雷公藤内酯对海人酸致痫大鼠神经元和caspase9蛋白表达的影响_杨宜承

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雷公藤甲素对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

雷公藤甲素对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响朱建华;胡永良;张武;关伟;黄光照【摘要】目的从形态和功能两方面观察雷公藤甲素(Triptolide,TP)对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPAA)的影响.方法将雄性SD大鼠随机分为3组,分别灌服2%丙二醇、丙二醇醋酸泼尼松混合溶液和丙二醇雷公藤甲素混合溶液7周,检测各组血浆皮质醇(cortisol,COR)、促肾上腺皮质激素(adrencocorticotropic hormone,ACTH)和促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)含量;行体质量、肾上腺器官系数测定及肾上腺皮质束状带组织病理学观察;免疫组织化学染色法观察ACTH在各组垂体中的表达.结果 (1)TP组与泼尼松组血浆COR含量低于对照组(P<0.05);血浆ACTH 与对照组比较无显著差异;TP组血浆CRH高于对照组(P<0.05).(2)TP组与泼尼松组大鼠实验后体质量均低于对照组,肾上腺器官系数与对照组比较无差异;光镜及电镜观察均表明TP组与泼尼松组肾上腺皮质束状带变薄、萎缩,肾上腺功能低下;ACTH在TP组大鼠垂体中的表达高于对照组(P<0.05).结论形态和功能两方面均提示较长期服用TP可引起大鼠肾上腺皮质萎缩、功能低下,通过负反馈调节,进而使下丘脑和垂体合成、分泌CRH和ACTH增加.【期刊名称】《法医学杂志》【年(卷),期】2010(026)004【总页数】6页(P260-265)【关键词】法医毒理学;雷公藤内酯;下丘脑-垂体系统;免疫组织化学;大鼠【作者】朱建华;胡永良;张武;关伟;黄光照【作者单位】皖南医学院,医学三系,安徽,芜湖,241002;皖南医学院,医学三系,安徽,芜湖,241002;皖南医学院,医学三系,安徽,芜湖,241002;长沙市星城地区检察院,湖南,长沙,410000;华中科技大学,同济医学院,湖北,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】DF795.1雷公藤又名黄藤、黄藤木、黄腊藤、断肠草等，属卫矛科雷公藤属植物，全株有毒，在我国法医学典籍《洗冤集录》中列举的鼠莽草，据考证即为雷公藤。

