下载文档原格式
一、实验目的1. 掌握临床微生物学实验的基本操作方法。
2. 了解临床常见病原微生物的形态、染色、培养和鉴定方法。
3. 培养无菌操作意识，提高实验技能。
二、实验内容1. 实验材料（1）实验用菌：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎链球菌、白色念珠菌等。
（2）实验试剂：革兰染色液、结晶紫染液、碘液、酒精、无菌生理盐水、营养琼脂、血琼脂、沙堡培养基等。
（3）实验仪器：显微镜、接种环、接种针、培养皿、酒精灯、无菌棉拭子、滴管、镊子等。
2. 实验方法（1）形态学观察①革兰染色：将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎链球菌分别涂片，进行革兰染色，观察菌体染色结果。
②念珠菌形态观察：将白色念珠菌涂片，进行染色，观察菌体形态。
（2）培养与鉴定①金黄色葡萄球菌培养：将金黄色葡萄球菌接种于营养琼脂平板，37℃培养24小时，观察菌落特征。
②大肠杆菌培养：将大肠杆菌接种于营养琼脂平板，37℃培养24小时，观察菌落特征。
③肺炎链球菌培养：将肺炎链球菌接种于血琼脂平板，37℃培养24小时，观察菌落特征。
④白色念珠菌培养：将白色念珠菌接种于沙堡培养基，25℃培养48小时，观察菌落特征。
（3）生化试验①氧化酶试验：取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌分别接种于氧化酶试剂管，观察结果。
②葡萄糖发酵试验：将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌接种于葡萄糖发酵管，37℃培养24小时，观察结果。
三、实验结果1. 形态学观察金黄色葡萄球菌：革兰阳性球菌，菌体呈球形，成对或呈葡萄串状排列。
大肠杆菌：革兰阴性杆菌，菌体呈杆状，排列成链状。
肺炎链球菌：革兰阳性球菌，菌体呈球形，成对排列。
白色念珠菌：革兰阳性酵母菌，菌体呈圆形或卵圆形，有时可见芽孢。
2. 培养与鉴定金黄色葡萄球菌：在营养琼脂平板上形成金黄色菌落。
大肠杆菌：在营养琼脂平板上形成粉红色菌落。
肺炎链球菌：在血琼脂平板上形成透明、β溶血环。
白色念珠菌：在沙堡培养基上形成白色、绒毛状菌落。
3. 生化试验金黄色葡萄球菌：氧化酶试验阴性，葡萄糖发酵试验阳性。
微生物学中的微生物培养与鉴定实验报告实验目的：本实验旨在学习并掌握微生物培养与鉴定的基本方法，了解微生物在培养基上的生长特性，并通过鉴定方法对其进行初步鉴定。
材料与设备：- 需要培养的微生物样本- 培养基（固体培养基和液体培养基）- 培养皿- 移液器- 培养箱- 显微镜- 染色剂（如甲基蓝、格拉姆染色等）- 鉴定手册或相关资料实验步骤：一、准备工作1. 检查培养箱的温度设定，保证培养环境的恒温。
2. 准备好所需的培养基，分别配置固体培养基和液体培养基。
二、微生物培养1. 将固体培养基倒入培养皿中，用移液器从微生物样本中取得少量细菌液滴于培养基表面。
2. 用棉签均匀地将细菌液在培养基表面涂抹，以形成单个菌斑或菌落。
3. 将盖子盖好，将培养皿放入预先恒温的培养箱中，设置适当的培养条件（如温度、湿度等），进行培养。
三、液体培养1. 将充足的液体培养基倒入培养瓶中，按照实验要求加入适量的微生物样本。
2. 盖好培养瓶盖，轻轻摇晃，使微生物均匀悬浮于培养基中。
3. 将培养瓶放入培养箱中，设置适当的培养条件进行培养。
四、微生物鉴定1. 取出培养好的微生物样本，观察其培养特性，如菌落形态、颜色、大小等，并记录相关观察结果。
2. 可根据需要，在液体培养基中进行荧光反应、氧需求等特定实验，以进一步鉴定微生物。
3. 对需要深入鉴定的微生物样本，可进行微生物染色，如甲基蓝染色、格拉姆染色等常用染色方法，观察染色后的细菌形态，并与鉴定手册或相关资料进行对照。
