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激光捕获显微切割激光捕获显微切割（（laser capture microdissection LCM laser capture microdissection LCM））操作方法操作方法蛋白质组学是当今肿瘤学研究领域中的一个热点，而“差异”蛋白质组学又是蛋白质组学研究的一个突破口。
在有关“差异”的研究中，若原始样品不是分别来自同一类型，或样品存在着杂质蛋白的污染，那么所得实验数据的准确性和说服力必然会受到影响[1]。
众所周知，人体组织器官是多种细胞的复合，肿瘤组织的不均一性是肿瘤细胞的重要特征。
因此，如何从复杂、不均一的样品中获得理想的高同质性的组分成为实验中亟需解决的主要问题之一。
激光捕获显微切割（laser capture microdissection LCM）技术的出现为上述问题提供很好的解决方案。
该方法的突出特点是能在目视下从样品中特异挑选同类细胞乃至单一细胞；从而剔除间质细胞和坏死及其他可能影响结果分析的杂质成分[2]。
本研究应用LCM 针对不同类型组织标本，选择性获取同质肺癌细胞和配对正常细胞；以期探讨该方法在肺癌研究中的技术参数和操作流程。
1 材料与方法材料与方法 1.1标本的收集及制备标本的收集及制备 收集西安交通大学医学院第二附属医院胸外科、陕西省人民医院胸心外科、陕西省肿瘤医院胸外科2005-2006年经病理诊断证实的手术切除肿瘤标本12例，其中肺鳞癌6例，肺腺癌6例，正常对照组织为同一患者正常肺组织。
12例患者中男性8例，女性4例；有吸烟史者5人，平均吸烟指数1900支/年；肿瘤分期：I 期2例、II 期7例（IIA3例，IIB4例）、III 期3例。
所有病例标本均在手术室采集，具体操作如下：待组织标本离体后立即切取肿瘤组织，同时切取正常对照组织；用4℃冰盐水冲洗3—5次，将血液冲净，均匀分割成0.2cm×0.2cm×0.2cm大小；分装于标志清楚的0.5mL离心管中；先置液氮中速冻，后置于-80℃冰箱保存备用。
激光切割机操作说明激光切割机是一种利用激光束对材料进行切割的高科技设备。
它在工业生产中应用广泛，能够精确地切割各种材料，提高生产效率，降低生产成本。
下面将详细介绍激光切割机的操作说明，帮助操作人员正确、安全地使用这一设备。
1. 安全操作在操作激光切割机之前，首先要确保设备处于正常工作状态。
检查设备的电源、冷却系统、压缩空气等是否正常，确保安全防护装置完好。
操作人员需要佩戴防护眼镜、手套，避免直接接触激光束，以免对眼睛和皮肤造成伤害。
2. 参数设置在进行切割作业之前，需要根据所需的切割材料和切割要求设置激光切割机的工作参数。
包括激光功率、切割速度、焦距等参数。
不同材料和厚度需要不同的参数设置，操作人员应根据实际情况来调整参数，确保切割效果达到预期。
3. 材料准备在进行切割作业之前，需要将待切割材料放置在工作平台上，并固定好位置。
确保材料平整、干净，避免有异物或杂质影响切割效果。
同时，要根据实际需要设置好切割路径，在操作过程中避免碰撞机器和材料。
4. 启动设备当所有准备工作就绪后，可以启动激光切割机。
按照设备说明书上的操作步骤来打开电源，启动冷却系统，调整工作台高度等。
在启动设备的过程中，要注意观察设备是否正常工作，确保没有异常情况。
5. 开始切割一切准备就绪后，可以开始进行切割作业。
根据设备设置的参数和切割路径，控制激光切割机进行切割。
在切割过程中，要注意观察切割效果，及时调整参数以获得更好的切割质量。
同时，要保持工作环境清洁，避免杂物影响切割效果。
6. 切割完成当切割作业完成后，需要将激光切割机停止，关闭设备，并进行清洁和维护。
及时清理工作台和残留的切割材料，检查设备是否有损坏或异响等异常情况。
确保设备处于良好状态，以便下次使用。
通过上述激光切割机操作说明，操作人员可以了解如何正确、安全地操作激光切割机，提高工作效率，保障人身和设备安全。