重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马p-Akt和caspase-9的影响及作用机制

重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马p-Akt和caspase-9的影响及作用机制王维平;史志勤;于江华;郭力;王乐;韩东亮;袁栋才;臧颖卓【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2010(030)001【摘要】目的观察重组人红细胞生成素(rHuEP0)对戊四氮(PTZ)点燃的癫痫持续状态(status epilepticus,SE)的SD大鼠海马神经元磷酸化蛋白激酶B(p-PKB/p-Akt)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)表达的影响,应用磷脂酰肌醇3激酶(P13K)抑制剂LY294002进一步探讨rHuEPO作用的可能机制.方法采用PTZ点燃大鼠SE模型,将175只大鼠随机分为正常对照组(给予生理盐水腹腔注射)、PTZ 组(腹腔注射PTZ点燃SE发作后30 min腹腔注射生理盐水)、rHuEPO组(SE发作后30 min腹腔注射rHuEPO 5000 U/kg)、LY294002组(SE发作后10 min脑室注射5 μlLY294002,SE发作后30 min腹腔注射rHuEPO 5000 U/kg)、二甲基亚砜(DMSO)组(SE发作后10 min脑室注射5μlDMSO,SE发作后30min腹腔注射rHuEPO 5000U/kg),并给予相应处理.检测大鼠行为学和脑电图的改变,免疫组织化学法观察p-Akt、caspase-9的表达,RT-PCR方法检测各组大鼠海马caspase-9 mRNA的表达;Western blotting方法检测各组大鼠海马Akt、p-Akt 蛋白的表达.结果与PTZ组比较,rHuEPO组p-Akt免疫反应阳性细胞和P-Akt蛋白表达水平均增高,caspase-9免疫反应阳性细胞及caspase-9mRNA表达水平均降低(P<0.05);与rHuEPO组比较,LY294002组p-Akt免疫反应阳性细胞和p-Akt 蛋白表达水平均降低,caspase-9免疫反应阳性细胞及caspase-9mRNA表达水平均增高(p<0.05).结论在SE大鼠模型中rHuEPO激活PI3K/Akt信号转导途径调整线粒体凋亡途径相关调控因子caspase-9,借以发挥抗凋亡的神经保护作用.【总页数】6页(P64-69)【作者】王维平;史志勤;于江华;郭力;王乐;韩东亮;袁栋才;臧颖卓【作者单位】河北医科大学第二医院神经内科,河北石家庄050000;河北医科大学第二医院神经内科,河北石家庄050000;北京天坛医院神经介入科,北京100050;河北医科大学第二医院神经内科,河北石家庄050000;衡水市哈励逊国际和平医院,河北衡水053000;衡水市哈励逊国际和平医院,河北衡水053000;衡水市哈励逊国际和平医院,河北衡水053000;河北医科大学第二医院神经内科,河北石家庄050000【正文语种】中文【中图分类】R742.1【相关文献】1.肉桂醛对呼吸道合胞病毒感染宿主HeLa细胞Caspase-9和p-AKT表达的影响[J], 卫高;代立娟;宋英杰2.Caspase-9在戊四氮所致癫痫持续状态大鼠神经元中的表达及重组人红细胞生成素的影响 [J], 于江华;朱梦楚;冯晓红;耿丽淳;史志勤;史诺菲;苏旭东;周毅;李彬;王珊;贾丽景;赵博3.重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马神经元磷酸化Akt表达的影响 [J], 史志勤;刘瑞春;于江华;王维平;王海祥;李薇;张清泉;袁栋才;李锦4.重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马线粒体凋亡途径相关调控因子的影响及作用机制 [J], 史志勤;卞红磊;魏艳静;尹晓琳;张荣;梁文杰;刘瑞春;王维平;于江华5.重组人红细胞生成素对大鼠癫痫持续状态诱导的海马神经元凋亡及p-Akt表达的影响 [J], 史志勤; 李薇; 刘瑞春; 王维平; 于江华; 袁栋才; 张清泉; 朱建国; 藏颖卓因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

姜黄素对海人酸致痫大鼠神经元凋亡及凋亡相关因子影响的实验研究

态不规则，姜黄素干预后的神经元形态均接近正常对照组的神经元数量和形态；海人酸组神经元胞浆中Ｃａｓｐａｓｅ３、Ｃａｓｐｅｓｅ９表达较正常对照组增高，姜黄素组神经元胞浆中Ｃａｓｐａｓｅ３、Ｃａｓｐａｓｅ９表达较海人酸
ｆＢｏｉｏ—ｏｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｙｒｉｎＬｉａｏｎｉｎｇＰｒｖｉｏｃｅｎ，ＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｌｇｅｆＤｏａｌｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎｌ１６６２２）
ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＣａｓｐａｓｅ３ａｎｄＣａｓｐａｓｅ９ｐｒｏｔｅｉｎｓａｎｄｔｈｅｉｒｍＲＮＡｏｆｎｅｕｒｏｎｓｉｎｋａｉｎｉｃａｃｉｄ— — ｉｎｄｕｃｅｄｅｐｉｌｅｐ・－
（辽宁省大连市第五人民医院・大连１１６０２１；大连大学医学院，辽宁省生物有机重点实验室・大连１１６６２２）
摘要目的：通过检测海人酸致痫大鼠海马神经元Ｃａｓｐａｓｅ３和Ｃａｓｐａｓｅ９蛋白及ｍＲＮＡ表达，探讨姜
ｒａｎｄｏｍｌｙ．ｍｏｄｅｌｓｗｅｒｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙｋａｉｎｉｃｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．ＩｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｅａｌｔｅｃｈｎｉｑｕｅｗｉｌＹ，ｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔＣａｓｐａｓｅ

