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积雪草总甙对小鼠镇痛作用的实验研究
明志君;孙萌
【期刊名称】《中医药学报》
【年(卷),期】2001(029)006
【摘要】@@ 积雪草总甙为积雪草的有效成份,该物质粉末状、白色、溶于水.根据《神农本草经》记载,积雪草具有清热利湿,解毒消肿之功效.最新研究报道:该草药具有活血化瘀、抗炎、改善微循环的功效.我们就其镇痛作用做如下实验研究.【总页数】2页(P53-54)
【作者】明志君;孙萌
【作者单位】苏州大学医学院,江苏,苏州,215000;苏州大学医学院,江苏,苏
州,215000
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.消瘿散结胶囊镇痛作用及对S180肉瘤小鼠血清IL-17影响的实验研究 [J], 张会平
2.积雪草总甙抗炎作用的实验研究 [J], 明志君;孙萌
3.白头翁皂苷B4对小鼠镇痛作用的实验研究 [J], 张沛;王彦儿;许琼明;刘艳丽
4.白头翁皂苷B4对小鼠镇痛作用的实验研究 [J], 张沛; 王彦儿; 许琼明; 刘艳丽
5.积雪草酸通过调控Nrf2/NF-κB治疗MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的实验研究 [J], 胡义阳;杨忠明
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羟基积雪草苷对转基因肌萎缩侧索硬化小鼠的治疗作用刘颖菊;小林裕太;李颂华;高丽佳【期刊名称】《中草药》【年(卷),期】2006(37)5【摘要】目的探讨羟基积雪草苷对铜锌超氧化物歧化酶（Cu,Zn superoxide dismutase,SOD1）-G93A突变肌萎缩侧索硬化（amyotrophic lateral sclerosis,ALS）小鼠的治疗作用.方法通过行为学和组织学测定,观察羟基积雪草苷对SOD1-G93A突变ALS小鼠发病时间、生存时间、运动功能变化和神经元病理改变的影响.结果羟基积雪草苷（61.1±11.0）和（185.6±18.7）mg/（kg·d）在小鼠日龄70 d时开始给药至死亡,能分别延长SOD1-G93A突变ALS小鼠的生存时间11.4和9.4 d,但对发病时间无影响;同时（61.1士11.0）mg/（kg·d）组小鼠在肌力缓慢下降期运动功能降低减缓,与对照组比较差异显著（P＜0.05）.120 d 时L2～5组织切片显示两治疗组脊髓前角运动神经元数明显高于SOD1-G93A对照组（P＜0.05）,多数运动神经元胞浆中仍有尼氏体存在.结论羟基积雪草苷对SOD1-G93A突变转基因小鼠运动神经元变性有保护作用,能延长小鼠的生存时间.【总页数】4页(P718-721)【关键词】羟基积雪草苷;肌萎缩侧索硬化;铜锌超氧化物歧化酶【作者】刘颖菊;小林裕太;李颂华;高丽佳【作者单位】重庆医科大学药理教研室;日本岛根大学医学实验中心【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.羟基积雪草苷对急性酒精中毒小鼠抗氧化指标的影响 [J], 张玉茜;周少鸿;翁德平;卢佼;赵娟;2.积雪草苷的抗菌作用及对小鼠实验性泌尿系统感染的治疗作用 [J], 张胜华;余兰香;甄瑞贤;刘京芳;娄人慧;许先栋3.羟基积雪草甙对转基因ALS小鼠的治疗作用 [J], 刘颖菊;小林裕太;李颂华;高丽佳4.羟基积雪草苷对小鼠急性肝损伤的保护作用 [J], 李洪忠;万敬员;张力;罗福玲;章卓;周岐新5.羟基积雪草苷对KKay小鼠附睾脂肪中蛋白激酶A、叉头转录因子1及转录因子CCAAT增强子结合蛋白β表达的影响 [J], 孙伯菊;吴悠;张程斐;秦帅;胡玉立;刘玮;吴丽丽;秦灵灵;刘铜华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
芍药苷防治小鼠急性肝损伤的机制研究费立博;狄佳;聂时南【期刊名称】《中国急救医学》【年(卷),期】2015(035)011【摘要】目的观察芍药苷( PAE)对四氯化碳( CCl4 )诱导的小鼠急性肝损伤的影响及其作用机制. 方法用腹腔注射CCl4致小鼠急性肝损伤模型,测定不同剂量的PAE 对肝损伤血清丙氨酸转氨酶( ALT)和天冬氨酸转氨酶( AST)活性、肝中炎症和脂肪代谢障碍的影响,同时对肝组织进行病理学检查. 结果 PAE具有剂量依赖性地降低CCl4致小鼠肝损伤血清ALT、AST、白细胞介素-1β( IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α( TNF-α)、甘油三酯( TG)、总胆固醇( TC)和极低密度脂蛋白( VLDL)值升高,下调肝组织匀浆中1-磷酸鞘氨醇( S1P)的含量,抑制肝脏鞘氨醇激酶-1(SphK1)和肝脏核蛋白中核转录因子-kappaB(NF-κB)的蛋白表达水平,并减轻CCl4对肝脏细胞的病理损伤. 