实验九防已中生物碱的提取与分离
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生物碱的提取方法
生物碱是一类含有碱性氮原子的天然化合物,可以从植物、动物等生物体中提取得到。
以下是生物碱的提取方法:
1.酸碱萃取法:生物碱通常是存在于植物的根、茎、叶、花、果实等部位的。
首先,将生物组织研磨,加入适量的酸性溶液进行萃取,将生物碱中的酸性残留物溶解。
然后,加入适量的碱性溶液进行中和,生物碱与碱性溶液中的酸性离子结合形成盐状物质,通过离心分离出生物碱。
2.溶剂萃取法:将生物组织研磨,加入溶剂(如乙醇、乙醚、丙酮等),使生物碱溶于溶剂中。
然后,通过蒸馏或蒸发浓缩将溶剂去除,得到含有生物碱的浓缩物。
最后,通过结晶、过滤等操作将生物碱纯化。
3.色谱分离法:利用色谱柱中吸附剂对生物碱进行分离。
通常采用薄层色谱、柱层析、液相色谱等,根据生物碱的不同特性选择不同的分离方法。
以上是三种常见的生物碱提取方法,根据具体情况选择不同的方法进行提取。
生物碱的提取与分离摘要生物碱是一类具有显著生物活性的含氮有机化合物,是许多药用植物的有效成分。
生物碱的溶解性能是生物碱提取与分离的重要依据。
生物碱及其盐类的溶解度与生物碱分子中氮原子的存在形式、极性基团的有无及数目、采用的溶剂种类都有密切关系。
本文综述了近几年来不同的提取和分离方法在生物碱提取分离中应用和进展。
关键词:生物碱,提取,分离Extraction and Separation of AlkaloidsABSTRACTAlkaloids are a class of organic compounds containingnitrogen with significant biological activity, is the effective ingredients in many medicinal plants. Solubility alkaloids is an important basis for the extraction and separation ofalkaloids. The nitrogen atoms and molecules solubilityalkaloids alkaloids and their salts in the presence of polar groups form, the existence of the number, the type of solventare closely related. This paper reviewed the different methods of extraction and separation of application and advance in separation and extraction of alkaloids.KEY WORDS: Alkaloids,Extraction,Separation目录前言 1第1章生物碱提取技术 2 1.1 生物碱的传统提取技术 2 1.1.1 煎煮法 21.1.2 浸渍法 21.1.3 回流法 31.1.4 渗漉法 31.2 生物碱提取的新技术 4 1.2.1 微波萃取法 41.2.2 超声波提取法 51.2.3 超临界流体萃取法 5 第2章生物碱的分离方法 6 2.1 色谱法 62.1.1 硅胶柱色谱法 62.1.2 高效液相色谱法 62.1.3 大孔吸附柱色谱法 6 2.2 膜分离技术 72.3 分子印迹技术 7结论 8谢辞 9参考文献 10前言生物碱是指中药中一类含氮杂环的有机物,具有碱性和显著的生理活性。
粉防己生物碱的提取分离和鉴别粉防己为植物防己科粉防己Stephania tetrandrd S.Moore的根,又名汉防己,是祛风解热镇痛药物,其有效成分为生物碱,主要是汉防己甲素和汉防已乙素。