结果与讨论：通过本次实验，我们成功地培养了微生物样本，并通过观察菌落特征和染色方法进行了初步的微生物鉴定。
根据观察结果，我们可以初步判断微生物属于哪个种类或属。
然而，本实验只是初步鉴定，对于微生物种类的确切鉴定还需要进一步深入的实验或分析。
对于未能明确鉴定的微生物种类，可以继续进行相应的实验或请专业人员进行进一步的鉴定。
结论：微生物培养与鉴定是微生物学研究中的基础内容。
第1篇一、实验目的1. 掌握病菌纯化培养的基本原理和方法。
2. 熟悉无菌操作技术，确保实验结果的准确性。
3. 通过实验，加深对病菌生长、繁殖特性的理解。
二、实验原理病菌纯化培养是微生物学实验中的重要环节，其目的是从混杂的微生物群体中分离出单一菌株。
通过选择合适的培养基和适当的培养条件，可以使目标病菌生长繁殖，同时抑制其他微生物的生长，从而获得纯培养。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 土壤样品- 病菌培养皿（平板）- 病菌接种环- 病菌培养箱- 显微镜- 病菌分离培养基- 生理盐水- 75%酒精- 灭菌棉签- 紫外线消毒灯2. 实验仪器：- 灭菌锅- 灭菌器- 高压蒸汽灭菌器- 电子天平- 移液器- 恒温水浴锅四、实验步骤1. 样品采集与处理：- 从土壤中采集适量样品，放入无菌容器中。
- 将样品用生理盐水稀释，制成10^-1、10^-2、10^-3等不同浓度的稀释液。
2. 平板划线法分离：- 将稀释液分别涂布在平板分离培养基上。
- 使用无菌接种环，按照平板划线法进行划线操作。
- 将划线后的平板倒置，放入培养箱中，在适宜的温度和湿度下培养。
3. 单菌落挑取：- 观察平板上的菌落，选择单个、形态一致、生长良好的菌落。
- 使用无菌接种环，将单个菌落挑取至新的平板分离培养基上。
- 重复上述操作，直至获得纯培养。
4. 纯培养鉴定：- 将纯培养的病菌进行显微观察，记录其形态、大小、颜色等特征。
- 对纯培养的病菌进行生化实验，鉴定其种类。
5. 结果记录与分析：- 将实验结果进行记录和分析，包括菌落特征、显微观察结果、生化实验结果等。
五、实验结果与分析1. 菌落特征：- 观察到纯培养的病菌菌落呈圆形、光滑、湿润、边缘整齐，菌落大小约为1-2mm。
2. 显微观察结果：- 显微镜下观察到纯培养的病菌为革兰氏阴性菌，细胞呈杆状，长度约为1-2μm。
3. 生化实验结果：- 纯培养的病菌在葡萄糖、乳糖、麦芽糖等糖类培养基上生长良好，产酸产气。
微生物学实验报告微生物学实验报告实验目的：观察和学习微生物在不同条件下的生长和繁殖特性。
实验原理：微生物是一类非常小型的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
它们广泛存在于自然界中的土壤、水体和空气中。
微生物可以通过分裂、繁殖等方式进行增殖，并且受到温度、pH值、营养条件等环境因素的影响。
实验材料：培养皿、琼脂、试管、移液器、细菌液等。
实验步骤：1. 准备好所需的培养皿，将琼脂均匀地倒入各个培养皿中。
2. 将培养皿放入高压锅中进行高压灭菌处理，以杀死培养皿中的病原体。
3. 等待琼脂冷却固化后，将培养皿倒置放置。
4. 使用无菌手术针，从微生物液体中获取一定量的微生物液体。
5. 将微生物液体均匀地涂抹在琼脂培养皿上。
6. 使用无菌眼刷将一部分涂抹的微生物液体划线，以便观察微生物的生长情况。
7. 将培养皿放入恒温箱中进行培养，并设置不同的温度、pH 值、营养条件等。
8. 每隔一段时间，观察培养皿上微生物的生长情况，并记录下来。
实验结果和分析：根据观察和记录的结果，我们发现微生物在不同条件下的生长速度和繁殖能力是有差异的。
在适宜的温度、pH值和营养条件下，微生物的生长速度相对较快，生物量也相对较高。
而在不适宜的条件下，微生物的生长速度会减慢或停止，甚至会死亡。
实验结论：微生物的生长和繁殖特性与环境条件密切相关。
