下载文档原格式
培养基及培养条件对Pycnoporus sp.SYBC-L1分泌漆酶的影响王志新;蔡宇杰;李颜颜;廖祥儒;张峰;张大兵【期刊名称】《食品与生物技术学报》【年(卷),期】2009(028)006【摘要】从作者所在实验室保存的3株白腐真菌中筛选到一株液态发酵产漆酶的密孔菌Pycnop-orus sp.SYBC-L1,以漆酶活力为指标,采用正交试验法,优化了Pycnoporus sp.SYBC-L1分泌漆酶的培养基:麸皮水煮液60 g/L,葡萄糖60 g/L,豆粕粉15 g/L,CuSO_4·5H_2O 1.0 mmol/L;培养条件:初始pH 3.0,装液量50mL/250 mL,30℃、200 r/min培养13 d,漆酶活力达24.95 U/mL,为优化前的36.16倍.【总页数】8页(P832-839)【作者】王志新;蔡宇杰;李颜颜;廖祥儒;张峰;张大兵【作者单位】江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122;江苏汉邦科技有限公司,江苏,淮安,223001【正文语种】中文【中图分类】TQ920.6【相关文献】1.Pycnoporus sp.SYBC-L1 18S rDNA序列分析及其固态发酵水葫芦产漆酶的研究 [J], 王志新;蔡宇杰;廖祥儒;钱丽园;张大兵2.Pycnoporus sp.SYBC-L3种子培养对深层发酵产漆酶的影响 [J], 刘家扬;廖祥儒3.培养条件对毛栓菌漆酶分泌的影响 [J], 王宜磊4.培养条件对白腐菌分泌漆酶的影响 [J], 张利萍;高慧5.培养条件对Coriolus Versicolor菌分泌漆酶的影响 [J], 方华;黄俊;陈曌;张德庆;丁莉芸因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大庆师范学院本科生毕业论文蛋白酶产生菌培养条件的条件优化院(部)、专业生命科学学院生物技术研究方向微生物学学生姓名朱琳学号200901122598指导教师姓名张亦婷2013年06月01日摘要采用大庆师范学院生命科学学院花园附近土壤、农田土壤及体育场附近土壤作为样品，并从中筛选分离并得到产蛋白酶能力较高的菌株，经过初步鉴定该菌株属芽孢杆菌。
通过对其产酶条件进行优化，结果显示该菌产酶最佳碳源为质量浓度15g/L的乳糖，最佳氮源为质量浓度20g/L的尿素，最适初始pH值为6.5，最适发酵温度为35℃。
关键词：菌种筛选；鉴定；蛋白酶；条件优化AbstractThe sewage treatment plant soil near east institute, soil and soil samples near farms .Using milk hydrolysis circle screening model separating screening in high ability get protease whr1 strains. Preliminary appraisal of the fungus belong to bacillus. After the optimization of the condition, the capability of whr1 was improved, the optimal condition is: carbon source is sucrose 15g/L; nitrogen source is Yeast extract 20g/L, the pH is 6.5; fermentation temperature is 35℃.Key words：Screening；Identified；Protease；Conditions optimization目录摘要 (1)Abstract (2)1 引言 ...........................................................................................................................................................2 材料与方法 (3)2.2.2 实验材料 (3)2.2.1 菌株筛选 (3)3.1 菌株筛选 (6)3.1.1 菌株的分离筛选 (6)2.3 条件优化 (7)2.3.1 不同碳源对产酶的影响 (7)2.3.3不同氮源对产酶的影响 (8)2.3.4 培养基不同初始pH值对产酶的影响 (9)2.3.5 不同温度对产酶的影响 (10)4 结论 (10)11 引言蛋白酶是催化蛋白质中肽键水解的酶，是一类广泛应用于皮革、毛皮、丝绸、医药、食品、酿造等方面的重要工业用酶，也是目前世界上产销量最大的商业酶，其市场占有率约占整个商品酶销售量的60％，微生物蛋白酶从微生物中提取，不受资源、环境和空间的限制，具有动物蛋白酶和植物蛋白酶所不可比拟的优越性。
毛云芝菌（Ｃｏｒｉｏｌｕｓｈｉｒｓｕｔｕｓ）产漆酶培养条件优化摘要：优化了以桑叶和麸皮为主要原料由毛云芝菌（Coriolus hirsutus）生产漆酶的培养条件，即培养料起始pH、装料量、封口情况、接种量、发酵时间对漆酶活性的影响，并观察了该菌在优化后培养条件下的代谢动力学情况。
结果表明，自然pH，装量为10 g/250 mL三角瓶、封口纱布4层，接种量为5 mL种子液/瓶，培养时间为10 d，酶活达到1.37×10 4U，优化后结果比初始设计提高了18％。
关键词：Coriolus hirsutus；漆酶；培养条件文献标识码：S646.2; Q554A微生物酶工业化生产应用的主要限制是成本高，培养基和培养工艺的优化是酶的工业化生产中降低成本的有效措施。
若培养基中所用的营养物质占总生产成本很高的比例，那么降低培养基质的成本能够增加生产过程的生产力［1］。
固体培养通常定义为微生物在没有或接近没有自由水的固体物质上生长［2］，研究表明，与液体深层发酵相比，固体发酵具有产量高、设施简单、能量消耗低、废水排除量少、目标产物容易回收等特点［3］。
漆酶是一种多酚氧化酶，用分子氧作为电子受体，催化许多酚类和芳胺化合物氧化；在存在合适的氧化还原介质时，漆酶也能够氧化非酚类物质［4］。
可见这种酶有广泛的底物专一性和显著的非特异性［5］。
近年研究表明，漆酶还可用于生物传感器的制造，如免疫探测器、药物研究等［6］，所以漆酶从十九世纪末至今受到了极大的关注［7］。
选择合适的培养基质，研究其适合的培养基和培养条件是提高漆酶产量的关键。
目前国外固体发酵产漆酶的研究较国内多样化且技术完善，国外有采用椰子果肉［8］、栗子壳［1］、酿造加工副产物［9］、香蕉收获时的残留废物［10］等作为固体发酵基质，这样既有利于解决环境问题，又可以使农产品加工废物得到充分的利用。
笔者在实验室已经筛选出的漆酶产量高的培养基培养毛云芝菌（Coriolus hirsutus）的基础上，优化了固体发酵C. hirsutus 产漆酶的培养条件，即不同的培养料起始pH、装料量、封口情况、接种量、发酵时间等对菌种产漆酶的影响，并分析了该菌在优化后的培养条件下的代谢曲线。
黄孢原毛平革菌摇瓶体系产锰过氧化物酶优化研究
黄孢原毛平革菌摇瓶体系产锰过氧化物酶优化研究
建立黄孢原毛平革菌液体反应体系,通过摇瓶液体培养试验,对黄孢原毛平革菌液体培养中温度、起始pH值、装液量、接种量、摇床转速等进行了对比研究.研究结果表明:温度为37℃、起始pH 4.5、装液量250毫升/瓶、接种量1.3×106个孢子/毫升、转速120 r/min为黄孢原毛平革菌摇瓶体系下产锰过氧化物酶的最适条件.
