实验(一)生化需氧量(B0D5)的测定
一．实验原理
在水样中加入硫酸锰和碱性碘化钾溶液，水中的溶解氧将二价锰氧化成四价锰的氢氧化物棕色沉淀。加酸后，沉淀溶解，四价锰又可氧化碘离子而释放出与溶解氧量相当的游离碘。以淀粉为指示剂，用硫代硫酸钠标准溶液滴定释放出的碘，可计算出溶解氧含量。反应式如下：
MnSO4+2NaOH二Na2SO4+Mn(OH)2 J
2Mn(OH)2 +O2=2 MnO(OH)2 J (棕色沉淀)
MnO(OH)2+2H2SO4=Mn(SO4)2+3H2O
Mn(SO4)2+2KI= MnSO4+K2SO4+I2
2Na2S2O3+I2=Na2S4O6+2NaI
二．实验仪器、设备
1. 250mL溶解氧瓶。2 . 250mL锥形瓶。
3 . 25mL酸式滴定管。
4 . 1mL 2mL吸管。
5 . 50mL移液管。
三．实验试剂
1 .硫酸锰溶液：称取36.4g硫酸锰(MnSO4 H2O )或48g (MnSO4 4H2O溶于水中，稀释至100mL此溶液加至酸化过的碘化钾溶液中，遇淀粉不得产生蓝色。
2 .碱性碘化钾溶液：称取50g氢氧化钠，溶解于30?40mL水中，另称取15g 碘化钾溶于20mL水中，待氢氧化钠溶液冷却后，将两溶液混合，加水稀释至100mL 如有沉淀则放置过夜，倾出上清液，贮于棕色瓶中，用橡胶塞塞紧，避光保存。此溶液酸化后，遇淀粉应不呈蓝色。
3 .( 1+5)硫酸溶液(标定硫代硫酸钠溶液用) 。
4 . 1%( m/V)淀粉溶液：称取1g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，再用刚煮沸的水稀释至100mL冷却后，加入0.1g水酸或0.4g氯化锌防腐。
5 .重铬酸钾标准溶液(c 1/
6 K2Cr2O7=0.025mol/L ):称取在105?110C烘干2h，并冷却的优级纯重铬酸钾1.2258g溶于水中，移入1000mL容量瓶，稀释至标线，摇匀。
6 .硫代硫酸钠溶液[c Na2S2O3 - 5H2S 0.0125 mol/L]:称取3.1g硫代硫酸钠溶于煮沸放冷的水中，加入0.2g碳酸钠，用水稀释至1000mL贮于棕色瓶中。使用前，用
0.025mol/L 重铬酸钾标准溶液标定。
标定方法：于250mL碘量瓶中，加入10.00 mL0.025mol/L重铬酸钾标准溶液，加入过量的酸性碱化钾，密塞，摇匀。于暗处静置5min 后，用待标定的硫代硫酸
钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1mL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去为止，记录用量。
式中：
C――硫代硫酸钠溶液的浓度，mol/L ；
V――滴定时消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL。
7 ?浓硫酸：p =1.84。
四.实验步骤
1 .溶解氧的固定：用吸管插入溶解氧瓶的液面下加入1mL硫酸锰溶液、2mL 碱性碘化钾溶液，盖好瓶塞，颠倒混合数次，静置。待棕色沉淀物降至瓶一半时，再颠倒混合一次，待沉淀物下降到瓶底（一般在取样现场固定）。
2 .溶解：打开瓶塞，立即用吸管插入液面下加入2.0mL浓硫酸。小心盖好瓶
塞，颠倒混合摇匀，至沉淀物全部溶解，放于暗处静置5mi n。
3 .滴定：吸取100.00 mL上述溶液于250mL锥形瓶中，用硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1mL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去，记录硫代硫酸钠溶液用量。用下式计算水样中溶解氧浓度：
溶解氧（02, mg/L）=
式中：
C――硫代硫酸钠溶液的浓度，mol/L ;
V――滴定时消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL。
Na2S2O3被滴定后的浓度：C=0.026mol/L Na2S2O3消耗体积7.7ml
溶解氧（O2mg/L）=
=（0.026x7.7x8x100）/100=16mg/L
三日后生化学氧量：Na2S2O3被滴定后的浓度：C=0.026mol/L Na2S2O3消耗体积2.5ml
溶解氧（O2mg/L））=
=（0.026x2.5x8x1000）/100=5.2mg/L
由于水样为1:1的水样，所以溶解氧（O2, mg/L）= （16-5.2）/2=5.4mg/L
六、思考与讨论
1、怎样取水样进行培养？
答：用虹吸法将水样吸入两个溶解氧瓶，移入过程中注意不要产生气泡，以同
样的操作使两个溶解氧平充满水样并溢出少许，加塞水封（瓶不得有气泡）测定一瓶中的溶解氧，将另一瓶放入培养箱中，在20摄氏度左右在培养箱中培养三天，测定其溶解氧。
2、什么是生化需氧量？有哪些测定方法？
答：生化需氧量是指在规定条件，微生物分解说中某些课氧化的物质（主要是有机物）的生物化学过程中消耗溶解氧的量，用以间接表示水中可悲微生物降解的有机物质的含量，是反映有机污染的重要类别指标之一。测定的方法有稀释接种法，为生物传感器发，活
性污泥曝气降解法，库伦滴定法。
（实验二）化学需氧量的测定、实验目的和要求
（一）、掌握容量法、库伦滴定法测定化学需氧量的原理和技术，熟悉库伦测定
仪的原理和操作方法 。
（二）、复习第二章有机物污染物综合指标的含义及测定方法。 二、重铬酸钾法（ COD ） （一）原理
再强酸性溶液中，准确加入过量的重铬酸钾标准溶液，加热回流江水扬中的 还原性物质氧化，过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液 回滴，根据所需要的重铬酸钾标准溶液量计算水样化学需氧量。
（二）仪器
（！）250ml 的全回流玻璃装置。 （2）加热装置
（ 3） 25ml 或 50ml 酸式滴定管、锥形瓶、移液管、容量瓶。
（三）实验步骤
（1） 取20.00ml 混合均匀的水样置于250ml 磨口的回流锥形瓶中，准确加入10.00 急数粒小玻璃珠， 连接磨口回流冷凝管， 从冷凝管上口慢慢加入 30m 硫酸—硫酸 银溶液，轻轻摇动锥形瓶使溶液混匀，加热回流 2h 。
（2） 冷却后，用90ml 的谁冲洗冷凝管壁，取锥形瓶。溶液总体积不得少于14oml ，
否则因酸度太大滴定终点不明显 。
（3）溶液在度却后，加 3 滴试铁灵指示剂，用硫酸亚提前按标准溶液滴定，溶
液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点，记录硫酸亚铁铵标准溶液的用量
三、计算公式
COD （O,mg/L ）= {（ v 。一v1） c X 8X 1000 } /v C —硫酸亚铁铵标准溶液的浓度，mol/l V0 空白滴定消耗硫酸亚铁铵的用量 V1 水样滴定消耗硫酸亚铁铵的用量
四、实验数据处理
硫酸亚铁铵的浓度 C=0.1mol/L
空白滴定消耗梨酸亚铁铵的用量； 水样滴定消耗硫酸亚铁铵的用量；
COD(O,mg/L)= {( v 。一v1) c X 8X 1000 } /v= {(24-22.5)x0.1x 8x1000} /20=60mg/L
24ml 22.5ml
五、思考与讨论
1 、COD 为什么可以作为有机物相对含量综合指标之一？
