有机物化学鉴定的一般方法
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研究有机物的一般方法有机物研究是化学领域中重要的研究方向之一。
有机物是由碳原子构成的化合物,其具有多样的结构和性质,广泛存在于自然界和人工合成物中。
研究有机物的一般方法主要包括化学分析、有机合成和物理性质研究等方面。
首先,化学分析是研究有机物的重要方法之一。
通过化学分析可以确定有机物的组成、结构和性质。
常用的化学分析方法包括质谱分析、核磁共振分析、红外光谱分析和紫外可见光谱分析等。
质谱分析可以确定有机物的分子量、元素组成和结构等信息;核磁共振分析可以确定有机物的结构和碳氢化合物的键合关系;红外光谱分析可以确定有机物中的官能团和官能团的位置等;紫外可见光谱分析可以确定有机物的电子结构等。
其次,有机合成是研究有机物的另一个重要方法。
有机合成是指通过化学反应将简单有机化合物转化为复杂有机分子的过程。
有机合成可以通过多种反应类型来实现,包括加成反应、消除反应、取代反应、重排反应和缩合反应等。
加成反应是指两个或多个分子反应生成一个更加复杂的分子;消除反应是指一个分子裂解成两个或多个较简单的分子;取代反应是指一个或多个原子、官能团或基团被其他原子、官能团或基团替代;重排反应是指有机物内部原子的排列顺序改变;缩合反应是指两个或多个分子通过共享共价键合成一个新的分子。
另外,物理性质研究也是研究有机物的重要方法之一。
物理性质研究可以帮助研究者了解有机物的性质、结构和反应特点。
常用的物理性质研究方法包括测定有机物的熔点、沸点和密度等。
熔点是指有机物由固态转变为液态的温度,可以用来判断有机物的纯度;沸点是指有机物由液态转变为气态的温度,可以用来判断有机物的挥发性;密度是指有机物的质量和体积的比值,可以用来判断有机物的纯度和成分。
此外,还有一些其他的研究方法可以辅助研究有机物。
比如,制备反应物的方法,可以根据特定的化学反应需求合成所需的试剂和催化剂;对反应条件的优化和控制也是研究有机物的重要环节,通过对温度、压力、反应时间和溶剂等条件的优化和控制可以提高反应的收率和选择性;此外,还可以采用计算化学方法对有机物的分子结构和性质进行研究,例如利用分子力场模拟、量子化学计算和分子动力学模拟等方法。
有机化学鉴别反应1.溴的四氯化碳溶液检验烯烃和炔烃烯烃分子中含C=C双键,炔烃分子中含C≡C叁键。
二者均能与溴发生加成反应,使溴的红棕色消失,因此可以来鉴别烯烃或炔烃。
2.高锰酸钾溶液检验烯烃和炔烃烯烃分子中含C=C双键,炔烃分子中含C≡C叁键。
当二者被高锰酸钾溶液氧化时,不饱和键被破坏,同时紫色高锰酸钾溶液褪色生成褐色的二氧化锰沉淀。
根据上述实验现象可以来鉴别烯烃或炔烃。
3.硝酸银氨溶液鉴别末端炔烃末端炔烃含有活泼氢,可与硝酸银氨溶液反应生成炔化银沉淀。
借此可鉴别末端炔烃类化合物。
4.铜氨溶液鉴别末端炔烃末端炔烃含有活泼氢,可与铜氨溶液反应生成炔化铜沉淀。
借此可鉴别末端炔烃类化合物。
5.硝酸银-乙醇溶液检验卤代烃的相对活性硝酸银-乙醇溶液与卤代烃反应时,如果烃基相同,不同卤素作为离去基团的反应性为:RI>RBr>RCl>RF如果卤原子相同而烃基不同,则受电子效应和空间效应的影响,卤代烃的相对反应性为:苯甲型、烯丙型>三级>二级>一级>苯型、乙烯型两个和两个以上卤原子同连在一个碳原子上的卤代烃,如氯仿等,不与硝酸银溶液反应。
由此可以推测卤代烷的可能结构。
