石斛中多糖含量的测定
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不同干燥方法对铁皮石斛多糖和甘露糖含量的影响铁皮石斛是一种传统的中药材,被广泛应用于中医药领域。
它含有丰富的多糖和甘露糖,具有滋补养生、抗疲劳、抗衰老等功效。
在铁皮石斛的加工过程中,干燥是不可或缺的环节,不同的干燥方法可能会对其多糖和甘露糖含量产生影响。
本文旨在探讨不同干燥方法对铁皮石斛多糖和甘露糖含量的影响,并为其合理干燥提供科学依据。
一、不同干燥方法对铁皮石斛多糖含量的影响在传统的铁皮石斛干燥过程中,通常采用自然晒干和烘干两种方法。
研究人员将使用这两种方法进行干燥处理,然后进行多糖含量的测定。
1. 自然晒干自然晒干是最为常见的一种干燥方法,其过程相对较为简单。
研究结果表明,自然晒干的铁皮石斛多糖含量较高,这可能与晒干过程中温度、湿度等环境因素有关。
晒干时的阳光照射和自然风力可以促进多糖的形成,因此其含量相对较高。
2. 烘干烘干是另一种常见的干燥方法,一般可以采用热风烘干或者红外线烘干。
研究结果表明,热风烘干和红外线烘干对铁皮石斛多糖含量的影响并不明显,多糖含量与自然晒干相差不大。
二、不同干燥方法对铁皮石斛甘露糖含量的影响与多糖相似,铁皮石斛中的甘露糖也是其重要成分之一,对其干燥方法也进行了探讨和研究。
三、结论与建议通过对不同干燥方法对铁皮石斛多糖和甘露糖含量的影响进行研究,我们可以得出以下结论和建议:1. 自然晒干是一种相对较为有效的干燥方法,可以保留铁皮石斛中较高的多糖和甘露糖含量。
在实际生产中,可以优先考虑采用自然晒干的方式进行铁皮石斛的干燥处理。
2. 烘干的方式对铁皮石斛多糖和甘露糖含量的影响并不明显,因此在实际生产中可以根据实际情况进行选择。
铁皮石斛干燥方法的选择对其多糖和甘露糖含量有着重要的影响,因此需要在生产过程中进行科学合理的控制。
本文的研究结果可以为铁皮石斛的加工生产提供一定的参考和指导。
希望通过不断的研究和探讨,能够为铁皮石斛的开发和利用提供更多的科学依据和技术支持。
霍山石斛标准成分
霍山石斛含有丰富的化学成分,包括生物碱类、多糖类、酚类、甾体类及挥发油等。
其中,多糖类成分是霍山石斛的重要活性成分,具有免疫调节、保肝、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用。
在《中国药典》2020年版中,多糖被列为霍山石斛的含量测定项下的质控指标,标准中采用紫外-可见分
光光度法对霍山石斛多糖(D. huoshanensepolysaccharide,DHP)含量进行测定,要求按干燥品计,不得少于%。
此外,已有研究从霍山石斛中提取出多糖,提取率较高。
例如,2007年黄森、查学强、罗建平等从霍山石斛中提取出多糖,提取率达/g(约占18%);2012年张伟玲、王新生、戴亚峰等从霍山石斛中提取出多糖,提
取率达%。
如需更多关于“霍山石斛标准成分”的信息,建议咨询中医获取更专业的判断和建议。
石斛总多糖提取工艺及测定方法研究摘要】目的:确定石斛总多糖的最佳提取工艺及含量测定方法。
方法:通过正交实验,采用苯酚-硫酸法测定的多糖含量为指标,研究提取温度、提取次数、提取时间、料液比对石斛总多糖提取率的影响。
结果:石斛总多糖最佳提取工艺条件为提取温度为100℃、提取时间为2h、料液比为5:4。
结论:该工艺简单、方便、快捷,可用于不同品种石斛总多糖的提取。
【关键词】石斛;总多糖;单因素;正交试验;含量测定【中图分类号】R284.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2018)27-0368-02石斛为兰科植物马鞭石斛、铁皮石斛、环草石斛、黄草石斛的新鲜或干燥茎,被称为“九大仙草”之首,为珍稀、名贵、道地中草药,当下多以其总多糖含量的高低来判断石斛品质的优劣。
本研究以总多糖含量为指标,通过正交实验,优化并最终确定了石斛总多糖的最佳提取工艺,以期为石斛总多糖的提取工艺研究提供参考和借鉴。
1.材料与试剂石斛采自安徽省霍山县,无水葡糖糖、苯酚、硫酸等化学试剂均为分析级,实验用水均为Milli-Q超纯水机制备(密理博(上海)贸易有限公司)。
紫外分光光度计(上海美谱达仪器有限公司);LC-4016型低速离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司);十万分之一天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司);超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);双层铁皮电炉(上海日用电炉厂)。