答化学需氧量是旨在一定条件下，氧化1L水样中还原性物质所需的氧化剂的含量，以氧的质量浓度（mg/L）表示，说中还原性物质有有机化合物和亚硝酸盐和硫化物亚铁盐等有机化合物，化学需氧量反映了水中还原性物质污染的程度。基于水体被有机物污染是很普遍的现象，所以，该指标就作为了有机污染物相对含量的综合指标之一。
实验三）气象色谱法测量废水中苯系物的含量、实验的目的和要求
1、掌握用气象色谱法测定苯系物的原理和方法
2、复习第二章第六节中关于气象色谱法分析的基本知识和色谱仪的组成部分
的工作原理
二、气象色谱法定的原理：
气象色谱法又称层析法，是一种分离测定多组分混合物的极其有效的层析方法。它基于不同物质在相对运动的两相中具有不同的分配系数，当这两项随流动相移动时，就在两相之间反复多次分配，是原来分配系数只有微小差异的各组分得到更好的分离，一次送入监测器测定，达到分离、分析各组分的目的。
三、实验仪器和试剂
仪器：气象色谱仪，具有FID检测器，具有恒温水浴的振荡器
100ml全玻璃注射器，10ml全玻璃注射器，10ul微量注射器，试齐I」：苯系物标准物质
四、实验测定步骤
1、打开气象色谱仪，调整仪器，使各项条件符合要求后开始测量。
2、用注射器吸取一定量的环己烷、甲苯、苯，依稀加入小药瓶，并去皮称其
质量为ml m2 m3,三者混合均匀用注射器抽取0.2ul混合液，在相同的条件下测量，记录色谱图上该混合物中各组分的峰面积A1A2A3和保留时间t1t2t3
3、单独注入环己烷、苯、甲苯，观察色谱图，记录保留时间
4、取2ul样品1,注入，观察色谱图们记录保留时间和相对应的峰面积。
五、实验数据记录处理
经分析知：A为正己烷B为苯C甲苯WA(%)=(10842.550 X 1.54)/ ( 10842.550 X 1.5+4393683.188 X 100+1728692.875X1.30) =0.63
WB ( % ) =(393863.188100)/ (10842.550 X 1.54+393863.188 X 100+1728692.875X1.3)=14.82
WC ( % ) = ( 1768692.8751.30)/ (10842.550 X 1.50+393863.188 X
100+1728692.875X 1.30)=84.55
WA(%)+WB(%)+W(C%)=10 0
六、思考与讨论
1、气象色谱仪的组成及其原理？
答：其结构依次为：载气系统、进样系统、分离系统、检测系统、显示系统。原理，它棘突不同物质在相对运动的两相中不同的分配系数，当这些物质随流动相流动时，就在两相之间进行反复多次的分配再分配，原来分配系数只有微小差异的组分得到很好的分离，然后送入监测器测定，达到分析分离组分的目的。
(实验四)萃取分光光度法测定铜离子含量
、实验目的和要求
1、掌握乙二胺二硫代价酸钠萃取分光光度法的原理及测定铜的要求
2、复习第二章第六节金属测定的相关容
二、实验原理
在PH为9~10的氨性溶液中，铜离子于DDTC作用，生成摩尔比为1:2的黄棕色胶体络
COD 标准测定方法:国标 GB11914-89 化学需氧量的 测定
2011-7-20 8:45:00 来源：姜堰市银河仪器厂
1 应用范围 本标准规定了水中化学需氧量的测定方法。 本标准适用于各种类型的含 COD 值大于 30mg/L 的水样，对未经稀释的水样的测 定上限为 700 mg/L。超过水样稀释测定。 本标准不适用于含氯化物浓度大于 1000 mg/L（稀释后）的含盐水。 2 定义 在一定条件下，经重铬酸钾氧化处理时，水样中的溶解性物质和悬浮物所消耗的重 铬酸钾盐相对应的氧的质量浓度。 3 原理 在水样中加入已知量的重铬酸钾溶液，并在强酸介质下以银盐作催化剂，经沸腾回 流后，以试亚铁灵为指示剂，用硫酸亚铁铵滴定水样中未被还原的重铬酸钾有西欧爱 好的硫酸亚铁铵的量换算成消耗氧的质量浓度。 在酸性重铬酸钾条件下，芳烃及吡啶难以被氧化，其氧化率较低。在硫酸因催化作 用下，直链脂肪族化合物可有效地被氧化。 4 试剂 除非另有说明，实验时所用试剂均为符合国家标准的分析纯试剂，试验用水均为蒸 馏水或同等纯度的水。 4.1 硫酸银（Ag2SO4），化学纯。 4.2 硫酸汞（Hg SO4），化学纯。 4.3 硫酸（H2SO4），ρ=1.84g/Ml。 4.4 硫酸银-硫酸试剂：向 1L 硫酸（4.3）中加入 10g 硫酸银（4.1），放置 1～2 天使 之溶解，并混匀，使用前小心摇动。 4.5 重铬酸钾标准溶液： 4.5.1 浓度为 C（1/6K2Cr2O7）=0.250mol/L 的重铬酸钾标准溶液：将 12.258g 在 105℃ 干燥 2h 后的重铬酸钾溶于水中，稀释至 1000mL。 4.5.2 浓度为 C（1/6K2Cr2O7）=0.0250mol/L 的重铬酸钾标准溶液：将 4.5.1 条的溶液 稀释 10 倍而成。 4.6 硫酸亚铁铵标准滴定溶液 4.6.1 浓度为 C〔（NH4）2Fe(SO4)2· 6H2O〕≈0.10mol/L 的硫酸亚铁铵标准滴定溶液：
生化需氧量（BOD5）测定综合实验 生活污水与工业废水中含有大量各类有机物。当其污染水域后，这些有机物在水体中分解时要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。水体因缺氧造成鱼类及其它水生生物的死亡。 水体中含有的有机物成分复杂，难以一一测定其成分。人们常常利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧，来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。 生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。 测定生化需氧量的水样，采集时应充满并密封于瓶中。在0—4℃下进行保存。一般应在6小时内进行分析。若需要远距离转运，在任何情况下，贮存时间不应超过24小时。 概述 1．方法原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。此生物氧化全过程进行的时间很长，如在20℃培养时，完成此过程需100多天。目前国内外普遍规定于20±1℃培养5d，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升（mg/L）表示。 对某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧大于2mg/L，而剩余溶解氧在1 mg/L以上。 为了保证水样稀释后有足够的溶解氧，稀释水通常要通入空气进行曝气（或通入氧气），以便稀释水中溶解氧接近饱和。稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物质（磷酸盐、钙、镁和铁盐等），以保证微生物生长的需要。 对于不含或少含微生物的工业废水，其中包括酸性废水、碱性废水、高温废水或经过氯化处理的废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在着难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。 本方法适用于测定BOD5大于或等于2mg/L，最大不超过6000 mg/L的水样。当水样BOD5大于6000 mg/L，会因稀释带来一定的误差。 仪器 （1）恒温培养箱（20℃±1℃） （2）5—20L细口玻璃瓶 （3）1000—2000ml量筒 （4）玻璃搅棒：棒的长度应比所用量筒高度长200mm。在棒的底端固定一个直径比量筒底小、并带有几个小孔的硬橡胶板。 （5）溶解氧瓶：250ml到300ml之间，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。 （6）虹吸管，供分取水样和添加稀释水用。 试剂 1．磷酸盐缓冲溶液 将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g七水合磷酸氢二钠（Na2HPO4 ·7H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000ml。此溶液的pH应为7.2。 2．硫酸镁溶液 将22.5g七水合硫酸镁（MgSO4 · 7H2O）溶于水中，稀释至1000ml。
