【研究生】现代仪器分析期末重点

生物仪器分析期末重点总结一、显微镜显微镜是最基本和常用的生物仪器之一。

它可以放大和观察微小的生物样本，以便研究其结构和功能。

目前，常见的显微镜包括光学显微镜、电子显微镜和荧光显微镜等。

光学显微镜使用可见光进行观察。

它可以放大样本的细节，并通过不同的镜头和滤波器来增强图像的对比度和分辨率。

电子显微镜利用电子束而不是光线照射样本。

它可以提供更高的放大倍数和更高的分辨率，从而能够观察到更小的细胞和分子结构。

荧光显微镜结合了光学显微镜和荧光染料技术，可以用来检测样本中特定蛋白质或细胞器的位置和分布。

二、基因测序仪基因测序仪是用于确定DNA序列的生物仪器。

它可以将DNA样本分解成不同的碱基，并通过检测不同碱基释放出的光信号来确定DNA序列。

目前常用的基因测序技术有Sanger测序和高通量测序等。

Sanger测序是一种经典的基因测序方法，它利用DNA链终止剂阻止DNA链延伸，并通过不同碱基释放的荧光信号来确定序列。

高通量测序则是指一系列自动化的测序技术，能够同时测序数百万个DNA片段。

这些技术可以大大加快基因测序速度，并降低成本，从而推动了基因组学研究的发展。

三、质谱仪质谱仪是一种用于分析样品中不同化学物质的仪器。

它可以通过测量样品中分子的质量和电荷，并根据其质荷比来确定其成分和结构。

质谱仪广泛应用于蛋白质组学、代谢组学和药物分析等领域。

质谱仪通常由电离源、质谱仪和检测器组成。

电离源用于将样品中的分子转化为带电粒子，质谱仪则用于分离不同质荷比的粒子，并将其聚焦到检测器上进行检测。

根据样品的特性和需要，常见的质谱技术包括质子化电喷雾质谱（ESI-MS）、飞行时间质谱（TOF-MS）和气相色谱质谱（GC-MS）等。

四、流式细胞仪流式细胞仪是一种用于分析和计数单个细胞的仪器。

它可以通过流体动力学原理将细胞分散在液体中，然后通过激光束逐个检测并测量细胞的大小、形状和荧光标记。

这项技术在细胞生物学、免疫学和肿瘤学等领域得到广泛应用。

四、计算题1、用光谱支项表示钾元素价电子114P 4S −→−的跃迁。

解：14S ：n=4，L=0，S=1/2，光谱支项1/22S 4；14P ：n=4，L=1，S=1/2，光谱支项3/22P 4、1/22P 4；1/22S 4—3/22P 4和1/22S 4—1/22P 4。

2、某光栅光谱仪的光栅刻痕密度为2400-1mm ，光栅密度为50mm ，求此光谱仪对一级光谱的理论分辨率。

该光谱仪能否将Nb309.418nm 与Al309.271nm 两谱线分开？为什么？解：5101.25024001klb kN R ⨯=⨯⨯===理21040.147309.344==∆=λλ实R因为实R «理R ，所以这两条谱线可以分开。

3、用原子吸收光谱分析法测定铅含量时，以0.1ug ·-1mL 质量浓度的铅标准溶液测得吸亮度为0.24，连续11次测得空白值的标准偏差为0.012，试计算其检出限。

解：1-smL 0.015ug 0.240.01230.1A3D ⋅=⨯⨯=⨯=σρ 4、已知用原子吸收法测镁时的灵敏度为0.005mg/L ，配制试液时最适宜质量浓度范围为多少？ 解：1-1c s1L 0.170mg 0.00440.150.0050.0044A C ⋅=⨯=⨯=ρ1-2c s2L 0.682mg 0.00440.600.0050.0044A C ⋅=⨯=⨯=ρ所以适宜的浓度范围为0.170—0.682mg ·-1mL 。

5、pH 玻璃电极和饱和甘汞电极组成如下测量电池：pH 玻璃电极|+H (a=x)‖SCE 在25℃时，测得pH 为5.00标准缓冲溶液的电动势为0.218V ；若用未知pH 溶液代替标准缓冲溶液，测得电动势为0.06V ，计算未知溶液的pH 。