在使用激光切割机时，务必严格遵守操作规程，避免操作失误造成损坏或伤害。
激光捕捉显微切割技术操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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激光切割机具体操作
在工业生产中，激光切割机是一种常见的设备，其能够高效、精准地对各类材
料进行切割。
下面将介绍激光切割机的具体操作步骤。
准备工作
•检查激光切割机的电源和气源是否正常连接；
•确认工作台面干净整洁，无杂物；
•检查激光切割头和反射镜是否干净，如有需要，及时清洁；
•调整激光切割机的参数及材料支撑架的高度。
操作步骤
1.打开激光切割机的主电源，启动设备；
2.将待切割材料放置在工作台面上，并紧固好；
3.通过操纵面板设置激光切割机的参数，包括切割速度、功率、焦距等；
4.调整好激光切割头的位置，确保正确对准待切割位置；
5.确认安全防护装置已完好，穿戴好个人防护装备；
6.按下启动按钮，开始切割作业；
7.在切割过程中，密切观察切割状态，确保切割效果良好；
8.切割完成后，关闭激光切割机主电源，及时清理切割废料。
安全注意事项
•切勿擅自修改激光切割机参数，避免引发安全事故；
•切勿触碰激光切割头和反射镜，避免受伤；
•使用激光切割机时，应远离设备操作区域；
•切勿在未经许可的情况下擅自打开激光切割机主电源。
以上便是关于激光切割机的具体操作步骤和安全注意事项，使用激光切割机时
务必谨慎操作，确保安全生产。
激光切割机操作流程和注意事项有哪些
激光切割技术在现代制造业中得到广泛应用，激光切割机是一种高精度的加工设备，操作流程和注意事项对于保证加工质量和安全非常重要。
以下是激光切割机操作流程和注意事项的总结：
操作流程
1.开机操作
–确保电源已接通，打开主机开关。
–检查光路系统是否正常，如发现异常及时调整。
–打开切割机气源。
2.设定加工参数
–根据加工材料和要求设定激光功率、速度、频率等参数。
–调整焦距，确保激光束聚焦准确。
3.确定加工路径
–通过CAD软件设计好加工路径或导入加工程序。
–确保加工路径与实际需求一致。
4.进行加工
–确保工件已固定好，避免因振动造成误差。
–观察加工过程，确保切割质量。
–完成后关闭主机，清理工作台。
注意事项
1.安全第一
–操作人员必须穿戴好防护装备，如护目镜、手套等。
–严禁在运行中接触激光束，以免造成伤害。
2.注意材料选择
–确保加工材料符合激光切割机的要求，避免产生有害气体。
–对于易燃材料需格外注意防火措施。
3.定期维护
–定期清洁光路系统，保持光学元件的清洁度。
–定期检查激光源和冷却系统，确保设备正常运行。
4.能效管理
–在不需要加工时，应尽量关闭激光切割机以节能减排。
–合理利用余热，提高设备能效。
通过严格遵守激光切割机操作流程和注意事项，可以保证加工效率和安全性，延长设备使用寿命，提高加工质量。
加工人员应接受专业培训，熟练掌握设备操作技巧，时刻注意细节，确保作业顺利进行。
医院激光切割机操作规程激光切割机是一种常用于医院手术和治疗的设备，操作规程对保证手术顺利进行和患者安全至关重要。
以下是医院激光切割机的操作规程，共1200字。
一、设备准备1. 确认激光切割机设备是否正常工作，并检查是否有任何明显的损坏。
2. 确保激光切割机设备的电源和连接线路安全可靠。
3. 检查激光切割机设备的冷却系统是否正常工作，以确保设备在操作过程中保持稳定的温度。
4. 准备所需的切割手术器械和材料，并确保其清洁和消毒。
二、操作前准备1. 穿戴适当的防护设备，包括手套、口罩、护目镜和实验服等。
2. 确认手术区域已彻底清洁和消毒，避免有任何可能影响手术的污染物。
3. 检查手术区域是否完全暴露，并确认患者处于适当的姿势。
三、操作步骤1. 打开激光切割机设备，按照设备说明书进行操作，确保设备处于正确的工作状态。
2. 根据手术所需的切割参数，调整激光切割机的功率、频率和工作模式等设置。