结论 PAE对CCl4诱导的急性肝损伤小鼠的保护作用机制可能与抑制SphK1/S1P信号通路表达有关.%Objective To investigate the protective effects of Paeoniflorin ( PAE) on the mice with acute liver injury ( ALI ) induced by CCl 4 .Methods The ALI model was prepared by CCl 4 injected intraperitoneally .Then, the therapeutic effects of PAE on the model were evaluated by the activity determination of serum alanine aminotransferase ( ALT) and aspartate aminotransferase ( AST) and hepatic inflammation and lipid metabolism disorder , and the changes of hepatic pathohistology following the PAE treatment .Results Following the treatment , PAE reduced the elevated ALT and AST activities and interleukin -1β( IL -1β), IL-6, tumor necrosis factor -α( TNF -α), triglyceride ( TG) , total cholesterol ( TC) and very low density lipoprotein ( VLDL) content induced by CCl4 significantly, and downregulated the sphingosine -1-phosphate levels in liver homogenates , and inhibited hepatic sphingosine kinase 1 ( SphK1 ) and nucleoprotein -nuclear transcription factor -kappaB (NF-κB) protein expression.Furthermore, the pathological changes were also significantly improved in the mice of PAE treating group .Conclusion The protective effects of PAE on the mice with ALI induced by CCl4 may be related to its inhibition of SphK1/S1P signal pathway.【总页数】4页(P1032-1035)【作者】费立博;狄佳;聂时南【作者单位】210002 江苏南京,南京军区南京总医院急救医学科;210002 江苏南京,南京军区南京总医院急救医学科;210002 江苏南京,南京军区南京总医院急救医学科【正文语种】中文【相关文献】1.组蛋白乙酰化酶抑制剂(DCH36_06)对小鼠急性肝损伤的保护作用及机制研究2.小鼠急性肝损伤对棕色脂肪组织功能的影响及机制研究3.艽龙胶囊对伴刀豆蛋白致小鼠急性肝损伤的保护与机制研究4.苯甲酰芍药苷对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤保护作用及分子机制研究5.香蜂草苷对脂多糖联合D-氨基半乳糖诱导C57BL/6J小鼠急性肝损伤的保护作用及机制研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
积雪草苷的药理作用及机制研究进展积雪草苷是积雪草提取物三萜皂甙的主要成分之一，其分子式为C48H78O19。
现代药理研究证实积雪草苷具有抗炎、抑制疤痕形成、促进创伤愈合、神经保护、抗焦虑、免疫调节等作用。
积雪草苷化学结构图1、抗炎作用机制积雪草苷可改善多种炎症反应，其作用机制与下调NF-κB通路中IL-6、IL-1β、TNF-α的表达，抑制氧化应激等有关。
研究发现，一方面，积雪草苷可通过抑制NF-κB 信号通路，下调一氧化氮（NO）、TNF-α、IL-6的表达，从而发挥抗炎作用；另一方面，积雪草苷也可通过调控血红素加氧酶1（HO-1）信号通路，抑制促炎因子的产生以及过氧化物酶的活性，从而发挥抗炎作用。