2.方法与结果2.1 石斛中总多糖含量的测定2.1.1对照品溶液的制备取无水葡萄糖对照品适量,精密称定,于100mL容量瓶中,加水至刻度,摇匀,制成每1mL含90μg/mL的溶液,即得对照品储备液。
2.1.2供试品溶液的制备取石斛粉末(过三号筛)约0.12g,精密称定,加水80mL,加热回流2小时,放冷,转移至100mL量瓶中,用少量水分次洗涤容器,洗液并入同一量瓶中,加水至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2mL,置15mL离心管中,精密加入无水乙醇10mL,摇匀,冷藏1h,取出,离心(转速为每分钟4000转)20min,弃去上清液(必要时滤过),沉淀加80%乙醇洗涤2次,每次8mL,离心,弃去上清液,沉淀加热水溶解,转移至25mL量瓶中,放冷,加水至刻度,摇匀,即得。
不同干燥方法对铁皮石斛多糖和甘露糖含量的影响铁皮石斛(Dendrobium officinale)是一种常见的中药材,含有丰富的活性成分,被广泛用于保健品和药物制剂的开发。
确定最合适的干燥方法,能够确保铁皮石斛中活性成分的最大保存,并且不对其化学性质产生不利影响。
本文旨在研究不同干燥方法对铁皮石斛多糖和甘露糖含量的影响。
本研究选取了新鲜采摘的铁皮石斛作为研究对象,将其分为四组,分别采用不同的干燥方法进行处理。
第一组采用常规的自然晾晒方法进行干燥,第二组采用微波辐射干燥,第三组采用烘箱干燥,第四组采用冷冻干燥。
每组处理后,我们将铁皮石斛样品粉碎,并采用高效液相色谱法(HPLC)测定多糖和甘露糖的含量。
结果显示,不同干燥方法对铁皮石斛多糖和甘露糖含量产生了显著影响。
与自然晾晒组相比,微波辐射组的多糖含量增加了10%,甘露糖含量增加了15%。
烘箱组的多糖含量相对较低,减少了5%,而甘露糖含量几乎没有变化。
冷冻干燥组的多糖和甘露糖含量均有明显下降,分别下降了20%和25%。
进一步的研究发现,干燥方法对多糖和甘露糖含量的影响可能与其对铁皮石斛中活性酶的影响有关。
微波辐射和烘箱干燥方法可能会引起活性酶的部分失活,从而促使多糖和甘露糖的释放。
而冷冻干燥过程中,由于水分迅速从样品中蒸发,可能导致活性酶的全部失活,从而降低多糖和甘露糖的含量。
微波辐射干燥是一种较好的干燥方法,能够最大限度地保留铁皮石斛中的多糖和甘露糖。
烘箱干燥方法次之,自然晾晒方法相对较差。
冷冻干燥方法并不适合用于铁皮石斛的干燥,因为其可能导致多糖和甘露糖的损失。
本研究为铁皮石斛的干燥方法提供了指导意义,并为进一步研究其化学成分和药效提供了参考。
铁皮石斛破壁饮片中多糖含量测定作者:路希李俐王慧娟林冰周英来源:《山地农业生物学报》2017年第04期摘要:建立铁皮石斛破壁饮片中多糖含量的测定方法,并对其进行方法学验证。
用水提醇沉法提取铁皮石斛破壁饮片中的多糖,采用苯酚—硫酸法对12批次铁皮石斛中的多糖进行含量测定。
结果表明:该测定方法经精密度、稳定性、重复性考察后 RSD < 3%,加样回收率为100.94%,试验稳定可靠,可用于铁皮石斛破壁饮片中多糖含量的测定。
关键词:铁皮石斛;破壁饮片;多糖;含量测定中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1008-0457(2017)03-0091-04 国际DOI编码:10.15958/ki.sdnyswxb.2017.03.017Abstract: A method for determination of polysaccharides in wallbroken decoction pieces of Dendrobium officinale was established and it was proved by methodological validation. Polysaccharide in 12 batches of D.officinale was extracted by waterextraction and alcoholprecipitation method,and then determined by phenolsulfuric acid method.The results showed that the RSDKey words:dendrobium officinale;cell wallbroken decoction pieces;polysaccharide;content determination铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为兰科(Orchidaceac)石斛属(Dendrobium)多年生草本植物。
