14-二(2-苄硒乙氧基)蒽诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的研究

14-噻吩基次亚甲基苦参碱体外抗鼻咽癌细胞CNE2作用的初步研究背景和目的:鼻咽癌是南中国地区常见的头颈部肿瘤,治疗上推荐以放疗为主结合化疗的综合治疗方法,五年生存率可达50%以上。

然而,不管是放射治疗或化学治疗均有一定的毒副作用,如何提高放化疗效果并减少放疗后并发症和减轻放疗的毒副作用是鼻咽癌研究关注的热点问题。

由于肿瘤的远处转移和放射的局部损伤作用给进一步改善晚期鼻咽癌患者的预后和生活质量带来了困难,因此需要越来越多的化疗手段介入。

苦参碱是近年受到关注的抗肿瘤成分,但存在生物利用率不高,并且有一定的毒副作用,使其难以单独用于临床抗肿瘤治疗。

为了使苦参碱毒性降低和生物利用度更高,我们的合作者以苦参碱为先导化合物,通过化学合成方法对其结构进行改造,合成了20个结构新颖的苦参碱衍生物,并进行了抗鼻咽癌作用筛选。

苦参碱改构体14-噻吩基次亚甲基苦参碱正是从中初步筛出的具有抗肿瘤活性的成分,本实验研究了该药对人鼻咽癌细胞CNE2体外增殖的影响,并探讨其机制。

方法:选用鼻咽癌细胞株CNE2进行实验,首先经MTT进行抗鼻咽癌作用筛选;然后本实验分四组即是实验组、阴性对照组、正常细胞对照组、溶剂组、空白对照组(调零孔);倒置光学显微镜下观察细胞形态;MTT实验检测药物抑制率;流式细胞仪检测细胞周期的分布和凋亡情况。

结果:加药细胞组形态变圆、变小、胞内可见空泡;MTT检测可见药物对人鼻咽癌细胞株CNE2有显著的抑制作用(P<0.05),抑制率最大可达到97.9%,但是对人脐静脉内皮细胞没有表显出相应的抑制作用,抑制率最大仅达到7.7%;流式细胞仪检测结果可见CNE2细胞的周期阻滞在S期和有浓度依赖性的明显凋亡,凋亡率最大可达89.71%。