适宜的温度、pH值和营养条件可以促进微生物的生长和繁殖，而不适宜的条件会影响微生物的生长。
因此，在实际应用中，我们需要根据微生物的需求条件来选择合适的培养条件，以提高微生物的生长和繁殖能力。
实验总结：通过本次实验，我们进一步了解了微生物在不同条件下的生长和繁殖特性。
微生物的生长和繁殖受到温度、pH 值、营养等环境因素的影响，这是我们在环境控制和微生物培养中需要注意的因素。
掌握微生物的生长和繁殖特性，有利于我们更好地应用微生物技术，并解决一些与微生物相关的问题。
微生物学实验报告答案微生物学实验报告答案引言：微生物学是研究微生物的结构、功能、分类、生长、繁殖以及微生物与其他生物之间的相互作用的学科。
在这个实验报告中，我们将讨论一些关于微生物学实验的答案，以帮助读者更好地理解微生物学的基本概念和实验技术。
实验一：细菌培养与观察在这个实验中，我们通过培养细菌并观察其形态和结构来研究细菌的特征。
1. 细菌培养基的选择：细菌培养基通常包括富含营养物质的琼脂和适当的缓冲液。
常用的培养基有LB （Luria-Bertani）培养基、MacConkey琼脂培养基等。
选择合适的培养基对于细菌的生长和观察非常重要。
2. 细菌培养条件：细菌培养需要一定的温度、湿度和氧气条件。
通常，细菌培养在37摄氏度下进行，因为这是大多数人体病原菌的适宜生长温度。
此外，培养皿需要保持湿润，以确保细菌的生长。
对于厌氧菌的培养，需要使用厌氧培养箱。
3. 细菌形态和结构观察：在观察细菌形态和结构时，可以使用显微镜。
细菌的形态包括球菌、杆菌和螺旋菌等。
此外，细菌还具有不同的结构特征，如菌落形态、荚膜和鞭毛等。
通过观察这些特征，我们可以初步鉴定细菌的种类。
实验二：细菌的致病性测试在这个实验中，我们将研究细菌的致病性，了解细菌在人体内引起疾病的机制。
1. 动物模型的选择：为了研究细菌的致病性，我们通常使用动物模型。
常见的动物模型包括小鼠、大鼠和兔子等。
选择合适的动物模型对于研究细菌的致病性非常重要。
2. 细菌接种和观察：在动物模型中，我们将细菌接种到动物体内，观察细菌是否引起疾病。
观察的指标可以包括动物的行为改变、体温升高和组织病理学变化等。
通过这些观察，我们可以评估细菌的致病性。
3. 细菌致病性机制的研究：细菌引起疾病的机制非常复杂，包括产生毒素、侵袭宿主组织和抑制免疫系统等。
通过研究细菌的致病性机制，我们可以更好地理解细菌与宿主之间的相互作用，为疾病的预防和治疗提供理论基础。
实验三：抗生素敏感性测试在这个实验中，我们将研究细菌对抗生素的敏感性，以评估抗生素的疗效。
微生物学实验报告微生物学实验报告引言微生物学是一门研究微小生物的科学，它涉及到微生物的分类、结构、生理、生态以及与人类和环境的相互作用等方面。
本实验旨在通过观察和分析微生物的生长特性，了解微生物的繁殖规律和影响因素。
实验方法1. 实验材料准备我们选择了常见的细菌和酵母菌作为实验材料。
实验中使用的培养基包括富含营养的琼脂培养基和含有特定营养物质的选择性培养基。
实验器材包括培养皿、试管、移液管等。
2. 实验步骤首先，我们将培养皿分成不同的区域，分别涂抹不同的微生物样本。
然后，将培养皿放入恒温培养箱中，控制温度和湿度，观察微生物在不同条件下的生长情况。
接下来，我们将微生物样本接种到含有特定营养物质的选择性培养基上，观察其生长情况，以了解微生物对不同营养物质的需求。
实验结果在琼脂培养基上，我们观察到细菌和酵母菌在适宜的温度和湿度条件下迅速生长。
细菌呈现出白色或黄色的菌落，而酵母菌则呈现出乳白色的菌落。
在选择性培养基上，我们发现不同微生物对营养物质的需求有所不同。
例如，某些细菌只能在含有特定氨基酸的培养基上生长，而在其他培养基上则无法繁殖。
讨论与分析微生物的生长受到多种因素的影响，包括温度、湿度、营养物质等。
在实验中，我们控制了温度和湿度，使其处于适宜的范围，从而促进微生物的生长。
此外，我们还观察到微生物对不同营养物质的需求不同，这与微生物的代谢特性有关。