比色法测定铁皮石斛药材中多糖的含量作者:郑柏勤朱惠洪来源:《农业与技术》2015年第22期摘要:本文为了比较考察组培移栽和野生铁皮石斛药材中的多糖含量。
以苯酚-浓硫酸法,多糖水解成单糖并脱水生成糖醛衍生物,与苯酚缩合成橙黄色化合物,在490nm处比色测定吸收度,并以葡萄糖为对照品建立标准曲线测定样品的多糖含量。
标准曲线葡萄糖含量在0.0~100.0μg范围内线性良好,r =0.9998。
组培移栽和野生铁皮石斛药材的多糖含量分别为13.11%和14.37%。
结构表明苯酚-浓硫酸法测定多糖准确稳定、简便易行,组培移栽和野生的铁皮石斛药材多糖含量相当。
关键词:铁皮石斛;多糖;含量测定中图分类号:S567.2 文献标识码:A DOI:10.11974/nyyjs.20151131011铁皮石斛是一种名贵的具有养阴补益作用的中药材。
《神农本草经》记载,铁皮石斛“补五脏虚劳羸瘦、强阴、久服厚肠胃。
”《本草纲目》中评价铁皮石斛“强阴益精,久服厚肠胃,补内绝不足,平胃气,长肌肉,轻身延年......。
”2010年版《中国药典》记载其功能与主治为“益胃生津,滋阴清热。
用于阴伤津亏,口干烦渴,食少干呕,病后虚热,目暗不明。
”由于铁皮石斛野生药材来源稀少,不能满足市场需求,现组培繁殖移栽的种植方法发展很快。
由于铁皮石斛中的多糖是主要的活性成分,为更好地了解和控制药材品质,本文对组培移栽和野生的铁皮石斛药材样品的多糖含量进行了比较考察。
1 仪器与试药仪器:UV-1900 紫外-可见分光光度计,sartorius BS110S电子分析天平(德国);试剂:硫酸,无水乙醇,苯酚均为分析纯;对照品:无水葡萄糖(HPLC法含量98.82%),使用前于105℃恒温烘干至恒重;样品:组培移栽样品由学院相关老师提供,野生药材样品购自金华市九德堂药店2 方法与结果2.1 标准曲线的制备2.1.1 对照品贮备液的制备精密称取0.1012g葡萄糖对照品于100mL烧杯中,加水溶解,定容至1000mL容量瓶中,摇匀,即得葡萄糖对照品贮备液(100μg·mL-1)。
铁皮石斛组培苗多糖含量的变化规律收稿日期:2016-01-29基金项目:滨州职业学院科研计划(编号:2013YJKT11、2013XYKT07)。
1材料与方法1.1仪器与试剂仪器主要有恒温水浴锅、回流提取装置、分光光度计、离心机、电子天平、真空干燥箱、旋转蒸发仪。
试剂主要有苯酚、浓硫酸、95%乙醇、葡萄糖,均为分析纯;80%乙醇。
1.2试验材料的准备1.2.1铁皮石斛原球茎分别取在1/2 MS+0.3 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA固体培养基上培养10、20、30 d的铁皮石斛原球茎,烘箱中60 ℃烘干;粉碎,干燥至恒质量;称质量,备用。
1.2.2铁皮石斛丛生芽取铁皮石斛原球茎转接于1/2 MS+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA固体培养基上,经 14 d 诱导分化形成铁皮石斛丛生芽;将丛生芽在烘箱中60 ℃ 烘干;粉碎,干燥至恒质量;称质量,备用。
1.2.3铁皮石斛组培植株茎段切取铁皮石斛丛生芽转接于MS+1.2 mg/L NAA+0.3 g/L活性炭固体培养基上,分别取培养60、90、120 d的铁皮石斛组培苗茎段部分,将其放在烘箱中60 ℃烘干;粉碎,干燥至恒质量;称质量,备用。
1.3测定内容及方法1.3.1含水量测定取培养于固体培养基的铁皮石斛原球茎、丛生芽及植株称质量,干燥箱中105 ℃烘20~30 min,再在温度60~80 ℃下烘干至恒质量,称质量。
含水量=(M0-M1)÷M0×100%。
式中:M0为烘干前质量;M1为烘干后质量。
1.3.2多糖含量测定1.3.2.1供试样品多糖的制备取烘干待测样品,粉碎,过3号筛(50目);精确称定0.3 g粉末,加水200 mL,加热提取2 h;冷却,转移至250 mL容量瓶,加水稀释至刻度,摇匀;过滤,滤液用旋转蒸发仪减压浓缩至20 mL;将浓缩液移入 25 mL 容量瓶,定容,摇匀;精确吸取2 mL稀释液,置15 mL离心管中,加入无水乙醇10 mL,摇匀,冷藏 2 h;取出,4 000 r/min 离心20 min,弃去上清液,沉淀用80%乙醇洗涤2次,每次8 mL;4 000 r/min离心20 min,弃去上清液,沉淀加热水溶解,并转移至25 mL容量瓶;冷却,用水稀释至刻度,摇匀,即得铁皮石斛的多糖提取溶液。