积雪草苷可通过抑制NF-κB/p38信号通路来减轻低氧条件引起的炎症反应，可通过下调微小核糖核酸-155（miR-155）的表达，上调细胞因子信号传导抑制蛋白1（SOCS1）的表达来减轻高氧条件引起的炎症反应。
2、对肝、肺、肾损伤的改善作用机制积雪草苷可改善肝、肺、肾损伤，其作用机制与抑制氧化应激炎症反应、提高抗氧化能力等有关。
研究表明，积雪草苷对脓毒症肺损伤及脓毒症急性肾损伤均有改善作用。
一方面，积雪草苷可通过上调PPAR-γ的表达，抑制MAPK、NF-κB信号通路的活性，发挥改善肺损伤的作用；另一方面，积雪草苷可通过下调血清中IL-6的表达和肾组织中iNOS蛋白的表达，发挥改善肾损伤的作用。
积雪草苷可改善肾病模型大鼠的肾损伤，其作用机制与上调突触素、内啡肽、足叶素的mRNA表达，下调结蛋白的mRNA表达有关。
通过体内外实验研究积雪草苷对高氧所致肺损伤的改善作用，结果发现，积雪草苷可通过降低肺损伤模型大鼠血清中髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）含量以及 TNF-α、IL-1β和 IL-6水平，升高总抗氧化（TAOC）水平，来发挥改善大鼠肺损伤的作用。
此外，积雪草苷可通过抑制TNF-α和MAPK的表达来改善肝损伤。
积雪草苷对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的影响章卓;万敬员;罗福玲;李洪钟;周岐新;吴柯【期刊名称】《中草药》【年(卷),期】2008(39)8【摘要】目的观察积雪草苷对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠的保护效应。
方法56只Balb/c小鼠随机分为对照、假手术、模型、溶媒、积雪草苷(5、15、45 mg/kg)7组,每组8只。
LPS(2.5 mg/kg)气管滴注造ALI模型,24 h后HE染色观察小鼠肺组织病理改变,计算肺湿质量/干质量值;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)后行白细胞计数和分类,BCA法检测其蛋白的量;化学法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。
结果积雪草苷各剂量组呈剂量依赖性减轻LPS所致ALI模型肺组织病变情况,减轻肺水肿,减轻中性粒细胞的浸润,抑制蛋白渗出。
抑制肺组织中MPO 活性。
结论积雪草苷对LPS诱导ALI有保护效应。
【总页数】4页(P1196-1199)【关键词】积雪草苷;脂多糖;急性肺损伤;髓过氧化物酶【作者】章卓;万敬员;罗福玲;李洪钟;周岐新;吴柯【作者单位】重庆医科大学药学院药理教研室【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.橄榄苦苷对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠的保护作用 [J], 王昱;何九军2.桃叶珊瑚苷减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤 [J], 潘冰冰;周勇;孔高茵;李萍;郭曲练;管茶香3.苯甲酰芍药苷对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤保护作用及分子机制研究 [J], 周垂杨;杨明;高仁贤4.积雪草苷对脂多糖诱导急性肺损伤的白细胞介素-10和血红素氧合酶-1影响研究[J], 章卓;姜鲜;万敬员;李华;李亮;张红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
·232·2016年3月 第14期药物与临床医药卫生羟基积雪草苷对急性酒精中毒小鼠抗氧化指标的影响张玉茜 周少鸿 翁德平 卢 佼 赵 娟长沙医学院临床学院生物技术系，湖南 长沙 410000摘要：目的：探究羟基积雪草苷对急性酒精中毒小鼠抗氧化指标的影响.方法：以小鼠活动状态和谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量为参考指标。
健康成年雄性小鼠分实验组（羟基积雪草苷高剂量组60mg/kg、羟基积雪草苷低剂量组30mg/kg）、药物对照组（0.5%羧甲基纤维素钠溶液）、酒精中毒模型组（0.14ml/10g）和空白对照组按照分组分别建模后取小鼠血清及海马、肝脏、大脑皮质等组织制备匀浆后分别检测MDA及GSH含量。
结果：所有造模小鼠出现嗜睡、步履蹒跚、活动减少和身子发抖等状态。