汉防己生物碱具有降低血压及镇痛的作用,临床上除用作治疗高血压、心绞痛、神经性疼痛、抗阿米巴原虫外,还将粉防已生物碱的碘甲基、或溴甲基化合物作为肌肉松弛剂应用,此外汉防已甲素在动物实验中有抗癌、扩冠和解热抗炎的作用。
一、实验目的1.掌握生物碱的提取原理和实验操作方法;2.掌握生物碱的基本鉴别法;3.掌握生物碱结构与一般性质的关系;4.熟悉用柱层析分离纯化生物碱单体的方法。
二、仪器与试药(一)仪器RE-52旋转蒸发仪 SHB-循环水式多用真空泵分液漏斗(250mL)HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶(1000mL)ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱移液管(10mL、5mL)蒸发皿小玻璃蒸发器玻璃层析柱(2.0cmⅹ40cm)(二)试药粉防己乙醇盐酸氯仿无水硫酸钠滤纸丙酮中性三氧化二铝无水硫酸钠甲醇浓氨水硅胶G 凡士林脱脂棉漏斗 CMC-Na改良碘化铋钾试液汉防已甲素和汉防已乙素对照品丙酮苦味酸碘化汞钾试液雷氏铵盐试液三、主要成分的结构和性质汉防已根中总生物碱含量为1~3%,主要为汉防已甲素,含量约1~2%,汉防已乙素,含量约0.5%;轮环藤酚碱,含量为0.4%;以及其它数种微量生物碱。
轮环藤酚碱四、实验原理:1.提取:利用游离的伯、仲、叔胺生物碱具有亲脂性,能溶于乙醇的性质,用乙醇提取总生物碱;2.分离:利用水溶性生物碱(季铵类生物碱)易溶于水而难溶于有机溶剂的性质进行二者的分离;3.粉防己甲、乙素的分离:利用甲、乙素在结构上的不同(二者极性大小不同)用氧化铝柱层析来分离甲、乙素。
五、生物碱的提取分离1.总生物碱的提取、亲脂性与亲水性生物碱的分离95%乙醇300mL水浴回流提取1小时,过滤NOCH3OROCH3OCH3ONCH3CH3H HR=CH3R=H汉防己甲素汉防己乙素ONOHOCH3CH3OHOOHCH3同法提取0.5小时,过滤5~10mL浓缩物2%盐酸转移至蒸发皿中充分搅拌,残渣做生物碱反应,将滤液放在分液漏斗中先加入50mL氯仿,pH至9-10,振摇萃取,静置分层后,分出氯仿层30mL萃取1次2次,每次20mL,分出氯仿层20g无水硫酸钠,密闭,(上交)加入丙酮适量(共15mL,少量多次),水浴加热溶解,趁热倒入蒸发皿丙酮液加入中性三氧化二铝3g拌匀,水浴上小心蒸干含生物碱的三氧化二铝颗粒2.低压柱层析分离汉防已甲素和乙素低压柱层析在低压下(0.5-3kg/cm2,一般0.3-1.2 kg/cm2)采用颗粒直径介于经典柱层析(100-200μm)和HPLC(37μm)之间的薄层层析用硅胶(或氧化铝)H或G(50-75μm)作为填充剂的一种柱层析柱,其基本原理与HPLC相同,分离效果也介于经典柱与HPLC之间,用减压干法装柱,铺层紧密均匀,层析带分布集中整齐,同时薄层层析的最佳分离溶剂系统可以直接用于低压柱层析,它是一种分离效果较好,设备简单,操作方便,快速的方法。
实验三粉防己生物碱的提取分离与鉴定1 实验目的1.1生物碱的一般提取方法。
1.2 用低压柱层析分离,纯化单体的方法及薄层层析鉴定2 实验原理2.1 生物碱大都能溶于氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂,除季铵碱和一些分子量较低或含极性基团较多的生物碱外,一般均不溶或难溶于水,而生物碱与酸结合成盐时则易溶于水和醇。
基于这种特性,可用不同的溶剂将生物碱从中药中提取。
常用的提取方法包括有溶剂提取法、直接提取法(水溶性生物碱、季铵碱)、离子交换树脂法(如麦角新碱类、东莨菪碱、咖啡因等)和沉淀法。
2.2 一种植物中往往含有几种或几十种生物碱。
因此,提取出来的总生物碱还需进一步分离,去除杂质、排除干扰物,保证分析结果的准确性。
一般纯化的方法可析出结晶的生物碱用重结晶法;挥发性生物碱可用水蒸气蒸馏法;易升华的生物碱用升华法提取得到单体。