3. 将患者的手术区域置于激光束的焦点范围内，并确保患者保持稳定的姿势。
4. 使用激光切割机进行切割操作时，保持手的稳定并控制切割的速度和深度，避免对患者产生额外伤害。
5. 定期检查切割手术器械的磨损情况，并更换必要的刀片和切割垫。
6. 在操作过程中，注意观察患者的状况，并根据需要调整切割参数。
7. 在手术结束后，关闭激光切割机设备，并进行清洁和消毒处理，以确保设备处于良好的工作状态。
四、安全措施1. 使用激光切割机时，注意防止激光束直接照射到眼睛或其他敏感部位，避免激光辐射引发损伤。
2. 在操作过程中，确保手术区域周围没有易燃物质或其他危险物品，并保持良好的通风环境。
3. 不得随意更改激光切割机设备的设置，以免影响手术效果和患者的安全。
4. 在操作过程中，遵守医院的手术卫生规范，确保手术区域的干净和卫生。
5. 操作结束后，将已使用的切割手术器械彻底清洁和消毒，并妥善保管以备下次使用。
以上是医院激光切割机的操作规程，操作人员应按照操作规程进行操作，保证激光切割手术的效果和患者的安全。
激光切割机的操作流程步骤在现代制造业中，激光切割技术被广泛应用于各种材料的加工领域。
激光切割机作为一种高效、精准的加工设备，在金属加工、汽车制造、电子产业等领域具有重要作用。
接下来将介绍激光切割机的操作流程步骤。
1. 准备工作在进行激光切割操作之前，需要做好一系列准备工作： - 确保激光切割机的供电和冷却系统正常运行； - 检查激光器和光学系统是否处于良好状态； - 准备好需要加工的工件，并安放在加工平台上； - 设定好切割参数，如激光功率、切割速度等。
2. 启动设备启动激光切割机，按照设备操作手册的要求进行操作。
通常包括以下步骤： - 打开主控电源，并确保所有安全电路正常； - 启动冷却系统，保证激光器处于正常工作温度； - 打开光学系统，进行对焦调节。
3. 调试切割参数根据工件的材料和要求，设定好切割参数，如激光功率、频率、速度等。
通过调试这些参数，确保激光切割效果达到预期，并在加工过程中保证工件的质量。
4. 进行切割加工一切就绪后，可以开始进行激光切割加工了： - 将工件放置在加工平台上，固定好位置； - 启动激光切割程序，进行加工； - 监控加工过程，确保切割效果符合要求； - 完成加工后，关闭激光切割机。
5. 清理维护在完成切割加工后，需要进行设备的清理和维护工作： - 清理工作台和工件的残渣，保持工作环境清洁； - 对设备进行常规的维护保养，延长设备的使用寿命；- 关闭设备，确保安全。
结语通过以上操作流程步骤，我们可以看到激光切割机在加工过程中的重要性和灵活性。
合理的操作流程和参数设定，可以确保激光切割机的稳定运行，提高加工效率和质量。
当然，在操作激光切割机的过程中，也需要严格遵守安全操作规程，以确保人身和设备的安全。
希望以上介绍能够帮助您更好地了解激光切割机的操作流程步骤。
激光切割机操作流程
激光切割机是一种高精度、高效率的切割设备，广泛应用于金
属加工、机械制造、汽车制造等领域。
正确的操作流程可以保证切
割效果和操作安全。
下面将介绍激光切割机的操作流程。
1. 准备工作。
在操作激光切割机之前，首先要进行准备工作。
包括检查设备
是否正常，切割头是否安装正确，切割材料是否放置到工作台上，
并清理工作台和设备周围的杂物。
确保设备和工作环境处于良好状态。
2. 打开设备。
接下来，打开激光切割机的电源，并按照设备说明书上的操作
步骤，启动设备。
在启动过程中，要注意观察设备是否有异常情况，确保设备正常运行。
3. 设定切割参数。
根据切割材料的种类和厚度，设定合适的切割参数。
这包括激光功率、切割速度、气压等参数的设定。
正确的参数设定可以保证切割质量和切割速度。
4. 进行切割。
在设定好切割参数之后，将切割材料放置到工作台上，并进行切割操作。
在切割过程中，要注意观察切割质量，及时调整参数和切割速度，以确保切割效果符合要求。
5. 完成切割。
当切割完成后，关闭激光切割机的电源，并进行设备的清理和维护工作。