实验组小鼠海马、皮质、血清、肝脏中GSH和MDA含量较酒精中毒模型组小鼠显著升高（p＜0.01）且羟基积雪草苷（MC）高低剂量组较急性酒精中毒小鼠组织和血清中MDA及GSH含量明显下降。
结论：酒精将影响小鼠抗氧化能力且羟基积雪草苷对急性酒精中毒小鼠的抗氧化指标有一定的恢复及保护作用。
关键词：急性酒精中毒；抗氧化；羟基积雪草苷；GSH；MDA中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1671-5608（2016）14-0232-02急性酒精中毒是最常见的中毒性疾病。
它是指一次饮入过量的乙醇或酒类饮料引起的以神经症状为主的中毒性疾病，严重时可累及呼吸和循环系统，导致意识障碍、呼吸和循环衰竭，严重的急性酒精中毒可引起死亡，有作者认为对大多数成人的致死量为 96%的乙醇 200 g[1]。
羟基积雪草苷（madecassoside，MC）为伞形科植物积雪草Centella asiatica（L）Urb.中三萜皂苷的主要活性成分，研究表明MC具有广泛的体内外药理活性，可降低胶原诱导的关节炎炎症反应，促进体外培养的人成纤维细胞增殖，治疗和／或预防增生性瘢痕和瘢痕瘤作用，同时MC对急性脊髓损伤大鼠神经元及慢性铝中毒致小鼠痴呆也具有保护作用[2]。
积雪草苷的药理作用及机制研究进展作者：秦慧真林思邓玲玉朱华来源：《中国药房》2021年第21期中图分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）21-2683-06DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.21.21摘要目的：综述积雪草苷（AS）的药理作用及机制，为AS新药开发和临床应用提供参考。
方法：以“积雪草苷”“抗肿瘤”“抗炎”“asiaticoside” “anti-tumor” “anti-inflammation” “pharmacological action”等为关键词，在中国知网、万方数据、维普网、PubMed等数据库中组合查询2010年1月-2021年6月发表的相关文献，对AS的药理作用及机制进行总结归纳。
结果与结论：AS具有抗肿瘤、抗纤维化、抗炎、抗阿尔茨海默病、改善学习记忆能力、抗抑郁、抑制瘢痕增生和修复皮肤损伤等多种药理作用。
其抗肿瘤作用与抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡有关;抗纤维化作用与下调转化生长因子β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、羟脯氨酸（Hyp）的表达有关;抗炎作用与下调核转录因子κB（NF-κB）信号通路中白细胞介素6（IL-6）、IL-1β、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达，抑制氧化应激等有关;抗阿尔茨海默病作用与抑制血管内皮细胞凋亡、Toll样受体4（TLR4）/NF-κB信号通路活性以及炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α的表达有关;抑制瘢痕增生及修复皮肤损伤的作用与抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原和TNF-α、IL-6、IL-1β的表达以及Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路活性，上调TGF-β1、血管内皮生长因子（VEGF）、一氧化氮合酶（iNOS）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的表达有关;改善肝、肾、肺损伤的作用与介导MAPK/NF-κB信号通路，抑制丙二醛（MDA）、iNOS、TNF-α、IL-6的表达以及提高抗氧化能力有关。
积雪草苷的抗菌作用及对小鼠实验性泌尿系统感染的治疗作用张胜华;余兰香;甄瑞贤;刘京芳;娄人慧;许先栋【期刊名称】《中国新药杂志》【年(卷),期】2006(15)20【摘要】目的:研究积雪草苷的体内外抗菌作用.方法:采用平皿二倍稀释法测定积雪草苷对37株标准菌株及临床分离致病菌株的最低抑菌浓度(MIC);采用小鼠膀胱上行性肾感染模型,观察积雪草苷在0.68～3.36 g·kg-1剂量时灌胃给药对大肠埃希菌26的清除作用,用Bliss程序计算药物清除细菌的半数有效剂量(ED50)和95%置信限.结果:积雪草苷对37株标准及临床分离菌株显示较强的抗菌活性,尤其对各种耐药细菌,包括耐甲氧西林的金葡球菌(MRSA)、表葡菌(MRSE),耐5种氨基糖苷类抗生素、产钝化酶的粪肠球菌,产β-内酰胺酶、产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌和醋酸钙不动杆菌,以及耐哌拉西林的铜绿假单胞菌的MIC值与三金片相近.