雷公藤内酯醇对胶原诱导的大鼠关节炎关节腔和外周血清中细胞因子的影响

雷公藤内酯醇对胶原诱导的大鼠关节炎关节腔和外周血清中细胞因子的影响涂胜豪;胡永红;曾克勤;赖先阳【期刊名称】《安徽中医学院学报》【年(卷),期】2006(25)1【摘要】目的:观察雷公藤内酯醇对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠外周血清和关节腔中IL-6、IL-10、TNF α的影响,探讨雷公藤内酯醇治疗CIA的可能机制.方法:以胶原诱导的Wistar大鼠关节炎为动物模型,将模型复制成功的20只大鼠随机分为模型组和雷公藤内酯醇组.雷公藤内酯醇按40 μg/kg BW肌注给药,每3 d 1次,31 d处死动物,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清和膝关节腔液中TNF α、IL-6和IL-10含量.结果:与正常对照组大鼠相比,CIA模型大鼠关节腔液和血清中TNF α、IL-6含量升高IL-10含量降低(P<0.01),经过雷公藤内酯醇治疗后,关节腔液和血清中TNF α、IL-6含量降低,IL-10含量升高,模型组与治疗组相比,差异有显著性(P<0.01).结论:雷公藤内酯醇可能通过调节细胞因子变化而达到治疗CIA,这也可能是雷公藤治疗类风湿关节炎的机制之一.【总页数】3页(P27-29)【作者】涂胜豪;胡永红;曾克勤;赖先阳【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合科,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合科,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合科,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合科,湖北,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R593.22【相关文献】1.汉防己甲素对胶原诱导的关节炎大鼠关节腔液中与外周血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的调节 [J], 潘昉;祝丽华;王倩;孙巍;贾会欣2.雷公藤内酯醇对大鼠胶原性关节炎和免疫功能的影响 [J], 李宜川;刘国玲;沈永杰;张玉霞;胡灵卫3.雷公藤内酯醇对胶原诱导关节炎大鼠外周血清和关节腔中细胞因子水平的干预[J], 涂胜豪;盛冬云;胡永红;曾克勤4.雷公藤多苷联合人参皂苷对胶原诱导关节炎大鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞和白介素-17的影响 [J], 李振彬;张秋媛;陈晶;齐静;何东仪;张英杰;杨静5.雷公藤多苷联合人参皂苷对胶原诱导关节炎大鼠外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞和白介素-17的影响 [J], 李振彬;张秋媛;陈晶;齐静;何东仪;张英杰;杨静;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

雷公藤内酯醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的拮抗作用

雷公藤内酯醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的拮抗作用韦登明;廖异平;王琳;黄光照;张益鹄;饶广勋【期刊名称】《中药药理与临床》【年(卷),期】2007(023)001【摘要】目的:探讨雷公藤内酯醇对大鼠局灶性缺血再灌注脑损伤的保护作用.方法:采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,雷公藤内酯醇0.2、0.4mg/kg ip后,检测大脑中动脉闭塞侧的梗死体积、神经功能受损程度、脑组织含水量、脑微血管内中性粒细胞计数.同时光镜下观察脑组织损伤程度和脑神经细胞IL-1β免疫组化染色改变.结果:与模型组比较,雷公藤内酯醇两治疗组大脑中动脉闭塞侧脑梗死体积、脑含水量、微血管内中性粒细胞计数及光镜下脑神经细胞受损程度均明显减少或减轻.脑神经细胞IL-1β免疫组化染色阳性细胞数明显减少,神经功能受损程度也明显改善.结论:雷公藤内酯醇对大鼠缺血再灌注脑损伤有保护作用.【总页数】4页(P15-18)【作者】韦登明;廖异平;王琳;黄光照;张益鹄;饶广勋【作者单位】宁波大学医学院,宁波,315211;宁波大学医学院,宁波,315211;宁波大学医学院,宁波,315211;华中科技大学同济医学院,武汉,430030;华中科技大学同济医学院,武汉,430030;华中科技大学同济医学院,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R2【相关文献】1.雷公藤内酯醇对急性重症胰腺炎大鼠全身炎症反应肺损伤的影响 [J], 王萍;高峰;王芳婷;郭雪艳2.雷公藤内酯醇抑制CXCL11表达对大鼠重症急性胰腺炎急性肺损伤的影响 [J], 陈海生;张海峰;陈海琴;曹维;周国雄3.雷公藤内酯醇改善大鼠脊髓损伤后的运动障碍 [J], 马斌祥;何万庆;周广超;关永林4.雷公藤内酯醇改善大鼠脊髓损伤后的运动障碍 [J], 马斌祥;何万庆;周广超;关永林5.雷公藤内酯醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织ICAM-1表达的影响 [J], 韦登明;黄光照;张益鹄;饶广勋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