由不同沸点组成的液体生物碱总碱,往往可通过常压或减压分馏分离。
如毒芹中的毒芹碱和羟基毒芹碱,石榴皮中的伪石榴皮碱、异石榴皮碱和甲基异石榴皮碱等都可通过减压分馏法分离出来。
许多生物碱的盐比游离碱更易于结晶。
因此,可利用其在各种溶剂中的不同溶解度进行分离,之后再转变成游离碱。
3 实验材料材料:汉防己4实验步骤4.1 生物碱的提取分离4.1.1 总生物碱的提取和亲脂性与亲水性生物碱的分离100g0.5%H2SO4液渗漉(注一)倍量V/V)pH9~10,静置,抽滤泥黄色沉淀(水溶性季铵碱及水溶性杂质)将沉淀与静砂拌匀(注二)80℃烘干,置索氏提取器中用乙醚(约180ml)提取至提尽生物碱(注三)回收乙醚(注四)乙醚提取物用95%乙醇40~60ml回流热溶后倾入500ml水中,加30gNaCl盐析水溶上加热至凝结,静置抽滤白色沉淀(亲脂性叔铵总碱,以汉防己甲素、乙素为主)注一:将汉防已粗粉加适量酸水液,以能将生药粉末润湿为度(约150ml),充分拌匀,放置半小时,均匀而致密地装入渗筒内,用锥形瓶底部或其它平底工具压紧,供渗漉用,流速约1.5ml/分。
1. 学习生物碱的提取原理和方法。
2. 掌握有机溶剂萃取法提取生物碱的实验操作。
3. 了解生物碱的鉴定方法。
二、实验原理生物碱是一类含氮的有机化合物,广泛存在于植物、动物和微生物中。
生物碱具有多种生物活性,如抗炎、镇痛、抗菌等。
本实验采用有机溶剂萃取法提取生物碱,通过层析分离,最后用化学方法鉴定提取到的生物碱。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:植物样品(如颠茄、曼陀罗等)、无水乙醇、氯仿、正己烷、无水硫酸钠、硅胶、层析纸、紫外灯、电子天平、研钵、漏斗、烧杯、滴管等。
2. 试剂:盐酸、氢氧化钠、氯化钡、硫酸铜、碘化钾、碘等。
四、实验步骤1. 植物样品预处理:将植物样品干燥、粉碎,过筛,得到粉末状样品。
2. 提取:将粉末状样品用无水乙醇浸泡过夜,过滤,得到滤液。
3. 萃取:将滤液用氯仿萃取,反复萃取,合并氯仿层,无水硫酸钠干燥。
4. 脱色:将干燥后的氯仿层加入适量的水,充分振荡,静置分层,取水层。
5. 中和:将水层用氢氧化钠溶液中和至pH 8-9。
6. 萃取:将中和后的溶液用氯仿萃取,反复萃取,合并氯仿层,无水硫酸钠干燥。
7. 分离:将干燥后的氯仿层用硅胶柱层析分离,得到生物碱。
8. 鉴定:取少量生物碱,用化学方法进行鉴定。
五、实验结果与分析1. 提取结果:通过有机溶剂萃取法,从植物样品中成功提取到生物碱。
2. 鉴定结果:采用化学方法对提取到的生物碱进行鉴定,结果表明其为某种生物碱。
1. 实验过程中,选择合适的有机溶剂和萃取条件对生物碱的提取效果至关重要。
2. 在层析分离过程中,控制好硅胶的粒度和柱层析的操作技巧,可以提高分离效果。
3. 鉴定生物碱时,需根据具体情况进行选择,以确保鉴定结果的准确性。
七、实验结论本实验采用有机溶剂萃取法成功从植物样品中提取到生物碱,并通过化学方法对提取到的生物碱进行了鉴定。
实验结果表明,该方法适用于生物碱的提取和鉴定。
八、实验反思1. 实验过程中,应严格控制操作条件,确保实验结果的准确性。
实验四粉防己生物碱的提取分离与鉴定(1)【实验目的】1、能够熟练进行粉防己总生物碱的提取。
【实验原理】本实验是根据粉防己生物碱可溶于一般有机溶剂的性质,先用乙醇提取得总碱,再利用粉防己碱、防己诺林碱及轮环藤酚碱的溶解性和极性差异进行分离。
将总生物碱溶于稀酸水,碱化后用苯萃取出粉防己碱,再用三氯甲烷萃取防己诺林碱,轮环藤酚碱为水溶性生物碱,仍留在碱水层;或者将稀酸水碱化后用三氯甲烷萃取出粉防己碱和防己诺林碱。