6.苯甲酰氯检验醇苯甲酰氯与醇反应生成有香味的酯,以此可鉴别醇类化合物。
7.卢卡斯试剂检验一、二、三级醇氯化锌-盐酸溶液称卢卡斯试剂。
一级醇、二级醇、三级醇与卢卡斯试剂反应的速率不同。
三级醇最快,二级醇次之,一级醇极慢。
六个碳原子以下的各级醇均溶于卢卡斯试剂,反应后生成的氯代烷不溶于该试剂,故反应发生后体系会出现混浊或分层。
根据实验现象可判别反应速率的快慢,以次区别一、二、三8.土伦试剂鉴别醛和酮*土伦试剂是银氨离子(硝酸银的氢氧化铵溶液),它与醛反应时,醛被氧化成酸,银离子被还原成银,附着在试管壁上形成银镜,由此称该反应为银镜反应。
土伦试剂与酮不发生上述反应,所以此实验可区别醛和酮。
9. 2,4-二硝基苯肼检验醛和酮2,4-二硝基苯肼能与醛、酮的羰基发生亲核加成反应并生成黄色、橙色或红色沉淀。
有机化合物结构鉴定与有机波谱学1 有机化合物结构鉴定有机化合物结构鉴定是化学及相关科学专业里常见的课题,旨在确定所研究的化合物的分子结构。
一般情况下,被研究的化合物的分子式由化学家提供,但是在确定分子结构的过程中,化学家需要更多的信息来确定它的实际结构,包括分子量、构型类型、其他部分的数量及相对的位置等特性。
实际上,在确定有机化合物结构的过程当中,经常被用到的主要技术有有机波谱学,包括:氢谱、质谱、碳素键索引法和核磁共振,它们在有机电子结构的研究及分析方面都发挥着重要的作用。
2 氢谱氢谱是最常用的有机电子结构分析技术,它用来分析有机分子中的氢原子的存在性及其特性。
氢谱中的信号来源于碳氢键的分裂,其信号可以用来判断拥有相同母分子结构的成分之间的相对位置及各种结构特征。
3 质谱质谱是另一种常用的有机化合物结构鉴定方法,它通常用来分析有机物质中大分子特征及小分子量化特征,如分子量、分子型及构型。
质谱可以用来检测有机物质的组成原子数量及结构,但是对于大分子的结构分析效果较差。
4 碳素键索引法碳素键索引法是一种纯粹的理论计算,它用来估算有机化合物的碳碳键长度,从而帮助确定和辨认有机物的结构;通过计算碳素键的索引,可以确定有机物的具体结构特征,如它的芳香性、侧链位置和构型类型。
5 核磁共振核磁共振是一种精确到原子尺度研究有机物结构和构型的技术,它能够用来确定高级有机化合物的单元结构、侧链位置及芳香性等特性。
核磁共振技术还可用于多种应用如蛋白质结构分析,该技术有助于揭示蛋白质与细胞结构之间的动态作用,以及它们在疾病和新药研发中的重要作用。
总的来说,分析有机化合物的结构是化学家研究的重要及有用的科学领域,有机波谱学是一种广泛应用于有机化合物结构鉴定的技术,其中氢谱、质谱、碳素键索引法和核磁共振等技术在不同研究领域中都发挥着重要作用。
化学方法鉴定羰基
羰基是指含有碳氧双键的官能团,是许多有机物的基础结构单元之一。
化学方法鉴定羰基主要包括以下几种:
1. 水合作用法:加入水试剂,羰基与水发生水合反应生成羟酮或羟醛,观察是否产生沉淀或颜色变化。
2. 碘化钠法:加入碘化钠试剂,羰基与碘离子反应生成碘代羟酮或碘代醛,观察产生的颜色变化。
3. 腈反应法:加入腈试剂,羰基与腈反应生成腈化合物,观察是否产生白色沉淀或异常颜色变化。
4. 甲醇铝反应法:加入甲醇铝试剂,羰基与甲醇铝反应生成铝醇化合物,观察是否产生颜色变化。
5. 分子筛吸附法:使用具有特定孔径的分子筛吸附羰基分子,观察吸附量的变化。
这些方法各有优缺点,应根据具体情况选择合适的方法进行鉴定。
有机化合物的官能团鉴定实验有机化合物的官能团鉴定实验是有机化学实验中非常重要的一项内容。