结论:体外实验表明,14-噻吩基次亚甲基苦参碱具有明显的抗鼻咽癌作用,可通过细胞周期S期阻滞和诱导细胞凋亡来抑制鼻咽癌细胞的增殖分裂,并表现出很弱的毒性。

《乙醛脱氢酶1作为喉癌Hep-2细胞系肿瘤干细胞标志物的实验研究及初步临床分析》一、引言喉癌是全球范围内一种常见的头颈肿瘤，严重威胁人类健康。

对于喉癌的诊断与治疗，探寻准确可靠的肿瘤干细胞标志物尤为重要。

乙醛脱氢酶1（ALDH1）作为潜在的生物标志物，其在肿瘤细胞中的表达和功能尚需进一步明确。

本研究旨在探讨乙醛脱氢酶1在喉癌Hep-2细胞系中的表达情况，并分析其作为肿瘤干细胞标志物的潜在价值。

二、材料与方法1. 材料（1）细胞系：喉癌Hep-2细胞系。

（2）试剂与仪器：乙醛脱氢酶1抗体、免疫组化试剂、显微镜、PCR仪等。

2. 方法（1）免疫组化检测：利用乙醛脱氢酶1抗体对Hep-2细胞系进行免疫组化染色，观察其表达情况。

（2）PCR检测：通过PCR技术检测Hep-2细胞系中乙醛脱氢酶1的基因表达水平。

（3）流式细胞术：分析Hep-2细胞系中乙醛脱氢酶1阳性细胞的比例及特性。

（4）初步临床分析：收集喉癌患者组织样本，检测乙醛脱氢酶1的表达水平，分析其与患者临床特征的关系。

三、结果1. 免疫组化检测结果通过免疫组化染色，我们发现乙醛脱氢酶1在Hep-2细胞系中表达阳性，主要定位于细胞质。

与正常细胞相比，肿瘤细胞中乙醛脱氢酶1的表达水平明显升高。

2. PCR检测结果PCR检测结果显示，Hep-2细胞系中乙醛脱氢酶1的基因表达水平较高，且与免疫组化结果一致。

3. 流式细胞术结果流式细胞术分析表明，Hep-2细胞系中乙醛脱氢酶1阳性细胞的比例较高，这些细胞具有肿瘤干细胞的特性，如自我更新、多向分化和抵抗化疗等。

4. 初步临床分析结果初步临床分析显示，喉癌患者组织样本中乙醛脱氢酶1的表达水平与患者年龄、性别、肿瘤大小等临床特征无显著相关性，但与患者的预后相关。

乙醛脱氢酶1高表达的患者预后较差，生存期较短。

四、讨论本研究表明，乙醛脱氢酶1在喉癌Hep-2细胞系中表达阳性，且具有肿瘤干细胞的特性。

初步临床分析显示，乙醛脱氢酶1的表达水平与患者预后相关，提示其可能作为喉癌的肿瘤干细胞标志物。

伊洛马司他对人喉癌Hep-2细胞增殖及凋亡的影响李黎;高树峰;张少容;刘月辉;兰宁;徐莲【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2013(29)19【摘要】目的:探讨基质金属蛋白酶抑制剂伊洛马司他对人喉癌Hep-2细胞增殖活性及凋亡水平的影响,为喉癌的临床用药提供参考.方法:应用MTr法分析不同浓度伊洛马司他对Hep-2细胞增殖活性的影响,并计算该药的IC10及IC50;应用流式细胞术检测接近IC10浓度伊洛马司他作用于Hep-2细胞不同时间后的凋亡率.结果:MTT结果示不同浓度伊洛马司他对Hep-2细胞均有抑制作用,且抑制率呈浓度依赖性(P＜0.05),此药的IC10及IC50分别为8和130 μg/mL(P＜ 0.05);流式细胞术结果示伊洛马司他可诱导Hep-2细胞的凋亡,且凋亡率依赖于药物作用时间的增加(P＜0.05).结论:伊洛马司他可抑制Hep-2细胞的增殖,诱导其凋亡,从而抑制喉癌的发生与发展,为喉癌的临床用药提供了一定的实验依据.【总页数】4页(P3116-3119)【作者】李黎;高树峰;张少容;刘月辉;兰宁;徐莲【作者单位】330006 南昌大学第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科;330006 南昌大学第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科;330006 南昌大学第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科;330006 南昌大学第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科;330006 南昌大学第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科;330006 南昌大学第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科【正文语种】中文【相关文献】1.大蒜素对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡的影响 [J], 马海滨2.伊洛马司他联合卡培他滨对人喉癌hep-2细胞的影响 [J], 李黎;张少容;熊辉强;高树峰;兰宁3.丹酚酸B对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡及侵袭转移能力的影响及机制研究[J], 郭俊宇;陈应超4.氯化两面针碱体外对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响 [J], 董涛;吴倩5.阻断氯通道对人喉癌Hep-2细胞增殖及凋亡的影响 [J], 余文发;赵玉林;张军辉;董明敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