不同微生物的代谢途径和需求差异导致它们对不同营养物质的利用能力不同。
微生物的快速繁殖和适应性使其在自然界中起到重要的作用。
它们参与了有机物质的分解和循环，维持了生态系统的平衡。
此外，微生物还可以用于生物工程和医学领域。
例如，利用细菌进行基因工程，可以生产出许多重要的药物和化学物质。
然而，微生物也可能对人类和环境造成危害。
某些微生物会引起传染病，给人类的健康带来威胁。
此外，微生物还可能对环境产生负面影响，例如导致水体富营养化和生态系统的破坏。
结论通过本次实验，我们深入了解了微生物的生长特性和影响因素。
微生物学实验报告实验一普通光学显微镜的使用及细菌染色与形态观察第一部分：显微镜的使用一、目的要求1．熟悉普通光学显微镜的构造、油镜的使用原理和显微镜的维护方法。
2．学会正确使用油镜观察细菌的基本形态和特殊构造。
3．了解各种显微镜的主要特征。
二、实验原理（一）光学显微镜的构造微生物实验室中最常用的是普通光学显微镜，它的构造可分为机械部分和光学部分。
1、机械部分普通复式光学显微镜的机械部分通常包括以下几个部分：目镜、镜筒、基座回转器、物镜、载物台、光圈、聚光器、光源、镜臂、细调节器、粗调节器等。
2、光学部分：目镜、物镜、聚光器、光圈、光源。
（二）放大倍数标本首先经物镜放大，在目镜的焦距平面上形成一个实像，再经过目镜放大成最终的虚像。
总的放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。
物镜的放大倍数愈大，其工作距离（物镜镜头到标本片之间的距离）愈短，这时光圈就要打开得愈大。
显微镜的性能受物镜的分辨距离或分辨力所限制。
分辨距离即透镜所能分辨的两个物点之间的最小距离，分辨距离愈小，透镜的分辨力愈高，物像也就愈清晰。
因此常以分辨距离来衡量显微镜的分辨力。
R=0.61λ/N.A式中：R-----分辨距离；λ------作用光的波长；N.A------数值口径。
一些介质的折射率介质折射率空气水玻璃香柏油1 13 55 1.56三、实验内容（一）材料：显微镜，香柏油，擦镜纸。
（二）方法：细菌很小，须使用油镜方可观察到。
油镜是显微镜上最重要的部件之一，观察时与玻片非常接近，稍不小心即可压碎玻片，更严重的是损坏镜头，故必须极其仔细地学习油镜的使用方法：1、为使低倍镜取得最适之光源，可将低倍镜头调节到离载物台约1cm的高度，将聚光器提高，光圈完全打开，然后调节电压旋钮至视野最合适。
2、滴一滴香柏油，固定于载物台上，用推动器调节到载物台正中。
在双目侧视下，下旋粗调节器，使油镜头浸入油中几乎与标本片相接触。
然后眼睛从目镜观察（如光线不足，可适当增大电源电压），徐徐上旋粗调节器至看到模糊物像之后，再用细调节器调节以使物像清晰。
微生物学实验报告（一）题目：实验室环境和人体表面的微生物观察姓名：喻曙光学号：年级班级：生命学院2010级生命基地组别：4同组者：一、实验器材1．培养基肉膏蛋白胨琼脂平板2．溶液和试剂无菌水，牛肉膏，蛋白胨，NaCl，琼脂、氢氧化钠溶液等。
3．仪器和其他用品灭菌棉签（装在试管内），试管，试管架，酒精灯，记号笔，废物缸，接种环，三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，高压蒸汽灭菌锅，pH试纸（pH5.5~9.0），棉花，牛皮纸，麻绳，纱布，平皿、剪刀等。
二、目的要求1、证实实验室环境与人体表面存在微生物。
2、体会无菌操作的重要性。
3、观察不同菌落类群微生物的菌落形态特征。
4、比较不同条件下细菌的数量及类型。
5、熟练掌握从固体培养物中转接微生物的无菌操作技术。
6、学习掌握培养基的配置原理。
7、通过对几种培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。
三、基本原理如何知道我们的周围存在看不见的微生物呢？也就是说任何使看不见的变得看得见呢？第三部分介绍的显微技术是一种方法，这是通过发的微生物个体，使我们能过看到他们。