包括清理切割头和工作台，检查设备是否有损坏或异常情况。
确保设备处于良好状态，以备下次使用。
以上就是激光切割机的操作流程。
正确的操作流程可以保证切割效果和操作安全。
希望以上内容能够帮助您更好地了解激光切割机的操作流程，提高工作效率和安全性。
激光切割机操作步骤
概述：
激光切割技术是一种高精度、高效率的材料加工方法，在许多行业中得到广泛应用。
激光切割机是使用激光束将材料进行高速切割的设备，操作规范对于确保切割质量至关重要。
以下是激光切割机的基本操作步骤。
步骤一：准备工作
1. 确保激光切割机与电源连接牢固，电源线未受损。
2. 检查激光切割机的冷却系统，确保冷却水清洁，水温稳定。
3. 根据需要切割的材料类型，更换合适的切割
头和透镜。
步骤二：打开激光切割机
1. 启动激光切割机主电源，并确认各个部件正常运转。
2. 打开光学系统并调整激
光束的焦点，确保精准照射到工件表面。
步骤三：设置切割参数
1. 根据材料种类和厚度设置激光功率、频率和速度等参数。
2. 根据设计要求，在
控制面板或软件中输入图形文件，确认切割路径和工件定位。
步骤四：进行切割
1. 将待切割材料平整固定在工作台上，确保不会移动。
2. 启动激光切割机，按照
设定路径进行切割操作。
3. 在切割过程中注意观察切割状态，确保切割质量。
步骤五：清洁和维护
1. 切割结束后关闭激光切割机主电源。
2. 清理工作台和切割头周围的废料，保持
工作环境整洁。
3. 定期检查激光切割机各部件的运行情况，及时进行维护保养。
总结：
激光切割机的操作步骤关乎切割质量和安全，操作人员需严格按照规范操作，确保设备和人员安全，同时可实现高效的材料加工。
希望以上概述能对您了解激光切割机的操作步骤提供一定帮助。
激光切割机器操作流程一、准备工作在使用激光切割机之前，需要进行一些准备工作，确保操作的顺利进行： 1. 检查机器 - 确保激光切割机器处于正常工作状态，无损坏和故障。
- 检查刀具和激光管是否安装正确，没有松动。
2. 准备材料 - 准备需要切割的材料，确保材料平整、无异物。
3. 安全防护 - 戴上防护眼镜，穿戴合适的防护服和手套。
二、操作步骤1.开机–按下机器上的开关按钮，等待机器自检完成。
2.调整工作台–根据材料的尺寸和形状，调整工作台的高度和角度。
3.调整焦距–使用调焦装置将激光头与工件表面保持适当的焦距。
4.设置切割参数–根据材料类型和厚度，设置激光功率、速度等参数。
5.启动激光切割–按下启动按钮，开始激光切割过程。
6.观察切割过程–在切割过程中，注意观察切割情况，确保切割效果符合要求。
7.停止切割–切割完成后，等待激光头停止工作，按下停止按钮。
三、注意事项1.安全第一–操作激光切割机器时，务必遵守安全规定，避免手部接触激光束。
2.材料处理–注意材料在切割过程中可能产生有害气体和烟雾，确保通风良好。
3.定期维护–定期对激光切割机器进行清洁和保养，确保机器的持续正常运转。
4.避免空机运转–避免无操作时开启激光切割机器，以避免造成意外损坏。
四、总结激光切割机器操作流程虽然看似简单，但需要严格遵守操作规程和安全要求。
只有合理调试和妥善操作，才能获得高质量的切割效果。
希望以上操作流程对您有所帮助，不断练习，可以让您熟练掌握激光切割机器的操作技巧。
激光捕获显微切割激光捕获显微切割（（laser capture microdissection LCM laser capture microdissection LCM））
操作方法操作方法
蛋白质组学是当今肿瘤学研究领域中的一个热点，而“差异”蛋白质组学又是蛋白质组学研究的一个突破口。
在有关“差异”的研究中，若原始样品不是分别来自同一类型，或样品存在着杂质蛋白的污染，那么所得实验数据的准确性和说服力必然会受到影响[1]。
众所周知，人体组织器官是多种细胞的复合，肿瘤组织的不均一性是肿瘤细胞的重要特征。
因此，如何从复杂、不均一的样品中获得理想的高同质性的组分成为实验中亟需解决的主要问题之一。