通过该实验,我们可以确定有机化合物中存在的官能团,进而推测出其化学性质和结构。
下面,将以具体实验步骤和相应的说明来介绍有机化合物官能团鉴定实验的基本过程。
实验所需材料:- 待鉴定的有机化合物样品- 试剂:- 2,4-二硝基氰胺- 氯化亚铜溶液- 塞巴酸铵- 氧化银溶液- 磺酸铵- 重氮甲烷溶液- 高氯酸实验步骤:1. 硝酸纸试验:取少许待鉴定的有机化合物样品,将其涂抹在硝酸纸上,观察是否发生颜色变化。
若样品发生明显的颜色变化,可初步判断出含有芳香族化合物。
2. 2,4-二硝基氰胺试验:取约0.1克待鉴定的有机化合物样品,加入少量2,4-二硝基氰胺试剂。
若样品与试剂反应产生黄色结晶,则可以确定存在醛或酮官能团。
3. 氯化亚铜溶液试验:取少量待鉴定的有机化合物样品,加入少量氯化亚铜溶液。
若样品与试剂反应产生红色或蓝色沉淀,则可以确定存在醇官能团。
4. 塞巴酸铵试验:取少量待鉴定的有机化合物样品,加入少量塞巴酸铵试剂。
若样品与试剂反应产生橙色或红色沉淀,则可以确定存在胺官能团。
5. 氧化银试验:取少量待鉴定的有机化合物样品,加入氧化银溶液。
若样品与试剂反应产生黑色沉淀,则可以确定存在卤代烷官能团。
6. 磺酸铵试验:取少量待鉴定的有机化合物样品,加入磺酸铵试剂。
若样品与试剂反应产生气泡,则可以确定存在酸官能团。
7. 重氮甲烷溶液试验:取少量待鉴定的有机化合物样品,加入重氮甲烷溶液。
若样品与试剂反应产生橙色或红色沉淀,则可以确定存在芳香胺官能团。
8. 高氯酸试验:取少量待鉴定的有机化合物样品,加入少量高氯酸。
若样品与试剂反应产生白色沉淀,则可以确定存在醇或酚官能团。
注意事项:- 实验中使用的试剂需严格按照实验室安全操作指南操作,避免接触皮肤、眼睛等。
- 使用的实验仪器和器材需事先清洗干净,以免干扰结果。
- 在进行鉴定实验时,应尽量避免将试剂或待鉴定样品直接接触到皮肤或吸入气体。
未知有机化合物的鉴定
未知有机化合物的鉴定,可以有多种方法。
具体可以分为化学鉴定、物理鉴定和对比鉴定。
1、化学鉴定:首先,可以利用Chromato-graphic等柱色谱分析仪测定
有机化合物的结构,确定其含有多少种有机物质,以及其之间的比例。
然后,可以使用红外光谱法,根据其红外吸收光谱的能量来判断出它
的结构类型,包括判断多少大官能团组成,以及判断它的具体官能团
结构(是碳氢键还是羧酸键)。
最后,可以使用核磁共振(NMR)或
者质谱技术等测定方法,确定有机化合物的最终结构。
2、物理鉴定:首先,可以测定有机化合物的分子量,利用凝胶渗透色
谱或者质谱仪等装置,以确定有机化合物的分子式,颜色,密度,沸点,折光率等性质信息,方便鉴定化学结构。
其次,分析溶剂极性,
这也能有助于鉴定有机物的化学结构。
最后,可以根据上述性质的变化,判断出有机化合物的类型。
3、对比鉴定:有机化合物的对比鉴定,就是利用相同分子量,相同密度,相同沸点,相同折光率等物理性质的有机物质和未知样品进行对比,来比较其结构特征,以判断未知物质的化学结构。
官能团的鉴定方法一、引言官能团是有机分子中的特定结构单元,它们在化学反应中起着重要的作用。
因此,鉴定官能团是有机化学中的基本技能之一。
本文将介绍鉴定常见官能团的方法。
二、醛和酮1. 硝酸银试剂法:将少量硝酸银溶液滴加到待检物上,若出现白色沉淀,则为醛。
2. 芳香胺试剂法:将少量芳香胺溶液滴加到待检物上,若出现黄色或橙色沉淀,则为醛。
3. 甲酰氯试剂法:将待检物与甲酰氯反应,若有气体放出,则为醛。
