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GC-MS测定藻油中DHA、DPA及其他微量成分石金娥;翟玉娟;李媛媛;李滢倩;李宁;张涛【摘要】目的:采用GC-MS法测定市售藻油中主要成分DHA、DPA及其他微量成分的含量.结果:3种市售藻油的甲酯化产物中,主要成分二十二碳六烯酸(DHA)甲酯含量为24.77 ～ 41.20％、二十二碳五烯酸(DPA)甲酯含量为4.00％～ 5.60％;此外,藻油的甲酯化产物中还含有19种饱和脂肪酸酯、24种不饱和脂肪酸酯,除了脂肪酸外,藻油中还含有少量的烃类、醇类和酮类物质.结论:市售复合型藻油为藻油与亚麻籽油等植物油按一定比例调和而成,且其DHA含量不满足国家标准GB 26400-2011的要求;角鲨烯和亚麻醇这两种微量成分的存在,使藻油比其他市售植物油更具保鲜和保健功能.【期刊名称】《中国食物与营养》【年(卷),期】2015(021)008【总页数】3页(P69-71)【关键词】藻油;二十二碳六烯酸;二十二碳五烯酸;气相色谱-质谱法;微量成分分析【作者】石金娥;翟玉娟;李媛媛;李滢倩;李宁;张涛【作者单位】吉林省食品检验所,长春130022;吉林省食品检验所,长春130022;吉林省食品检验所,长春130022;吉林省食品检验所,长春130022;吉林省食品检验所,长春130022;吉林省食品检验所,长春130022【正文语种】中文藻油于2010年被卫生部指定为新资源食品，其富含ω-3 系高度不饱和脂肪酸，主要包括二十二碳五烯酸(DPA)和二十二碳六烯酸(DHA)等。
DPA 和DHA都是人体所必需的脂肪酸，但在人体内难以合成，主要来自于海洋鱼类和微藻油［1］。
研究表明，DHA、DPA 具有调节血脂、改善视力、促进生长发育和提高人体免疫功能等作用［2～3］。
目前为止，对藻油的研究主要集中在藻油的提取［4］、纯化［5］、藻油的应用领域研发及DHA、DPA 的含量测定方法的研究，但藻油的组成及微量成分分析却未见文献报道，而且，现有标准对藻油的质量有求的参数有限，市售藻油的质量状况分析较为片面，因此本文采用GC-MS 法测定市售藻油DHA、DPA 含量，并对其组成及微量成分进行了分析，考察藻油的组成与常见市售植物油的区别及市售藻油在微量成分上的差异，旨在为藻油食品标准的完善提供科学依据。
新三九dha执行标准-回复新三九DHA执行标准是指针对DHA（二十二碳六烯酸）藻油产品的行业标准，旨在规范产品质量、安全性和有效性。
本文将一步一步回答有关新三九DHA执行标准的相关问题，解释其背景、内容以及对消费者的意义。
第一步：背景介绍新三九DHA执行标准是由中国食品药品监督管理局制定的。
DHA是一种人体必需的多不饱和脂肪酸，对人体健康具有重要作用。
然而，传统的鱼油质量参差不齐，存在重金属和其他污染物的风险。
为了解决这个问题，人们开始寻找替代品，如藻油。
新三九DHA执行标准的出台，是为了确保藻油产品的质量和安全性，提高消费者对藻油产品的信任度。
第二步：标准内容新三九DHA执行标准主要包括以下几个方面的内容：1. 品质标准：此标准规定了藻油产品中DHA的含量要求，通常为每日推荐摄入量的一定比例。
同时，还对产品中其他脂肪酸和毛细化学指标进行了规定，以确保产品质量稳定且符合国家标准要求。
2. 安全性要求：藻油作为一种新产品，其安全性需要得到保障。
新三九DHA执行标准要求藻油产品必须符合国家食品安全法规中关于重金属、有害微生物和农药残留等方面的规定。
此外，标准还对产品生产过程中的卫生管理、生产设备和出厂检验等方面提出了要求。
