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常见肿瘤标志物转贴肿瘤标志物〈一〉肿瘤标志物的定义所谓肿瘤标志物，是指在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞生物合成、释放或者是宿主对癌类反应性的一类物质。
它们的存在或量变可以提示肿瘤的性质，了解肿瘤的组织发生、细胞分化、细胞功能，以进行肿瘤的诊断、分类、判断预后及指导治疗。
〈二〉肿瘤标志物的分类目前可通过两个因素对肿瘤标志物进行分类：一是按肿瘤标志物的来源；二是按肿瘤标志物本身的化学特性。
根据肿瘤标志物的来源及特异性，大致可以分为两大类。
仅有某一种肿瘤所产生的特异性物质，称为该肿瘤的特异性标志物。
如前列腺特异性抗原（prostate specific anfigen,PSA）就是前列腺肿瘤所产生的特异性标志物质，只有患前列腺癌时，PSA才会显著性升高。
但更多的肿瘤标志物，则是在一类组织类型相似而性质不同的肿瘤发生时，其含量会有教大的变化，一般称这类物质为肿瘤的辅助标志物。
这类标志物往往在良性肿瘤或正常组织也会出现，但在肿瘤发生时，这类标志物的含量要明显高出良性肿瘤或正常组织。
耕具肿瘤标志物本身的化学特性分类可以将其分为以下几类：1 肿瘤胚胎性抗原标志物；2 糖类标志物；3 酶类标志物；4 激素类标志物；5 蛋白质类标志物；6 基因类标志物。
1肿瘤胚胎性抗原标志物在人类发育过程中，许多原本只有在胎盘期才具有的蛋白类物质，随胎儿的出生而逐渐停止合成和分泌，但因某中因素的影响，特别是肿瘤状态时，会使得机体一些“关闭”的基因激活，出现了返祖现象，而重新生成和分泌这些胚胎、胎儿期的蛋白。
这类蛋白虽然与肿瘤组织不一定都具有特定的相关性，但与肿瘤的发生存在着内在的联系，故而被作为一种较为常见的肿瘤标志物。
β名称性质相关肿瘤甲胎蛋白糖蛋白70KD 肝细胞、胚细胞肿瘤（非精原细胞瘤）β癌胚抗原80kd 结肠肿瘤癌胚铁蛋白糖蛋白600kd 肝肿瘤癌胚抗原糖蛋白22kd 结肠、直肠、胰腺、肺、乳腺肿瘤胰癌胚抗原糖蛋白40kd 胰腺肿瘤鳞状细胞抗原糖蛋白44-48kd 肺、皮肤、头、和颈部肿瘤组织多肽抗原细胞角蛋白8，细胞角蛋白18，细胞角蛋白19 乳腺、结肠肿瘤（1）癌胚抗原癌胚抗原（carcino-embryonic antigen,CEA）是1065年Gold和Freedman首先从胎儿及结肠组织中发现的，CEA的编码基因位于19号染色体。
免疫组化常用标记物一、常用标志物1、ＣD15(LeuM1)---(阳性部位:细胞膜)。
就是一种由半乳糖、岩藻糖与N－乙酰葡萄糖组成得碳水化合物抗原,又称半抗原χ,就是粒／单核细胞相关抗原、免疫组织化学表达:成熟粒细胞、激活得淋巴细胞(主要就是T淋巴细胞)、R－S细胞、大多数腺癌等。
2、癌胚抗原(carcｉｎoeｍbrｙonic antigen,ＣEA)(CD６6e)——-(阳性部位:细胞膜／浆)、癌胚抗原就是表达于胎儿上皮细胞得一种糖蛋白,分子量为18０kＤａ。
存于某些恶性肿瘤组织尤其就是内胚层来源发肿瘤中,大多数胃肠道(包括胰腺)与肺腺癌均有表达,少量成人上皮细胞与良性肿瘤亦可表达、ＣＥA主要用于标记上皮性肿瘤,尤其就是腺上皮来源得腺癌。