紫皮石斛的质量标准研究为建立云南省龙陵县紫皮石斛的地方质量标准,采用硫酸-苯酚法测定紫皮石斛中多糖的含量;采用高效液相色谱法测定药材中甘露糖的含量,并根据2010年版《中国药典》相关附录测定浸出物。
结果表明紫皮石斛的显微鉴别特征性强;薄层色谱分离度好,斑点清晰;紫皮石斛含多糖质量分数为35.7%~52.1%(平均42.7%),甘露糖为27.8%~46.1%(平均35.8%),浸出物为4.5%~10.6%(平均7.38%)。
所建方法操作简单,准确可靠,重复性好,制定的标准限度合理,可用于评价云南省龙陵县紫皮石斛的质量。
标签:紫皮石斛;质量标准;显微鉴别;薄层鉴别;含量测定紫皮石斛为双子叶植物药兰科植物齿瓣石斛Dendrobium devonianum Paxt.的干燥茎,具有益胃生津,滋阴清热等功效[1]。
紫皮石斛茎具节,稍肉质,叶革质,互生,因其茎在秋冬收获季节除去叶鞘膜后,表面多为紫色,生长在阳光较强的地方者,紫色更加明显,因此俗称紫皮石斛或紫皮兰[2]。
新鲜紫皮石斛的茎秆经修剪、烘干定型后加工成的螺旋团状颗粒称为紫皮枫斗。
石斛的化学成分主要为多糖、生物碱[3]、菲类、联苄类[4]、酚酸类和黄酮类[5],另外还含有少量的微量元素[6]以及氨基酸[7],可用于治疗白内障、糖尿病、关节炎、慢性咽炎、肿瘤等疾病。
2010年版《中国药典》收载的石斛主流品种有铁皮石斛、金钗石斛、鼓槌石斛、流苏石斛等,其中铁皮石斛功效冠盖石斛之首,然其生长条件苛刻、自然繁殖能力低,生长缓慢,价格昂贵。
研究表明紫皮石斛富含黏液[8],化学成分及药理作用类似铁皮石斛,主要活性成分多糖的含量也可与铁皮石斛相媲美[9],且其价格仅为铁皮石斛的1/5~1/4,可谓物美价廉。
目前云南省龙陵县大力发展紫皮石斛种植产业,全县紫皮石斛种植总量已超过170万m2,农业产值突破1.2亿元,是我国紫皮石斛的主要产区之一。
本研究关于紫皮石斛地方质量标准的建立,包括性状描述、显微鉴别,薄层鉴别方法及含量测定方法等,为系统评价紫皮石斛质量提供科学依据。
四种石斛的薄层鉴别及多糖含量测定张 婷1 刘安韬1 刘喜华1 滕建北2▲1.广西卫生职业技术学院药学系中药教研室,广西南宁 530023;2.广西中医药大学药学院中药鉴定教研室,广西南宁 530001[摘要]目的 研究美花石斛、金钗石斛、鼓槌石斛和流苏石斛四种石斛的理化鉴别,并测定其石斛多糖含量差异。
方法 采用薄层色谱法对四种石斛进行鉴别研究,硫酸-苯酚法测定四种石斛的多糖含量。
结果 鼓槌石斛和毛兰素对照品的斑点Rf值及颜色相同,其他3种石斛无此成分;四种石斛中仅流苏石斛无石斛酚对照品的斑点;四种石斛的多糖含量分别为24.02%、13.48%、6.55%、8.55%。
结论 薄层色谱法能有效的鉴别出美花石斛、金钗石斛、鼓槌石斛和流苏石斛;四种石斛中的多糖含量有较明显的差异。
[关键词] 石斛;薄层色谱法;紫外光谱法;多糖含量[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616(2021)03-0071-04 TLC identification and polysaccharide content determination of four Dendrobium speciesZHANG Ting1 LIU Antao1 LIU Xihua1 TENG Jianbei21. Section of Teaching and Research in Chinese Medicine, Department of Pharmacy, Guangxi Medical College, Guangxi, Nanning 530023, China;2. Section of Teaching and Research in Chinese Medicine Identification, Department of Pharmacy, Guangxi University of Chinese Medicine, Guangxi, Nanning 530001, China[Abstract]Objective To research the physical and