激光捕获显微切割（laser capture microdissection LCM）技术的出现为上述问题提供很好的解决方案。
该方法的突出特点是能在目视下从样品中特异挑选同类细胞乃至单一细胞；从而
剔除间质细胞和坏死及其他可能影响结果分析的杂质成分[2]。
本研究应用LCM 针对不同类型组织标本，选择性获取同质肺癌细胞和配对正常细胞；以期探讨该方法在肺癌研究中的技术参数和操作流程。
1 材料与方法
材料与方法 1.1标本的收集及制备标本的收集及制备 收集西安交通大学医学院第二附属医院胸外科、
陕西省人民医院胸心外科、陕西省肿瘤医院胸外科2005-2006年经病理诊断证实的手术切除肿瘤标本12例，其中肺鳞癌6例，肺腺癌6例，正常对照组织为同一患者正常肺组织。
12例患者中男性8例，女性4例；有吸烟史者5人，平均吸烟指数1900支/年；肿瘤分期：I 期2例、II 期7例（IIA3例，IIB4例）、III 期3例。
所有病例标本均在手术室采集，具体操作如下：待组织标本离体后立即切取肿瘤组织，同时切取正常对照组织；用4℃冰盐水冲洗3—5次，将血液冲净，均匀
分割成0.2cm×0.2cm×0.2cm大小；分装于标志清楚的0.5mL离心管中；先置液氮中速冻，后置于-80℃冰箱保存备用。
整个标本采集过程耗时控制于30min内。
试剂和仪器 苏木精、伊红、无水乙醇、二甲苯、尿素等均为国产分析纯。
1.2 试剂和仪器
组织包埋剂（OTC）；冰冻切片机（Microm，HM500）；超低温冰箱（Thermo Forma -86℃)；Pixcell显微激光切割系统（Arcutuous，USA）及乙烯乙酸乙烯酯膜帽子细胞收集器（EVA LCM Caps）。
方法
1.3方法
冰冻切片制备及染色 预处理载玻片（将普通载玻片清洗干净，流水冲洗后1.3.1冰冻切片制备及染色
泡酸过夜，双蒸水冲洗干净，60℃烘干备用）。
取0.2cm×0.2cm×0.2cm 大小组织两块，OTC包埋，待组织包埋固定完全，将切片机箱内温度设置为-25℃进行切片，切片厚度8um，每次连续制作15张切片，-80℃保存备用。
两组肿瘤组织和对照各6例，每例患者制作切片15张。
取制作好切片进行H-E染色，方法如下：苏木精10s，捞片置于冰水冲洗10s，伊红15s，85、95乙醇各20s，无水乙醇2min，2次，二甲苯I 4min，二甲苯II 2min。
上述染色过程在冰盒中进行，染液温度控制于4—10℃，总时间控制在8 min以内。
完毕后进行激光捕获。
激光捕获获将染色完好切片置于Pixcell显微激光切割系统10×10倍目镜直1.3.2 激光捕
视观察，重点观察细胞形态和染色情况。
找到细胞密集、形态较好、染色满意区域，装载细胞收集器；在10×20倍目镜下调节监视器，按照如下条件：Power 100mV、Duration 15.5s、Spots size 15.5um、Current 8.0mA，每张切片平均8000shots 条件进行捕获。
总捕获时间不超过40min 。
结果
2结果
切片按照改良的HE方法染色后，均能获得细胞形态完整、对比度好、肿瘤细胞和间质可清楚区分的合格切片；在设定捕获条件下，每张切片捕获后能够将90以上的细胞收集，细胞同质性高（见图1）。
按照理论测算，每个shots可以捕获4-6个细胞，即每个帽子收集装置可以获得25000-30000个细胞数。
讨论
讨论
3.3.讨论
肺脏是一个开放器官，容易受到外界污染，加之肺癌组织含有较多间质细胞而且容易坏死。
因此，按照传统方法进行组织块研磨提取总蛋白进行分析，结果难免会受到杂质蛋白的影响。
LCM技术现已成为蛋白质组学研究中获得纯化的目的细胞的理想工具，其在实体瘤研究中应用较多，技术方法亦日臻成熟[3-5]。
但据文献报道，该法主要用于核酸分子以及染色体研究，在肺癌组织蛋白组学研究领域鲜见[6]。
本研究应用LCM技术切割不同类型肺癌组织，获得250个帽子收集装置和8.7×106 个细胞数。
从捕获操作过程中我们发现，捕获细胞的同质性、细胞收集率以及操作过程所耗费时间是影响激光捕获及后续蛋白质组学实验结果的关键因素。