3. 有效性验证：为了确保新三九DHA执行标准的有效性和科学性，标准制定方还对产品进行了有效性验证要求。
即根据人体的吸收能力，通过科学实验和临床研究，评估产品的生物利用度和效果。
只有通过相关验证，产品才能获得新三九DHA执行标准的认证。
第三步：对消费者的意义新三九DHA执行标准对消费者具有重要的意义。
首先，该标准为消费者提供了一个选择优质藻油产品的依据。
消费者可以参考标准中的品质要求、安全性要求以及有效性验证等内容，选择符合标准的藻油产品，避免购买到劣质或有安全隐患的产品。
其次，新三九DHA执行标准的出台还有助于提高产品的整体质量水平。
标准要求制造商在产品生产过程中加强卫生管理，确保产品质量的稳定性。
二十二碳六烯酸生产工艺简介1. 简介二十二碳六烯酸是一种重要的多不饱和脂肪酸，广泛应用于医药、化妆品和食品工业中。
本文将介绍二十二碳六烯酸的生产工艺及相关的生产流程。
2. 原料准备二十二碳六烯酸的生产主要依赖于以下原料： - 植物油：普通的原油作为植物油的原料，如花生油、豆油等。
- 精细盐：用于中和反应的原料。
- 氧化剂：用于催化反应的氧化剂，常用的有过氧化氢和高锰酸钾等。
3. 生产工艺二十二碳六烯酸的生产工艺主要包括以下几个步骤：3.1 初步提取将原料植物油经过初步处理，去除杂质和不饱和脂肪酸。
可以通过碱处理和脱色等步骤来提高植物油的纯度。
3.2 中和反应将初步提取得到的植物油与精细盐进行中和反应。
通过控制反应条件和添加适量的剂量，可以将植物油中的酸性物质中和掉，得到中和产物。
3.3 氧化反应将中和产物与氧化剂进行氧化反应。
在控制了适当的温度和反应时间下，可以将中和产物中的不饱和脂肪酸进行氧化，生成二十二碳六烯酸。
3.4 结晶和分离将氧化反应产生的混合物进行结晶和分离处理。
通过控制结晶条件和过滤操作，可以将二十二碳六烯酸从混合物中分离出来。
4. 关键工艺参数在二十二碳六烯酸的生产过程中，以下几个关键工艺参数需要重视：4.1 温度控制反应过程中的温度控制非常重要。
不同的反应步骤需要不同的温度条件来达到最佳效果。
过低的温度可能导致反应速率过慢，过高的温度则可能导致副反应的发生。
4.2 反应时间反应时间取决于反应速率和产物纯度的要求。
反应时间过短可能导致产物纯度不高，反应时间过长则会增加生产成本。
4.3 氧化剂用量在氧化反应中，氧化剂的用量需要控制在适当的范围内。
过少的氧化剂会降低反应效率，过多的氧化剂则可能导致产物质量下降。
5. 成品质量控制在二十二碳六烯酸生产过程中，成品质量控制非常重要。
以下几个方面需要特别注意：5.1 纯度检测通过仪器分析，检测成品的纯度。
常用的检测方法有高效液相色谱法、红外光谱法等。
食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定1范围本标准规定了食品中脂肪酸含量的测定方法。
本标准适用于食品中脂肪酸含量的测定。
本标准适用于食品中总脂肪、饱和脂肪（酸）、不饱和脂肪（酸）含量的测定。
第一法内标法2原理加入内标物的样品经水解-乙醚溶液提取其中的脂肪后，在碱性条件下皂化和甲酯化，生成脂肪酸甲酯，经毛细管气相色谱分析，内标法定量测定脂肪酸甲酯含量。
依据各种脂肪酸甲酯含量和转换系数计算出总脂肪、饱和脂肪（酸）、单不饱和脂肪（酸）、多不饱和脂肪（酸）含量。
3试剂和材料注：除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1试剂3.1.1盐酸(HCl)。
3.1.2氨水(NH3·H2O)。
3.1.3焦性没食子酸(C6H6O3)。
3.1.4乙醚(C4H10O)。