紫杉醇对人喉鳞状细胞癌Hep-2放射增敏作用的实验研究周秦毅;王家东【期刊名称】《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》【年(卷),期】2007(13)1【摘要】目的在体外用细胞生物学实验技术了解紫杉醇联合直线加速器X射线照射对Hep-2细胞株的作用,以及紫杉醇对Hep-2细胞株细胞周期的影响,并探讨其作用机制.方法①用MTT法计算Hep-2细胞经直线加速器照射组;先紫杉醇作用12、18、24、30 h后再直线加速器照射组;先直线加速器照射再联合紫杉醇作用12、18、24、30 h组各组细胞生长抑制率.②应用流式细胞仪检测Hep-2细胞经紫杉醇作用12、18、24、30 h后各组细胞周期分布.结果①先紫杉醇作用再直线加速器照射组细胞生长抑制率较高(各组均值达到87.51%～89.64%),与先照射再联合紫杉醇组细胞生长抑制率(各组均值为57.84%～64.34%)及单纯照射组细胞生长抑制率(均值为41.90%)相比有统计学意义(P＜0.01).②用紫杉醇后Hep-2细胞株细胞周期停滞于G2/M期,G2/M期停滞于24～30 h达到峰值(24.65%～25.15%),并在用药后30 h观察到凋亡峰.结论紫杉醇有放射增敏作用,其可能机制是使细胞生长停滞于射线敏感期G2/M期,从而加强射线对肿瘤细胞的杀伤效应.【总页数】4页(P17-20)【作者】周秦毅;王家东【作者单位】上海交通大学仁济医院,耳鼻咽喉-头颈外科,上海,200001;上海交通大学仁济医院,耳鼻咽喉-头颈外科,上海,200001【正文语种】中文【中图分类】R739.65;R730.261【相关文献】1.熊果酸对人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究 [J], 周晓红;彭丽娜;杨雪;连蕾2.长链非编码RNA MALAT-1基因的敲除抑制人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞的增殖和迁移 [J], 韩跃峰;陈德尚;李慧;王晓敏;张明洁;杨洋3.膜蛋白AN01过表达对人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株生物学特性的影响 [J], 李雅冬4.RNAi沉默STAT3基因对裸鼠人喉鳞状细胞癌移植瘤化疗增敏作用的实验研究[J], 郭慧;李晓明;高伟;秦多;李东波;韩锦华5.CXCR4小干扰RNA对人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用[J], 唐凤翔;胡国华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

本实验对黄芩苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用及可能的作用机制进行了初步研究，以期为临床应用提供理论依据。

材料与方法一、细胞、试剂和仪器人肝癌HepG-2细胞购自中国医学科学院基础医学研究所，黄芩苷购自中国药品生物制品检定所。

辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG、抗β-actin、DeadEnd T M Fluorometric TUNEL System，Reverse Transcription System试剂盒购于Promega公司；抗Caspase-3、抗Caspase-9和抗Bcl-2购于Santa Cruz生物技术公司。

二、MTT实验取对数生长期HepG-2细胞，接种于96孔板（每孔200μl）培养。

24h后弃培养液，换含不同浓度（25、50、75和100μg/ml）黄芩苷的培养液200μl，于37℃继续培养。

分别于24h、48h、72h后弃上清，每孔加新配制的5mg/ml M TT 液20μl，37℃继续培养4h后终止培养，弃培养液，每孔加DM SO150μl于振荡器上振摇，酶标仪测定570nm处的吸光值（A值），以空白孔调零。

同时设阴性对照组（加入200μl完全培养基）和空白对照孔（只加200μl完全培养基，不含细胞），每组浓度设3个平行孔，取平均值。

按下列公式计算抑制率：黄芩苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用观察梁慧敏时小燕和振坤徐庆杰【摘要】目的研究黄芩苷对人肝癌HepG-2细胞凋亡的影响，并探讨其作用机制。

方法以不同浓度的黄芩苷与人肝癌HepG-2细胞共同培养，采用M TT法测定细胞增殖抑制率；采用Hoechst33258/PI染色法在荧光显微镜下观察凋亡细胞形态学变化；采用TUNEL法检测细胞凋亡率；采用Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-3和Bcl-2表达的变化。