4. 2,4-二硝基苯肼试剂法:将待检物与2,4-二硝基苯肼反应,若出现橙红色沉淀,则为酮。
三、羧酸和羧酸衍生物1. 碘甲烷试剂法:将碘甲烷滴加到待检物上,若产生水果味儿的气味,则为羧酸。
2. 氨基甲酸酯试剂法:将氨基甲酸酯溶液滴加到待检物上,若出现沉淀,则为羧酸。
3. 热解法:将待检物加热至高温,若有发生脱羧反应,则为羧酸。
四、醇和醚1. 卤代烷试剂法:将卤代烷滴加到待检物上,若产生白色沉淀,则为醇。
2. 高锰酸钾试剂法:将高锰酸钾溶液滴加到待检物上,若颜色由紫色变为棕色,则为不含双键的单一脂肪族或环状结构的碳氢化合物,即为醇或环氧化合物。
3. 三乙胺试剂法:将三乙胺溶液滴加到待检物上,若出现油状液体,则为醚。
五、胺和芳香族化合物1. Hinsberg 试剂法:将Hinsberg 试剂(二甲基磺酰氯)与待检物反应,得到第一层产物后再用稀盐酸水解。
若水解后产生白色沉淀,则为第一层产物中含有烷基胺;若水解后无白色沉淀,则为第一层产物中含有芳香族胺。
2. 氯仿试剂法:将氯仿与待检物反应,若出现浅紫色溶液,则为芳香族化合物。
六、酸和碱1. 酚酞试剂法:将少量酚酞溶液滴加到待检物上,若颜色由红变黄,则为弱酸;若颜色由黄变红,则为弱碱。
2. 醋酸铜试剂法:将少量醋酸铜溶液滴加到待检物上,若出现蓝色沉淀,则为弱碱;若颜色不变或出现棕色沉淀,则为弱酸。
七、总结以上是常见官能团的鉴定方法。
在实际实验中,需要根据待检物的特点选择相应的方法进行判断。
5.2研究有机化合物的一般方法一、教学目标1、了解有机化合物分离和提纯的方法;2、知道有机化合物结构鉴定的一般研究过程3、了解用于有机化合物结构测定的现代常用仪器技术4、结合简单图谱信息分析判断有机化合物的分子结构二、教学重难点重点:1.了解有机化合物分离和提纯的方法;2.结合简单图谱信息分析判断有机化合物的分子结构。
难点:结合简单图谱信息分析判断有机化合物的分子结构。
三、教学方法总结归纳法、分组讨论法等四、教学过程【导入】展示:研究有机化合物的一般过程【讲解】主要步骤:分离、提纯有机化合物,研究有机化合物的组成、结构、性质和应用,对有机化合物分子进行设计和合成。
操作简单而应用广泛的有机物分离和提纯的方法【生】重结晶、萃取、分液、蒸馏、升华、色谱分离【问】有机化合物的分离、提纯原则是什么?【生】①不增、不减、易分离、易复原①方法简便易行①途径最佳(步骤少、转化率高、无副产物等)【讲解】化学方法:一般是加入或通过某种试剂进行化学反应物理方法:利用有机物与杂质物理性质差异进行分离有机物分离的常用物理方法包括:【展示】用柱色谱分离有机物按固定相载体不同,色谱可以分为柱色谱、纸色谱、薄层色谱等;按流动相的状态不同,可以分为气相色谱、液相色谱、超临界流体色谱等。
【讲解】一般是加入或通过某种试剂进行化学反应在一般情况下,离子化合物在水中具有较大的溶解度,而在有机溶剂中溶解度很小。
利用这一性质,可以用酸或碱将某些杂质(如乙酸、苯酚、液溴)转化为离子化合物除去。
【讲解】物质的性质与分离、提纯方法的选择(1)根据物质的溶解度差异,可选用结晶、过滤的方法将混合物分离。
(2)根据物质的沸点差异,可选用蒸馏的方法将互溶性液体混合物分离。
(3)根据物质在不同溶剂中溶解度的差异,用萃取的方法把溶质从溶解度小的溶剂中转移到溶解度较大的溶剂中。
(4)根据混合物中各组分的性质不同可采用加热、调节pH、加适当的试剂等方法,使某种成分转化,再用物理方法分离而除去。