另一种方法是通过放大成子细胞群体（菌落），使我们看到他们的存在，即通过培养的方法是肉眼看不见的单个个体在固体培养基上经过长期的生长繁殖形成几百万的菌聚集在一起的肉眼可见的菌落。
本实验将采用后一种方法检查实验室环境和人体表面微生物，从而使我们牢记无菌概念。
高温对微生物具有致死效应，因此在微生物的转接过程中，一般在火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环，以达到灭菌的目的，但一定要保证其冷却后方可进行转接，以免烫死微生物。
高压蒸汽灭菌。
高压蒸汽灭菌是将灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾儿产生蒸汽。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时，由于蒸汽不能溢出，儿增加了灭菌锅内的压力，从而使沸点增高，得到高于100°C的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
微生物学实验报告(免费)
实验目的：
通过实验，了解微生物的基本特征，掌握微生物的培养和观察方法，提高对微生物的认识。
实验材料：
1. 实验室培养基
2. 微生物培养物
3. 显微镜
4. 微生物培养器具（如培养皿、试管等）
5. 显微镜玻片和盖玻片
6. 高温灭菌器
实验步骤：
1. 准备培养基和培养物：将培养基倒入培养器具中，加入微生物培养物。
根据需求，选择不同的培养基进行培养。
2. 培养微生物：将培养器具放入恒温箱或培养箱中，控制好温度和湿度等条件，让微生物得到适宜的生长环境。
3. 观察微生物：取适量的培养物涂抹在显微镜玻片上，加上盖玻片，放在显微镜上观察。
调节显微镜的放大倍数和焦距，观察微生物的形态、数量和运动等特征。
4. 记录观察结果：根据实际观察情况，记录下微生物的性状，如形态、大小、颜色、数量等。
5. 清洁工作：实验结束后，清洁培养器具，将已使用过的玻片进行消毒处理，彻底清洁实验室设备和环境。
实验结果：
根据实际观察，记录下微生物的形态、大小、运动等特征。
可以通过观察和比较不同微生物的特征，进行分类和鉴定。
实验结论：
通过本实验，加深了对微生物的认识和了解。
掌握了一些基本的观察和培养方法，为今后深入研究微生物打下了基础。
注意事项：
1. 实验操作时要注意无菌操作，避免外界细菌的污染。
2. 实验室要保持清洁，定期消毒，防止微生物的交叉感染。
3. 注意个人安全，避免操作时的误伤和化学品的误食等意外情况。
微生物学实验报告在微生物学这个学科中，实验是最为重要的一环。
通过实验可以探究微生物的结构、生物学特性、遗传变异和环境适应等方面的问题。
本文将介绍我所做的微生物学实验及其结果，旨在探讨微生物在生物环境中的行为和特性。
实验一：细菌培养和实验设计在这个实验中，我所选的是常用的大肠杆菌(E. coli)。
首先，我需要配置LB(Luria-Bertani)培养基和无菌平板培养基。
然后，我从冷冻样品中取出大肠杆菌株并将其接种到一定比例的LB液体培养基中。
接着，我加入了抗生素以选择性地培养出无菌的大肠杆菌菌落。
接下来，我需要设计一些操纵控制的变量，比如控制温度和时间。
我在37℃下培养菌液。
过了一段时间，我开始观察菌液的颜色和浑浊度。
我发现，菌液的浑浊度在第三小时左右达到峰值，然后逐渐下降。
这表明菌群数量和代谢活性的变化随着时间的推移而变化。
实验二：抗生素敏感性实验在这个实验中，我选取了四种常见耐药菌。
首先，我以不同于实验一的方式种植这些菌株。
在每一个控制条件下，我测量了菌液在不同抗生素浓度下的最小抑制浓度(MIC)。
MIC越低，即表示菌株抗药性越强。
我用来源于大肠杆菌的产β-内酰胺酶菌株进行对照。
结果表明，这种菌株的MIC值很高。