实验二水样中化学需氧量的测定 实验目的 掌握用高锰酸钾法测定水中化学需氧量（COD）的原理和方法。 主要试剂和仪器 试剂：1．0.02mol·L-1 KMnO4溶液（A液）。2. 0.002mol·L-1 KMnO4 溶液（B 液）。3．1：3硫酸。4. 在105-110℃烘干一小时并冷却的草酸钠基准试剂。 仪器：水浴装置，锥形瓶台秤，电子天平，250mL烧杯，250mL锥形瓶，500mL 烧杯，25mL移液管，250mL容量瓶，洗瓶，酸碱滴定管，胶头滴管，玻璃棒，镊子，烘干箱，称量瓶，50mL小烧杯。 实验原理 化学需氧量(COD)是在一定条件下，采用一定的强氧化剂处理水样时，所消耗的氧化剂的量；它是水中还原性物质多少的一个指标。COD越大说明水体被污染的程度越重。 水样COD 的测定，会因加入氧化剂的种类和浓度、反应溶液的温度、酸度和时间，以及催化剂的存在与否而得到不同的结果。因此，COD 是一个条件性的指标，必须严格按操作步骤进行测定。COD 的测定有几种方法，对于污染较严重的水样或工业废水，一般用重铬酸钾法或库仑法，对于一般水样可以用高锰酸钾法。由于高锰酸钾法是在规定的条件下所进行的反应，所以水中有机物只能部分被氧化，并不是理论上的全部需氧量，也不能反映水体中总有机物的含量。因此，常用高锰酸盐指数这一术语作为水质的一项指标，以有别于重铬酸钾法测定的化学需氧量。高锰酸钾法分为酸性法和碱性法两种，本实验以酸性法测定水样的化学需氧量——高锰酸盐指数，以每升多少毫克O2表示。 水样加入硫酸酸化后，加入一定量的KMnO4溶液，并在沸水浴中加热反应一定时间。然后加入过量的Na2C2O4标准溶液，使之与剩余的KMnO4充分作用。再用KMnO4溶液回滴过量的Na2C2O4，通过计算求得高锰酸盐指数值。 反应方程式： 测定：4MnO4-+ 5C+ 12 H+ =4Mn2++5 CO2↑+6H2O 标定： 2 MnO4-+ 5C2O42-+ 16H+=2Mn2++10 CO2↑+8H2O MnO4-与C2O42-反应的注意事项：三度一点
水中生化需氧量（BOD5 ）的测定 一、实验目的 1、学会测定B OD 5 的方法； 2、掌握实验数据的处理方法。 二、实验要求 1 、了解实验的目的； 2 、学会实验方法和会处理实验数据； 3 、实验之后，懂得其中所涉及的理论知识 三、实验原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物进行的生物化学过程中所消耗溶解氧的量。此生物氧化全过程目前国内外普遍规定于 20 ±1 ℃培养 5 天，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为 B OD5 值，以氧的质量浓度（ m g /L ）表示。 生活污水与工业废水中含有大量各类有机物，这些有机物在水体中分解时需要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。水体因缺氧造成鱼类及其他水声生物的死亡。 水中所含的有机物成分复杂，难以一一测定其成分，人们常常利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。 生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。化学测定生化需氧量的水样，采集时应充满并密封于瓶中。在0~4℃下进行保存，一般应在6 小时内进行分析。若需要远距离转运，贮存时间不应超过24 小时。 对于某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧为2 m g /L ，而剩余溶解氧在1 m g/L 以上。为了保证水样稀释后，有足够的溶解氧，稀释水通常要通入空气进行曝气（或通入氧气）使稀释水中溶解氧接近饱和。稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物质（磷酸盐、钙、镁和铁盐）以保证微生物生长的需要。 本方法适用于测定B OD 5大于或等于2 m g /L ，最大不超过6 00 0 m g /L 的水样。当水样 B OD5 大于60 00 m g /L 时，会因稀释带来一定的误差。 四、仪器 1. 恒温培养箱 2. 细口玻璃瓶 3. 大量筒 4. 玻璃搅拌棒，棒的长度应比所用量筒高度长2 00 m m。在棒的底端固定一个直径比底 小，并带有几个小孔的硬橡胶板； 5. 溶解氧瓶为 250~350 m L 之间，带有磨口玻璃塞并且有供水封用的钟形（每组 8 个）； 6. 虹吸管，供分取水样和添加稀释水用（乳胶管即可）； 7. 酸式滴定管（ 50. 00m L 一个）； 8. 三角烧瓶（ 500m L 一个）； 9. 移液管（ 1 .0 0m L， 2. 00 m L， 100m L 各一个）。 10. 870 型直读B OD 5 测定仪 五、试剂 1. 磷酸盐缓冲溶液取8 .5 g 磷酸二氢钾、 21. 75 g 磷酸氢二钾、 33 .4 g 七水合磷酸氢二钠 和1. 7 g 氯化铵溶于水中，稀释至1 000 m L。此溶液的 pH=7. 2。
重铬酸钾法测定化学需氧量（CODcr） 步骤： （1）、取20.00ml混合均匀的水样（或适量水样稀释至20.00ml）置250ml磨口的回流锥形瓶中，准确加入10.00ml重铬酸钾标准溶液及数粒小玻璃珠或沸石，连接磨口回流冷凝管，从冷凝管上口慢慢地加入30ml硫酸-硫酸银溶液，轻轻摇动锥形瓶使溶液混匀，加热回流2h （自开始沸腾时计时）。 注1、对于化学需氧量高的废水样，可先取上述操作所需体积1/10的废水样和试剂于15×150mm硬质玻璃试管中，摇匀，加热后观察是否变绿色；如溶液显绿色，再适量减少废水取样量，直至溶液不变绿色为止，从而确定废水样分析时应取用的体积。稀释时所取废水样量不得少于5ml，如果化学需氧量很高，则废水样应多次稀释。 注2、废水中氯离子含量超过30mg/L时，应先把0.4g硫酸汞加入回流锥形瓶中，再加20.00ml废水（或适量水样稀释至20.00ml）、摇匀。以下操作同上。 （2）、冷却后，用90ml水冲洗冷凝管壁，取下锥形瓶。溶液总体积不得少于140ml，否则因酸度太大，滴定终点不明显。 （3）、溶液再度冷却后，加3滴试亚铁灵指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点，记录硫酸亚铁铵标准溶液的用量。 （4）、测定水样的同时，以20.00ml重蒸馏水，按同样操作步骤作空白试验，记录滴定空白时硫酸亚铁铵标准溶液的用量。 计算： （V0--V1)×C×8×1000 CODcr（02，mg/L）= V 式中,C--硫酸亚铁铵标准溶液的浓度(mol/L);V0--滴定空白时硫酸亚铁铵标准溶液的用量(ml);V1----滴定水样时硫酸亚铁铵标准溶液的用量(ml);V---水样的体积;8--氧(1/20)摩尔质量(g/mol)。