结果在25~100μg/ml的药物浓度作用下，细胞增殖被抑制。

β-elemene联合顺铂抑制Hep-2细胞生长作用的实验研究吴丽华;李瑞玉;叶青【期刊名称】《福建医药杂志》【年(卷),期】2013(035)006【摘要】目的探讨β-elemene联合顺铂对体外培养的Hep-2细胞(人喉咽癌细胞)生长的抑制作用.方法采用MTT比色法和流式细胞分析技术检测不同组别、不同时间(12、24、48 h)对Hep-2细胞的抑制其增殖和诱导其凋亡的作用.结果单纯β-elemene组、单纯顺铂组及β-elemene联合顺铂组,12 h时对Hep-2细胞增殖抑制率分别为19.05%、20.12%和22.24%,细胞凋亡率分别为12.21%、17.98%和20.34%;24 h时细胞增殖抑制率为40.62%、41.51%和64.65%,细胞凋亡率为25.34%、31.08%和34.62%;48 h时细胞增殖抑制率为60.50%、68.23%和71.56%,细胞凋亡率为40.63%、42.96%和63.01%.β-elemene联合顺铂组对Hep-2细胞生长抑制作用和诱导细胞凋亡的作用都明显优于其他各组(P<0.05).结论β-elemene联合顺铂能够明显抑制Hep-2细胞增殖,诱导Hep-2细胞凋亡,为喉咽癌的化疗提供了一个新的启发.【总页数】4页(P56-59)【作者】吴丽华;李瑞玉;叶青【作者单位】福建医科大学省立临床学院,福建省立医院耳鼻咽喉科,福州,350001;福建医科大学省立临床学院,福建省立医院耳鼻咽喉科,福州,350001;福建医科大学省立临床学院,福建省立医院耳鼻咽喉科,福州,350001【正文语种】中文【中图分类】R739.65;R739.63【相关文献】1.温热与顺铂以不同的时序性联合对人肺巨细胞癌细胞抑制作用的实验研究 [J], 孙胜杰;焦顺昌2.阿斯匹林对喉癌细胞系Hep-2生长抑制作用的实验研究 [J], 葛平江;张宝泉;高志强;张建民;孔庆利;何维3.叶酸磁性纳米颗粒载顺铂抑制人喉癌Hep-2细胞生长且无细胞毒性作用 [J], 张海中;黄爱萍;4.叶酸磁性纳米颗粒载顺铂抑制人喉癌Hep-2细胞生长且无细胞毒性作用 [J], 张海中;黄爱萍5.辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因系统联合放射对Hep-2细胞的生长抑制作用[J], 鲍洁;廖正凯;周福祥;谢丛华;熊杰;刘诗权;周云峰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep-2抗增殖作用的研究于广久1,康健1,郭凤2(1·锦州医学院附属第一医院耳鼻咽喉-头颈外科,辽宁锦州121000;2·齐齐哈尔市第一医院耳鼻咽喉科,黑龙江齐齐哈尔161005)出处：锦州医学院学报〔作者简介〕于广久(1977-),男,辽宁省丹东市人,在读硕士研究生,主要研究方向是喉癌的肿瘤学治疗。

【摘要】目的探讨人参单体皂甙Rh2对体外培养的人喉癌细胞株Hep-2的抗增殖作用及其作用机制。

方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验、流式细胞技术及免疫组织化学S-ABC 法分别检测人参单体皂甙Rh2对喉癌细胞株Hep-2的增殖、细胞周期的影响。

结果(1)人参单体皂甙Rh2可明显抑制Hep-2细胞的生长,并呈剂量、时间依赖性作用。

(2)人参单体皂甙Rh2 (30μg/ml)处理细胞24h: G1期细胞由60·09%增加至68·86% (P<0·01), S期细胞由18·89%减少至12·30% (P<0·01), G2/M期细胞及凋亡细胞无明显变化(P>0·05),细胞阻滞于G1期。

结论人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep-2具有明显的生长抑制作用,并可导致其G1期细胞周期阻滞。

G1期细胞周期阻滞可能是人参单体皂甙Rh2抗肿瘤作用的机制之一。

【关键词】人参单体皂甙Rh2 (G-Rh2);喉癌;细胞周期【中图分类号】R739·65【文献标识码】A【文章编号】1000-5161 (2003) 06-0034-04Anti-proliferative Effect and the Mechanism of Ginsoniside Rh2on Human Laryngeal Carcinoma Cell Line Hep-2YU Guang-jiu1, KANG Jian1, GUO Feng2(1·Department of ORL-HNS, the First Affiliated Hospital of inzhou Medical College, Jinzhou 121000 China; 2·Department of ORL,the First Hospital of Qiqiha’er City, Qiqiha’er 161005 China)【Abstract】Objective To study the anti-proliferative effect and the用0·25%的胰蛋白酶消化后分瓶,每周传代两次,培养条件: 5%CO2,温度37℃,湿度100%。

