三地理株白纹伊蚊与致倦库蚊贵州株蛋白质分析
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三地理株白纹伊蚊与致倦库蚊贵州株蛋白质分析陈 虹1,陈汉彬2(1.武警总医院,北京 100039;2.贵阳医学院生物学教研室,贵州贵阳 550004)
[摘 要]目的:比较海南、北京、贵州三地理株白纹伊蚊和贵州株致倦库蚊蛋白质含量的差异。方法:用凯氏
定氮法测定羽化后第5天白纹伊蚊和致倦库蚊(雌蚊)蛋白质含量,并比较地理株和种间的差异。结果:海南株蛋白质分别与北京株及贵州株蛋白质有显著差异(P<0101),但北京株与贵州株之间无显著差异(P>0105
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;贵
州株和北京株白纹伊蚊与贵州株致倦库蚊之间无显著差异(P>0105);海南株白纹伊蚊与贵州株致倦库蚊之间有显著差异(P>0101)。结论:不同地理株白纹伊蚊蛋白质含量可有差异,同一地区的不同蚊种之间蛋白质可无差异。[关键词]库蚊属;伊蚊属;蛋白质类
[中图分类号]Q96919422;Q966 [文献标识码]A [文章编号]1000-2707(2002)02-0136-02
AComparativeStudyonProteinContentsinThreeGeographicStrainsofAedesalbopictusandGuizhouStrainofCulexpipiensquinquefasciatus
CHENHong1,CHENHan2bin2(1.GeneralHospitalofChinesePeople’sArmedPoliceForce,Beijing100039
,China;
2.DepartmentofBiology,GuiyangMedicalCollege,Guiyang550004,China)
[Abstract]Objective:TocomparethecontentsofproteininAedesalbopictusfromBeijngcity、Hainanprovince、GuizhouprovinceandtheGuizhoustrainofCulexpipiensquinquefasciatusMeth2ods:ThecontentsofproteinweredeterminedwithKyeldanh’smethodfornitrogencontentdetermi2nationonthe5thdayaftertheeclosionofthemosquitoesResults:TherewasasignificantdifferenecinproteincontentsamongAe.albopictusstrainsfromHainan,Beijing,andGuizhou(P<0.01).ButtherewasnosignificantdifferencebetweenBeijingandGuizhoustrains(P>0.05).TherewasnosignificantdifferentproteincontentsbetweenAe.albopictusfromGuizhou,BeijingandCx.Pip
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iensquinquefesiatus(P>0.05).TherewasasignificantdifferenceinproteinbetweenHainanstrainofAe.alopictusandGuizhoustrainofCx.pipiensquinquefasciatus(P>0.01).Conclusion:TherecouldbedifferencesofproteincontentsindifferentgeographicstrainsofAe.albopictus;Therecouldn’tbedifferenceofproteincontentindifferentmosquitoracesinthsamearea.[Keywords]Aedes;Culex;proteins
白纹伊蚊[Aedesalbopictus(Skuse,1894)]和致倦库蚊[CulexaPipiensquinquefasciatus(Say,1823)]均是我国重要的传病媒介。昆虫体内蛋白质是其生命现象和生物活动的物质基础,也是构成虫体各组织的主要组分[1]。近年曾有学者应用蛋白质电泳研究虫种分类[2,3],亦有学者证实不同地理株的蛋白带有一定的差异[4],通过不同虫种株
蛋白质电泳图谱,可以了解虫种株间的遗传变异和亲缘关系[5]。迄今,国内外尚无通过测定蚊虫总蛋白对蚊虫进行分类和了解不同地理株之间差异的报道。本文应用凯氏定氮法测定了海南、北京、贵州三地理株白纹伊蚊和贵州株致倦库蚊蛋白质
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第27卷 第2期2002年4月 贵阳医学院学报JOURNALOFGUIYANGMEDICALCOLLEGE Vol.27 No.2200214