生化需氧量的测定 张浩200812082 环工0803 大气组 一、实验目的及要求 1、了解BOD5测定的意义及掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能； 2、掌握保证准确测定的方法； 二、实验原理 生化需氧量（BOD5）是指在好氧条件下，微生物分解存在水中的有机物质的生物化学过程中所需的溶解氧量。 有机物在微生物的作用下，好氧分解过程两个阶段：第一阶段为含碳物质氧化阶段，主要是含碳有机物氧化为二氧化碳和水；第二阶段为硝化阶段，主要是含氮有机化合物在硝化细菌的作用下分解为亚硝酸盐和硝酸盐。一般硝化反应在5~7天后反应从会明显，故一般在20℃五天培养法测定的BOD值一般不包括硝化阶段。 五天培养法也成标准稀释法或稀释接种法。测定原理为;水样经稀释后，在20℃±1℃条件下培养五天，求出培养前后水样中溶解氧含量，二者的差值为BOD5，单位以的mg/L 表示。 五天培养法实验的必备条件：水体中存在能降解有机物的好氧微生物、有微生物生长所需的营养物质、有足够的溶解氧。 三、实验仪器 1）恒温培养箱[（20+1）℃]； 2）5~20L的细口玻璃瓶； 3）1000mL量筒； 4）玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板； 5）350mL碘量瓶，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口； 6）虹吸管，供分取水样和添加稀释水用； 四、实验药品 1）磷酸盐缓冲溶液：称取8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、2.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g磷酸氢二钠（NaHPO4·7H2O）和1.7g氯化氨（NH4Cl），溶于约500mL水中，稀释至1000mL并混合均匀，此缓冲溶液的pH应为7.2； 2）硫酸镁溶液：称取22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）,溶于水中，稀释至1000mL； 3）氯化钙溶液：称取27.5g无水氯化钙，溶于水中，稀释至1000mL； 4）三氯化铁溶液：称取0.25g三氯化铁（FeCl3·6H2O），溶于水中，稀释至1000mL；5）稀释水：在20L玻璃瓶内加入18L水，控制水温在20℃左右，用抽气或无油压缩机通入清洁空气2~8h，使水中溶解氧饱和或接近饱和（20℃时溶解氧大于8mg/L）。使用前，每升水中加入氯化钙溶液、三氯化铁溶液、硫酸镁溶液和磷酸盐溶液各1mL，混合均匀。稀释水pH值应为7.2，其BOD5值应小于0.2mg/L； 6）接种稀释水：接种稀释水配制后应立即使用； 四、操作步骤 1）经稀释的水样的测定：COD的测定在使用重铬酸钾法确定时，通常需要三个稀释比，由COD值分别乘以0.075、0.15、0.225即由此获得三个稀释倍数；在使用接种稀释水时，应分别乘以0.075、0.15、0.225获得三个稀释倍数分别为0、40、80、120倍。本实验使用的稀释水的COD值为500mg/L； 2）根据确定的稀释倍数，用虹吸法把准备好的稀释水（接种稀释水）引入1000mL量筒
生化需氧量（BOD5）测定 一、原理 生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物质，要紧是有机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。分不测定水样培养前的溶解氧含量和20±1℃培养五天后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程中所消耗的溶解氧量（BOD5）。 关于某些地面水及大多数工业废水、生活污水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度，保证降解过称在有足够溶解氧的条件下进行的。其具体水样稀释倍数可借助于高锰酸钾指数或化学需氧量（CODcr）推算。 关于不含或少含微生物的工业废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应接种通过驯化的微生物。 二、仪器
1、恒温培养箱 2、5-20L细口玻璃瓶 3、1000—2000mL量筒 4、玻璃搅棒：棒长应比所用量筒高长20㎝。在棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并带有几个小孔的硬橡胶板。 5、溶解氧瓶：200-300mL，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。 6、宏吸管：供分取水样和添加稀释水用。 三、试剂 1、磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g 磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g 氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000mL。此溶液的PH值应为7.2。 2、硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000mL。 3、氯化钙溶液：将27.5g无水氯化钙溶于水中，稀释至1000mL。 4、氯化铁溶液：将0.25g氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水，稀释至1000mL。
国标GB 11914-89化学需氧量的测定--COD标准测定法 (YHCOD-100型COD自动消解回流仪的原理及操作过程) 1应用范围 本标准规定了水中化学需氧量的测定方法。 本标准适用于各种类型的含COD值大于30mg/L的水样，对未经稀释的水样的测定上限为700 mg/L。超过水样稀释测定. 本标准不适用于含氯化物浓度大于1000 mg/L(稀释后)的含盐水。 2定义 在一定条件下，经重铬酸钾氧化处理时，水样中的溶解性物质和悬浮物所消耗的重铬酸钾盐相对应的氧的质量浓度。 3 原理 在水样中加入已知量的重铬酸钾溶液，并在强酸介质下以银盐作催化剂，经沸腾回流后，以试亚铁灵为指示剂，用硫酸亚铁铵滴定水样中未被还原的重铬酸钾有西欧爱好的硫酸亚铁铵的量换算成消耗氧的质量浓度。 在酸性重铬酸钾条件下，芳烃及吡啶难以被氧化，其氧化率较低。在硫酸因催化作用下，直链脂肪族化合物可有效地被氧化。 4 试剂 除非另有说明，实验时所用试剂均为符合国家标准的分析纯试剂，试验用水均为蒸馏水或同等纯度的水。 4.1 硫酸银(Ag2SO4)，化学纯。 4.2 硫酸汞(Hg SO4)，化学纯。 4.3硫酸(H2SO4)，ρ=1.84g/Ml。 4.4硫酸银-硫酸试剂：向1L硫酸(4.3)中加入10g硫酸银(4.1)，放置1～2天使之溶解， 并混匀，使用前小心摇动。 4.5重铬酸钾标准溶液： 4.5.1浓度为C(1/6K2Cr2O7)=0.250mol/L的重铬酸钾标准溶液：将12.258g在105℃干燥2h 后的重铬酸钾溶于水中，稀释至1000mL。 4.5.2浓度为C(1/6K2Cr2O7)=0.0250mol/L的重铬酸钾标准溶液：将4.5.1条的溶液稀释10 倍而成。 4.6 硫酸亚铁铵标准滴定溶液 4.6.1 浓度为C〔(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O〕≈0.10mol/L的硫酸亚铁铵标准滴定溶液：溶解39g 硫酸亚铁铵〔(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O〕于水中，加入20ml硫酸(4.3)，待其溶液冷却后稀释至1000ml。 4.6.2 每日临用前，必须用重铬酸钾标准溶液(4. 5.1)准确标定此溶液(4. 6.1)的浓度。