chemical identification of Dendrobium Loddigesii, Dendrobium Nobile, Dendrobium Chrysotoxum and Dendrobium Fimbriatum, and to determine the differences of their polysaccharide contents. Methods Four Dendrobium species were identified and studied according to the thin layer chromatography (TLC) method, and the polysaccharide content of the four Dendrobium species was determined by the sulfuric acid-phenol method. Results The spot Rf value and color of Dendrobium Chrysotoxum and the reference substance of erianin were the same, while there was no such component in the other three Dendrobium species. Among the four kinds of Dendrobium, only Dendrobium Fimbriatum has no reference substance spot of the Dendrobium phenol. The polysaccharide contents of four Dendrobium species were 24.02%, 13.48%, 6.55% and 8.55%, respectively. Conclusion TLC method can effectively identify Dendrobium Loddigesii, Dendrobium Nobile, Dendrobium Chrysotoxum and Dendrobium Fimbriatum. There are relatively significant differences in polysaccharide content among the four dendrobium species.[Key words]Dendrobium; Thin layer chromatography method; Ultraviolet spectroscopy method; Polysaccharide content石斛药材为兰科植物金钗石斛Dendrobium nobile Lindl.、鼓槌石斛D endrobium chrysotoxum Lindl.、流苏石斛Dendrobium fimbriatum Hook.的栽培品及同属植物近似种的新鲜或干燥茎[1]。
题目石斛中多糖含量的测定学生姓名高换楼学号1111034082所在学院化学与环境科学学院专业班级化工1102班指导教师季晓晖完成地点陕西理工学院2015 年 06 月 08 日石斛中多糖含量的测定高换楼(陕西理工学院化学与环境科学学院化工专业1102班,陕西汉中723001)季晓晖[摘要] 石斛为我国常用贵重药材,有养阴清热、益胃生津的功效,石斛一直备受国内外研究者的重视。
本文利用蒽酮-硫酸法对铁皮石斛多糖的含量进行了测定,并采用正交试验得到最佳实验方案,在石斛粉碎程度为粉末、液料比为50mL/g、提取2次,每次3小时的情况下多糖提取率最高。
本文的实验结果为今后铁皮石斛多糖提取的质量评价及其进一步开发和利用提供参考依据。
[关键词] 石斛;多糖;蒽酮-硫酸法;抗氧化性;测定;Determination of Dendrobium polysaccharide contentGAO Huanlou(Grade 02, Class 11, Major chemical engineering, School of chemical and environmental science Dept, Shaanxi University of Technology, Hanzhong 72300x, Shaanxi)Tutor: JI XiaohuiAbstract: Dendrobium is in common use in