雷公藤多甙片对Ig肾病模型大鼠血清中IL-2,IL-6及TNF-α含量的影响

雷公藤多甙片对Ig肾病模型大鼠血清中IL-2,IL-6及TNF-α
含量的影响
林剑
【期刊名称】《中外医疗》
【年(卷),期】2011(030)004
【摘要】IgA肾病是肾小球系膜区以IgA沉积为主的原发性肾小球疾病,是一种自身免疫性疾病.大量的研究资料也表明,本病与患者的免疫功能为乱关系密切,但其发病机理还在进一步的研究中,在机体的免疫应答及免疫调节中IL-2,IL-6及TNF-α的作用及其重要 [1～2].本次实验主要是观察雷公藤多甙片对IgA肾病患者血清中IL-2,IL-6及TNF-α的影响,进一步探讨雷公藤多甙片治疗IgA肾病的发病机制.【总页数】2页(P21-22)
【作者】林剑
【作者单位】洞口县人民医院,湖南邵阳,422300
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.独一味胶囊对复发性口腔溃疡大鼠血清TNF-α、IL-2和IL-6水平的影响 [J], 杨敏;柳志文
2.PTZ致痫模型大鼠血清中TNF-α与IL-6含量变化的实验研究 [J], 陈晓霞;白洁
3.青蒿琥酯对IgA肾病模型大鼠血清IL-2、IL-6含量的影响 [J], 马云霞;栾森;马
行一;曾燕;吴蔚桦;米绪华;秦伟
4.参芪蛭龙汤对膜性肾病大鼠血清中IL-2、IL-6\r和TNF-α水平的影响 [J], 薛丕良;李凤金;白茹;刘欣欣;袁茵;肖洪彬;牛雯颖
5.补肾健脾、利湿化瘀法对IgA肾病模型大鼠血清TNF-α、IL-6含量的影响 [J], 张守琳
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雷公藤多甙对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤脑组织中NO水平、NOS活性的影响

雷公藤多甙对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤脑组织中NO水平、NOS活性的影响方莉;方伟;李庆军;董海军【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》【年(卷),期】2003(038)001【摘要】目的:研究大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤脑组织中一氧化氮(NO)水平,一氧化氮合酶(NOS)活性变化及雷公藤多甙(GTW)对其影响.方法:将100只Wistar 大鼠分成假手术组、手术组、生理盐水治疗组和GTW治疗组,用线栓法建立大鼠脑缺血-再灌注动物模型,用硝酸银还原法测定4组大鼠脑组织缺血1 h再灌注15 min、1 h、6 h、12 h、24 h NO含量和NOS活性.结果:与手术组及生理盐水治疗组相比,各时间点GTW治疗组大鼠脑组织NOS活性降低,NO含量减少(P<0.05).结论:GTW对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤有保护作用.【总页数】3页(P87-89)【作者】方莉;方伟;李庆军;董海军【作者单位】郑州大学医院检验科,郑州,450052;河南省建筑医院内科,郑州,450003;郑州大学第一附属医院神经内科研究生,郑州,450003;郑州大学医院药剂科,郑州,450052【正文语种】中文【中图分类】R743.3【相关文献】1.褪黑素对局灶性脑缺血大鼠扩散加权成像及脑组织中Fas、FasL、活性Caspase-3蛋白表达的影响 [J], 王海宇;陈岚芬;王晓莉;闫少珍;牟青杰;赵岩松2.腺苷预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中内源性神经干细胞增殖的影响 [J], 陈娟;李娟;谭军3.雷公藤多甙对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织单胺类递质含量的影响 [J], 张艳;贾丹辉;刘宗文;何美霞;张钦宪4.雷公藤多甙对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织三磷酸腺苷酶的影响 [J], 张艳;刘宗文;贾丹辉;王艳红;胡香杰;王金兰;张钦宪5.乙酰葛根素对于大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的脑组织与血清NO和iNOS的影响研究 [J], 王明娟;何晓明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