3.1.5石油醚：沸程30℃~60℃。
3.1.6乙醇(C2H6O) (95%)。
3.1.7甲醇(CH3OH)：色谱纯。
3.1.8氢氧化钠（NaOH）。
3.1.9正庚烷[CH3(CH2)5CH3]：色谱纯。
3.1.10三氟化硼甲醇溶液，浓度为15%。
3.1.11无水硫酸钠(Na2SO4)。
3.1.12氯化钠(NaCl)。
3.2试剂配制3.2.1盐酸溶液（8.3 mol/L）：量取250 mL盐酸，用110 mL水稀释，混匀，室温下可放置2个月。
3.2.2乙醚石油醚混合液（体积比1:1）：取等体积的乙醚和石油醚，混匀备用。
3.2.3氢氧化钠甲醇溶液（2%）：取2 g氢氧化钠溶解在100 mL甲醇中，混匀。
3.2.4饱和氯化钠溶液：称取360 g氯化钠溶解于1.0L水中，搅拌溶解，澄清备用。
3.3标准品3.3.1十一碳酸甘油三酯。
3.3.2混合脂肪酸甲酯标准溶液（37种）。
3.3.3单个脂肪酸甲酯标准：丁酸甲酯C4:0（C5H10O2）CAS NO. 623-42-7；己酸甲酯C6:0（C7H14O2）CAS NO.106-70-7；辛酸甲酯C8:0（C9H18O2）CAS NO.111-11-5；癸酸甲酯C10:0（C11H22O2）CAS NO.110-42-9；十一烷酸甲酯C11:0（C12H24O2）CAS NO.1731-86-8；月桂酸甲酯C12:0（C13H26O2）CAS NO.111-82-0；十三烷酸甲酯C13:0（C14H28O2）CAS NO.1731-88-0；肉豆蔻酸甲酯C14:0（C15H30O2）CAS NO.124-10-7；肉豆蔻脑酸甲酯C14:1（C15H28O2）CAS NO.56219-06-8；十五烷酸甲酯C15:0（C16H32O2）CAS NO.7132-64-1；顺-10-十五碳烯酸甲酯C15:1（C16H30O2）CAS NO.90176-52-6；棕榈酸甲酯C16:0（C17H34O2）CAS NO.112-39-0；棕榈油酸甲酯C16:1（C17H32O2）CAS NO.1120-25-8；十七烷酸甲酯C17:0（C18H36O2）CAS NO.1731-92-6；顺-10-十七碳烯酸甲酯C17:1（C18H34O2）CAS NO.75190-82-8；硬脂酸甲酯C18:0（C19H38O2）CAS NO.112-61-8；反油酸甲酯C18:1n9t(C19H36O2) CAS NO.1937-62-8；油酸甲酯C18:1（C19H36O2）CAS NO.112-62-9；反亚油酸甲酯C18:2n6t（C19H34O2）CAS NO.2566-97-4；亚油酸甲酯C18:2n6c（C19H34O2）CAS NO.112-63-0；γ亚麻酸甲酯C18:3n6（C19H32O2）CAS NO.16326-32-2；花生酸甲酯C20:0（C21H42O2）CAS NO.1120-28-1；顺-11-二十碳烯酸甲酯C20:1（C20H38O2）CAS NO.2390-09-2；亚麻酸甲酯C18:3n3（C19H32O2）CAS NO.301-00-8；山嵛酸甲酯C22:0（C23H46O2）CAS NO.929-77-1；二十一烷酸甲酯C21:0(C22H44O2) CAS NO.6064-90-0；顺-11,14-二十碳二烯酸甲酯C20:2(C21H38O2) CAS NO.2463-02-7；顺-8,11,14-二十碳三烯酸甲酯C20:3n6( C21H36O2) CAS NO.21061-10-9；顺芥子酸甲酯C22:1n9(C23H44O2) CAS