烯与炔的鉴定方法烯和炔是有机化学中常见的两种碳氢化合物。
烯是指含有一个或多个碳碳双键的化合物,而炔则是指含有一个或多个碳碳三键的化合物。
鉴定烯和炔的方法有很多种,本文将介绍其中一些常用的方法。
一、化合物的物理性质烯和炔在物理性质上有一些区别,可以通过这些性质来初步判断化合物是否为烯或炔。
例如,烯通常比炔密度更小,沸点和熔点也较低。
此外,烯的分子间作用力较弱,容易挥发,而炔则相对稳定一些。
二、酸碱性试验烯和炔的碳碳双键和三键都含有较强的电子云,因此对酸碱试剂有一定的反应性。
烯和炔都可以与稀酸反应生成相应的盐,但炔的反应更为剧烈。
因此,通过与稀酸反应的强弱可以初步判断化合物是否为炔。
三、溴水试验烯和炔都可以与溴水发生加成反应,但反应速率和程度不同。
烯与溴水反应较慢,需要较长时间才能看到溶液颜色的变化,而炔与溴水反应迅速,溶液会迅速变色。
四、氢气试验烯和炔在加氢反应中也有不同的表现。
烯在催化剂存在下可以与氢气发生加成反应,生成饱和的烷化合物。
而炔在催化剂存在下可以与氢气发生还原反应,生成烯化合物。
五、氧化反应由于烯和炔的不饱和性,它们都可以参与氧化反应。
烯可以与弱氧化剂反应生成醇或醛,而炔则可以与强氧化剂反应生成羧酸。
六、紫外-可见光谱紫外-可见光谱是一种常用的鉴定烯和炔的方法。
烯和炔的π电子体系吸收紫外-可见光谱范围内的光线,产生特定的吸收峰。
通过测定化合物的紫外-可见光谱,可以确定其是否含有烯或炔结构。
七、核磁共振谱核磁共振谱是一种常用的鉴定烯和炔的方法。
烯和炔中的碳和氢原子在核磁共振谱中会产生特定的峰。
通过测定化合物的核磁共振谱,可以确定其是否含有烯或炔结构。
烯和炔的鉴定方法主要包括化合物的物理性质、酸碱性试验、溴水试验、氢气试验、氧化反应、紫外-可见光谱和核磁共振谱等方法。
通过综合运用这些方法,可以准确鉴定化合物是否为烯或炔结构,为有机化学研究和应用提供有力支持。
第十一章有机化学基础李仕才第一节认识有机化合物考点四研究有机物的一般步骤和方法1.研究有机化合物的基本步骤2.分离、提纯有机化合物的常用方法(1)蒸馏和重结晶(2)萃取分液①常用的萃取剂:苯、CCl4、乙醚、石油醚、二氯甲烷等。
②液—液萃取:利用有机物在两种互不相溶的溶剂中的溶解性不同,将有机物从一种溶剂转移到另一种溶剂中的过程。
③固—液萃取:用有机溶剂从固体物质中溶解出有机物的过程。
3.有机物分子式的确定(1)元素分析(2)相对分子质量的测定——质谱法质荷比(分子离子、碎片离子的相对质量与其电荷的比值)最大值即为该有机物的相对分子质量。
4.有机物分子结构的鉴定(1)化学方法:利用特征反应鉴定出官能团,再制备它的衍生物进一步确认。
(2)物理方法①红外光谱分子中化学键或官能团可对红外线发生振动吸收,不同化学键或官能团吸收频率不同,在红外光谱图上将处于不同的位置,从而可以获得分子中含有何种化学键或官能团的信息。
②核磁共振氢谱判断正误(正确的打“√”,错误的打“×”)1.蒸馏分离液态有机物时,在蒸馏烧瓶中应加少量碎瓷片。
( √)2.某有机物中碳、氢原子个数比为1∶4,则该有机物一定是CH4。
( ×)3.根据物质的沸点利用蒸馏法提纯液态有机物时,沸点相差大于30 ℃为宜。
( √) 4.乙醇是良好的有机溶剂,根据相似相溶原理用乙醇从水溶液中萃取有机物。
( ×) 5.混合物经萃取、分液后可以得到提纯,获得纯净物。
( ×)6.有机物完全燃烧后仅生成CO2和H2O,则该有机物中一定含有C、H、O、三种元素。