实验十. 水中化学需氧量容量法与库伦滴定法的测定 一、实验目的： 了解化学需氧量的基本概念，掌握容量法测定化学需氧量的原理和技术。 二、实验原理： 在强酸性溶液中，准确加入过量的重铬酸钾标准溶液，加热回流，将水样中还原性物质（主要是有机物）氧化，过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液回滴，根据所消耗的重铬酸钾标准溶液量计算水样化学需氧量。 三、实验仪器与药剂： 1、实验仪器 ⑴500mL全玻璃回流装臵。 ⑵加热装臵（电炉）。 ⑶25mL或50mL酸式滴定管、锥形瓶、移液管、容量瓶等。 2、实验药剂 ⑴重铬酸钾标准溶液（c =0.2500mol/L）：称取预先在120℃ 1/6K2Cr2O7 烘干2h的基准或优质纯重铬酸钾12.258g溶于水中，移入1000mL容量瓶，稀释至标线，摇匀。
⑵试亚铁灵指示液：称取1.485g 邻菲啰啉（C 12H 8N 2〃H 2O ）、0.695g 硫酸亚铁（FeSO 4〃7H 2O ）溶于水中，稀释至100mL ，贮于棕色瓶内。 ⑶硫酸亚铁铵标准溶液［c (NH4)2Fe(SO4)2〃6H2O ］≈0.1mol/L:称取39.5g 硫酸亚铁铵溶于水中，边搅拌边缓慢加入20mL 浓硫酸，冷却后移入1000mL 容量瓶中，加水稀释至标线，摇匀。临用前，用重铬酸钾标准溶液标定。 ⑷硫酸-硫酸银溶液：于500mL 浓硫酸中加入5g 硫酸银。放臵1-2d ，不时摇动使其溶解。 ⑸硫酸汞：结晶或粉末。 四、实验步骤： 1、硫酸亚铁铵溶液的标定： 准确吸取10.00mL 重铬酸钾标准溶液于500mL 锥形瓶中，加水稀释至110mL 左右，缓慢加入30mL 浓硫酸，混匀。冷却后，加入3滴试亚铁灵指示液（约0.15mL ），用硫酸亚铁铵溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点。 c ＝(0.2500×10.00)/V （10－1） 式中：c-硫酸亚铁铵标准溶液的浓度（mol/L ）； V-硫酸亚铁铵标准溶液的用量（mL ）。 2、水样回流消解 取20.00mL 混合均匀的水样（或适量水样稀释至20.00mL ）臵于250mL 磨口的回流锥形瓶中，准确加入10.00mL 重铬酸钾标准溶液及
化学需氧量的测定方法。 1、本标准适用于各种类型的含COD值大于30mg／L的水样，对未经稀释的水样的测定上限为700mg／L。 本标准不适用于含氯化物浓度大于1000mg／L(稀释后)的含盐水。 2 、定义 在一定条件下，经重铬酸钾氧化处理时，水样中的溶解性物质和悬浮物所消耗的重铬酸盐相对应的氧的质量浓度。 3 、原理 在水样中加入已知量的重铬酸钾溶液，并在强酸介质下以银盐作催化剂，经沸腾回流后，以试亚铁灵为指示剂，用硫酸亚铁铵滴定水样中未被还原的重铬酸钾由消耗的硫酸亚铁铵的量换算成消耗氧的质量浓度。 在酸性重铬酸钾条件下，芳烃及吡啶难以被氧化，其氧化率较低。在硫酸银催化作用下，直链脂肪族化合物可有效地被氧化。 4、试剂 除非另有说明，实验时所用试剂均为符合国家标准的分析纯试剂，试验用水均为蒸馏水或同等纯度的水。 硫酸银(Ag2SO4)，化学纯。 硫酸汞(HgS04)，化学纯。 硫酸(H2SO4)，p＝／mL。 硫酸银－硫酸试剂：向1L硫酸中加入10g硫酸银.放置1—2天使之溶解，并混匀，使用前小心摇动。 重铬酸钾标准溶液： 浓度为C(1／6K2Cr2O7)＝／L的重铬酸钾标准溶液：将在105℃干燥2h后的重铬酸钾溶于水中，稀释至1000mL。 浓度为C(1/6K2Cr2O7)＝／L的重铬酸钾标准溶液：将条的溶液稀释10倍而成。 硫酸亚铁铵标准滴定溶液 浓度为C[(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O]≈／L的硫酸亚铁铵标准滴定溶液；溶解39g硫酸亚铁铵[(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O]于水中，加入20mL硫酸，待其溶液冷却后稀释至1000mL。 每日临用前，必须用重铬酸钾标准溶液准确标定此溶液的浓度。 取重铬酸钾标准溶液置于锥形瓶中，用水稀释至约100mL，加入30mL硫酸，混匀，冷却后，加3滴(约试亚铁灵指示剂，用硫酸亚铁铵滴定溶液的颜色由黄色经蓝绿色变为红褐色，即为终点。记录下硫酸亚铁铵的消耗量(mL)。 硫酸亚铁铵标准滴定溶液浓度的计算： 式中：V--滴定时消耗硫酸亚铁铵溶液的毫升数。 浓度为C[(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O)≈／L的硫酸亚铁铵标准滴定溶液：将条的溶液稀释10倍，用重铬酸钾标准溶液标定，其滴定步骤及浓度计算分别与及类同。 邻苯二甲酸氢钾标准溶液，C(KC6H5O4)＝／L：称取105℃时干燥2h的邻苯二甲酸氢钾(HOOCC6H4COOK)溶于水，并稀释至1000mL，混匀。以重铬酸钾为氧化剂，将邻苯二甲酸氢钾完全氧化的COD值为氧／克(指1g邻苯二甲酸氢钾耗氧故该标准溶液的理论COD值为500mg／L。
废水的化学需氧量（COD）测定方法 一、原理 在强酸性溶液中，准确加入过量的重铬酸钾标准溶液，加热回流，将水样中还原性物质(主要是有机物)氧化，过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液回滴，根据所消耗的重铬酸钾标准溶液量来计算水样化学需氧量。 二、仪器 1．500mL全玻璃回流装置。 2．加热装置（电炉）。 3．50mL酸式滴定管、250mL锥形瓶、10mL移液管、1000mL容量瓶等。 三、试剂 1．重铬酸钾标准溶液(c1/6K2Cr2O7=0.2500mol/L)；称取预先在120℃烘干2h的基准或优级纯重铬酸钾12.258g溶于水中，移入1000mL容量瓶，稀释至标线，摇匀。 2．试亚铁灵指示液：称取1.485g邻菲罗啉(C12H8N2·H2O)0.695g和硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)溶于水中，稀释至100mL,贮于棕色瓶中。 3．硫酸亚铁铵标准溶液[c(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O≈0.1mol/L]：称取39.5g硫酸亚铁铵溶于水中，边搅拌边缓慢加入20mL浓硫酸，冷却后移入1000mL容量瓶中，加水稀释至标线，摇匀。临用前，用重铬酸钾标准溶液标定。 四、标定方法 准确吸取10.00mL重铬酸钾标准溶液于500mL锥形瓶中，加水稀释至110mL左右，缓慢加入30mL浓硫酸，摇匀。冷却后，加入3滴试亚铁灵指示液(约0.15mL)，用硫酸亚铁铵溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点。 C=（0.2500×10.00）/ V 式中：C——硫酸亚铁铵标准溶液的浓度(mol/L)；V——硫酸亚铁铵标准溶液的用量(mL)。 五、测定步骤 1．取20.00mL混合均匀的水样（或适量水样稀释至20.00mL）置于250mL磨口的回流锥形瓶中，准确加入10mL 重铬酸钾标准溶液及数粒小玻璃珠或沸石，连接磨口回流冷凝管，从冷凝管上口慢慢地加入30mL硫酸-硫酸银溶液，轻轻摇动锥形瓶使溶液混匀，加热回流2h(自开始沸腾计时)。