3。
嗜铬素A(chｒomｏｇraｎiｎA,CgＡ)－－—(阳性部位:细胞浆)。
嗜铬素就是位于神经分泌颗粒内得酸性糖蛋白家族,就是一组可溶性酸性蛋白,分子量为７6～120 ｋDａ,分布广泛。
含量最丰富得就是嗜铬素A,另两个就是嗜铬素B与嗜铬素C。
几乎所有得神经内分泌肿瘤中均可检测到嗜铬素、嗜铬素A不仅存在于神经内分泌细胞得分泌颗粒中,也广泛分布于所有含有颗粒得内分泌细胞与神经内分泌细胞来源得肿瘤细胞、此抗体可以识别嗜铬素A 抗原羧基末端得片段,而不与氨基末端得片段反应,主要用于标记神经内分泌细胞及其来源得肿瘤、对小细胞癌进行抗原修复可提高检测得敏感性、4。
细胞角蛋白(cytokeratｉｎpan,广谱CK)－--AＥ1/AE3(阳性部位:细胞浆)。
此抗体可以识别绝大部分酸性细胞角蛋白(Ⅰ型/低分子量)与碱性细胞角蛋白(Ⅱ型/高分子量)、用于标记上皮及上皮来源得肿瘤,特别就是对鉴别与判断转移性肿瘤就是否为上皮源性具有一定得意义、５.细胞角蛋白5/6(cytokeratｉn 5／6,CK5/6)—－－(阳性部位:细胞浆)、在正常组织中,鳞状上皮与导管上皮得基底细胞以及部分得鳞状上皮生发层细胞、肌上皮细胞与间皮细胞阳性,腺上皮细胞阴性。
免疫组化常用标记物一、常用标志物1、ＣD15(ＬeｕM1)-——(阳性部位:细胞膜).就是一种由半乳糖、岩藻糖与Ｎ—乙酰葡萄糖组成得碳水化合物抗原,又称半抗原χ，就是粒/单核细胞相关抗原.免疫组织化学表达:成熟粒细胞、激活得淋巴细胞(主要就是T淋巴细胞)、R-S细胞、大多数腺癌等．2、癌胚抗原(ｃaｒciｎｏｅmbｒｙonｉc aｎtigen，CEA）（CＤ66ｅ)——－(阳性部位:细胞膜/浆).癌胚抗原就是表达于胎儿上皮细胞得一种糖蛋白，分子量为180ｋＤa。
存于某些恶性肿瘤组织尤其就是内胚层来源发肿瘤中,大多数胃肠道(包括胰腺)与肺腺癌均有表达,少量成人上皮细胞与良性肿瘤亦可表达。
CEA主要用于标记上皮性肿瘤,尤其就是腺上皮来源得腺癌。
３、嗜铬素A（cｈｒｏmoｇranin A，CgＡ)—-—(阳性部位：细胞浆)。
嗜铬素就是位于神经分泌颗粒内得酸性糖蛋白家族,就是一组可溶性酸性蛋白,分子量为76～1２0 kDａ,分布广泛。
含量最丰富得就是嗜铬素A,另两个就是嗜铬素B与嗜铬素C。
几乎所有得神经内分泌肿瘤中均可检测到嗜铬素．嗜铬素A不仅存在于神经内分泌细胞得分泌颗粒中,也广泛分布于所有含有颗粒得内分泌细胞与神经内分泌细胞来源得肿瘤细胞。
此抗体可以识别嗜铬素Ａ抗原羧基末端得片段，而不与氨基末端得片段反应,主要用于标记神经内分泌细胞及其来源得肿瘤。
对小细胞癌进行抗原修复可提高检测得敏感性.4、细胞角蛋白(ｃytｏkeratｉn pａn，广谱ＣK)--—AE1／AE3(阳性部位：细胞浆)。
此抗体可以识别绝大部分酸性细胞角蛋白（Ⅰ型/低分子量)与碱性细胞角蛋白(Ⅱ型/高分子量）。
用于标记上皮及上皮来源得肿瘤，特别就是对鉴别与判断转移性肿瘤就是否为上皮源性具有一定得意义。
5、细胞角蛋白５/6(cytokeratｉn 5/6,CK5/6)——－（阳性部位:细胞浆)。