雷公藤多苷对rmMIF诱导大鼠成纤维样滑膜细胞增殖及RANKL／OPG表达的影响

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ｌ０・
医药杂志２０１３年４月第２５卷第４期Ｍｅｄ＆ＰｈａｒｍＪＣｈｉｎＰＬＡ。Ｖｏ１．２５．Ｎｏ．４．ＡＤｒ．２０１３
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论著
雷公藤多苷对ｒｍＭＩＦ诱导大鼠成纤维样滑膜细胞增殖及ＲＡＮＫＬ／ＯＰＧ表达的影响
养液。置３７ ℃、５％ＣＯ孵箱培养４８ｈ。ＭＴＴ法检测ＦＬＳ的增殖活性；免疫组化法检测滑膜细胞ＯＰＧ／ＲＡＮＫＬ的表达；酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测ＦＬＳ上清液ＯＰＧ、ＲＡＮＫＬ表达。结果Ｍ１Ｆ组增殖活性高于空白对照组，ＭＩＦ＋
［ＤｏＩ］１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５ — １４０Ｘ．２０１３．０４．００３
ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＴｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍＧｌｙｃｏｓｉｄｅｓｏｎＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＲＡＮＫＬ／ＯＰＧｉｎＲａｔ，ｓＦｉｂｒｏｂｌａｓｔ－
结论
ｒｍＭＩＦ可促进体外培养大鼠ＦＬＳ增殖，上调ＦＬＳ的ＲＡＮＫＬ表达和ＲＡＮＫＬ／ＯＰＧ值；ＴＧ抑制ｒｍＭＩＦ诱导的大
鼠ＦＬＳ增殖、降低ｒｍＭＩＦ诱导大鼠ＦＬＳ分泌ＲＡＮＫＬ、下调ＦＬＳ的ＲＡＮＫＬ表达和ＲＡＮＫＬ／ＯＰＧ比值，可能是其治疗类风湿关节炎的骨免疫学机制之一。［关键词］雷公藤多苷；成纤维样滑膜细胞；细胞增殖；细胞核因子一Ｂ受体活化因子配体；骨保护素；大鼠［中国图书资料分类号］Ｒ一３３；Ｒ６８４．３［文献标志码］Ａ［文章编号］２０９５ — １４０Ｘ（２０１３）０４ — ００１０￣５

中药复方含药血清对雷公藤致骨髓细胞凋亡的保护作用及其机制研究

中药复方含药血清对雷公藤致骨髓细胞凋亡的保卫作用及其机制探究引言：雷公藤作为一种重要的传统中草药，广泛应用于风湿性关节炎的治疗。

然而，雷公藤的使用也存在着一定的安全隐患。

探究表明，雷公藤可引起骨髓细胞凋亡，造成骨髓功能紊乱。

为了寻找一种对抗雷公藤引起骨髓细胞凋亡的方法，本文利用中药复方提取的血清进行试验，探究其对雷公藤致骨髓细胞凋亡的保卫作用及其机制。

材料与方法：1. 试验动物：选取健康雄性SD大鼠40只。

2. 分组：将大鼠随机分为比较组、雷公藤组、中药复方组以及复方+雷公藤组。

3. 处理方法：比较组大鼠赐予等量正常盐水，雷公藤组大鼠赐予雷公藤提取物处理，中药复方组大鼠赐予中药复方提取物处理，复方+雷公藤组大鼠先赐予中药复方提取物处理，随后再赐予雷公藤提取物处理。

4. 观察指标：观察大鼠骨髓细胞凋亡指标，包括DNA毁伤程度、细胞凋亡相关蛋白表达水对等。

5. 统计分析：接受SPSS 23.0统计软件进行数据处理，进行方差分析和t检验。

结果：1. 雷公藤组大鼠的骨髓细胞显示明显的DNA毁伤和凋亡现象，而中药复方组和复方+雷公藤组的骨髓细胞凋亡现象较少。

2. 雷公藤组大鼠骨髓细胞凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3的表达水平显著上调，而中药复方组和复方+雷公藤组的表达水平下调。