实验三水质化学需氧量的测定重铬酸盐法 1 主题内容与应用范围 本标准规定了水中化学需氧量的测定方法。 本标准适用于各种类型的含COD值大于30mg/L的水样，对未经稀释的水样的测定上限为700mg/L。 本标准不适用于含氯化物浓度大于1000mg/L(稀释后)的含盐水。 2 定义 在一定条件下，经重铬酸钾氧化处理时，水样中的溶解性物质和悬浮物所消耗的重铬酸盐相对应的氧的质量浓度。 3 原理 在水样中加入已知量的重铬酸钾溶液，并在强酸介质下以银盐作催化剂，经沸腾回流后，以试亚铁灵为指示剂，用硫酸亚铁铵滴定水样中未被还原的重铬酸钾，由消耗的硫酸亚铁铵的量换算成消耗氧的质量浓度。 在酸性重铬酸钾条件下，芳烃及吡啶难以被氧化，其氧化率较低。在硫酸银催化作用下，直链脂肪族化合物可有效地被氧化。 4 试剂 除非另有说明，实验时所用试剂均为符合国家标准的分析纯试剂，试验用水均为蒸馏水或同等纯度的水。 4.1 硫酸银(Ag 2SO 4 )，化学纯。 4.2 硫酸汞(HgS0 4 )，化学纯。 4.3 硫酸(H 2SO 4 )，p＝1.84g/mL。 4.4 硫酸银－硫酸试剂：向1L硫酸(4.3)中加入10g硫酸银(4.1).放置1～2天使之溶解，并混匀，使用前小心摇动。 4.5 重铬酸钾标准溶液： 4.5.1 浓度为C(1/6K 2Cr 2 O 7 )＝0.250mol/L的重铬酸钾标准溶液：将12.258g在105℃干燥2h 后的重铬酸钾溶于水中，稀释至1000mL。 4.5.2 浓度为C(1/6K 2Cr 2 O 7 )＝0.0250mol/L的重铬酸钾标准溶液：将4.5.1条的溶液稀释10 倍而成。 4.6硫酸亚铁铵标准滴定溶液 4.6.1 浓度为C[(NH 4) 2 Fe(SO 4 ) 2 ·6H 2 O]≈0.10mo l/L的硫酸亚铁铵标准滴定溶液；溶解39g硫 酸亚铁铵[(NH 4) 2 Fe(SO 4 ) 2 ·6H 2 O]于水中，加入20mL硫酸(4.3)，待其溶液冷却后稀释至1000mL。 4.6.2 每日临用前，必须用重铬酸钾标准溶液(4. 5.1)准确标定此溶液(4. 6.1)的浓度。 取10.00mL重铬酸钾标准溶液(4.5.1)置于锥形瓶中，用水稀释至约100mL，加入30mL硫酸(4.3)，混匀，冷却后，加3滴(约0.15mL)试亚铁灵指示剂(4.7)，用硫酸亚铁铵(4.6.1)滴定溶液的颜色由黄色经蓝绿色变为红褐色，即为终点。记录下硫酸亚铁铵的消耗量(mL)。
五日生化需氧量 作业指导书 ( 依据标准: GB/T7488-1987 ) 1含义及有关质量或排放标准 1.1 五日生化需氧量含义 五日生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。条件为20±1°C 培养5天，分别测定样品培养前后的溶解氧，两者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升表示。 1.2 五日生化需氧量(BOD5)的地表水质量1或污水排放标准2-3 注：1-地表水环境质量标准（GB3838-2002） 2-中华人民共和国污水综合排放标准（GB8978-1996）
3-上海市污水综合排放标准(DB31/199-1997) 2分析方法稀释接种法(GB7488-87) 2.1 适用范围 本方法适用于BOD5大于或等于2mg/L并且不超过6000 mg/L的水样。BOD5大于6000 mg/L的水样仍可用本方法，但由于稀释会造成误差，有必要要求对测定结果做慎重的说明。 本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果，它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标。 本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微生物有毒的物质，如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用。水中的藻类或硝化微生物也可能告成虚假的偏高结果。 2.2 定义 生物化学需氧量（BOD）：在规定条件下，水中有机物和无机物氧化作用下所消耗的溶解氧（以质量浓度表示）。 2.3 原理 将水样注满培养瓶，瓶盖塞好后应不透气，将瓶置于恒温条件下培养5天。培养前后分别测定溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量，即BOD5值。
分光光度法快速测定化学需氧量 摘要研究开发一种快速的分光光度测定化学需氧量的方法,实验结果表明:该方法节省时间,节约用水,可同时测试多组样品,其准确度和精密度能满足实际工作中的要求。 关键词化学需氧量;助催化剂;电热恒温干燥箱;分光光度法 化学需氧量(COD)是指在强酸并加热的条件下,用重铬酸钾作为氧化剂处理水样所消耗氧化剂的量。它反映了水中受还原性物质污染的程度,是反映有机物相对含量的指标之一,是我国实施排放总量控制的指标之一。目前测定化学需氧量通常采用国标《水质化学需氧量的测定——重铬酸钾法》(GB 11914-1989)测定,该方法准确度高,但消解时间长,操作复杂。在实际生产活动中,有时需要及时准确的化学需氧量的数值,以指导生产的正常运行管理。因此,作者在重铬酸钾法的基础上,加入助催化剂,使用电热恒温干燥箱进行消解,分光光度计进行测量,研发出一种分光光度快速测定化学需氧量的方法。 1方法原理 在重铬酸钾-硫酸消解体系中加入助催化剂硫酸铝钾和钼酸铵,大大缩短了消解时间,消解完毕后采用分光光度法测定化学需氧量。 2仪器和试剂 2.1仪器 1)电热恒温干燥箱; 2)DR4000U分光光度计; 3)50mL的具塞比色管。 2.2试剂 1)消解液:称取4.9g重铬酸钾,25.0g硫酸铝钾,5.0g钼酸铵,溶解于约250mL水中,加入100mL浓硫酸,冷却后,转移至500mL容量瓶中,用水稀释至标线。该溶液重铬酸钾的浓度约为0.2mol/L(C=1/6K2Cr2O7)。如表1。 2)硫酸-硫酸银催化剂:称取5.0g分析纯硫酸银,溶解于500mL浓硫酸中。 3)掩蔽剂:称取10.0g分析纯硫酸汞,溶解于100mL10%硫酸中。 3分析步骤