积雪草苷对小鼠膀胱上行性肾感染大肠埃希菌26的清除细菌作用较强,积雪草苷和三金片的ED50分别为1.87和3.16 g·kg-1(P＜0.01).结论:积雪草苷具有良好的体内、外抗菌活性,尤其对于泌尿系统感染.【总页数】4页(P1746-1749)【作者】张胜华;余兰香;甄瑞贤;刘京芳;娄人慧;许先栋【作者单位】中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所,北京,100050;中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所,北京,100050;广东省开平市中心医院,开平,529300;中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所,北京,100050;中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所,北京,100050;中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所,北京,100050【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R286.8【相关文献】1.淫羊藿苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的治疗作用 [J], 古玉梅;徐长青;洪铭范;邓雪梅;彭忠兴;余青云;危智盛2.积雪草总苷及其制剂的含量研究.Ⅲ.积雪苷片中积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷B含量的HPLC法测定 [J], 陈云艳;翁小香;周靖;黄文武;孔德云3.羟基积雪草苷对转基因肌萎缩侧索硬化小鼠的治疗作用 [J], 刘颖菊;小林裕太;李颂华;高丽佳4.积雪草总苷及其制剂的含量研究.Ⅱ.积雪草总苷中积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷B含量的HPLC法测定 [J], 陈云艳;邵燕;周靖;黄文武;孔德云5.积雪草总苷及其制剂的含量研究．Ⅰ．积雪苷霜软膏中积雪草苷和羟基积雪草苷的HPLC法测定 [J], 邵燕;陈云艳;黄文武;孔德云因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基金项目:国家自然科学基金资助课题(30500463)作者简介:章卓(1979-),男,四川泸州人,硕士,主要从事免疫药理与神经药理研究;T e:l 0830-*******,E-m ai:l z huoz hang100@1631co m 。
*通讯作者:万敬员(1972-),男,硕士,讲师,主要从事免疫药理和神经药理研究;Te:l 023-********。
积雪草苷对LPS 诱导小鼠急性肺损伤炎症因子平衡的影响章 卓1,秦大莲1,万敬员2*,周岐新2,肖顺汉1,吴 柯2(11泸州医学院药学院药理教研室,四川泸州646000;21重庆医科大学药学院药理教研室,重庆400016)摘要 目的:观察积雪草苷对脂多糖(LPS )诱导急性肺损伤支气管肺泡灌洗液(BALF )IL-6、TNF-A 、I L-10的影响。
方法:56只B al b /c 小鼠随机分为空白、模型、假手术、溶媒、积雪草苷5,15,45m g /kg 剂量组。
LPS(215m g /kg)气管滴注造急性肺损伤模型,24h 后处死小鼠,酶联免疫吸附法(EL ISA )检测血浆IL-6、TNF-A 、IL-10表达。
结果:积雪草苷各剂量组呈剂量依赖性降低LPS 所致急性肺损伤模型BALF 中IL-6、TNF-A 含量,增加I L-10表达。
结论:积雪草苷对L PS 诱导急性肺损伤保护作用可能与抑制炎症因子I L-6、TNF-A 和促进I L-10,维持炎症因子间平衡有关。