谈论：本探究结果表明，中药复方含药血清对雷公藤致骨髓细胞凋亡具有保卫作用。

中药复方可能通过抑止骨髓细胞DNA毁伤、下调凋亡相关蛋白的表达水平来发挥其保卫作用。

此外，复方+雷公藤组的试验结果表明，中药复方可能与雷公藤提取物互相作用，减轻雷公藤对骨髓细胞的毁伤。

结论：中药复方含药血清能够保卫骨髓细胞免受雷公藤的凋亡毁伤，这一保卫作用可能与中药复方的抗氧化和抗凋亡特性有关。

中药复方可能成为治疗雷公藤相关骨髓功能紊乱的潜在选择。

注意：本文仅为虚拟助手自动生成，仅供参考，不能作为临床使用的依据。

如需详尽了解该领域的探究，请查阅相关正式文献本探究结果表明，中药复方含药血清对雷公藤致骨髓细胞凋亡具有保卫作用。

雷公藤内酯醇抑制佐剂性关节炎组织NO生成的实验研究

雷公藤内酯醇抑制佐剂性关节炎组织ＮＯ生成的实验研究摘要目的：探讨雷公藤内酯醇对佐剂性关节炎大鼠病变关节组织iNOS表达和NO含量的影响。

方法：在建立大鼠佐剂性关节炎模型基础上，给予不同剂量雷公藤内酯醇后，检测关节肿胀度和病变关节组织NO含量，观察病变关节组织病理损害程度和iNOS免疫组织染色结果。

结果：与模型组比较，3个雷公藤内酯醇治疗组关节肿胀度和病变关节组织NO含量明显减少，病变关节组织的病理损害明显改善，iNOS免疫阳性细胞积分光密度显著减少。

结论：雷公藤内酯醇可抑制佐剂性关节炎大鼠病变关节组织iNOS表达从而减少病变关节组织NO 含量。

关键词雷公藤内酯醇佐剂性关节炎一氧化氮一氧化氮合酶实验研究一氧化氮(NO)是重要的细胞因子，研究表明，NO参与了炎症反应和免疫损伤过程，在炎症过程中，单核细胞、巨噬细胞产生NO，加重炎症反应程度。

有实验证据表明[1]，NO在类风湿性关节炎的发生发展中起重要作用，抑制和减少炎细胞产生NO，可明显减轻炎症病变程度。

体外实验表明[2]雷公藤醋酸乙酯提取物可抑制类风湿性关节炎病人关节软骨细胞产生高浓度NO的病理损害程度。

而作为雷公藤的主要有效成分之一的雷公藤内酯醇，其治疗类风湿性关节炎的机理之一是否与其在体内影响病变关节滑膜组织细胞NO的产生过程有关?国内外尚未见文献报道。

本研究旨在建立大鼠佐剂性关节炎模型基础上，通过应用不同剂量的雷公藤内酯醇，观察其对佐剂性关节炎病变组织细胞iNOS表达和NO水平变化的影响，探讨雷公藤内酯醇治疗类风湿性关节炎有关的作用机理。

1 材料和方法1．1 药品和试剂：雷公藤内酯醇(纯度为99．95％，批号：20050422)购于福建省医学科学研究所，溶于2％丙二醇，并用200目滤器过滤除菌后备用。

福氏完全佐剂(FCA)购于上海华美生物工程有限公司。

一氧化氮(NO)检测试剂盒购于南京聚力生物医学工程研究所。

兔抗大鼠一氧化氮合酶(NOs)多克隆抗体、生物素化羊抗兔IgG、即用型碱性磷酸酶（SABC）试剂盒均购于武汉博士德生物工程有限公司。

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48第15卷第2期 2013 年 2 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 15 No. 2 Feb .，2013癫痫发作与神经－免疫－内分泌失调有关，使神经系统内在兴奋性升高、抑制性降低。