© 1995-2006 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.含量,并进行比较分析,以期探索不同地理株及不同蚊种间的蛋白质含量有无差异。1 材料与方法111 实验蚊种 白纹伊蚊海南株和北京株蚊卵分别购自海南省寄生虫研究所及由军事医学科学院微生物流行病研究所惠赠;贵州株白纹伊蚊和致倦库蚊系贵阳医学院生物学教研室苏晓庆实验室驯育14年的种株。实验种、株的蚊卵同时投入水中,力求保持蚊虫饲养密度一致。饲养条件:(27±1)℃。相对湿度:(80±5)%,每日光照12h。幼虫饲兔肝粉,成虫饲8%葡萄糖水。收集羽化后第5天的雌蚊用于实验。112 测定方法 取称量准确至万分之一的蚊虫样品于消化管中,加少许蒸馏水润湿样品后,加入催化剂110g及浓硫酸310ml,小火加热,待泡沫停止后,加大火力,消化至浅绿或蓝色清亮透明为止。冷却后,取样品在凯氏定氮瓶中蒸馏,用硼砂进行吸收;然后用标准HCl滴定,计算蛋白质含量。113 统计处理 对所测数据先作方差齐性检验后,用t检验作两两比较。2 结果白纹伊蚊蛋白质含量:海南株为(226174±0128)g/100g,北京株(34189±0169)g/100g,贵州株(33136±0173)g/100g。海南株与北京株、贵州株白纹伊蚊的蛋白质含量比较均有显著性差异(P<0101),但北京株与贵州株无显著性差异(P>0105);贵州株致倦库蚊蛋白质含量为(34112±0136)g/100g,北京株和贵州株白纹伊蚊与贵州株致倦库蚊的蛋白质含量无显著差异;海南株白纹伊蚊与贵州株致倦库蚊蛋白质含量有显著差异。3 讨论魏鸣等[6]通过对致倦库蚊发育各期蛋白质的分析,证明蚊虫发育各期及生命期各日龄的蛋白带均有变化,认为在做分类或其他研究时,最好先用同期或同龄的蚊。本研究中的不同地理株白纹伊蚊和致倦库蚊均取羽化后第5天之成蚊用于实验,以使在同一日龄所测蛋白质具有可比性。有资料显示,不同地理株白纹伊蚊对登革病毒的易感性存在差异[7,8],张升和何桂铭[9]的实验也表明,我国9个不同地理株白纹伊蚊对登革病毒Ⅰ型和Ⅱ型经口感染的易感性存在差异,如海口株对登革病毒Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ型的易感性均较高,北京株对登革病毒Ⅰ型较易感,而对登革病毒Ⅱ型较不易感。这种易感性的差异除可能与蚊虫的中肠屏障有关外,是否还与蚊虫自身组织的成分和含量(如糖,蛋白质,脂,酶及元素等因素)有关,值得深入的研究。叶丙辉[10]用等电聚焦电泳比较了徐州、宜兴、福州和海口四地理株中华按蚊的蛋白质、糖和脂,
结果显示各株间糖和脂均无差别,而纯蛋白质尽管4株基本一致,但福州株比另外3株缺1条中性带,多1条酸性带,而海口株缺2条中性带,且个别蛋白质之间的量有明显不同,海口珠比其他三地株明显为浓。此外,叶丙辉等[4]通过对不同地理株中华按蚊蛋白质多肽点的分析,认为这种不同地理株蛋白质电泳条带及肽点的差异与地理分布有关。距离越大,差异越大,各地间距离越近,则差异越小。本组实验蚊虫选择,在地理上有长江、琼州海峡的天然分界间隔,北京、贵州、海南三地理株总蛋白的测定结果显示海南株分别与北京株和贵州株有极显著差异,但北京株与贵州株之间却无显著性差异。从距离上看,北京与贵阳的距离明显大于贵州与海口的距离,但二者之间却无明显差异。再者,同为贵州株的白纹伊蚊和致倦库蚊虽是不同蚊种,其蛋白质含量也无差异。作者认为蚊虫蛋白质的差异可能与气候(或纬度)关系更大。海南是我国唯一的亚热带省区,其气候条件和生态环境与另外两地区明显不同。由于不同气候和生态条件的选择作用,可能引起不同条件下不同遗传变异的保存,经过长时间的淘汰,终于形成了生殖隔离。李本文等[11]从基因分子水平为以上假说提供了佐证。本研究提示,不同地理株白纹伊蚊蛋白质含量可有差异,同一地区的不同蚊种之间蛋白质可无差异。
[参考文献][1]刘惠霞,李新岗,吴文君.昆虫生物化学[M].陕西:陕西科学技术出版社,1998.40.
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2期 陈 虹等 三地理株白纹伊蚊与致倦库蚊贵州株蛋白质分析 © 1995-2006 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.311 肝源性溃疡的发病情况 本组病例平均发病的年龄为4814岁,较一般消化性溃疡发病年龄较晚。起病缓慢,病程长,平均病程为215年。肝硬化病人消化性溃疡发生率大约是社会人群的2~3
倍[2]。目前国内文献报道肝硬化合并溃疡的发生率达可10%~30%
[3]
,本组为1712%,与文献相
符。十二指肠球部溃疡多于胃溃疡,二者之比为218∶1,溃疡的直径以015~1cm多见,占8018%。而且胃镜下伴随病变高达9212%,伴随病变以糜烂性胃炎多见。312 肝源性溃疡的出血 非肝源性溃疡并发出血,发生率为20%~25%[4]。本组肝源性溃疡出血率高达3113%,出血机会明显高于非肝源性溃疡,而且以大出血多见,占70%。其出血方式常是呕血先于黑便,易被误诊为食道静脉曲张破裂出血。所以对肝硬化合并上消化道出血者,在条件允许时,应积极行胃镜检查,尽早明确出血病因,进行有效的治疗,减少盲目用药带来的病人经济负担过重。313 肝源性溃疡的诊断 诊断依靠胃镜或钡餐,但首选胃镜。对肝硬化病人出现消化性溃疡的常见症状,如上腹痛、嗳气、返酸或上消化道出血时,
更应及时进行胃镜检查。不能满足于已建立的肝硬化诊断,尽量减少误诊、漏诊的发生。314 肝源性溃疡的治疗 本组肝源性溃疡4周的愈合率只有4314%,说明肝源性溃疡的同期愈合率比非肝源性溃疡延长。可能是由于肝硬化与溃疡病互为因果,肝硬化的基本病因不能去除以及造成胃粘膜损害因素的加强,或与保护因素的减弱不能去除有关。因此,肝源性溃疡一旦确诊,应及时进行内科的治疗,增加营养,注意休息,加强支持与保肝治疗。