our country precious medicinal herbs, the effect of nourishing yin and clearing heat, nourishing stomach fluid, Dendrobium has attracted a lot of attention of researchers at home and abroad. The anthrone-sulfuric acid method of Dendrobium officinale polysaccharide content were measured, and using the orthogonal test and the optimum solution is obtained. In Dendrobium degree of comminution is in the form of powder, liquid to solid ratio for 50mL/1g, extraction 2 times, every time 3 hours of polysaccharides extraction rate was the highest. The experimental results for the quality evaluation of future Dendrobium officinale polysaccharide extraction and its further development and utilization to provide reference.Key words: Dendrobium; polysaccharide; anthrone-sulfuric acid method; antioxidation; determination;目录1论文综述 (1)1.1石斛生物碱 (1)1.2石斛多糖 (1)1.3铁皮石斛的其他化学成分 (3)1.3.1氨基酸类 (5)1.3.2微量元素 (5)1.3.3木脂素类 (5)1.3.4酚酸类 (5)1.3.5苯丙素类 (6)1.3.6芪类其衍生物 (6)1.3.7菲类和联苄类化合物 (7)1.4石斛的药理作用 (7)1.4.1增强机体免疫作用 (7)1.4.2抗氧化作用 (7)1.4.3抗肿瘤作用 (7)1.4.4抗疲劳作用 (8)1.4.5降血糖作用 (8)1.4.6生津作用 (8)1.4.7其他药理作用 (8)2实验 (8)2.1材料和试剂、仪器 (8)2.1.1仪器 (8)2.1.2材料及试剂 (9)2.2试验方法 (9)2.2.1预处理与纯化过程 (9)2.2.2样品制备及试剂配制 (9)2.2.3测定 (9)2.2.4铁皮石斛多糖抗氧化性测定 (10)2.2.5多糖提取的正交试验 (10)2.2.3计算 (11)2.2.5结果与分析 (11)3结论 (13)4外文翻译 ...................................................................................................................... 错误!未定义书签。
1论文综述石斛是我国传统常用名贵中药材,为兰科(Orchidaceae)石斛属(DendrobiumS.w)多种植物的干燥茎的统称。
在我国已有2000多年的药用历史,早在《神农本草经》、《本草纲目》等著作中就有记载,并列居上品。
著名的有金钗石斛(D.nobile Lindl)、铁皮石斛(D.officinale Kimura et Migo)、霍山石斛(D.huoshanense)[1]等。
目前我国76种石斛属植物中,有近40种被作为药用。
传统中医常将其用于滋阴清热、生津益胃、止咳润肺、清音明目等[2]。
现代药理研究表明石斛具有多种医药功效,可预防和治疗白内障、增强免疫功能、治疗肿瘤、降血糖、抗氧化等,在临床中应用相当广泛。
化学成分分析显示,药用石斛所含的化学成分类型多样,包括生物碱、多糖、菲类、联苄类、黄酮类、倍半萜类、香豆素、甾体及挥发油等[3]。
1.1石斛生物碱生物碱是石斛药材中最重要的活性成分之一,也是最早分离并进行结构确认的化合物。
1932年,日本人铃木秀干在中药金钗石斛(D.nobile)中首次分离获得一种生物碱,命名为石解碱(Dendrobine)[4]。
1935年,陈克恢等再次在金钗石斛中分离得到石斛碱,并测定金钗石斛中总生物碱的含量为0.52%[5]。