反复发作导致神经元变性，变性神经元兴奋性异常升高且不稳定，是癫痫异常放电的结构基础。

癫痫的反复进一步使神经元变性程度加深、甚至凋亡，而海马神经元凋亡又可导致癫痫的发作反复加重[1]。

近期文献报道，雷公藤内酯对帕金森病和阿尔茨海默病的神经元凋亡具有抑制作用[2-3]。

本实验通过观察雷公藤内酯对海人酸（kainate，KA）致痫大鼠神经元形态和凋亡相关蛋白caspase3和caspase9表达的影响，旨在探讨雷公藤内酯抑制海人酸致痫大鼠神经元凋亡的机制。

1 材料和方法1.1 材料SD 雄性大鼠30只，10周龄，体重（230±10）g，由大连医科大学实验动物中心提供。

兔抗鼠caspase3单克隆抗体和兔抗鼠caspase9单克隆抗体购自Cell Signaling 公司；生物素标记的羊抗兔IgG 抗体、SP 试剂和DAB 显色剂购自北京中杉金桥公司；海人酸购自Sigma 公司；雷公藤内酯购自沈阳陇浦科技公司。

1.2 方法1.2.1 动物分组30只SD 大鼠分成对照组10只，海人酸组10只，雷公藤内酯干预组10只。

海人酸组颈内皮下注射海人酸，剂量为10 mg/kg。

雷公藤内酯干预组于海人酸注射前连续7 d 腹腔内注射雷公藤内酯，剂量为15 μg/kg。

对照组注射与海人酸等量的生理盐水。

以Racine 分类改良法为标准，达到第Ⅳ级为癫痫造模成功[4]。

雷公藤内酯对海人酸致痫大鼠神经元c a s p a s e 3和c a s p a s e 9蛋白表达的影响杨宜承，赵薇，曾常茜，高松，陈晓云（大连大学医学院，辽宁大连 116622）摘要：目的：通过检测海马神经元caspase3和caspase9蛋白表达，探讨雷公藤内酯抑制神经元凋亡的机制。

方法：结晶紫染色观察海马神经元形态，免疫组化法检测海马神经元caspase3和caspase9蛋白表达水平。

结果：结晶紫染色结果显示，海人酸组中，海马神经元变性或丢失，胞体皱缩，形态不规则。

雷公藤内酯干预组中海马神经元的数量和形态与对照组相似，胞浆清晰淡染，核仁清楚。

免疫组化染色显示，与对照组比较，海人酸组海马神经元caspase3和caspase9蛋白表达水平显著增高（P <0.05）；与海人酸组相比，雷公藤内酯干预组神经元caspase3和caspase9蛋白表达水平显著减少（P <0.05）。

结论：雷公藤内酯可下调海人酸致痫大鼠海马神经元caspase3和caspase9蛋白表达，从而抑制神经元凋亡。

关键词：雷公藤内酯；海人酸；神经元；caspase3；caspase9中图分类号：R742.1 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2013) 02- 0048- 03收稿日期：2012-08-09作者简介：杨宜承（1987-），男，吉林人，2011级硕士研究生，研究方向：神经免疫学。

通讯作者：曾常茜（1964-），女，吉林人，教授，硕士，研究方向：神经免疫学。

E-mail ：zengchangqian@。

Effect of Triptolide on Hippocampal Neuron in Kainite-InducedRat and Expressions of Caspase3 and Caspase9YANG Yicheng，ZHAO Wei，ZENG Changqian，GAO Song，CHEN Xiaoyun （Key Laboratory of Bio-organic Chemistry in Liaoning Province，MedicalCollege of Dalian University，Dalian 116622，Liaoning，China）Abstract ：Objective ：To investigate the mechanism of triptolide inhibiting neurons apoptosis through detecting the expressions of caspase3 and caspase9 in the hippocampal region. Methods ：Crystal Violet Staining was used to observe the morphological change of the hippocampal neuron. Immunohistochemistry staining was used to examine the expressions of caspase3 and caspase9 in the hippocampal region. Results ：Crystal Violet Staining showed that the neurons of the hippocampal region exhibited irregular morphology and body shrinked and numbers decreased partly in kainite group. However，the neurons of triptolide treatment group showed clear cytoplasm dyed and nucleoli，and had the similar number and morphology compared with the control group. Immunohistochemistry staining showed that the expressions of caspase3 and caspase9 on neurons in hippocampal region in kainite group were increased significantly than that incontrol group（P <0.05）.Compared with kainite group，the expressions of caspase3 and caspase9 on neurons in hippocampal region in triptolide treatment group were obviously decreased（P <0.05）. Conclusion ：Triptolide can inhibit the expressions of caspase3 and caspase9 in the hippocampal neuron，and finally inhibit neurons apoptosis.Key words ：triptolide ；kainite ；neuron ；caspase3；caspase915卷辽宁中医药大学学报1.2.2 组织切片制备用10%水合氯醛（350 mg/kg）皮下深麻醉，通过左心室灌注PBS（pH7.4）200 mL，再灌注4%多聚甲醛，取脑海马，常规脱水、透明、石蜡包埋。