而在另一个实验中，我发现之前选取的两种E. coli的抗药性都比大肠杆菌高。
这再一次表明了菌株在生物环境中的生存策略和特性。
实验三：微生物遗传实验在这个实验中，我选用的是一种转移质粒(pUC18)。
我内含了几个基因，能使细菌对抗抗生素。
我接种了E. coli和这个转移质粒，然后将它们在富含抗生素的培养基上培养。
结果表明，细胞克服了抗生素的抵抗力。
结论通过这些微生物学实验，我学到了微生物在生物环境中的行为和特性。
微生物的特性是由生长条件和遗传机制共同决定的。
微生物能够拥有高水平的耐药性，也能够表现出合适的社会性。
因此，我们需要更加深入地了解细菌在生物环境中的行为和特性，以及它们如何进化和適應新的环境。
微生物学实验报告实验一普通光学显微镜的使用及细菌染色与形态观察第一部分：显微镜的使用一、目的要求1．熟悉普通光学显微镜的构造、油镜的使用原理和显微镜的维护方法。
2．学会正确使用油镜观察细菌的基本形态和特殊构造。
3．了解各种显微镜的主要特征。
二、实验原理（一）光学显微镜的构造微生物实验室中最常用的是普通光学显微镜，它的构造可分为机械部分和光学部分。
1、机械部分普通复式光学显微镜的机械部分通常包括以下几个部分：目镜、镜筒、基座回转器、物镜、载物台、光圈、聚光器、光源、镜臂、细调节器、粗调节器等。
2、光学部分：目镜、物镜、聚光器、光圈、光源。
（二）放大倍数标本首先经物镜放大，在目镜的焦距平面上形成一个实像，再经过目镜放大成最终的虚像。
总的放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。
物镜的放大倍数愈大，其工作距离（物镜镜头到标本片之间的距离）愈短，这时光圈就要打开得愈大。
显微镜的性能受物镜的分辨距离或分辨力所限制。
分辨距离即透镜所能分辨的两个物点之间的最小距离，分辨距离愈小，透镜的分辨力愈高，物像也就愈清晰。
因此常以分辨距离来衡量显微镜的分辨力。
R=0.61λ/N.A式中：R-----分辨距离；λ------作用光的波长；N.A------数值口径。
一些介质的折射率介质折射率空气水玻璃香柏油1 13 55 1.56三、实验内容（一）材料：显微镜，香柏油，擦镜纸。
（二）方法：细菌很小，须使用油镜方可观察到。
油镜是显微镜上最重要的部件之一，观察时与玻片非常接近，稍不小心即可压碎玻片，更严重的是损坏镜头，故必须极其仔细地学习油镜的使用方法：1、为使低倍镜取得最适之光源，可将低倍镜头调节到离载物台约1cm的高度，将聚光器提高，光圈完全打开，然后调节电压旋钮至视野最合适。
2、滴一滴香柏油，固定于载物台上，用推动器调节到载物台正中。
在双目侧视下，下旋粗调节器，使油镜头浸入油中几乎与标本片相接触。
然后眼睛从目镜观察（如光线不足，可适当增大电源电压），徐徐上旋粗调节器至看到模糊物像之后，再用细调节器调节以使物像清晰。
如镜头已离开油面还未看到物像，则再重新操作。
3、更换标本时应先提高油镜头，再更换玻片，切勿随意移动显微镜的位置。
4、油镜观察完毕后，按“显微镜保护”中（6）项处理。
5、最后将油镜各部分还原，聚光器下降，反光镜垂直于镜座，镜头转成八字形，以免与聚光器发生碰撞。
四、思考题1、使用显微镜时为何调节下列构造？反光镜，光圈，聚光器，粗调节器，细调节器，镜头回转器。
答：聚光器的位置之升降可影响视野的明亮度，上升则视野明亮，下降则光线减弱。
光圈的放大或缩小也可控制视野明亮程度。
粗调节器和细调节器均是调节焦距的装置。
镜头回转器为装置物镜和转换物镜之用。
2、使用不同放大倍数的物镜时，工作距离与光圈的关系。
如何利用这一原理用好显微镜？答：物镜的放大倍数愈大，其工作距离（物镜镜头到标本片之间的距离）愈短。
标本首先经物镜放大，在目镜的焦距平面上形成一个实像，再经过目镜放大成最终的虚像。
总的放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。