( ×) 7.质谱法可以测定有机物的摩尔质量,而红外光谱和核磁共振氢谱图可以确定有机物的官能团类型。
( ×)1.实验式中氢原子已经达到饱和,则该物质的实验式就是分子式,如实验式为CH4O,则分子式为CH4O,结构简式为CH3OH。
2.实验式通过扩大整数倍时,氢原子数达到饱和,则该式即为分子式,如实验式为CH3O的有机物,扩大2倍,可得C2H6O2,此时氢原子数已达到饱和,则分子式为C2H6O2。
研究有机化合物的一般步骤和方法有机化合物广泛应用于化学、医学、食品、石油、塑料等领域。
其研究方法多种多样,但一般可以从以下几个方面入手。
1. 确定化合物的化学结构有机化合物的化学结构是研究有机化合物的基础。
其确定方法主要包括核磁共振(NMR)、红外光谱(IR)、紫外光谱(UV)、质谱(MS)等。
在确定化合物结构时,需要进行碳谱(13C-NMR)、氢谱(1H-NMR)等核磁共振谱图的分析和解释,以及红外光谱图的分析和解释。
2. 确定有机化合物的物理性质有机化合物的物理性质是研究有机化合物的重要方面。
其包括熔点、沸点、密度、折射率等。
通过对这些物理性质进行测试和分析,可以进一步判断化合物的纯度和结构等信息。
3. 合成化合物通过合成化合物可以进一步研究化合物的结构和性质。
合成化合物的方法包括有机合成化学、无机合成化学、生物合成化学等。
其中,有机化学中最常用的方法是功能团转化法、碳-碳键形成法和碳-杂原子键形成法等。
4. 确定有机化合物的性质有机化合物的性质是研究有机化合物最直接的方法之一。
其包括化学反应性质、光学旋转力、溶解度、热力学性质等。
通过对化合物性质的分析和判断,可以进一步确定化合物结构和特性。
5. 制备有机化合物的晶体有机化合物的晶体结构是研究有机化合物的重要方面。
其晶体结构的确定方法有X射线单晶衍射、粉末X射线衍射、中子衍射、电子衍射等。
通过这些方法可以在分子水平上研究有机化合物的结构和性质。
6. 确定有机化合物的毒性和效价有机化合物的毒性和效价是研究有机化合物在医学和环境领域应用的重要指标。
通过对毒性和效价进行测试和分析,可以进一步提高有机化合物的应用效率和安全性。
:以上是研究有机化合物的一般步骤和方法。
在研究有机化合物时,需要综合运用各种方法,通过实验和数据分析来确定化合物的结构和性质。
有机物化学鉴定的一般方法
蛋白质、多肽、氨基酸
(1)加热或矿酸试验:取检品的水溶液1ml于试管中,加热至沸或加5%盐酸,如发生混浊或有沉淀示含有水溶性蛋白质。
(2)缩二脲试验:取检品的水溶液1ml,加10%氧化钠溶液2滴,充分摇匀,逐渐加入硫酸铜试液,随加摇匀,注意观察,如呈现紫色或紫红色示可能含有蛋白质和氨基酸。
凡蛋白质结构中含有两个或两个以上肽键(-CONH-)者均有此反应,能在碱性溶液中与Cu2+生成仙络合物,呈现一系列的颜色反应,二肽呈蓝色,三肽呈紫色,加肽以上呈红色,肽键越多颜色越红。
(3)茚三酮试验,取检品的水溶液1ml,加入茚三酮试液2-3滴,加热煮沸4-5分钟,待其冷却,呈现红色棕色或蓝紫色(蛋白质、胨类、肽类及氨基酸)。
α氨基酸与茚三酮的水合作物作用,氨其酸氧化成醛、氨和二氧化碳,而茚三酮被还原成仲醇,与所后成的氨及另一分子茚三酮缩合生成有蓝紫色的化合物。
【注】①茚三酮试剂主要是多肽和氨基酸的显色剂,反应在1小时内稳定。
试剂溶液pH值以5-7为宜,必要时可加吡啶数滴或醋酸钠调整。
②此反应非常灵敏,但有个别氨基酸不能呈紫色,而呈黄色,如脯氨酸。