【实验材料】设备: 500ml圆底烧瓶、锥形瓶、长滴管、分液漏斗、滤纸药品: 粉防己(粗粉)、95%乙醇、10%盐酸、浓氨水、三氯甲烷、碘化铋钾试剂【实验步骤】1.总生物碱的提取:称取汉防已粗粉100g,置于500ml圆底烧瓶中,加95%乙醇浸没药材(约需300ml),水浴上加热回流l小时后,过滤,滤液置于锥形瓶中,药渣再用95%乙醇(约200ml)同法提取2次.每次30分钟,合并3次滤液。
放冷后如有絮状物析出,再过滤一次,澄清溶液浓缩至无醇味,成糖浆状,即得到总生物碱。
2.脂溶性生物碱和水溶性生物碱的分离:将糖浆状总提取物置于锥形瓶中,逐渐加入1%盐酸约100ml,充分搅拌使生物碱溶解,不溶物呈树脂状析出下沉。
静置,滤出上清液,锥形瓶底部的不溶物再用1%盐酸少量多次洗涤,直至洗液对生物碱沉淀试剂反应微弱。
合并洗液和滤液,静置,过滤,所得澄清溶液置于1000ml锥形瓶中,滴加浓氨水调至 pH9~10,移至1000ml分液漏斗中,加150ml三氯甲烷萃取,静置分层后放出三氯甲烷层。
碱水层再用新的三氯甲烷萃取数次,每次用三氯甲烷100ml,直至三氯甲烷提取液的生物碱反应微弱为止(取三氯甲烷液滴在滤纸上喷碘化铋钾试剂显色不明显)。
三氯甲烷液中含脂溶性叔胺碱,而三氯甲烷萃取过的氨性碱水液含有水溶性生物碱。
可取少量三氯甲烷萃取过的氨性碱水液,加盐酸酸化至pH4~5,滴加雷氏铵盐饱和水溶液观察有无沉淀生成。
提取生物碱的方法
方法1——溶剂法:
利用麻黄碱和伪麻黄碱既能溶于水,又能溶于亲脂性有机溶剂的性质,以及麻黄碱草酸盐比伪麻黄碱草酸盐在水中溶解度小的差异,使两者得以分离。
方法为麻黄用水提取,水提取液碱化后用甲苯萃取,甲苯萃取液流经草酸溶液,由于麻黄碱草酸盐在水中溶解度较小而结晶析出,而伪麻黄碱草酸盐留在母液中。
方法2——水蒸汽蒸馏法:
麻黄碱和伪麻黄碱在游离状态时具有挥发性,可用水蒸汽蒸馏法从麻黄中提取。
方法3——离子交换树脂法:
利用生物碱盐能够交换到强酸型阳离子交换树脂柱上,而麻黄碱的碱性较伪麻黄碱弱,先从树脂柱上洗脱下来,从而使两者达到分离。
生物碱的提取实验报告生物碱的提取实验报告引言:生物碱是一类具有碱性的天然有机化合物,广泛存在于植物和动物体内。
它们具有多种生物活性,包括抗菌、抗炎、抗肿瘤等。
因此,提取生物碱并研究其活性成为了许多科研工作者的关注点。
本实验旨在通过提取和分离的方法,从植物中获取生物碱,并对其进行初步的鉴定和活性测试。
材料与方法:1. 实验材料:乌头、乙醇、石油醚、盐酸、氨水、氯仿等。
2. 实验仪器:研钵、滤纸、漏斗、蒸馏器、pH计等。
实验步骤:1. 将乌头研磨成粉末,并加入适量的乙醇,搅拌均匀。
2. 将混合物过滤,收集滤液。
3. 将滤液进行蒸馏,以去除乙醇。
4. 将得到的残渣用石油醚进行提取,得到石油醚相。
5. 将石油醚相进行蒸馏,得到生物碱的粗提物。
6. 将粗提物用盐酸溶解,并加入氨水进行中和。
7. 将中和后的溶液用氯仿进行提取,得到氯仿相。
8. 将氯仿相进行蒸馏,得到纯净的生物碱。
结果与讨论:经过实验,我们成功地从乌头中提取到了生物碱。
通过对提取过程的观察和分析,我们可以得出以下结论:1. 乌头中的生物碱主要溶于乙醇和石油醚,而不溶于水。
因此,通过乙醇和石油醚的提取,可以有效地分离生物碱。
2. 盐酸能够与生物碱形成盐类,使其溶于水相。
而氨水可以中和盐酸,使生物碱重新转为不溶于水的形态。
这样,通过盐酸和氨水的处理,我们可以得到纯净的生物碱。
3. 氯仿是一种有机溶剂,可以与生物碱形成可溶性的复合物。
通过氯仿的提取,我们可以有效地分离生物碱。
4. 通过蒸馏的方法,我们可以去除溶剂,得到纯净的生物碱。
实验中的方法和步骤是经过多次试验和改进后确定的,确保了提取生物碱的效果和纯度。
然而,由于实验条件的限制和实验操作的差异,提取到的生物碱可能存在一定的误差。
因此,在进一步的研究中,可以使用更加精确的仪器和方法来验证实验结果的准确性。
结论:通过本实验,我们成功地从乌头中提取到了生物碱,并对其进行了初步的鉴定和活性测试。
生物碱的提取方法可以为进一步研究其活性和应用提供基础。