3、为何要选用与玻璃折射率相似的香柏油作为油镜的介质？油镜的原理是什么？答：香柏油只在使用油镜头时（100倍物镜）使用，因为当镜与装片之间的介质为空气时，由于空气（n= 1.52）的折射率不同，光线会发生折射，不仅使进入物镜的光线减少，降低了视野的照明度，而且会减少镜口角。
当以香柏油（n=1.515）为介质时，由于它的折射率与玻璃相近，光线经过载玻片后可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射，不仅增加了视野的照明度，更重要的是通过增加数值孔径达到提高分辨率的目的。
可见光的波长平均为0.55μm。
当使用数值孔径为0.65的高倍镜时，它能辨别两点之间的距离为0.42μm；而使用数值孔径为1.25的油镜时，能辨别两点之间的距离则为0.22μm。
选用香柏油是因为它的折射率是1.5154、显微镜有哪几种？各自的主要特征是什么？答：光学显微镜中除明视野显微镜外，还有暗视野显微镜、相差显微镜和荧光显微镜；除光学显微镜外，还有电子显微镜。
暗视野显微镜：在普通光学显微镜载物台下安装一个暗视野聚光器即成暗视野显微镜。
相差显微镜：相差显微镜成像的原理和普通光学显微镜一样，所不同的是相差显微镜包括有环状光阑、装有相板的相差物镜和全轴调整望远镜三个特殊部分。
荧光显微镜：荧光显微镜的主要特征是以紫外线为光源，当照射到用荧光素标记的细菌时，荧光素吸收了紫外线的能量后，再发射出可见的橙、黄、浅绿色荧光。
由于用荧光素标记的菌体各种结构中的溶解、吸附或化合情况不一，于是发出不同色调和亮度的荧光，从而可以观察细菌的不同结构。
电子显微镜：电子显微镜的基本结构和工作原理与普通光学显微镜非常相似，不同的是用电子流代替光线，用电磁圈代替透镜聚焦。
第二部分：细菌形态学检查方法一、目的要求1、了解不染色标本检查法，用悬滴法观察活细菌及其动力。
2、熟悉染色标本的制备过程，掌握革兰氏染色法及其结果判断，了解革兰氏染色法原理。
3、了解其它常用染色法。
二、实验原理检查细菌形态的主要工具是显微镜，可根据不同目的将细菌染色或不染色进行镜检。
常用的碱性染料有结晶紫、美蓝、碱性复红等。
染色法又分单染色法和复染色法两大类。
单染色法即仅用一种染料着色，所有的细菌均被染成一种颜色，无鉴别细菌的作用。
复染色法又称鉴别染色法，通常用二种或二种以上的染料着色，由于不同种类的细菌或同种细菌的不同组成结构对染料有不同的反应性而被染成不同的颜色，从而有鉴别细菌的作用。
2、最常用的细菌复染色法是革兰氏染色法（Gram stain）。
通过革兰氏染色法操作，可把细菌分成两大类：革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌。
凡能使第一种染料结晶紫保留蓝色的细菌叫革兰氏阳性细菌，凡被洒精脱色后染上对比颜料沙黄或稀释复红而呈红色的细菌叫做革兰氏阴性细菌。
三、实验内容（一）染色标本的制备及观察1、复染色法（革兰氏染色法）材料：葡萄球菌琼脂培养物 1支大肠杆菌琼脂培养物 1支革兰氏染液一套：结晶紫、95%酒精、路哥氏碘液、稀释复红各1瓶。
玻片，接种环，酒精灯，吸水纸等。
方法：（1）涂片用葡萄球菌和大肠杆菌混合涂片。
①取玻片一块，拭净。
②用无菌接种环取生理盐水一滴，放在玻片中央（如被检材料是液体，可不加生理盐水）。
③左手斜持菌种试管，右手将菌种试管棉塞稍加转动，以便拔下。
④右手持接种环，经火焰灭菌后，用右手小拇指拔开菌种试管棉塞，试管口通过火焰，将接种环插入试管中取菌少许（切不可多，更不可将培养基刮下）。
⑤试管口再通过火焰，塞好棉塞。
⑥将接种环上的细菌加入玻片上之水滴内，磨匀，涂成直径为1cm大小的薄菌膜。
⑦接种环经火焰灭菌。
.（2）干燥涂片置于空气中，使其自然干燥。
（3）固定干燥后将涂片在火焰上缓缓通过三次，此为“固定”。
目的是使细菌粘于玻片上，染色和水冲时不易脱落；且细菌为蛋白质，被热凝固可保持完整形态。