(4)氨基酸薄层层析检出反应:
①吸附剂:硅胶G。
②展开剂:(1)正丁醇:水(1:1)(2)正丁醇:醋酸:水(4:1:5)
③显色剂:0.5%茚三酮丙酮溶液,喷雾后于1100烘箱放置5分钟,显蓝紫允或紫色。
2.皂甙
(1)泡沫试验:取检品的水溶液2ml于带塞试管中,用力振摇3分钟,即产生持久性蜂窝状泡沫(维持10分钟以上),且泡沫量不少于液体体积的1/3。
【注】常用的增溶剂吐温、司盘,振摇时均能产生持久性泡沫,要注意区别。
(2)溶血试验:取试管4支,分别加入滤液0.25、0.5、0.75 ml,然后依次分别加入生理盐水2.25、2.0、1.75、1.5 ml,使每一个试管中的溶液都成为2.5ml, 再将各试管加入2%的血细胞悬液2.5ml,振摇均匀后,同置于370水浴或25-270的室温中注意观察溶血情况,一般观察3小时即可,或先滴红细胞于显微镜下,然后滴加检液看血细胞是否消失。
如有溶血现象示正反应。
【注】①鞣质对血红细胞有凝集作用,干扰溶血试验的观察,应事先除去(可用取胜酰胺粉吸附或用明胶沉淀)。
②检液应为中性溶液。
(3)醋酐浓硫酸试验(Liebrmann Burchard反应)取检品的水溶液置蒸发皿中,于水浴上蒸干,残渣加入少量冰醋酸使溶解,再加入醋酐浓硫酸(19:1)试液,呈现红紫色并变成污色绿色(甾类、三萜类成分或皂甙)
(4)区别甾体皂甙和三萜皂甙:取带塞试管两支,各盛检品的水溶解1 ml,1支加0.1N盐酸溶液2ml,另一支加0.1N氢氧化钠溶液2ml用力振摇1分钟(需左右手交替振摇各半分钟),观察两管泡沫的多少,若两管泡沫体积相同或酸管多,示含三萜式皂甙;若加碱管泡沫多于加酸管示含甾示含甾体皂甙。
三萜皂甙为酸性皂甙在酸性水溶液中形成较稳定的泡沫;甾体皂甙为中性皂甙在碱笥溶液中能形成较稳定的泡沫。
3.糖、多糖或甙类
(1)碱性酒石酸铜试液:取检品的水溶液1-2ml(如为醇溶液须将醇蒸发除去),加入碱笥酒石酸铜试液1ml,于沸水浴上加热5分钟,产生棕红色或砖红色氧化亚铜沉淀,示有还原糖。
还原糖能使二价铜盐(蓝色)还原成氧化亚铜,醛糖的醛基氧化成羧基:
【注】①如检液呈酸性,应先碱化。
②此反应所产生的沉淀由于条件不同,其颜色也不同,质点上的呈黄色,质点大的呈红色。
有保持性胶体存在时,也常产生黄色沉淀。
③职样品中含有其他醛、酮及还原较强的其他成分,或中划药制剂中附加的抗氧剂、;葡萄糖等均可显阳性反应。
(2)α萘酚试验(Molisch紫环反应):取检品的水溶液1ml,加5%萘酚试液数滴振摇后,沿管壁滴入5-6滴浓硫酸,使成两液层,待2-3分钟后,两层液面出现紫红色环(糖、多糖或甙类)。
多糖类遇浓硫酸被水解成单糖,单糖被浓硫酸脱水闭环,形成糠醛类化合物,在浓硫酸存在下与α萘酚发生酚醛缩合反应,生成紫红色缩合物。
【注】①甙的分子结构中含有糖基,一般属于单糖类,如葡萄糖,鼠李糖、半乳糖,但也有含二分子糖(双糖)或多分子糖(多糖)。
在上述反应条件下,甙被水解成单糖,因此甙萘酚试验,系分子中糖部分的反应。
②由于此反应较为灵敏,如有微量滤纸纤维或中草药粉末存在于溶液中,都能产生上述反应。
故滤过时应加注意。
(3)多糖的确证试验:取检品的水溶液5ml于水蒸发至干,加入1ml蒸馏水,再加入乙醇5ml,如出现沉淀,滤过收集后用少量热乙醇洗涤,再将沉淀物溶于3ml蒸馏水中,做下例试验。
①碘试验:取检品的不溶液1ml,加碘试液1滴,观察颜色变化,如呈蓝黑色为地衣糖;紫黑色为糊精;蓝色加热消失,冷后蓝色再现为淀粉。