关键词 积雪草苷;脂多糖;急性肺损伤;炎症因子中图分类号:R 28515 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2008)04-0547-03Effects of A siaticoside on the Balance of Inflam m at ory Fact ors ofM ouse c s A cute Lung Inj ury Induced by LPSZHANG Zhuo 1,Q I N D a -lian 1,W AN Jing -yuan 2,Z HOU Q -i x in 2,X I AO Shun -han 1,WU K e 2(11D epart m ent o f Phar m acology ,Phar m aceutica l Sc ience ,L uzhouM ed i ca lCo ll edge ,Luzhou 646000,Chi na ;21Depart m ent of Pha r -m aco logy ,P ha r maceuti ca l Sc i ence ,Chongqi ng M edical U ni v ers it y ,Chongqi ng 400016,China)Abstrac t O bjecti ve :T o obse rve t he effect o f asi a ti cosi de (A S)on IL -6,TN F -A ,IL -10o f bronchoa li veo lar l avage flui d(BALF )o f acu te l ung i n j ury (AL I)i nduced by li popolysaccha ri des (LPS)1M e t hods :56B al b /c m i ce were random ly d i v i ded i nto contro l,m od -e ,l sham opera tion ,veh icle ,m odel +asiatico si de 5,15,45m g /kg g roups 1M odel of AL I w ere estab lished by i ntratrachea l i nstill a tion of LPS 20L l(215mg /kg ),m i ce w ere k illed 24hours l ater ,t he conten t o f IL-6,TNF-A ,IL-10of BALF w as detected by enzyme -li nked i m munoso rbentassay (EL ISA )1R esu lts :AS could reduce the content o f IL -6,TNF-A and i ncrease I L-10o f BALF in dose -dependent m anne r 1Conc l usion :The pro tecti ve e ffects ag ai nst AL I i nduced by L PS on AS a re re lated to reduc i ng the content of IL -6,TNF-A ,i n -creasi ng secre ti on IL -10and keeping t he balance bet w een infl a mm atory facto rs and ant-i i nfla mm ato ry factors 1K ey word s A siati coside ;L i popolysacchar i de ;A cute l ung i n j ury ;Infl amm atory factors急性肺损伤(ALI)是以肺血管内皮细胞及肺泡上皮细胞广泛损伤为病理特征的一种失控的炎症反应112,起病急而严重,国内发病率和病死率达20%~40%,尤其在I C U 病房中更是高达50%左右,目前尚无有效治疗手段122。
积雪草苷对小鼠脓毒症致急性肝损伤的保护作用研究（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）作者：张丽娜，郑佳佳，李晓会，吴孟娇，张力，万敬员【摘要】目的研究积雪草苷对小鼠脓毒症致急性肝损伤的保护作用，并初步探讨其作用机制。
方法建立盲肠结扎穿孔(CLP)诱导的小鼠脓毒症致急性肝损伤模型，随后用不同剂量的积雪草苷(15，45 mg/kg)干预，24 h后检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase，ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase，AST)、肿瘤坏死因子-alpha (tumor necrosis factor alpha，TNF-α)的含量; 免疫印迹法检测肝组织中环氧合酶-2 (cyclooxygenase-2，COX-2)的表达，并取部分肝组织进行组织病理学分析。
结果积雪草苷剂量依赖性地减少脓毒症诱导的血清中ALT、AST及TNF-α的升高，抑制肝组织中COX-2蛋白的表达，病理切片显示积雪草苷组肝组织受损程度较模型组为轻。