解; 2.320.0590.218-0.065.000.059E -E pH pHs x s x=+=+=6、采用格氏作图法测定某试样中+2Cu 的浓度，格氏计算图上得0sV =−3.84ml ，0V 空白=−0.05ml ，加入的+2Cu 标准溶液浓度为5.0×-410mol/L 时，计算该试样中+2Cu 的浓度。

▪ 7.固定液选择的原理是？ ▪ 8.在色谱分析法中，为什么要测定定量校
正因子 ？
▪ 9.液相色谱中正相，反相色谱的定义及研 究对象
▪ 10.色谱定量分析公式-内标法 ▪ 11.色谱分离条件选择-如何提高柱效
第三节 HPLC的主要类型及分离原理
1. 液液分配色谱
亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极 性小于固定相的极性，称为正相液液色谱法，极性柱 也称正相柱。主要应用于分离甾醇类、类脂化合物、 磷脂类化合物、脂肪酸以及其他有机物。
cM mMVS
VS
：相比
相对保留值 r21：指组分2和组分1的调整保留值之比。
r21
t 'R2 t 'R1
V 'R2 V 'R1
相对保留值的特点是只与温度和固定相的性质有关, 与色谱柱及其它色谱操作条件无关。
相对保留值反映了色谱柱对待测两组分1和2 的选 择性,是气相色谱法中最常使用的定性参数。
例：用电解法从组成为0.01 mol/L Ag+, 2mol/L Cu2+的混合液中分离Ag+ 和Cu2+，已知铜的标 准电极电位为0.345V，银的标准电极电位为 0.779V。
问：1）首先在阴极上析出的是铜还是银？
2）电解时两者能否完全分离？
3) 外加电压应控制在什么数值上，Ag+与Cu2+ 完全分离,阳极电位等于1.23v（vs.SCE，不考 虑超电位） ？
测待测液的pH值，写出该化学电池的符号表示式？(见书 P113) 5.离子选择性系数 的定义？(见书P118) 6.盐桥是什么组成的？作用是什么？ 7.干扰电流及其消除方法(见书P162) 8.什么是残余电流，它产生的原因是什么？它对极谱分析有 什么影响？ (见书P162)

现代仪器分析考点一、名词解释：色谱法的定义：色谱法又称色层法或层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次“平衡”，使各溶质达到相互分离。

基线：无试样通过检测器时，检测到的信号即为基线。

保留时间（t R）：组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间死时间（t M）：不与固定相作用的气体（如空气）的保留时间。

调整保留时间：保留时间减去死时间（t R ＇）：t R＇= t R－t M分配系数K：在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的浓度（单位：g / mL）比，称为分配系数，用K 表示，分配系数是色谱分离的依据。

分配比是指，在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的质量比。

噪声N：无样品通过时，由仪器本身和工作条件等偶然因素引起基线的起伏称为噪声（以噪声带衡量）.最低检测限：检测器响应值为3倍噪声水平时的试样浓度（或质量），被定义为最低检测限（或该物质的最小检测量）。

原子吸收光谱法（atomic absorption spectrometry, AAS)：是以在蒸气状态被测元素原子对其共振辐射的吸收进行定量分析的方法。

锐线光源：光源发射线的中心频率与吸收线的中心频率一致，而且发射线的半宽度比吸收线的半宽度小得多时，则发射线光源叫做锐线光源。

线性范围：指进入检测器组分量与其响应值保持线性关系，或是灵敏度保持恒定所覆盖的区间，称线性范围。

二、简答题1、色谱法按照分离机制可以分为哪几种：（1）吸附色谱（adsorption chromatography ）利用吸附剂表面对不同组分吸附性能的差异，达到分离鉴定的目的。

（2）分配色谱（partition chromatography）利用不同组分在流动相和固定相之间的分配系数（或溶解度）不同，而使之分离的方法。

（3）离子交换色谱（ion-exchange chromatography ）利用不同组分对离子交换剂亲和力的不同，而进行分离的方法。