（4）染色初染→媒染→脱色→复染①加结晶紫染液于标本上，使其覆满标本，染1~2分钟。
②细水冲洗。
③加路哥氏碘溶液经1分钟。
④水洗。
⑤加95%酒精于玻片上来回流动，倾去酒精。
如此重复2~3次（约30秒钟）。
⑥水洗。
⑦加稀释复红染液，染约1分钟。
⑧水洗，用吸水纸吸干。
（5）镜检革兰氏阳性菌在结晶紫着色后不易被酒精脱色，故仍为深蓝色或紫色；革兰氏阴性菌在结晶紫着色后易被酒精脱色，故经稀释复红复染后成红色。
三、实验记录革兰氏染色过程：取玻片一块，在玻片上滴三小滴水（有一定的距离），分别用接种环取EC（大肠杆菌）和BS（金黄色葡萄球菌）与两边的水滴上，并混匀，灼烧接种环后再分别取EC和BS于中间的水滴上混匀（即中间水滴是两种菌的混合物），并在酒精灯下灼烧至干（小心不要将玻片炸裂），用结晶紫进行初染，细水冲洗后，加路哥氏碘液进行媒染，水洗后加酒精脱色2~3次，水冲洗后加稀释复红染液复染一分钟，水洗，并用吸水纸吸干。
大肠杆菌为革兰氏阴性菌，染色后呈紫红色。
普葡萄球菌为革兰氏阳性菌，染色后呈现蓝紫色。
以下为实验观测图：四、思考题1．染色法在微生物学上有何实际意义？染色法可以更方便的观察细菌的具体形态，更方便观察细菌，革兰氏染色法有更重要的意义，可以鉴别细菌，把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，在实验方面，可以通过杀死阳性或阴性菌而得到目的菌。
2．比较复染色法与单染色法的优缺点。
答：单染色法：优点：仅用一种染料着色，所有的细菌均被染成一种颜色，简单方便，可用来观察细菌的形态和排列方式。
缺点：但无鉴别细菌的作用。
复染色法：优点：用二种或二种以上的染料着色，由于不同种类的细菌或同种细菌的不同组成结构对染料有不同的反应性而被染成不同的颜色，从而有鉴别细菌的作用。
缺点：使用试剂较多，过程较单染色法更复杂繁琐。
3．以革兰氏染色法为例，说明它至少要涉及几种试剂？各起何作用？答：至少用到4种试剂。
结晶紫溶液进行初染，路哥氏碘液进行媒染，95%酒精进行脱色，稀释复红染液进行复染。
4．要确证一个未知细菌的革兰氏染色性质，你可用什么方法来说明你的结果是可靠的？答：通过在显微镜下的菌体被染的颜色可以判断，凡能使第一种染料结晶紫保留蓝色的细菌为革兰氏阳性细菌，凡被洒精脱色后染上对比颜料沙黄或稀释复红而呈红色的细菌为革兰氏阴性细菌。
微生物学实验报告实验二培养基的的制备灭菌及接种技术培养基的制备和灭菌一、目的要求掌握基础培养基应具备的条件及其制备方法。
二、实验原理培养基是人工配制的供给细菌或其它微生物生长繁殖的营养基质。
微生物的种类虽然繁多，但对基本营养物质如碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水分等的要求却有共同性。
这些营养物质的作用是：提供合成菌体和代谢产物的原料；提供生命活动必需的能量；调节代谢环境。
作为培养基必须具备下列条件：①含有适当的水分和一定配比的适宜的营养物质。
②具有合适的酸碱度（pH值）。
③有适当的物理状态：液体培养基、固体培养基和半固体培养基。
④培养基必须经灭菌成为无菌状态后方能使用。
利用培养基对细菌等进行人工培养，在微生物学上有重要意义。
例如，细菌纯培养物的分离、培养，细菌生物学特性的研究、分类鉴定，菌种保藏等都需要利用培养基进行人工培养。
同时在传染病的诊断、生物制品的研制、发酵生产，以及利用细菌等作为工具进行的其它学科的研究中（如遗传学、基因工程等），都离不开培养基的应用和细菌的人工培养。
基础培养基一般指的是营养肉汤培养基和营养琼脂培养基，它通常由蛋白胨（主要作为氮源）、牛肉浸膏（作为碳源、氮源、维生素和无机盐）、氯化钠（无机盐并具有维持一定的渗透压的作用）和水所组成。
基础培养基含有大多数细菌生长繁殖所需要的营养物质。
另外，根据培养基的组成和使用目的菌不同，还有加富培养基、选择培养基、厌氧培养基等。