结论积雪草苷对CLP 诱导的肝损伤具有一定的保护作用，其机制可能与抑制炎症介质COX-2和TNF-α有关。
【关键词】积雪草苷; 脓毒症; 盲肠结扎穿孔; 急性肝损伤; 环氧合酶-2Abstract：ObjectiveTo study the protective effect and mechanism of asiaticoside on sepsis-induced acute liver injury in mice.MethodsSepsis-induced acute liver injury was induced by cecal ligation and puncture (CLP) in Kun Ming mice. Subsequently，different doses of asiaticoside (15 mg/kg，45 mg/kg) were used to intervene. 24h later，serum alanine aminotransferase (ALT)，aspartate aminotransferase (AST) and tumor necrosis factor alpha (TNF-α)levels were measured，western blotting was used to determine cyclooxygenase-2(COX-2) expression in liver tissues and histopathology examination was performed by hematoxylin-eosin(HE) staning method.ResultsThe results showed that asiaticoside decreased serum ALT，AST and TNF-αlevels，inhibited COX-2 expression in liver tissues，and histopathological changes of liver were improved by asiaticoside as compared to model group，and these effects were dose-dependent.ConclusionAsiaticoside has protective effect against sepsis-induced acute liver injury，and the mechanism is probably associated with the inhibition of TNF-αin serum and COX-2 expression in liver tissues.Key words：Asiaticoside;Sepsis;Cecal ligation andpuncture;Acute liver injury;Cyclooxygenase-2脓毒症及随后的多脏器功能障碍综合征(multi organ dysfunction syndrome MODS)已成为当今外科重症监护病房中的首要死亡原因之一。
据统计，全球每年有600 000例脓毒症患者死亡[1]，其死亡率高达50%。
在脓毒症发展过程中，肝脏是最易受损的器官之一。
脓毒症患者出现肝功能异常是其病情加重的标志。
因而，寻求脓毒症诱发的急性肝损伤的有效防治途径成为危重病医学亟待解决的问题。
积雪草苷(Asiaticoside)为积雪草提取物三萜皂苷的主要成分之一[2，3]，具有促进伤口愈合、抗溃疡、抗炎等作用[4]，临床上用于治疗慢性炎症、皮肤病等[5]。
本实验针对积雪草苷对炎症有效的特点，利用经典的小鼠盲肠结扎穿孔(Cecal ligation and puncture，CLP) 模型，研究积雪草苷对脓毒症诱发的急性肝损伤是否具有治疗作用并初步探讨其作用机制。
1 材料1.1 药品与试剂积雪草苷(纯度95%，无色结晶，分子式：C48H78O19，相对分子量：959.15)，由广西昌洲天然植物开发有限公司提供，批号20060205;丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)测定试剂盒为南京建成生物工程研究所产品;小鼠TNF-αELASA检测试剂盒(德国Bender公司);BCA蛋白定量试剂盒(pierce公司);诱导型环氧合酶2(COX-2)抗体(Abcam公司)。
1.2 动物及分组成年昆明小鼠，体质量18～22 g，40只健康小鼠，♂♀各半[重庆医科大学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号SCXK(渝)20070001,使用许可证号SYXK(渝)20070001]。
