及含量的分析方　法，具有灵敏、快速、准确等特点。近年来。电子技术、计算　

自来水中镁含量的测定

【任务分析】

原子吸收分光光度计与紫外可见分光光度计一样也可以做物质的定量，本任务就是学习

工作曲线法在实际样品分析中的应用，并进一步熟练原子吸收分光光度计使用方法。

【任务实施】

1、回顾任务一中仪器操作步骤

2、任务内容

(1) 配制0.00500mg/mL镁标准溶液

(2)配制镁系列标准溶液：用l0mL吸量管分别吸取0.00500mg/mL标准溶2.00mL、4.00mL、6.00mL.8.00mL、10.00mL于5个l00mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，摇匀。此溶液含Mg为0.10μg/mL、0. 20μg/mL、0.30μg/mL、0. 40μg/mL、0.50μg/mL 。

(3)制备水样：用l0mL移液管移取水样l0mL（可根据水质适当调节水样量）于100ml:容量瓶中，用蒸馏水稀至标线，摇匀。

(4)开机并调试仪器

①检查仪器各部件及气路连接正确性和气密性。

②安装镁空心阴极灯，接通电源，打开电脑，进入工作软件，进行光源对光和燃烧器对光。

③条件设置。

(5)测定系列标准溶液和水样的吸光度：由稀至浓逐个测量系列标准溶液的吸光度，最后测量水样的吸光度，并列表记录。

注意！每次测完一个溶液，都要用去离子水喷雾调零后，再测下一个溶液。

(6)结束工作

①实验结束，吸喷去离子水3～5min后，按关机操作顺序关机。

②清理实验台面和试剂，填写仪器使用记录。

（7）注意事项

①试样的吸光度应在工作曲线的中部，否则应改变取样体积。

②经常检查管道气密性，防止气体泄漏，严格遵守有关操作规定，注意安全。

（8）数据处理

①在坐标纸上绘制镁的A-c工作曲线。

②根据试液吸光度从工作曲线中找出相应浓度，然后按取样体积求出水样中镁的质量浓度。 【知识链接】

1、知识储备

在一定条件下，基态原子蒸气对锐线光源发出的共振线的吸收符合朗伯一比尔定律，其吸光度与待测元素在试样中的浓度成正比，即

基础生物化学实验-实验三核黄素（VB2）荧光光度定量测定法

时间：2009-04-06 07:10:16 来源： 作者：

实验三核黄素（VB2）荧光光度定量测定法

目的

了解荧光法测定核黄素的原理和方法。

学习荧光光度计的操作和使用。

掌握荧光定量分析工作曲线法。

原理

核黄素（维生素B2）是一种异咯嗪衍生物，其水及酒精的中性溶液为黄色，并且有很强的荧光，这种荧光在强酸或强碱中易破坏。核黄素可被亚硫酸盐还原成无色的二氢化物，同时失去荧光，因而样品的荧光背景可以被测定。二氢化物在空气中易重新氧化，恢复其荧光，其反应如下：

核黄素的激发光波长范围约为440-500nm（一般定为460nm），发射光波长范围约为510-550nm（一般定为520nm）。利用核黄素在稀溶液中荧光的强度与核黄素的浓度成正比可进行定量分析。

实验材料

核黄素片（5mg/片）、蛋黄粉、大豆。

930型荧光光度计。

容量瓶100ml（×2）。

试管1.5cm×15cm（×7）。

吸管10.0 ml（×1），5.0 ml（×1），2.0 ml（×1），0.50 ml（×2）。

量筒 1000 ml（×1），100 ml（×1）。

实验试剂

核黄素标准溶液：准确称取核黄素10mg，放入预先装有约50ml蒸馏水的1000ml容量瓶中，加入5ml

6mol/L醋酸，再加入大约800ml水，置水浴中避光加热直至溶解，冷却直至室温，用蒸馏水再定溶至1000ml，混匀。

连二亚硫酸钠（保险粉）或亚硫酸钠。

36%醋酸。

操作

标准曲线绘制

将配好的10μg/ml标准核黄素溶液，按表1所示比例稀释成6个标准溶液。

样品溶液的配制

将被测的样品（如核黄素药片，维生素B2针剂等）参照标准溶液的含量范围和溶剂体系配制成测定溶液。对于食物和生物材料中的核黄素测定，一定需要事先经过抽提，或经过分离，纯化处理。

荧光测定