在正常组织中，鳞状上皮与导管上皮得基底细胞以及部分得鳞状上皮生发层细胞、肌上皮细胞与间皮细胞阳性,腺上皮细胞阴性.因此,可用于鳞癌与腺癌、间皮瘤与腺癌得鉴别诊断.支气管上皮基底细胞、间皮;鳞癌、大细胞癌、移行细胞癌、间皮瘤阳性。
免疫组化常用标记物一、常用标志物１、 CD１5（LｅuM１）－--（阳性部位:细胞膜）。
就是一种由半乳糖、岩藻糖与N—乙酰葡萄糖组成得碳水化合物抗原，又称半抗原χ,就是粒/单核细胞相关抗原。
免疫组织化学表达：成熟粒细胞、激活得淋巴细胞（主要就是Ｔ淋巴细胞)、R-S细胞、大多数腺癌等。
2、癌胚抗原（carcinｏembｒyonic ａｎtｉgen,ＣEA)(CD66e）—-—(阳性部位：细胞膜/浆).癌胚抗原就是表达于胎儿上皮细胞得一种糖蛋白,分子量为180kDａ.存于某些恶性肿瘤组织尤其就是内胚层来源发肿瘤中，大多数胃肠道（包括胰腺)与肺腺癌均有表达，少量成人上皮细胞与良性肿瘤亦可表达。
CEA主要用于标记上皮性肿瘤，尤其就是腺上皮来源得腺癌。
3、嗜铬素A（cｈromogrａnin Ａ,CｇA）--—(阳性部位:细胞浆）。
嗜铬素就是位于神经分泌颗粒内得酸性糖蛋白家族，就是一组可溶性酸性蛋白，分子量为76~12０ kDa,分布广泛。
含量最丰富得就是嗜铬素A，另两个就是嗜铬素B与嗜铬素C.几乎所有得神经内分泌肿瘤中均可检测到嗜铬素。
嗜铬素A不仅存在于神经内分泌细胞得分泌颗粒中，也广泛分布于所有含有颗粒得内分泌细胞与神经内分泌细胞来源得肿瘤细胞。
此抗体可以识别嗜铬素A抗原羧基末端得片段，而不与氨基末端得片段反应，主要用于标记神经内分泌细胞及其来源得肿瘤。
对小细胞癌进行抗原修复可提高检测得敏感性。
４、细胞角蛋白(ｃytokｅrａｔiｎpaｎ,广谱CK）－—－ AE1／ＡE３（阳性部位:细胞浆)。
此抗体可以识别绝大部分酸性细胞角蛋白(Ⅰ型/低分子量)与碱性细胞角蛋白（Ⅱ型/高分子量）.用于标记上皮及上皮来源得肿瘤,特别就是对鉴别与判断转移性肿瘤就是否为上皮源性具有一定得意义.5、细胞角蛋白5/6(cytokeｒatin 5／６,CK5／6）－--（阳性部位：细胞浆）。
在正常组织中,鳞状上皮与导管上皮得基底细胞以及部分得鳞状上皮生发层细胞、肌上皮细胞与间皮细胞阳性，腺上皮细胞阴性。
免疫组织化学技术制片的规范和质量控制随着免疫组织化学技术的不断发展，该技术在组织学研究和病理诊断尤其是在肿瘤鉴别诊断的应用越来越广泛。
科学地规范免疫组化技术的操作对保证免疫组化制片质量，提高临床病理诊断水平，促进病理学研究工作的发展有着重要的意义。
影响免疫组化染色结果的因素很多，除了免疫组化染色操作因素外，还包括组织切片制备各个环节的因素。
因此，免疫组化技术的操作规范也要包括组织切片技术的规范。
一、免疫组织化学技术对组织切片的要求免疫组织化学技术适用于冰冻切片和石蜡切片，部分抗体只能用于冰冻切片，大部分抗体可用于石蜡切片，适用于石蜡切片的抗体也适用于冰冻切片。
冰冻切片能很好地保存组织抗原，抗原丢失少，但形态结构差，定位不很清晰；石蜡切片组织形态结构好，定位清晰，但在组织的固定、脱水、包埋等过程中容易破坏组织抗原，使抗原的免疫活性有所降低。