作者：高尚张晶黄民生Gao Shang Zhang jing Huang Minsheng 作者单位：华东师范大学资源与环境学院,上海,200062 刊名：上海化工英文刊名：SHANGHAI CHEMICAL INDUSTRY 年，卷(期)： 2007 32(9) 分类号： X788 关键词：锰过氧化物酶温度起始pH 装液量接种量转速。
火红密孔菌产漆酶培养基的优化杨咏洁;吕蕾;王旻乾;权伍荣【期刊名称】《延边大学农学学报》【年(卷),期】2015(037)003【摘要】采用液体摇瓶培养方法,探讨了碳源、氮源及pH值等不同培养条件对火红密孔菌分泌产漆酶能力的影响.同时,采用正交试验设计方法,对主要的影响因素进行了优化.结果表明:葡萄糖为最佳碳源、酒石酸铵为最佳氮源、初始pH值为8.0时,均有利于漆酶的分泌.正交试验表明:葡萄糖20 g/L、酒石酸铵10 g/L、初始pH 值8.0,以邻联甲苯胺作底物,经7d培养,漆酶的酶活力最高,可达238 U/mL.【总页数】5页(P231-235)【作者】杨咏洁;吕蕾;王旻乾;权伍荣【作者单位】延边大学农学院食品科学系,吉林延吉133002;延边大学农学院食品科学系,吉林延吉133002;延边大学农学院食品科学系,吉林延吉133002;延边大学农学院食品科学系,吉林延吉133002【正文语种】中文【中图分类】TQ925【相关文献】1.血红密孔菌Pycnoporus sanguineus SYBC-L12固态发酵小麦秸秆产漆酶及其对小麦秸秆的降解作用 [J], 范晶晶;马德丽;席艳茹;蔡宇杰;孙啸;管政兵;廖祥儒2.血红密孔菌Pycnoporus sanguineus SYBC-L12固态发酵水稻秸秆产漆酶及其对染料的脱色作用 [J], 孙啸;蔡宇杰;廖祥儒;张峰;刘家扬;袁小曼;马德丽;席艳茹3.响应面法优化褐腐真菌竹生薄孔菌产纤维素酶的液体培养基 [J], 马鸿飞;崔宝凯;员瑗;陈圆圆;戴玉成;司静4.白腐真菌落叶松锈迷孔菌产漆酶液体培养基的优化及其对染料的脱色作用 [J], 吴怡; 马鸿飞; 曹永佳; 司静; 崔宝凯5.真菌产生的锰过氧化物酶和漆酶研究Ⅱ．一株产锰过氧化物酶的担子菌──血红密孔菌K－2352 [J], 周金燕;张发群因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
漆酶高产菌株的筛选实验方案漆酶是一种能够分解木质素的酶，被广泛应用于漆酶工业生产中。
为了获得高产漆酶的菌株，可以采用以下筛选实验方案。
首先，准备木材素作为酶的底物。
木材素是漆酶的天然底物，因此使用木材素可以更好地模拟真实环境，提高筛选的准确性。
接下来，采集不同环境中的泥土样品。
漆酶产生菌株存在于自然环境中的泥土中，因此从不同环境中采集泥土样品能够获得更多潜在的高产漆酶菌株。
然后，制备泥土微生物的培养基。
泥土样品中的微生物需要合适的培养基进行生长，通常可以使用Czapek-Dox培养基作为基础培养基，并根据实际情况进行优化。
随后，进行菌株的分离与纯化。
将采集的泥土样品进行稀释，并分别洒在含有木材素的琼脂板上。
通过观察是否存在环带或透明圈，从木材素周围分离出对木材素具有降解能力的菌株。
然后将菌株进行连续传代，并进行单菌落的分离，最终得到纯化的菌株。
接着，筛选高产漆酶的菌株。
采用固体培养，将纯化的菌株接种到含有木材素的琼脂板上，培养一定时间后，观察琼脂板上是否出现降解区域。
根据降解区域的大小和颜色的深浅，可以初步评估出菌株的木质素降解能力。
然后，选取降解能力较强的菌株进行液体培养。
将选取的菌株接种到含有木材素的液体培养基中，进行摇瓶培养。
培养一定时间后，通过测定液体培养基中木质素的降解率来评估菌株的降解能力。
最后，通过PCR扩增和酶活测定等分子技术手段对菌株进行鉴定与验证。
通过PCR扩增菌株的漆酶基因序列，并与已知的漆酶基因序列进行比对，验证菌株是否真正具有漆酶产生能力。
同时，使用酶活测定方法对菌株中的漆酶酶活进行测定，验证菌株的漆酶活性。
以上是一种对漆酶高产菌株进行筛选的实验方案。
通过以上步骤，可以筛选到具有高降解能力和高酶活的漆酶菌株，为漆酶产业的发展提供有力支持。