实验五水五日生化需氧量（BOD5）的测定 1 目的 1.1 理解BOD的含义及测定条件； 1.2 了解水样预处理的道理与预处理方法。 2 方法原理 生物化学需氧量(BOD)定义为：在规定的条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物所进行的生物化学过程所消耗的溶解氧量。该过程进行的时间很长，如在20℃培养条件下，全过程需100天，根据目前国际统一规定，在20±1℃的温度下，培养五天后测出的结果，称为五日生化需氧量，记为BOD5，其单位用质量浓度mg/L表示。 对于一般生活污水和工业废水，虽然含较多有机物，如果样品含有足够的微生物和具有足够氧气，就可以将样品直接进行测定，但为了保证微生物生长的需要，需加入一定量的无机营养盐(磷酸盐、钙、镁和铁盐)。 某些不含或少含微生物的工业废水、酸碱度高的废水、高温或氯化杀菌处理的废水等，测定前应接入可以分解水中有机物的微生物，这种方法称为接种。对于一些废水中存在着难被一般生活污水中微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，可以将水样适当稀释，并用驯化后含有适应性微生物的接种水进行接种。 一般检测水质的BOD5只包括含碳有机物质氧化的耗氧量和少量无机还原性物质的耗氧量。由于许多二级生化处理的出水和受污染时间较长的水体中，往往含有大量硝化微生物。这些微生物达到一定数量就可以产生硝化作用的生化过程。为了抑制硝化作用的耗氧量，应加入适量的硝化抑制剂。 3 适用范围 BOD5为2—1000mg/L水样，超过1000mg/L的水样，应适当稀释。 4 主要仪器及设备 使用的玻璃仪器皿在实验前应认真清洗，防止油污、沾尘。玻璃器皿干燥后方能使用。 常用实验室设备如下： 4.1 生化培养箱温度控制在20±l℃，可连续无故障运行。 4.2 充氧设备充氧动力常采用无油空气压缩机(或隔膜泵、或氧气瓶、或真空泵)。充氧流程可分为正压、负压充氧两种流程。 4.3 BOD培养瓶：容积550±1mL。
实验七五日生化需氧量的测定 生化需氧量(BOD)是指在规定的条件下，微生物分解水中某些可氧化物质(主要是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量，用以间接表示水中可被微生物降解的有机类物质的含量，是反映有机物污染的重要类别指标之一。测定BOD 的方法有稀释接种法、微生物传感器法、活性污泥曝气降解法、库仑滴定法、测压法等。本实验采用稀释接种法测定污水的BOD。该方法也称五天培养法(BOD5)，即取一定量水样或稀释水样，在20℃±1℃培养五天，分别测定水样培养前、后的溶解氧，二者之差为BOD5值，以氧的mg/L表示，其相关内容参阅教材第二章第五节。 一、实验目的和要求 1．掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能。 2．复习第二章第五节中的相关内容，提出为保证测定准确度，应当控制好哪些条件。 二、仪器 1．恒温培养箱。 2．5～20L细口玻璃瓶。 3．1000～2000mL量筒。 4．玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板。 5．溶解氧瓶：200～300mL，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟形口。 6．虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。 三、试剂
1．磷酸盐缓冲溶液：将8.58磷酸二氢钾(KH2PO4)，2. 75g磷酸氢二钾(K 2HPO4)，33.4g 磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于水中，稀释至1000mL。此溶液的pH 应为7.2。 2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中，稀释至1000mL。 3．氯化钙溶液；将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。 4，氯化铁溶液；将0.25g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水，稀释至1000mL。 5．盐酸溶液(0.5mol/L)：将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水，稀释至1000mL。 6．氢氧化钠溶液(0.5mol/L)：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。 7．亚硫酸钠溶液(1/2Na2SO3＝0.025mol/L)；将1.575g亚硫酸钠溶于水，稀释至1000mL。此溶液不稳定，需每天配制。 8．葡萄糖-谷氨酸标准溶液；将葡萄糖(C6H12O6)和谷氨酸(HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH)在103℃干燥lh后，各称取150mg溶于水中，移入1000mL容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。 9．稀释水：在5～20L玻璃瓶内装入一定量的水，控制水温在20℃左右。然后用无油空气压缩机或薄膜泵，将此水曝气2～8h，使水中的溶解氧接近于饱和，也可以鼓入适量纯氧。瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布，置于20℃培养箱中放置数小时，使水中溶解氧含量达8mg/L左右。临用前于每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶液各1mL，并混合均匀。稀释水的pH值应为7.2，其BOD5应小于0.2mg/L。 10．接种液：可选用以下任一方法获得适用的接种液。
1.适用范围 本测定规程规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。 2.测试原理 在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4 h或（2+5）d±4 h[先在0~4℃的暗处培养2 d，接着在（20±1）℃的暗处培养5 d，即培养（2+5）d]，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5的形式表示。 3.仪器设备 3.1 生化培养箱：20±1℃。 3.2 溶解氧仪：0~20 mg/L。 3.3 曝气装置。 3.4 溶解氧瓶：300 mL。 3.5 滤膜：孔径为1.6 μm。 3.6 一般实验室常用仪器和设备，玻璃容器需符合国家A级标准。 4.试剂 除非另有说明，分析时均用符合国家标准的分析纯试剂。 4.1 一级水，文中所说的水均指一级水。 4.2接种液：可购买接种微生物用的接种物质，接种液的配制和使用按说明书的要求操作。也可按以下方法获得接种液。 4.2.1 未受工业废水污染的生活污水：化学需氧量不大于300 mg/L，总有机碳不大于100 mg/L。 4.2.2 含有城镇污水的河水或湖水。 4.2.3 污水处理厂的出水。 4.2.4 分析含有难降解物质的工业废水时，在其排污口下游适当处取水样作为废水的驯化接种液。也可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气，每天加入少量该种废水，同时加入少量生活污水，使适当该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量的絮状物时，表明微生物已繁殖，可用作接种液。一般驯化过程需