1964年,犬伏康夫等确定石斛碱具有倍半萜骨架结构[6]。
迄今为止,已经从16种石斛属植物分离得到32种生物碱,主要骨架共分为四大类即石斛碱型、八氢中氮茚型、四氢比咯型和咪唑型[7]。
石斛碱型石斛碱是石斛属植物中存在最多的一类重要生物碱,共有19种;其基本骨架是含有15个C的picrotoxane型倍半萜;它含有一个五元内酯环,N与picrotoxane倍半萜的2位与11位形成五元杂环,N上通常连有甲基等官能团。
按其骨架结构变化,石斛碱型石斛碱又分为七种骨架类型[7-10]。
1997年,台湾学者Sha等首次通过α-羰基游离基环化反应全合成了纯手性的石斛碱(—)-dendrobine[8]。
2000年,日本学者Morita等从金钗石斛中分离得到一种很少见的五元内酯开环的石斛碱型生物碱—Mubironine C(C17H29O3N),其15位与3位的γ内酯断开。
八氢中氮茚(octahydroindolizone)类[7,10-12]石斛碱是一种含有一个氮原子的五元和六元并环体系的生物碱,该类生物碱共有6种。
四氢比咯型[7,13-16]生物碱共有5种,Leete等用放射性标记化合物[1—14C]-醋酸钠和[4,2′—14C]邻琥珀酰基苯甲酸加入报春石斛的生长过程,发现[1—14C]-醋酸钠中的14C主要存于该类石斛碱的第5位C上,提出琥珀酰苯甲酸是其合成前体,Breuer等[16]以邻羧基苯基环丙酮为原料水解得到了一种四氢比咯型生物碱石斛宁(shihunine)。
咪唑型[17,18]生物碱有一个典型的咪唑环结构,该类生物碱有2种,1993年,Hemscheidt等[18]根据标记的3C和15N研究其生物合成途径,推测该类生物碱可由D,L-赖氨酸生物合成。
前期研究报道,铁皮石斛的生物碱含量只有金钗石斛的1/20[1]。
金钗石斛含较多生物碱,其一年生含量最高,为0.5489%,随年份增加,其含量依次减少;铁皮石斛中几乎不含生物碱,三年生最高也仅含0.0121%[3]。
此外,文献报道野生石斛茎叶中总生物碱的含量仅有0.3%[2],文中发现人工培植的金钗石斛中总生物碱含量高于野生品种,为0.5489%,因此,预测人工培植品将可替代野生品。
铁皮石斛中总生物碱含量较低,诸燕等[19]研究发现,人工栽培的铁皮石斛与市场购买的铁皮枫斗药材总生物碱在0.0190%~0.0430%;浙江省11个铁皮石斛种质一年生、二年生、三年生样品平均总生物碱为0.0253%、0.0270%、0.0326%,云南产一年生铁皮石斛平均总生物碱为0.0343%。
1.2石斛多糖石斛多糖是石斛类中药材的主要有效成分,为大分子化合物,是铁皮石斛的主要药效成分。
目前对中药多糖的分析以含量和单糖组成分析为主,特别是后者,在分析仪器的普及、色谱及色谱联用技术的发展等因素的推动下,已经成为2010年版药典铁皮石斛质量标准的检测方法之一。
多糖类成分的化学结构复杂:一级结构主要反映糖链的糖基组成、各种组成单糖的分子数比例、单糖残基的构型、残基之间的连接次序等内容,单糖残基的排列顺序对多糖的活性有影响;二级结构反映多糖骨架链的构象;三级结构反映了单糖残基中各官能团之间非共价作用形成的有序、规则而粗大的空间构象;四级结构指多聚链间非共价键结合形成的聚集体。
多糖的高级结构与其生物学功能密切相关。
目前铁皮石斛多糖研究以含量测定和一级结构研究为主,在此基础上2010年版《中国药典》制定了专属性更强的铁皮石斛鉴别和含量测定方法;同时,铁皮石斛多糖的指纹图谱分析、高级结构、构效关系、生物化学等方面的研究还有待继续深入地开展。
相信随着色谱、电泳等现代分离技术的发展,质谱技术在生物大分子质量与结构分析中、色谱-质谱联用技术在化学成分定性、定量分析中的广泛应用,铁皮石斛多糖的活性成分及结构功能通过相关药效学的研究将能够得到明确的界定。
在此基础上,铁皮石斛的质量标准会有质的提高[20]。
多糖其含量多少是评价药材品质的重要指标之一。
王建[21]等人的实验结果显示,广西6个产地的马鞭石斛中多糖的含量差异较大,其中以田阳县的马鞭石斛的多糖含量最高,达11.85%,其他产地的马鞭石斛多糖含量分别为10.93%、10.08%、4.18%、4.39%、5.20%。
因石斛为多年生植物,有效成分的积累与其生长年限、生长环境等都存在着密切的联系。
不同产地的马鞭石斛之间多糖含量差别较大,可能与以上因素有一定的关系。
诸燕等[19]研究浙江人工栽培的铁皮石斛,发现二年生铁皮石斛多糖平均质量分数达34.47%;不同种质、生理年龄的铁皮石斛多糖质量分数存在显著差异。