②多糖水解:取检品的水溶液1ml,加入稀盐酸5滴,置沸水浴中加热10-15分钟,然后用10%氢氧化钠液中和至中性,再加新配制的碱性酒石酸铜试淮4滴,另取检液1ml,不加酸水解直接加入上述试液4滴,两管同置水浴上煮沸5-6分钟。
如果水解后生成棕红色常常物的量比未经水解的多,则示有多糖。
多糖水解后产生单糖,利用单糖的还原性,使铜离子还原成氧化亚铜。
4.鞣质及酚类
(1)三氯化铁试验:取检品的水溶液1ml,加三氯化铁试液1-2滴,呈现绿色、污绿色、蓝黑色或暗紫色(可水解鞣质显蓝一蓝黑色,缩合鞣显绿色一污绿色)。
鞣质均是多羟基酚的衍生物,即多元酚,能和三价铁离子发生颜色反应生成复杂的络盐。
【注】此反应如遇有矿酸或有机酸、醋酸盐等存在,能阻碍颜色的生成。
硝基酚类对三氯化铁试剂无明显反应。
(2)明胶试验:取检品的水溶液1ml,加氯化钠明溶液2-3滴,即生成白色沉淀物。
鞣质有凝固蛋白的性能。
(3)溴试验:取检品的水溶液1ml,加溴试液1-2滴,生成白色或沉淀物,示可能含有酚或儿茶酚鞣质。
【注】过多的溴会阻碍鞣质的沉淀,因此溴水不宜多加。
(4)香草醛一酸试验:取检品的水溶液点于滤纸片上,干后,喷雾或滴加香草醛一盐酸试液,呈现红色斑点(多元酚类物质)。
(5)鞣质、酚类薄层层析检出反应:
①吸附剂:聚酰胺;硅胶;硅胶;石膏:水(5:1:7)调成状,涂成薄板,1050烘干45分钟。
②展开剂:乙醇:醋酸(100:2);正丁醇:乙酸乙酯:水(5:4:1);苯:甲醇(95:5)。
③显色剂:10%三氯化铁溶液;1%三氯化铁乙醇溶液与1%铁氰化钾水溶液(1:1)显蓝一紫色斑点。
5.黄酮及其甙类
(1)盐酸一镁(或锌)粉试验:取检品的乙醇溶液1ml,加放少量镁粉(或锌粉),然后加浓盐酸4-5滴,置沸水浴中加热2-3分钟,如出现红色示有游离黄酮类或黄酮甙(以同法不加镁或粉做一对照,如两管都显红色则有花色素存在。
如继续加碳酸试液使成碱笥即变成紫色双转变为蓝色,即证明含花色素)。
黄酮类的乙醇溶液,在盐酸存在的情况下,能被镁粉还原,生成花色甙元而呈现红色或紫色反应(个
别为淡黄色、橙色、紫色或蓝色)。
这是由于酮类化合物分子中含有一个碱性氧原子,致能溶于稀酸中被还原成带四价的氧原子即锌盐。
本法是鉴别黄酮类的一个反应。
但花色素本身在酸性下(不需加镁粉)呈红色,应加以区别。
【注】①此反庆仅在化学结构中,第三位上带羟基的酮醇类显色较明显,而其它黄酮烷酮类均不甚明显。
因此试验呈阴性反庆是不能做出否定的结论,尚需结合其他实验再做结论。
②试验应在醇中进行,水分多会影响颜色的生成。
此反庆较慢,有时需置水浴上加热,以促使反应的进行。
(2)荧光试验:
①三氯化铝试验:取检品的乙醇溶液点于滤纸片上(干后再点1次,使其浓度庥中),干后,喷雾1%三氯化铝乙醇试液,在紫外光灯下观察,呈现黄色、绿色、橙色等荧光为黄酮类;呈现天蓝色或黄绿色;荧光,则为二氢黄酮类。
这是区别二氢黄酮类化合物的一种鉴别反应。
②硼酸丙酮枸橼酸丙酮试验:取检品的乙醇溶液1ml,在沸水浴上蒸干加入饱和硼酸丙酮溶液及10%枸橼酸丙酮溶液各0.5ml,蒸去丙酮后,在紫外光灯下观察,管内呈现强烈的绿色荧光(黄酮或其甙类)。
(3)碱液试验:取检品的乙醇溶液点于滤纸片上(干后,再点一次,使其溶液集中),干后,喷1%碳酸钠溶液或在氨蒸气中熏几分钟,呈现亮黄、绿或橙黄色。
如将氨气熏过的滤纸露置空气中,颜色逐渐裉去而变为原有的颜色(黄酮或其甙类)。