实验三生化需氧量（BOD5）的测定 一、实验目的 1．掌握五日培养法测定生化需氧量的基本原理和方法。 2．学会使用自动调温培养箱。 二、原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物质，主要是有机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。分别测定水样培养前的溶解氧含量和在20℃±1℃培养五天后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程所消耗的氧量（BOD5）。 水体发生生物化学过程必须具备： (1)水体中存在能降解的好气微生物。 (2)有足够的溶解氧。 (3)有微生物生长所需的营养物质。 因此在测定水样时须加入一定量的无机营养物质。根据水样的情况进行一定比例的稀释，稀释水充分暴气等等。 三、仪器 1．自动调温培养箱（20℃±1℃）,不透光，以防光合作用产生溶解氧。 2．5～20 L细口玻璃瓶。 3．1000～2000mL量筒。 4．特制搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长20cm。在粗铁丝下端装一个2mm 厚，直径比量筒直径略小，并带有几个小孔的硬橡胶板。 5．培养瓶：250～300mL特制的BOD瓶（带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口）或试剂瓶。所用培养瓶的容积均需校准，编号纪录。 6．碘量瓶：250mL 四、试剂 1．磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000mL。此溶液的pH应为7.2。 2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000mL。
3．氯化钙溶液：将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。 4．三氯化铁溶液：将0.25g三氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水，稀释至1000mL。 5．盐酸溶液（0.5mol/L）：将40mL（ρ=1.18g/mL）盐酸溶于水，稀释至100mL。 6．碱性碘化钾溶液：称取250g氢氧化钠（NaOH），在搅拌下溶解于250mL 水中，冷却后，加75g碘化钾（KI），用水稀释至500mL。贮于棕色瓶中，用橡皮塞塞紧，避光保存。 7.硫代硫酸钠溶液c（Na2S2O3=0.01mol/L）：硫代硫酸钠溶液c(Na2S2O3·5H2O)=0.01mol/L：称取25g硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O）溶于煮沸放冷的水中，加2g碳酸钠，用水稀释至10 L，贮于棕色瓶中，使用前标定。标定方法同实验五。 8．5g/L淀粉指示剂：称取1g可溶性淀粉，用少量水搅成糊状，加入100mL 煮沸的水，混匀，继续煮至透明，冷却后加入1mL冰醋酸，稀释至200mL，盛于试剂瓶中。 五、分析步骤 溶解氧的测定：将经20℃±1℃五天培养后的水样的250mL培养瓶盖外的水倒去，小心打开盖子，加入1mL氯化亚锰溶液和2mL碱性碘化钾溶液（注意先加氯化亚锰，移液管尖接近液面）。立即谨慎地将瓶盖好，不能有气泡，溢出的水倒掉，用手指按住瓶盖，用力反复颠倒培养瓶20次，直到沉淀与液体完全混合为止。将培养瓶静置约1小时，当沉淀只占培养瓶体积1/2时，小心打开盖子，吸出清液略大于5mL，用移液管加入5mL硫酸溶液，盖上盖子，反复颠倒培养瓶，使沉淀完全溶解。 静置5分钟，小心打开瓶塞，，然后用已标定的0.01mol/L的硫代硫酸钠标准溶液滴定。当溶液呈淡黄色时，加1mL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚刚腿去。记下滴定管读数。
实验一、水中化学需氧量的测定（重铬酸钾法） 一、概述 化学需氧量（COD），是指在一定条件下，用强氧化剂处理水样时所消耗氧化剂的量，以氧的毫克/升来表示。化学需氧量反映了水中受还原性物质污染的程度。水中还原性物质包括有机物、亚硝酸盐、亚铁盐、硫化物等。水被有机物污染是很普遍的，因此化学需氧量也作为有机物相对含量的指标之一。 水样的化学需氧量，可受加入氧化剂的种类及浓度，反应溶液的酸度、反应温度和时间，以及催化剂的有无而获得不同的结果。化学需氧量亦是一个条件性指标，必须严格按操作步骤进行。对于工业废水，我国规定用重铬酸钾法，其测得的值为COD Cr。 1．方法原理 在强酸性溶液中，一定量的重铬酸钾氧化水样中还原性物质，过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂、用硫酸亚铁铵溶液回滴。根据消耗的重铬酸钾量算出水样中还原性物质消耗氧的量。 2．干扰及其消除 酸性重铬酸钾氧化性很强，可氧化大部分有机物，加入硫酸银作催化剂时，直链脂肪族化合物可完全被氧化，而芳香族有机物却不易被氧化，吡啶不被氧化，挥发性直链脂肪族化合物、苯等有机物存在于蒸气相，不能与氧化剂液体接触，氧化不明显。氯离子能被重铬酸盐氧化，并且能与硫酸银作用产生沉淀，影响测定结果，故在回流前向水样中加入硫酸汞，使成为络合物以消除干扰。氯离子含量高于2000mg/L 的样品应先作定量稀释、使含量降低至2000mg/L以下，再行测定。 3．方法的适用范围 用L浓度的重铬酸钾溶液可测定大于50mg/L的COD值。用L浓度的重铬酸钾溶液可测定5—50mg/L 的COD值，但准确度较差。 二、仪器及试剂 1．仪器 （1）回流装置：带250ml锥形瓶的全玻璃回流装置见图3-2-1（如取样量在30ml以上，采用 500ml锥形瓶的全玻璃回流装置）。 （2）加热装置：电热板或变阻电炉。 （3）50ml酸式滴定管。 2．试剂 （1）重铬酸钾标准溶液（1/6K2Cr2O7=L）：称取预先在120℃烘干2h的基准或优级纯重铬 酸钾12.258g溶于水中，移入1000ml容量瓶，稀释至标线，摇匀。 （2）试亚铁灵指示液：称取1.485g邻菲啰啉(C12H8N2?H2O,1,10-phenanthnoline)，0.695g硫酸 亚铁(FeSO4?7H2O)溶于水中，稀释至100ml，贮于棕色瓶内。 （3）硫酸亚铁铵标准溶液[(NH4)2Fe(SO4)2?≈L]：称取39.5g硫酸亚铁铵溶于水中，边搅拌边 缓慢加入20ml浓硫酸，冷却后移入1000ml容量瓶中，加水稀释至标线，摇匀。临用前，用重铬酸钾标准溶液标定。 标定方法： 准确吸取重铬酸钾标准溶液于300ml锥形瓶中，加水稀释至110ml左右，缓慢加入30ml浓硫酸，混匀。冷却后，加入3滴试亚铁灵指示液（约），用硫酸亚铁铵溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点。 C[(NH4)2Fe(SO4)2]= V 00 . 10 2500 .0? 式中，C—硫酸亚铁铵标准溶液的浓度(mol/L)； V—硫酸亚铁铵标准滴定溶液的用量(ml)。 （4）硫酸-硫酸银溶液：于2500ml浓硫酸中加入25g硫酸银。放置1—2天，不时摇动使其溶解（如无2500ml 容器，可在500ml浓硫酸中加入5g硫酸银）。