NO.1120-34-9；顺-11,14,17-二十碳三烯酸甲酯C20:3n3(C21H36O2) CAS NO.55682-88-7；花生四烯酸甲酯C20:4n6(C21H34O2) CAS NO.2566-89-4；二十三碳酸甲酯C23:0(C24H48O2) CAS NO.2433-97-8；顺-13,16-二十二碳二烯酸甲酯C22:2(C23H42O2) CAS NO.61012-47-3；木蜡酸甲酯C24:0(C25H50O2) CAS NO.2442-49-1；顺-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸甲酯C20:5(C21H32O2) CAS NO.2734-47-6；神经酸甲酯C24:1(C25H48O2) CAS NO.2733-88-2；顺-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯C22:6(C23H34O2)CAS NO. 2566-90-7。
关于食品添加剂“二十二碳六烯酸粉剂”申报名称的说明我公司申报食品添加剂名称为“二十二碳六烯酸粉剂”，申报资料及检测报告中为二十二碳六烯酸微藻粉剂及DHA藻油粉剂，以“二十二碳六烯酸粉剂”为准，特此说明。
广东润科生物工程有限公司申报资料二添加剂的通用名称、功能分类、用量和使用范围通用名称：二十二碳六烯酸粉剂,（Docosahexaenoic acid, DHA ）; 英文名： DHA Powder 功能分类：营养强化剂 使用量：对于儿童和孕妇用调制乳粉：以纯DHA 计表1 调制乳粉中的使用量对于其他食品：推荐使用量每人≤300毫克/天（以纯DHA 计） 使用范围：特殊膳食用食品、婴幼儿配方食品、辅助食品、孕妇食品、儿童食品、乳制品、饮料。
食品分类号 食品类别最大使用量 （g/kg ） 01.03.02 调制乳粉（仅限儿童用乳粉） ≤0.5％（占总脂肪酸 的百分比） 01.03.02 调制乳粉（仅限孕产妇用乳粉） 300-1000mg13.01 婴幼儿配方食品 按国标执行 13.05 辅助食品≤115mg/100g申报资料三证明技术上确有必要和使用效果的资料DHA是人体内一种重要的多不饱和脂肪酸，它是大脑、神经和视觉细胞中重要的脂肪酸组成成分，对人体生理功能的正常发挥及多种疾病的防治有着重要作用，特别是在婴幼儿大脑和视觉系统发育过程中占有十分重要的地位。
许多发达国家都已经在孕妇、哺乳期妇女以及婴幼儿和学前儿童的配方食品中添加DHA[1]。
我国卫生部也批准由裂壶藻生产的DHA油为新资源食品。
但是由于DHA油的天然物理性质为油脂，而且含有多个不饱和双键，因此极易受到环境中氧、热、水分、光的影响而产生质量和气味的变化，稳定性受到极大影响, 同时还可以生成反式脂肪酸和氧化产物[2]。
研究表明这些油脂的氧化产物可以引发人体内细胞程序性死亡（Programmed Cell Death, PCD），并直接诱导癌症的发生[3]。
二十二碳六烯酸(DHA)的生产工艺二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic Acid, DHA）是一种重要的ω-3多不饱和脂肪酸，具有诸多积极的健康功效，如促进脑发育和维持心脏健康。
近年来，DHA的生产工艺得到了大幅改进，使得大规模工业化生产成为可能。
DHA的生产工艺通常基于微生物发酵过程。
首先，从自然界中筛选出高DHA产量的海洋微生物菌种，并通过温度、pH值、营养源等条件的优化，使其DHA产量最大化。
随后，通过研发合适的培养基和发酵条件，如氧含量、发酵时间等，达到高效稳定的DHA产酸工艺。
