微生物实验
微生物实验
细菌形态观察
细菌分布
消毒灭菌
微生物实验报告
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细菌形态观察
一、实验目的
1. 掌握光学显微镜（油镜）的使用及日常维护
2. 掌握细菌的三种形态
3. 掌握临床常见细菌的形态及染色
4. 掌握细菌的特殊结构
5. 了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点
二、实验原理
1. 普通光学显微镜（油镜）的使用
1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油，然后转换油镜头
2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴内，当油镜头几乎接触玻片时停止转动，以免碰撞玻片，用双眼观察目镜，同时调节细调节器，直至细菌清晰
3. 根据需要调节显微镜亮度
2. 普通光学显微镜的维护
1. 移动显微镜时，用右手持镜壁，左手托镜座，平端于胸前
2. 油镜用毕后， 要立即用擦镜纸擦去香柏油；再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头；最后，用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去，以免损伤油镜头
3. 镜头擦净后，降低接物镜并将其转成八字形，罩好镜罩放入柜内
4. 做好使用记录
3． 微生物知识
1． 细菌按形态分类：
球菌：球形（包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等）
杆菌：杆状（包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等）
螺旋菌：螺旋状（包括螺旋菌、弧菌等）
2． 细菌的基本结构
细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体
3． 细菌的特殊结构
荚膜：如肺炎双球菌
鞭毛：又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。如：变形杆菌为周毛菌
菌毛
芽胞：如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌
4． 微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称，包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类：细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体
真核类：真菌、原生动物、显微藻类
（2020年整理）微生物实验报告：水中细菌总数和大肠菌群的检测.doc
报告编号：XXXX-20200607-001
检测单位：XXXX实验室
受检单位：XX科技有限公司
报告日期：2020年6月07日
一、实验目的
水是鱼类生存和繁殖等重要活动场所，细菌总数和大肠菌群的检测是检测水质及鱼类生存状况的重要检测项目。本次实验的目的是检测被试水的细菌总数和大肠菌群，以评价水质的卫生情况。
二、实验原理
检测水质中的细菌总数和大肠菌群，采用称量法和MPN法。称量法，是指将水样用适量至特定容器中，再加入培养基或正常培养基，加热杀菌，将培养基分装到干燥无菌条件下的多瓶子或多孔板中，经历恢复培养、适度积累、分离离心等步骤后，最终细菌总量计数，从而对水中细菌总量进行评估。MPN法，是指以MPN表的形式，将被试水按比例加入带有不同浓度的培养基中，再考察由被试水所产生的菌落数。结合特定的标准格式，最终结合细菌种类分布，可以得出该试样的大肠菌群的成分及数量。
三、实验材料
1、实验用品：被试水、NaCl 溶液、硝酸铵溶液、常规培养基、研磨液、HgCl2溶液、可计数杆菌；
2、实验仪器：细菌计数器、酸碱度计、烧杯、细胞培养箱、紫外线安全柜、隔离台等。
四、实验步骤
1、水样收集：将被试水用500mL烧瓶采集；
2、细菌总数检测：将水样加入常规培养基，经恢复培养、适度积累等步骤，最终在培养基表面细菌计数，取结果最大值作为该样细菌总数；