1.2.3 结晶紫染色将石蜡切片脱蜡至水，经0.1%结晶紫染液染色2 h，三蒸水洗2 min，75%、95%、100%酒精和二甲苯依次洗1次，中性树胶封片，镜下观察。

1.2.4 免疫组化染色方法常规脱蜡至水，微波修复抗原，抑制内源性过氧化酶活性后，血清封闭20 min。

加兔抗鼠caspase3、caspase9单克隆抗体（1∶500），4℃过夜，PBS洗涤。

加生物素标记的羊抗兔IgG抗体，37 ℃孵育1 h，PBS洗涤。

滴加SP试剂，室温作用20 min，PBS洗涤。

加DAB显色6~8 min，苏木素复染30 s。

脱水、透明，中性树胶封片，镜下观察。

用Image proplus图像分析软件测定海马caspase3和caspase9蛋白表达的平均光密度（IOD/area），并进行统计分析。

1.3统计学方法数据以均数±标准差（x—±s）表示，采用SSPS11.5软件进行方差分析和LSD检验。

2 结果2.1雷公藤内酯对海人酸致痫大鼠海马神经元的影响对照组未见神经元损伤，且神经元排列紧密，染色均匀，形态规则。

海人酸组中，海马神经元部分丢失，排列疏松，胞体皱缩，形态不规则，呈凋亡形态学改变。

雷公藤内酯干预组中，海马神经元排列较紧密，其数量和形态与对照组相似，胞浆清晰，呈凋亡改变的神经元数量较海人酸组减少。

2.2雷公藤内酯对海人酸致痫大鼠caspase3和caspase9蛋白表达的影响对照组中，caspase3和caspase9阳性神经元以锥体细胞层表达为主，高倍镜下可见阳性细胞一般为梭型或星型，胞浆及细胞膜上有棕黄色阳性颗粒；与对照组相比，海人酸组中caspase3和caspase9阳性神经元细胞数较多，胞浆染色较深，平均光密度值较高（P<0.05）；与海人酸组相比，雷公藤内酯干预组中caspase3和caspase9阳性神经元细胞数减少，胞浆染色变浅，平均光密度值显著减少（P<0.05）。

（见表1）表1 雷公藤内酯对海人酸致痫大鼠神经元caspase3和caspase9蛋白表达的影响（x—±s）指标对照组海人酸组雷公藤内酯干预组caspase3 0.076±0.080.171±0.023★0.086±0.005★★caspase90.084±0.0100.197±0.018★0.108±0.021★★注：与对照组比，★P<0.05；与海人酸组比，★★P<0.05。

3 讨论癫痫，中医又称癫疾、痫证。

本病主要由先天与后天两方面因素形成。

先天因素如元阴不足、胎中受惊。

后天因素多为七情失调、饮食不节、脑部外伤及病后继发。

近年来对癫痫病因病机研究较多，多认为其病机不外乎惊、风、火、痰、瘀、虚等几个方面，病位在心、肝、脾、肾[5]。

心肝脾肾功能失调，影响津液正常运行，聚而成痰，痰浊内伏，壅塞气机，久之化热，痰因火动，火动风生，以致痰火、痰气、瘀浊、风痰闭阻神明，流窜经隧，而发为本病。

癫痫的治疗强调辨证论治，应分清标本虚实，实证以治标为主，着重豁痰熄风、镇惊开窍。

虚证以治本为重，或健脾化痰，或补益脾肾。