在培养基的配方中，常常采用含有高量DHA原料的基础物质，如脂肪酸、氨基酸、糖类和矿物质等。
这些原料中的碳源提供微生物生长所需的能量，而氮源则是微生物合成蛋白质和细胞物质的重要组成部分。
同时，添加适量的维生素和辅酶等有助于DHA产酸过程中的微生物生长和代谢。
发酵过程中微生物需经历一系列的阶段，包括生长、合成和稳定期。
生长期是指微生物菌种通过吸收培养基中的养分进行繁殖的阶段，此过程要求培养基中营养物质的充分供应。
在合成期，微生物通过吸收培养基中的养分合成DHA，这是DHA生产的关键阶段。
稳定期是指微生物菌种停止生长且DHA产量稳定的阶段，此时应减少培养基的供应以维持产酸。
当DHA的合成达到一定程度后，需要进行分离提纯工艺。
常用的分离提纯方法包括有机溶剂萃取、冷冻结晶和薄膜分离等。
其中，有机溶剂萃取可以从发酵液中将DHA与其他杂质分离，冷冻结晶则通过控制温度和其他操作参数，将DHA从溶液中结晶出来。
薄膜分离是通过特定的薄膜材料，如超滤膜或纳滤膜，将DHA与其他组分分离。
综上所述，二十二碳六烯酸（DHA）的生产工艺主要基于微生物发酵过程。
通过合理优化培养基配方和发酵条件，选择高产DHA的微生物菌种，可实现高效稳定的DHA产酸过程。
最后通过分离提纯工艺将DHA从发酵液中纯化出来。
这种工艺为DHA的大规模工业化生产提供了有效的技术支持。
GCMS法中饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸测定与计算的探讨我从事食品检测行业已经6年了，真正接触脂肪酸测还是在08年初。
所以在这方面我并不是做得很好，但是由于这个方法，我从研发到初步的成型整整用了一年的时间。
在这一年的研发过程中，我走了很多的歪路，但也从中学到很多，现在我把我的经验写出来让大家分享一下，同时也希望各位能给我指出我的不足之处，谢谢！当时公司提出要开发食品营养标签的测试，这个营养标签中就有二个是用到气相色谱法测定的，脂肪酸就其中的一个。
虽然在大学里就有听说过饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、反式脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸这个东西，但是我还真没做过。
开始拿到方法当时还是GB/T17376-1998和17377-1998我当时拿着这两个方法是看了又看看了又看就是看不明白他是怎么计算的。
当我搞明白计算方法后，又来了一个难题了，那就是为什么这个计算又分面积归一化法和内标法呢？由于我主要说的是关于脂肪酸的测定，那么对于以上问题我是怎么去做的，在后面可能会讲到，如果没有讲到的大家也可以给我留言大家相互交流。
以下我来说说关于GCMS测定脂肪酸的方法。
我们所有标品是已经甲脂化好的标液。
34种混合标液。
这37种混合标准品要一针全部走出来且要全部分开那可不是一件容易的事，所以当时在做这个方法时，当时标液都用去了一半。
由于之前在想60m的柱子（ZB-624）应该就可以把这34种物质全部份开，但是没想怎么不管我用多度的流速多小的升温程序都是无法把C18里的几个正反式分开，分得最好时也是有几个三个峰连在一齐，是后实在不行，只能重新购买CP-Sil 88 V ARIAN 100m的柱子。
100m的柱子购买回来后就是一个不段的调试，以更能最好的把34种脂肪酸全部分开，这程就不多说了，现在就说说我们最终方法。
进样口温度220度，柱温箱初温150度保持15分钟后以3度每分钟的到220度保持3分钟。
柱流速我采用的是恒流模试1ml/min。