3、MPN测定：按MPN表的形式，将被试水按比例加入带有不同浓度的培养基中，再考察由被试水产生的菌落数，进而得出大肠菌群； 4、实验结果：按比例表分析实验结果，得出样品中大肠菌群的浓度及细菌种类分布情况。
五、实验结果
根据实验结果，被试水中的细菌总数为2.8×105 c.f.u/ml，大肠菌群的数量为3×102 c.f.u/ml，甲烷产生菌的数量为9 c.f.u/ml，发酵碳水化合物的菌的数量为4
精品文档
。 1欢迎下载 年级：2009 专业：医学检验 班级：一班 姓名：赵富海 学号：2009221792
实验八、细菌的药物敏感试验
【K-B法】
菌种（均为幼龄菌）：金黄色葡萄球菌1.5×108/ml、大肠埃希菌1.5×108/ml
药物纸片：青霉素、庆大霉素、新诺明、环丙沙星
方法：
1.涂菌（棋盘划线法），室温放10min；
2.贴药敏纸片，注意间距（大于24mm）和边距（大于15mm）；
3.置35℃ 24h判读结果。
结果如图所示：
金黄色葡萄球菌
测抑菌环直径（单位：mm）：
菌种 抗生素 1-青霉素 2-庆大霉素 3-新诺明 4-环丙沙星
金黄色葡萄球菌 23mm 19mm 28mm 25mm
金黄色葡萄球菌抗菌药物敏感性试验评价结果
实验结论：金黄色葡萄球菌对青霉素耐药，对庆大霉素、新诺明、环丙沙星敏感。
【试管稀释法】
菌种：金黄色葡萄球菌1.5×108/ml、大肠b1.5×108/ml
抗生素：庆大霉素32u/ml
方法：
1.对倍稀释抗生素
2.加菌液0.1ml/管，摇均35℃ 16—18h 精品文档
。 2欢迎下载 3.判读MIC
试验操作如下图所示：
注意 :设立对照管(肉汤对照管,待测菌生长对照管和质控菌生长对照管)
结果判断: 不出现肉眼可见生长的最低药物浓度为该药对该细菌的MIC.
如图：
实验结论：MIC=原药物浓度(32u/ml) ×稀释倍数(1:24)=2u/ml
【联合药敏试验】（示教）
金黄色葡萄球菌 大肠b
结果判断：
金黄色葡萄球菌联合药敏试验结果判读：
①青+链=青单+链单→相加作用
②青+红=青单+红单→相加作用 精品文档
。 3欢迎下载 ③青+万=青单+万单→相加作用
④青+林＞青单+林单→协同作用
大肠b联合药敏试验结果判读：
第1篇
一、实验目的
1. 了解环境细菌的培养方法及注意事项。
2. 学习细菌菌落的观察和鉴定。
3. 掌握无菌操作技术。
4. 通过实验，提高实验操作技能和团队协作能力。
二、实验原理
细菌是一类微小的单细胞生物，广泛存在于自然界中。细菌培养是研究细菌生物学特性的基本方法之一。本实验通过在特定环境中培养细菌，观察其生长和繁殖情况，从而了解环境细菌的种类和数量。
三、实验材料
1. 环境样品：土壤、水体、空气等。
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养琼脂培养基、伊红美蓝培养基等。
3. 培养器具：培养皿、接种环、酒精灯、高压蒸汽灭菌器等。
4. 其他：无菌水、生理盐水、无菌棉签、镊子、剪刀、显微镜等。
四、实验步骤
1. 样品采集与处理
（1）采集环境样品：根据实验要求，采集土壤、水体、空气等样品。
（2）样品处理：将采集到的样品进行适当处理，如研磨、过滤等，以获得均匀的样品。
2. 培养基制备与灭菌
（1）制备培养基：根据实验要求，选择合适的培养基，按照说明书配制。
（2）灭菌：将制备好的培养基分装到培养皿中，进行高压蒸汽灭菌。
3. 接种与培养 （1）接种：用无菌棉签蘸取适量样品，在培养基表面进行划线或点种。
（2）培养：将接种好的培养皿放入恒温培养箱中，在适宜温度下培养。
4. 菌落观察与鉴定
（1）观察：培养一段时间后，观察培养基上的菌落生长情况，记录菌落特征。
（2）鉴定：根据菌落特征，如颜色、形态、大小等，对菌落进行初步鉴定。
5. 结果分析
根据菌落特征，对培养出的细菌进行分类和计数，分析环境细菌的种类和数量。
五、实验结果与分析
1. 土壤样品培养结果
在牛肉膏蛋白胨培养基上，观察到多种菌落生长，其中以金黄色、白色、灰色等为主。经初步鉴定，这些菌落可能为细菌、放线菌等。
2. 水体样品培养结果
在水体样品中，观察到较多菌落生长，以白色、绿色、棕色等为主。初步鉴定，这些菌落可能为细菌、藻类等。