由于LCM是在直视下操作，细胞纯度可以保证。
经随机抽取3组、45个帽子收集装置，使用Pixcell II显微激光切割系统内标记尺划分观察视野，抽样估算收集装置内细胞同质性可达到95以上，该结果与文献报道一致[7]。
当然，文献报道最多的是关于基因和分子水平的研究，但其中的切片制作和LCM切割部分是相同的。
Pixcell II显微激光切割系统是新一代系统，该系统的优点是使用的是乙烯乙酸乙烯酯膜的塑料帽（ethylene vinyl acetate caps，EVA caps）细胞收集装置，可避免操作者手接触所收集到的细胞，减少污染机会。
EVA膜需要和细胞紧密接触才能够被激光束融化而将目标细胞收集，因而LCM过程受很多因
素影响而不能保证将每个捕获细胞均能收集。
激光捕获仪主要参数有：Power、 Duration、 Spot size、 Repeat 及Current等。
一般在打开系统进行切割之前，应先在帽子空白区空打5—6次，观察激光能量，光点大小是否合适，以光点能够完全覆盖目标细胞为宜。
本实验中所选择条件是：Power 100mW、 Duration 15.5ms、 Spot size 7.5-15um、 Repeat 0.2s、Current 8.0mA。
Zhukov等[8]应用LCM 切割肺癌组织时认为，鳞癌可选择7.5&mum激光束，腺癌中用15&mum，可获得较好效果。
在本实验中，我们发现激光束的大小与鳞癌和腺癌组织类型关系不明显，但与切片的制作和捕获操作过程关系较大，切片的厚度、脱水时间和EVA 膜是否和细胞紧密接触是重要影响因素。
制作切片时应将切片厚度控制于
8-9&mum，以8&mum效果最佳，超过10&mum因切片过厚则细胞发生重叠从而使细胞收集困难，同时要注意不能使切片产生褶皱，造成切片表面与EVA膜之间存在缝隙，影响捕获效果。
在HE染色步骤中，二甲苯疏松时间、组织含水量及环境湿度等均可影响捕获结果。
二甲苯疏松时间不足可出现细胞较难从周围组织分离。
对环境湿度和组织含水较多者应及时更换染液，适当延长乙醇的脱水时间。
但过分延长脱水时间则使组织变的干燥松脆，出现帽子与切片不能紧密接触而无法捕获。
在实验过程中梯度乙醇的最长脱水时间为2min。
乙烯乙酸乙烯酯膜的塑料帽（EVA caps）应置于4—10℃、干燥环境妥善保存。
如帽子受潮，则激光激发能量可被乙烯乙酸乙烯酯膜大部分吸收而非穿透，致使帽子与组织接触局部温度升高，产生组织和捕获细胞灼伤。
从肿瘤组织类型看，腺癌的捕获收集成功率最高，可以达到91；鳞癌相对较差，可能与鳞癌多有癌巢及角化珠形成、癌细胞与间质结合较为致密有关。
考虑到正常肺泡及支气管上皮细胞体积相对较小、细胞分布相对稀疏，故正常对照组应多捕获约10个帽子，以保证病例和对
照之间可溶性蛋白总量的均衡性。
在所有蛋白质组学实验中，标本处理时间都是有严格要求的[9]。
一般认为，组织标本超过30—40min常温暴露往往造成细胞内蛋白质大量降解而影响检测结果。
在本实验中，我们使用改良的HE染色方法，较标准方法时间缩短14min，明显减少组织暴露时间。
但从染色效果看，该方法对细胞核染色效果不佳、核浆的对比度较差；而且在腺癌染色效果与鳞癌和正常组织有所不同，其原因有待深入研究。
有学者在乳腺癌等实体瘤标本中使用苏木精单染，其染色时间在30s[10]。
我们在预实验中使用该方法发现，尽管用苏木精染色后时间可缩短，避免蛋白质降解，但随着捕获时间的延长，切片染色加深，导致细胞和间质不能很好区分，影响捕获效果。
在LCM操作过程中将捕获时间控制在40min内，按照统一标准：Duration 15.5s的激光脉冲频率和平均8000shots 计算，既可保证每个帽子的细胞收集数量，也能够将实验时间尽可能缩短，从而使实验可控性提高使操作过程标准化。
当然，从质谱分析的角度出发，通过LCM 获取细胞的数量较小是该方法不可避免的缺陷[11]。
因此，在后续实验中，选择适当的质谱方法应当慎重考虑。