榄香烯诱导喉癌细胞凋亡的实验观察李文秀;周梁;金晓杰【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2002(022)004【摘要】目的研究榄香烯对喉癌细胞的作用及机制. 方法用MTT法测定榄香烯对喉癌细胞的抑制作用,在透射电镜下观察其形态学变化,用流式细胞仪研究不同浓度、不同时间细胞凋亡的发生和对细胞周期的影响. 结果榄香烯明显抑制Hep_2细胞的生长,对Hep_2细胞的半数生长的抑制剂量(IC50)值24h为61.3μg/ml.透射电镜观察发现染色质浓缩,沿着核膜排列,形成不同形状和大小的块状.流式细胞术证实,凋亡细胞具有时间和药物浓度双相依赖性.榄香烯阻滞Hep-2细胞从S期进入G2M期. 结论在实验室条件下,榄香烯能够抑制喉癌细胞的生长,其抑制作用与细胞凋亡有关.【总页数】3页(P306-308)【作者】李文秀;周梁;金晓杰【作者单位】普陀区人民医院耳鼻咽喉科,200060;复旦大学眼耳鼻喉科医院耳鼻喉科;上海第二医科大学仁济医院耳鼻咽喉-头颈外科,上海200001【正文语种】中文【中图分类】R739.65【相关文献】1.榄香烯诱导SHG-44细胞凋亡和对细胞周期各时相的影响 [J], 李英夫;宣兆博;廉晓宇2.榄香烯诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的研究 [J], 李文秀;周梁;金晓杰3.β-榄香烯诱导血管内皮细胞凋亡的研究 [J], 郭建忠;魏尧;谷如雷;郭东亮;陈胜利4.肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体与放、化疗联合应用诱导喉癌Hep-2细胞凋亡途径研究 [J], 张明;周梁;田洁5.β-榄香烯诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡的研究 [J], 蒋革;吴艳华;罗锋;薛勇;李清因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

臭灵丹中黄酮类化合物对人喉癌细胞Hep-2凋亡的影响及机制曹长姝;沈伟哉;李药兰;王辉【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2010(026)007【摘要】目的:探讨中药臭灵丹中黄酮类化合物诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡的机制.方法:MTT法检测分离自臭灵丹的黄酮类化合物3,5-二羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮(HTMF)对2种正常细胞的毒性和对3种肿瘤细胞株的增殖抑制作用;采用流式细胞仪检测化合物对Hep-2细胞凋亡率的影响;Western blotting法检测凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的变化.结果:HTMF显著抑制Hep-2细胞的增殖并呈浓度、时间双重依赖性关系,但对正常细胞Vero和EVC304的毒性较小,对A549和HepG2细胞抑制作用小.流式细胞仪检测结果显示HTMF对Hep-2细胞有促凋亡作用并呈明显的量效、时效关系.Western blotting结果显示HTMF可诱导Hep-2细胞中caspase-3和caspase-9蛋白的活化,并呈时间依赖性关系.结论:HTMF对人喉癌细胞Hep-2的生长有显著的抑制作用,其机制可能通过激活caspase-9进而活化caspase-3诱导Hep-2细胞凋亡.【总页数】4页(P1362-1365)【作者】曹长姝;沈伟哉;李药兰;王辉【作者单位】暨南大学医学院解剖学系,广东,广州,510632;暨南大学医学院解剖学系,广东,广州,510632;暨南大学药学院中药及天然产物研究所中药药效物质,广东,广州,510632;暨南大学医学院微生物及免疫学系,广东,广州,510632【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.大蒜素对人喉癌Hep-2细胞周期与细胞凋亡的影响 [J], 马海滨2.DRB对人喉癌Hep-2细胞系中PK-CK2 mRNA表达的影响及其与细胞凋亡的关系 [J], 王建亭;刘英鹏;龚树生3.siRNA沉默eIF4E诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡及其机制 [J], 王贺彬;汪雅芳;沈妙言;李娜;赵丽晶;滕博4.丹酚酸B对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡及侵袭转移能力的影响及机制研究[J], 郭俊宇;陈应超5.苯乙基异硫氰酸酯对喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡、周期和侵袭转移能力的影响及机制 [J], 甘辉云;杜敬东;欧阳虹;程杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。