因此在检测石蜡切片组织抗原时，尽可能保存组织抗原的免疫活性十分重要。
二、组织的固定组织离体以后应及时取材固定，组织经过固定后可保存组织原有的形态结构，防止组织抗原弥散。
常用的固定液为10％福尔马林液(4%甲醛液)，最好选用10％中性福尔马林液，固定时间为4-6小时，一般不超过24小时。
固定时间不足，组织结构不佳，组织抗原弥散；固定时间过长，可封闭或破坏组织抗原。
冰冻切片常用的固定液为无水丙酮或4%多聚甲醛，固定时间为10-20min。
三、载玻片的处理组织切片贴在载玻片上进行免疫组织化学染色，由于染色过程操作步骤及冲洗次数较多，容易出现脱片现象，因此将载玻片涂胶或硅化是必要的。
较常用效果较好的是硅化玻片。
硅化玻片的制备：1. 载玻片经酸洗，冲洗干净后烤干。
2. 2％APES丙酮溶液浸1-2min。
3. 无水丙酮液浸1-2min。
3. 蒸馏水浸洗1-2min。
4. 烤干备用。
可用无水酒精代替无水丙酮，也可以直接配成APES水溶液使用。
＊ APES(3-AMINOPROPYLTRIETHOXY-SILANE) 氨丙基三乙氧基硅烷SIGMA产品。
常见肺肿瘤的免疫组化标志物一、肺肿瘤的常用标志物1. CD15(LeuM1)---（阳性部位：细胞膜）是一种由半乳糖、岩藻糖和N-乙酰葡萄糖组成的碳水化合物抗原，又称半抗原χ，是粒/单核细胞相关抗原。
免疫组织化学表达：成熟粒细胞、激活的淋巴细胞（主要是T淋巴细胞）、R-S细胞、大多数腺癌等。
2. 癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）(CD66e)---（阳性部位：细胞膜/浆）癌胚抗原是表达于胎儿上皮细胞的一种糖蛋白，分子量为180kDa。
存于某些恶性肿瘤组织尤其是内胚层来源发肿瘤中，大多数胃肠道（包括胰腺）和肺腺癌均有表达，少量成人上皮细胞和良性肿瘤亦可表达。
CEA主要用于标记上皮性肿瘤，尤其是腺上皮来源的腺癌。
3.嗜铬素A（chromogranin A，CgA）---（阳性部位：细胞浆）嗜铬素是位于神经分泌颗粒内的酸性糖蛋白家族，是一组可溶性酸性蛋白，分子量为76～120 kDa，分布广泛。
含量最丰富的是嗜铬素A，另两个是嗜铬素B和嗜铬素C。
几乎所有的神经内分泌肿瘤中均可检测到嗜铬素。
嗜铬素A不仅存在于神经内分泌细胞的分泌颗粒中，也广泛分布于所有含有颗粒的内分泌细胞和神经内分泌细胞来源的肿瘤细胞。
此抗体可以识别嗜铬素A抗原羧基末端的片段，而不与氨基末端的片段反应，主要用于标记神经内分泌细胞及其来源的肿瘤。
对小细胞癌进行抗原修复可提高检测的敏感性。
4.细胞角蛋白（cytokeratin pan，广谱CK）--- AE1/ AE3（阳性部位：细胞浆）此抗体可以识别绝大部分酸性细胞角蛋白（Ⅰ型/低分子量）和碱性细胞角蛋白（Ⅱ型/高分子量）。
用于标记上皮及上皮来源的肿瘤，特别是对鉴别和判断转移性肿瘤是否为上皮源性具有一定的意义。
5.细胞角蛋白5/6（cytokeratin 5/6，CK5/6）---（阳性部位：细胞浆）在正常组织中，鳞状上皮和导管上皮的基底细胞以及部分的鳞状上皮生发层细胞、肌上皮细胞和间皮细胞阳性，腺上皮细胞阴性。