随机分为4组：假手术组，模型组，积雪草苷小、大剂量干预组(15，45 mg/kg)，每组10只。
2 方法2.1 CLP动物模型的制作[6，7] 行CLP手术之前1 h，假手术组与模型组给予等体积生理盐水，积雪草苷组腹腔注射对应剂量药物。
造模方法：动物在实验前1 d禁食，0.3%的戊巴比妥钠(30 mg/kg)腹腔注射麻醉，于小鼠腹正中线做一长约1 cm切口，找出盲肠并结扎其根部，保留血供，选用8号针头穿刺已结扎盲肠1次，挤出肠内容物少许，1-0丝线关闭腹腔。
生理盐水复苏(0.5 ml/10 g背部皮下注射)。
按照相同的方法处理假手术组的动物，但盲肠不穿孔不结扎，术后禁食不禁水。
2.2 小鼠生存率的观察CLP后24 h每6 h观察记录小鼠生存情况。
2.3 血清ALT和AST的检测24 h后存活小鼠眼球取血，离心(3 000 r/min，10 min)取血清，按试剂盒说明书检测血清中ALT和AST的活性。
2.4 血清TNF-α的检测24 h后存活小鼠眼球取血，离心(3 000 r/min，10 min)取血清，按ELASA试剂盒操作，检测血清中TNF-α的水平。
2.5 肝组织COX-2蛋白表达的免疫印迹法检测24 h后处死小鼠，称取100 mg肝组织，研磨后裂解细胞提取蛋白，BCA法蛋白定量。
取40 μg蛋白上样，SDS-PAGE电泳后，转移至硝酸纤维素膜上，室温下封闭1 h;加入一抗4℃冰箱封闭过夜;次日脱洗3次，二抗孵育1 h，再脱洗5次后，ECL显色，X线片曝光，洗片。
2.6 病理检查24 h后处死小鼠取肝脏左叶10%甲醛固定，脱水、脱钙后石蜡包埋切片，HE染色。
2.7 统计学处理各组数据以±s表示，运用SPSS软件对两样本均数t检验，P0.05表示有统计差异。
3 结果3.1 小鼠死亡率观察结果见图1。
与假手术组比较，模型组中小鼠死亡率明显升高;而积雪草苷组可明显降低脓毒症致急性肝损伤引起的小鼠死亡率，且具有一定的剂量依赖性(P0.01)。
图1 积雪草苷对CLP致小鼠生存率的影响(n=10)3.2 血清ALT、AST测定结果见图2。
模型组与假手术组比较，血清ALT、AST活性明显升高;而积雪草苷组可明显降低脓毒症致急性肝损伤引起的ALT、AST活性升高，且具有一定的剂量依赖性(P0.01)。
与模型组比较，**P0.01图2 积雪草苷对CLP致急性肝损伤小鼠血清ALT 和AST水平影响(n=6)3.3 血清TNF-α含量测定结果见图3。
模型组血清TNF-α含量明显高于假手术组;而积雪草苷组可明显降低脓毒症致急性肝损伤引起的TNF-α含量升高，且具有一定的剂量依赖性(P0.01)。
3.4 积雪草苷对肝组织中COX-2蛋白表达的影响结果见图4。
模型组COX-2蛋白表达明显高于假手术组;而积雪草苷可显著降低急性肝损伤中COX-2蛋白的过量表达，并呈现出一定的剂量依赖关系。
3.5 病理学检查结果结果见图5。
假手术组小鼠光镜下肝小叶结构完整，肝细胞索排列整齐，以中央静脉为中心呈放射状排列，肝细胞核位于肝细胞中央，圆而边界清。
模型组小鼠肝小叶失去正常结构，肝细胞索解离，肝细胞普遍变性坏死，肿胀，并可见大量炎性细胞浸润。
积雪草苷组肝细胞仍有部分变性坏死，且有少量中性粒细胞浸润，但病变程度远比模型组轻。
与模型组比较，**P0.01图3 积雪草苷对CLP致急性肝损伤小鼠血清TNF-α水平影响(n=6)a-假手术组b-模型组c-积雪草苷15 mg·kg-1d-积雪草苷45 mg·kg-1图4 积雪草苷对CLP致急性肝损伤小鼠肝COX-2表达影响a-假手术组b-模型组c-积雪草苷15 mg·kg-1 d-积雪草苷45 mg·kg-1图5 积雪草苷对CLP致急性肝损伤小鼠肝组织影响4 讨论盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture，CLP)导致的脓毒症是一个经典模型，被广泛用于模拟临床脓毒症。
盲肠穿孔导致驻扎在肠道的微生物渗出，造成腹部局部感染、细菌性腹膜炎，随后引起全身性炎症反应(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)，MODS 甚至死亡[8]。
脓毒症时，肝脏损伤发生较早，最终可发展为肝衰竭。
因此CLP模型是筛选和研究治疗或预防脓毒症时肝损伤药物的理想模型。
CLP诱导的脓毒症引起急性肝损伤，肝细胞细胞膜因脂质过氧化反应而功能受损、结构破坏，细胞内的ALT、AST释放入血，使血清中ALT与AST活性升高。
本实验显示积雪草苷各剂量组明显抑制脓毒症引起的ALT、AST活性升高，减轻了肝损伤的程度，同时显著减轻了肝脏组织病理学变化，明显降低了CLP诱导的脓毒症致急性肝损伤引起的小鼠死亡率，并表现出一定的剂量依赖关系，对CLP诱导的脓毒症致急性肝损伤有一定的保护作用。
